TECNICAS DE RECUENTO

Usando cmaras de cuenta se

1 colocan un volumen determinado y
RECUENTO DE MICROORGANISMOS Contaje microscpico se recuentan las bacterias:
directo - Cmara de Neubauer.
- Cmara de Petroff-Haufer.
VIABLES TOTALES

Permite rpidamente determinar

Contaje de partculas utilizando el nmero de partculas presentes
Sistemas automticos del tipo Coulter- en una suspensin y la distribucin
Counter: de sus tamaos.

El cultivo puede hacerse tanto en masa

Contaje de placa como en superficie.

El resultado es funcin de una serie de

factores como son el mtodo de muestreo

Utilizado cuando el nmero de

Filtros de membrana bacterias es bajo. Tipos de membrana:

Tipo 114/130/131/138.

Puede hacerse mediante microscopia de

Mitocondrias en DEFT
fluorescencia o epifluorescencia.

C. de mitocondrias Aadir un pequeo volumen de agar-cultivo

al microscopio. para segn la formacin de mitocondrias.

Gotitas de Agar Se examina el crecimiento de las colonias en

las gotitas tras la incubacin

Films de Agar Pelculas deshidratadas de medios de

cultivos generales o selectivos.

Medio lquido y proporciona una idea aprox.

N.M.P. De numero de bacterias vivas (tubos
incubados)

Reduccin de colorante Usando azul de metileno o resazurina

colorantes reducidos por las bacterias, al
reducirse cambian de color y esto es medible.
 METODOS 2
FISICOS
Impedancia:
Citrometra de flujo:
Detecta de los cambios de
Clulas de una suspensin impedancia que se dan con el
pasan por un detector capaz de tiempo.
medir diferentes parmetros.

Espectrofotometra: Compara Microcalometria: Estudio de pequeos

la radiacin absorvida o cambios de calor producidos como
transmitida por una solucin consecuencia del anabolismo de
que contiene una cantidad nutrientes.
desconocida de soluto.

METODOS INMUNOLOGICOS
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RADIOINMUNOENSAYO Y ELISA: Se basa en el marcaje SEROLOGIA DE
con un radioisotopo de un antigeno determinado y su ENRIQUECIMIENTO:
posterior deteccion por anticuerpos especificos fijador Especialmente desarrollado
sobre un soporte slido detecta Salmonella. Toxinas de por la deteccion de
Salmonella, el antisuero no
S. aureus.
se aade al alimento para
evitar falsos positivos.
TEST 1 -2: ANTICUERPOS
FLUORESCENTES:
Sistema ultiliza dos DIFUSION EN GEL:
cmaras de agar blando Se utiliza anticuerpo-
una selectiva y otra no marcado con una molcula Deteccin de antgenos
selectiva donde se forma fluorescente o un segundo mediante el mtodo
una banda de aglutinacin anticuerpo que reconozca inmunodifusin radial
cuando entra Salmonella. al primero. doble.

MTODOS
QUIMICOS
LISADO DE LIMULUS:
Detecta las endotoxinas de
bacterias gram (E. coli). Se
basa en la aglutinacin de Sirven para identificar
extractos de ametocito de
sangre de Limulus
producida por cantidades
de orden de picogramos de
LPS.
NUCLEASA TERMOESTABLE:
S. aureus produce una
termonucleasa (enzima termo
resistente). La endonucleasa
3
puede detertarse
experimentalmente como un
ndice de la presencia de ste.
MEDIDA DE ATP:
SONDA DE ADN:
Se detecta la presencia
de ATP usando luciferasa,
microorganimos aunque hay algunos
desconocidos por problemas
medios del secate experimenales que hacen
Southern. que la tecnica sea
controvertida.
SUBSTRACTOS FLUORO Y
CRONOGNICOS:
Se aaden como aditivos a los
medios de cultivos para failitar y
acelerar la deteccin de los
microorganismos.