Laboratorio de Bioqumica General para Nutricin QIM202N 2 Semestre de 2017

INFORME DE ANLISIS DE RESULTADOS

PRCTICO N3

Nombre: Catalina Andrade Reyes Seccin: 1 Fecha: 11 /09 /2017

1.- Anlisis cualitativo de aminocidos y protenas

1.1.- Tabla 1 de Resultados: Indique si el test es positivo o negativo. Anote las

observaciones. (1.0 punto)
Muestra Test de Test de Biuret Test de Test
ninhidrina acetato de Xantoproteico
plomo
Blanco Negativo. Negativo. Negativo. Negativo.
(Glucosa) La Glucosa no Se ve una Incoloro. Incoloro.
cambi de color al coloracin azul
agregar clara
Ninhidrina.

Alanina Positivo. Negativo. Negativo. Negativo.

Se torn de color La coloracin Incoloro. Incoloro.
morado al vista fue de un
contacto con celeste claro.
Ninhidrina lo que
indica la
presencia de un
grupo amino
primario.
Cistena Positivo. Negativo. Positivo, Negativo.
Se not una El color Tiene Incoloro.
coloracin obtenido fue precipitado
amarilla, lo que un celeste gris, por lo
indica un grupo oscuro. tanto es un
amino aminocido
secundario. azufrado.
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Triptfano Positivo. Negativo. Negativo. Positivo.

Con ninhidrina Coloracion Incoloro. Coloracin muy
cambi a un color azulosa clara. amarilla; se
morado claro, que puede decir que
puede traducrise el aminocido
a la presencia de tiene grupo
un grupo amino bencnico
primario.
Solucin Positivo. Positivo. Positivo. Positivo.
de El color tras Cambi a un Mucha Coloracion
Albmina reaccionar con color Violeta lo presencia de amarilla
de huevo Ninhidrina fue un que indica la precipitado clara/pastel,
al 10% morado muy presencia de gris, lo que posee grupo
oscuro, lo que enlace quiere decir que bencnico
quiere decir que peptdico. hay presencia
hay un grupo de aminocidos
amino primario. azufrados.
Solucin Negativo. Positivo. Positivo. Positivo.
Harina de No se not un Coloracin Se ve Se ve un color
trigo al cambio de color azul-violeta, precipitado gris amarillo
10% con Ninhidrina. presencia de E. pero en baja amarillo plido,
Peptdico cantidad, hay hay presencia
aminocidos de grupo
azufrados en la bencnico.
muestra.
Gelatina Negativo. Positivo. Negativo. Negativo.
al 10% No hubo cambio Color Azul- Incoloro. Incoloro.
de color tras Violetoso.
aadir Ninhidrina. Existe en lace
peptdico en la
muestra.

1.2.- Qu informacin puede obtener si una muestra problema da positivo para

ninhidrina y negativo para Biuret? Explique brevemente. (2.5 puntos)
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Se puede decir que en la muestra problema se est analizando solo un aminocido, pues
si la MP da positivo al test de ninhidrina quiere decir que existe presencia de un grupo
amino, sin embargo, al dar negativo en biuret se puede decir que no hay uniones
peptdicas porque este solo se da entre aminocidos (dos o ms) y si es positivo este
test, es debido a la formacin de un complejo de coordinacin entre los cationes cpricos
en medio alcalino con los enlaces peptdicos.

1.3.- Por qu una protena que posee un alto % de cistena puede dar negativo
el test de acetato de plomo? Proponga un procedimiento para que pueda
obtener un resultado positivo al test de acetato de plomo. Justifique su
respuesta. (2.5 puntos)

Puede ocurrir que una protena con alto grado de cistena de negativo al test de acetato
de plomo si es que la protena misma se comienza a denaturar, ya que los residuos de
cistena no quedarn cara a cara y por lo tanto no se podrn formar enlaces S-S entre
las cistenas, la protena se desplegara y los puentes disulfuro por ende no existirn ya
que al no estar la protena plegada no se formaran y en consecuencia el acetato no podr
reaccionar con estos para dar un precipitado negro. Un procedimiento para poder
obtener positivo al test sera renaturar la protena para que asi se formen los enlaces S-
S y puedan reaccionar con el acetato de plomo.
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La positividad al test de Acetato de plomo ocurre cuando hay formacin de un

precipitado de color negro o gris, que indica la formacin de sulfuro de plomo,
utilizndose el azufre de los aminocidos. Una primera opcin podra ser que una
protena con alto % de Cistena en su composicin est en una estructura cuaternaria

2.- Obtencin de la Casena de la Leche

2.1.- Tabla 2 de Resultados: Indique si el test es positivo o negativo. Anote las
observaciones. (0.5 puntos)

Muestra Test de Test de Biuret Test de acetato Test

ninhidrina de plomo Xantoproteico

Suero Negativo. Negativo. Positivo. Positivo.

de leche Incoloro, no Coloracin Color de la Color amarillo
cambi de celeste. muestra plido, que indica
color. amarillenta, con existencia de
presencia de grupo bencnico.
precipitado gris.
Casena Positivo. Positivo. Positivo. Positivo.
Coloracion Color morado, Presencia de Coloracion
violeta plida, lo que indica precipitado color amarilla,
presencia de presencia de gris en la presencia de
grupo amino enlace muestra, ie, hay grupo bencnico.
primario. peptdico. aminocido
azufrado en la
muestra.

2.2.- Describa, cmo el efecto de pH puede favorecer la separacin de

protenas. (1.5 puntos)

El pH es especfico para la funcionalidad de cada protena. Los iones cidos o bsicos de

los medios en que se encuentren, afecta la carga electrice de los grupos alcalinos y
cidos de los grupos -R de los aminocidos, esta alteracin elimina las interacciones
electrostticas que estabilizan la estructura terciaria de las protenas lo que favorece su
precipitacin.
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3.- Desnaturalizacin de protenas

3.1.- Tabla 3 de Resultados: Indique si el test es positivo o negativo. Anote las
observaciones. (1.0 punto)

Tubo Observaciones

N1 + H2O Negativo.
No hay cambios notables, solo aumento de
volumen.

N2 + Temp. 50C Positivo.

El tubo pas de ser trasparente a tener un color
blanquizco pero no muy intenso.

N3 + Sol. de t
Negativo.
Se ve un color un poco ms claro que el de la
solucin de T.
N4 + alcohol Positivo.
Hacia el centro de la muestra se cre una especie
de color blanco (no muy intenso) y hacia arriba y
abajo, transparente.

N5 + sol. Pb(NO3)2 Positivo.

Con aproximadamente 10 gotas, cambi desde

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transparente a blanco

3.2.- Indique cmo se manifiesta la denaturacin de la albmina de huevo. (1.5

puntos)
Al agregar distintos reactivos a la albmina de huevo, la denaturacin hace que la
albmina cambie sus propiedades. La denaturacin se aprecia con la presencia de
grumos en el vaso precipitado que se esta usando, se ve una especie de coagulacin
ya que se pierde la estructura globular haciendo que se pierda la solubilidad de la
protena en cuestin.

3.3.- Indique cul de los agentes utilizados tiene mayor poder de denaturacin.
Justifique su respuesta. (1.5 puntos)

El Nitrato de plomo al 10%, ya que en su composicin tiene cido ntrico, el cual se

caracteriza por ser un cido fuerte que hace que haya una mayor prdida de la
estructura nativa de la protena, haciendo as que existan cambios en las propiedades
y generalmente la funcionalidad de esta.