FACULTE

DES SCIENCES DE TUNIS

Cycle prparatoire Biologie-Gologie: BG1
GENETIQUE
Cours 4

Prsent par Salwa ZEHDI

Et Hajer ENNAFAA

CHAPITRE III
ORGANISATION ET EXPRESSION DES GENES
EUCARYOTES ET PROCARYOTES

S. ZEHDI & H. ENNAFAA

Dans ce chapitre, nous allons:
C omparer lorganisaOon des gnes chez les
Eucaryotes et les Procaryotes. Parmi les gnes, on
trouve:
- Les gnes qui sont copis (transcrits) en ARN
foncOonnel (tel quun ARN ribosomal ou un ARN de
transfert): ces ARN ne sont pas traduits en
protines.
- Les gnes qui sont transcrits en ARN messager
(ARNm) qui sera traduit en protine.
Dans tout ce qui suit, on sintressera parOculirement
ces derniers gnes, cest--dire les gnes qui codent
pour les protines.
S. ZEHDI & H. ENNAFAA
Etudier lexpression de ces gnes, cest--dire
leur transcripCon et leur traducCon.
- La transcripCon est le processus de copie de lADN
en ARN.
- La traducCon, cest le mcanisme par lequel lARNm
qui est une squence de nucloCdes, est traduit en
protine qui est une squence dacides-amins.
Mais tout dabord, nous allons voir une exprience
qui apporte la preuve que cest lARN qui assure le
transfert dinformaOon de lADN jusquaux protines.

S. ZEHDI & H. ENNAFAA

III-1 LARN: Intermdiaire de linformaCon
gnCque
Dans une cellule Eucaryote, lADN se trouve
dans le noyau alors que les protines sont
s y n t h O s e s d a n s l e c y t o p l a s m e : u n
intermdiaire est donc ncessaire.
Plusieurs expriences ont mis en vidence que
cest lARN qui joue le rle dintermdiaire
dans le transfert dinformaOon de lADN
jusquaux protines: nous allons en citer une,
ralise chez les Eucaryotes.
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Exprience de chasse isotopique (=pulse chase)
- Des cellules Eucaryotes sont culOves pendant
une courte priode en prsence duracile
radioacCf an de marquer (pulse) lARN
nosynthOs.
- Les cellules sont ensuite laves pour liminer
luracile radioacOf puis culOves en prsence
dun excs duracile non radioacCf (luracile
radioacOf est ainsi chass ).

S. ZEHDI & H. ENNAFAA

Les points noirs signalent les posiOons de lARN radioacOf : aprs le
marquage, lARN radioacCf se retrouve dans le noyau; aprs la chasse,
il est prsent dans le cytoplasme.
Chez les Eucaryotes, lARN est synthCs dans le noyau et migre
ensuite vers le cytoplasme, dans lequel sont synthCses les
protines: lARN est donc un bon candidat au rle dintermdiaire
de transfert dinformaCon entre lADN et les protines.
CaractrisCques de lARN
L ARN dire de lADN:
 Uracile

Uracile

Les ARN messagers sont parOculirement instables:

ils ont une dure de vie courte.
III-2 OrganisaCon des gnes chez les Eucaryotes
et Procaryotes
Gne Eucaryote:
Le gne commence en 5 par des squences non transcrites,
rgulatrices (= enhancers , silencers ), qui peuvent tre
trs loignes (jusqu quelques kb en amont).
Vers -100 par rapport au site diniOaOon de la transcripOon
commence la rgion appele Promoteur.
- Le promoteur correspond une rgion non transcrite de
l'ADN, dont la squence permet la xaOon de l'ARN
polymrase (enzyme qui copie lADN en ARN).
- Certaines squences du promoteur (surnommes "botes")
ont une importance parOculire dans le processus diniOaOon
de la transcripOon: la "bote TATA" (= TATA box ) tant la
plus importante. S. ZEHDI & H. ENNAFAA
 Promoteur: Terminateur:
Signale le debut Signale la n
de la de transcripCon.
transcripCon.
ADN region transcrite:
Une parOe de cele rgion conOent
les informaOons qui spcie une
squence d'acides amins.

squence rgulatrice: Site pour

la liaison de protines rgulatrices
Le rle de ces protines
est d'inuencer le taux de Transcription
la transcripOon.

