AISLAMIENTO Y SELECCIN DE MICROORGANISMOS PRODUCTORES

DE ENZIMAS (AMILASAS)

INTRODUCCION

Las enzimas son protenas que actan como aceleradores de las reacciones
qumicas, de sntesis y degradacin de compuestos, estas se encuentran en
todos los seres vivos y son piezas esenciales en su funcionamiento. Estas tienen
muchas aplicaciones en diversos tipos de industrias, entre las que se destaca la
alimenticia; por ejemplo en la obtencin de yogurt, o la produccin de cerveza o
de vino, ya que el proceso de fermentacin se debe a las enzimas presentes en
los microorganismos que intervienen en su produccin. Sin embargo, para
mejorar los procesos de produccin, pueden utilizarse enzimas aisladas, sin
incluir a los microorganismos que las producen. Desde hace unas dcadas se
dispone de enzimas relativamente puras extradas industrialmente de bacterias,
hongos, plantas y animales, con una gran variedad de actividades.

Las amilasas son enzimas que catalizan las reacciones hidrolticas del almidn,
dando origen a diversos productos que poseen una gran relevancia para algunas
operaciones y procesos industriales. Las amilasas son comnmente halladas en
animales y plantas; sin embargo, para fines industriales, las ms utilizadas son
aquellas de origen bacteriano o fngico. Las amilasas poseen una gran
importancia en la produccin de alimentos y de biocombustibles. Tambin
presentan gran utilidad en la industria textil. Se han utilizados amilasas para la
obtencin de jarabes fructosados. La produccin de dichas enzimas se ha hecho
a partir de Bacillus sp. Por lo an se siguen buscando microorganismos
especficos que reporten mejores rendimientos para optimizar los procesos
industriales.

OBJETIVOS

Aislar y seleccionar microorganismos productores de amilasas a partir de

2 muestras: suelo de cultivo y humus.
Medir los halos generados por la degradacin del almidn por efecto de
las amilasas.
Seleccionar la cepa con mayor halo producido.
MATERIALES

Solucin Salina Fisiolgica estril

PDA
Cloranfenicol
Tubos
Placas
Agar almidn 1%
Muestra de suelo de cultivo
Muestra de humus

PROCEDIMIENTO
AISLAMIENTO:

Se coloc 1g de suelo de cultivo y/o humus en una bolsa de primer uso que
contena SSF estril.

Se realizaron diluciones sucesivas hasta 10-2 utilizando tubos con 9ml de SSF
estril. Se realiz la siembra de las dos ltimas diluciones en agar Almidn al
1% por estra y agotamiento y se incubo a 37C por 24 horas.
SELECCIN:

Se sembr de manera ordenada y por puntura cada cepa desarrollada en placas

con agar almidn 1% y en placas con agar nutritivo del mismo modo, de manera
que se obtuvo una rplica de las cepas en agar nutritivo, codificando las cepas.
Se incubo a 37C durante 24 horas.

Se adiciono lugol en la placa de agar almidn 1% y se observ las colonias con

halos generados por la degradacin del almidn por efecto de las amilasas.

Se replic las cepas que produjeron halos (presentes en agar nutritivo) en placas
de agar almidn al 1% esta vez separadas para poder medir bien los halos
producidos.

Se adiciono lugol en la placa de agar almidn 1% y se seleccionaron las cepas

con los halos de mayor tamao.
RESULTADOS

Se analizaron las medidas de los dimetros de los halos de degradacin de

almidn 1% de todas las mesas de trabajo.

Mesa Cepas Halo (mm) Cepa con mayor

produccin de amilasa
AI-E 8
AI-A 5
1 AI-E
HI-F 2
HI-E 3
G-3 12
G-6 5
2 G-1 2 G-3
H-3 2
H-I 2
3 S-9 8 S-9

DISCUSIN

Las cepas con mayor halo de produccin de amilasas pertenecen a la mesa 2

fue de 12mm las cuales fueron aisladas de las muestras de humus.

Ninguna de las cepas obtenidas fue considerada como buenas productoras de

amilasas, puesto que las medidas de los halos debieron ser mayores para ser
consideradas como tal.
ANEXOS

1- Aislamiento de microorganismos productores de amilasas a partir de

suelo de cultivo y humus

2- Aislamiento de microorganismos productores de amilasas

3- Cepas en agar almidn con lugol adicionado y cepas en agar
nutritivo

4- Seleccin de microorganismos productores de amilasas

 BIBLIOGRAFIA:

https://es.slideshare.net/LuzFernanda/amilasas-pracmindustrial

https://repository.javeriana.edu.co/bitstream/handle/10554/8262/tesis246.p

df?sequence=1&isAllowed=y

https://www.cosmos.com.mx/wiki/amilasas-cxhj.html