por su parte la solucin 2 sirve para tener una lisis
CEVADA SANTIAGO KAREN JAZMN alcalina de la pared as como tambin un agente MORALES LUNA LUCA emulsionante de los lpidos de membrana, la 4QM1. SECCIN 2 siguiente solucin (3) es un amortiguador de pH utilizado para que cuando se exponga el contenido PRCTICA: AISLAMIENTO DE DNA PLASMDICO. interno de la bacteria los plsmidos puedan precipitar, en la solucin 4 el isopropanol cambia la INTRODUCCIN. constante dielctrica de la solucin precipitando Los plsmidos son moculas de DNA las protenas y el plsmido y finalmente la quinta extracromosomales presentes en algunas clulas solucin es un agente quelante que har que los bacterianas, levaduras y hongos. Poseen DNA de iones magnesio y en especial el calcio sean doble hebra, mayormente son circulares; poseen su capturados evitando as la accin de las nucleasas. propio origen de replicacin. Los plsmidos no son Despus del proceso de aislamiento de plsmido se esenciales para el desarrollo de la clula, pero le procedi a su caracterizacin mediante una proveen una ventaja de competitiva a las clulas electroforesis, la cual es una tcnica de separacin que lo poseen, dado que los plsmidos poseen y caracterizacin de molculas utilizando un campo genes que le confieren caractersticas selectivas a elctrico en funcin del tamao y carga elctrica de su husped tales como resistencia a antibiticos, la molcula, as pues el, ADN teniendo carga nuevas habilidades metablicas como de negativa migr a travs de los poros de la matriz degradacin de carbohidratos, factores de hacia el lado con carga positiva y la tincin del gel virulencia y produccin de toxinas entre otros. En con bromuro de etidio, que es una sustancia la ingeniera gentica poseen un inters singular, fluorescente se intercala en la molcula de ADN, y la por se uno de los sistemas de vectores ms exposicin con luz ultravioleta, permite observar el sencillos de utilizar. resultado de sta migracin, observndose tres bandas muy marcadas, correspondiendo la primera OBJETIVO. al DNA circular relajado la cual es una isoforma del Aislar DNA plasmdico bacteriano, comprobando DNA, donde debido a una fuerza mecnica el dicho aislaminento mediante electroforesis en gel plsmido que tiene una forma normal de dos anillos de agarosa. unidos, se rompi una cadena de ellos, la segunda RESULTADOS. banda muestra al DNA lineal lo cual indica que ambas cadenas del plsmido se rompieron y por ltimo la tercer banda indica al DNA sper enrollado el cual es la forma correcta de separacin del plsmido y en el cual ambas cadenas estn intactas. Fig. 1 Resultados de la electroforesis del DNA plasmdico, se CONCLUSIONES. aprecian 3 lneas, la primera corresponde al DNA circular Se aislaron los tres tipo de DNA plasmdico (sper relajado, la segunda al DNA lineal y la tercera al DNA enrollado, lineal y circular relajado). superenrrollado. Mediante la electroforesis se pudo aislar en mayor cantidad la isoforma del DNA plasmdico lineal y DISCUSIN. sper enrollado. En la realizacin de la prctica se realiz primero un proceso de separacin de los plsmidos BIBLIOGRAFA. bacterianos de cepas tipo a los cuales se les agreg DNA plasmdico, consultado en una solucin con GTE (tris/EDTA/GLUCOSA) la cual https://bacteriologiaclinica.wikispaces.com genera las condiciones ptimas para que la cepa , el da 16 de mayo de 2017. pueda regenerarse despus de su criogenizacin,