ARNm
5 3
 Vient ensuite le site diniOaOon de la transcripOon (not +1).
Suivent ensuite, une alternance de squences:
Les exons: squences qui seront conserves dans la version
nale de lARNm.
Les introns: squences qui ne seront pas conserves dans la
version nale de lARNm.
10 20 bases avant la n du dernier exon, est retrouve une
squence AATAAA = squence de reconnaissance pour la
coupure du transcrit primaire.
La terminaison de la transcripOon se fait bien plus en aval, au
niveau de signaux dont la nature nest pas bien connue.
Le gne se termine enn par une rgion 3 adjacente, non
transcrite (o lon a caractris parfois des squences
rgulatrices).
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ORGANISATION DUN GENE CODANT POUR UNE PROTEINE CHEZ
LES EUCARYOTES

S. ZEHDI & H. ENNAFAA

Gne Procaryote
Sa structure est beaucoup plus simple que celle dun gne
Eucaryote et en parOculier, il ne possde pas dintrons.
On y trouve dans cet ordre:
- Le Promoteur: qui comporte aussi des squences trs
conserves: -35 et -10 . La bote -10 est appele
Pribnow box , elle est lquivalent de la TATA box des
Eucaryotes.
- Le site diniOaOon de la transcripOon (not +1)
- Une rgion 5 non traduite : 5UTR (UnTRanslated).
- La squence codante du gne
- Une rgion 3 non traduite: 3UTR.
- et enn un signal de n de transcripCon.
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III-3 La TranscripCon
La transcripOon, cest le mcanisme par lequel lARNm
est synthOs.
Les deux brins de la double hlice dADN se sparent
localement et seul lun des deux brins (= brin
transcrit, nomm aussi brin anO-sens) sert de
matrice pour la synthse de lARNm.
Mais ce nest pas toujours le mme brin dADN qui sert de
matrice: pour certains gnes ce sera un brin, pour dautres gnes
ce sera lautre brin.
Cest une ARN polymrase ADN-dpendante qui
assure la synthse de lARNm dans le sens 5vers 3,
de faon complmentaire et anCparallle au brin
dADN transcrit.
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 Gne A Gne B Gne C
5 3

3 5
5 3 5 3 5 ARNm

(= Brin sens)
Gne A:
5---CGTTAACGTAGTCATCGT---3 brin non transcrit
3---GCAATTGCATCAGTAGCA---5 brin transcrit
(= Brin anO-sens)

5---CGUUAACGUAGUCAUCGU---3 ARN m

Remarque: l ARNm est idenCque au brin dADN non transcrit mais

avec U la place de T.
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 Chromosomal DNA Regions of DNA
between genes
Promoter Terminator Promoter Terminator Terminator Promoter
Gene A
Gene B
Gene C

T emplate strand
5 3 5 3 5 3
3 5 3 5 3 5
Direction of
transcription Template strand

5 3 5 3 3 5
Gene A RNA Gene B RNA Gene C RNA
III-3-1 Les direntes tapes de la transcripCon:
On peut diviser la transcripOon en trois tapes: liniCaCon,
llongaCon et la terminaison. Dans leurs grandes lignes, ces
tapes ne dirent pas sensiblement entre Procaryotes et
Eucaryotes.
LiniCaCon
- Le signal de dbut de transcripCon est le promoteur.
- L ARN polymrase se xe au promoteur grce aux squences
spciques qui sy trouvent.
- Une fois xe, lARN polymrase droule localement lADN
et commence incorporer des ribonucloOdes.
(Remarque: le site diniOaOon de la transcripOon est souvent
situ en amont du signal du dbut de traducOon (ATG), ce qui
cre une rgion 5 non traduite (5UTR) au niveau du transcrit.)
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 LlongaCon
- A mesure que lARN polymrase parcourt lADN, elle
droule celui-ci devant elle et enroule lADN qui a
t dj transcrit.
- L ARN polymrase ralise la synthse de lARN
dans le sens 5 vers 3.
- Les nucloCdes sont ainsi toujours ajouts
lextrmit 3 en cours dlongaCon.
- L ARN polymrase va souder les ribonucloOdes
entre eux par une liaison ester.
(les substrats de lARN pol. sont des ribonucloOdes
triphosphates: ATP, GTP, UTP et CTP).
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 La terminaison
- LlongaOon se poursuit jusqu ce que lARN
polymrase reconnaisse des squences qui servent
de signal pour la terminaison de la transcripCon.
- L ARNm est alors libr et lARN polymrase se
dcroche du brin dADN matrice.
(Remarque: la transcripOon conOnue au del de la
squence codante du gne, ce qui cre une rgion 3
non traduite (3UTR) au niveau du transcrit.)

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III-3-2 Les modicaCons post-transcripConnelles
Chez les Procaryotes, il ny a praCquement pas de
modicaCon de lARNm. Dailleurs, chez les
procaryotes, la traducOon dmarre avant mme
que la transcripOon ne soit termine.
Au contraire, chez les Eucaryotes, les modicaCons
apportes aprs la transcripCon sont trs
importantes: elles se font dans le noyau avant la
migraOon de lARNm vers le cytoplasme.

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Cytoplasme
Noyau
ADN
Pre-ARNm
Transcription
ARNm
ADN
Cytoplasme
Epissage de lARNm Transcription:
ADN est transcrit
en ARNm

ARNm
Traduction
PolypepCde Traduction:
PolypepCde
Ribosome
Ribosome LRNm est traduit
En un polypeptide

TranscripCon chez les procaryotes

TranscripCon chez les
eucaryotes

ModicaCons post-transcripConnelles chez les
Eucaryotes:
Chez les Eucaryotes, lintgralit du gne, cest--dire
aussi bien les exons que les introns sont transcrits pour
donner une longue molcule dARN appele ARN
pr-messager (pr-ARNm) ou transcrit primaire.
Le pr-ARNm va subir direntes modicaOons
appeles maturaCon de lARN:
- AddiCon dune coie (= cap) lextrmit 5.
(la coie est un GMP ayant un CH3 sur lazote en 7)
- AddiCon dune queue poly-A lextrmit 3.
- Epissage: Retrait des introns (excision) et runion des
exons.
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MATURATION DE lARN pr-m:

Epissage

Exon

Intron
 Structure de gne Eucaryote

Exon 1 Intron 1 Exon 2 Intron 2 Exon 3

Promoteur Terminateur
Transcription

Pre-mRNA
5 3
pissage

coie

Queue polyA ARNm mature

5 3

Exon 1 Exon 2 Exon 3

5 coie 3 queue poly A

Introns limins
Epissage alternaCf:
Lpissage des exons peut tre ralis suivant direntes combinaisons. Dirents
ARNm puis direntes protines sont produits parCr du mme transcrit primaire
III-4 TranscripCon inverse in vitro: RT-PCR
Principe:
La RT-PCR (= Reverse Transcriptase PCR) consiste
raliser une PCR aprs transcripCon inverse dun
ARN en ADN complmentaire (ADNc).
Pour raliser une RT-PCR, il faut donc extraire les
ARN et les recopier in vitro en ADNc simple-
brin.
Cele transcripOon inverse est ralise par une
enzyme appele Reverse Transcriptase.
(cele enzyme est isole parOr de rtrovirus = virus
dont le matriel gnOque est consOtu par lARN)
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 La rverse transcriptase est une ADN polymrase
ARN-dpendante: elle va uCliser un brin dARN
comme matrice pour raliser la synthse dun brin
d ADNc.
Comme toutes les ADN polymrases, elle ne peut pas
iniOer une chane, elle a besoin dune amorce.
L a synthse du second brin de l ADNc et
lamplicaCon de la molcule double-brin ainsi
obtenue se fera par la suite grce une PCR
classique .

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