Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
APLICADA
YHR
CURSO 2016-2017
er
1 Parcial (Tema 1-7)
Karl Stetter fue el primero que aisl bacterias capaces de crecer a 100 grados centgrados. El 80%
de la historia de la evolucin de la vida en la Tierra, los microorganismos han estado presentes,
por lo que aportan un balance significativo para que el ecosistema funcione ptimamente.
Alrededor 1 de cada diez clulas de nuestro cuerpo son de origen microbiano.
La vida celular est presente en la Tierra desde hace unos 3800 millones aos. Las cianobacterias
comenzaron la lenta oxigenacin de la Tierra hace unos 3 bya, pero los niveles actuales de O2 en la
atmsfera no se lograron hasta hace 500-800 millones de aos. Los eucariotas son clulas
nucleadas e incluyen tanto microorganismos como organismos multicelulares.
La mayor parte de los microorganismo se encuentran en los subsuelos, marino 66% y terrestre
26%. En el suelo superficial encontramos el 48%. Un 22% se encuentran en los ocanos y el 1%
en otro tipo de hbitats. Los microorganismos cultivables que proceden de la superficie del suelo
solo representan el 1% de todos los existentes.
A travs de los aos, los microbilogos han tenido gran xito en: Descubrir cmo funcionan los
microorganismos, y la aplicacin de este conocimiento se ha incrementado en gran medida los
efectos beneficiosos y reducido muchos de sus efectos nocivos.
Los microorganismos tienen una gran importancia e impacto en los humanos, en muchos aspectos:
obtencin de energa, biorremediacin, comida, compuestos de inters medio o farmacutico, etc.
Los avances en biologa molecular han aumentado enormemente nuestra comprensin de los
cidos nucleicos. Esto ha dado lugar a aplicaciones en las tecnologas como la ingeniera gentica.
Todos los aspectos de manipulaciones biolgicas tienen ahora dimensiones de biologa molecular y
parece conveniente dividir la biotecnologa en:
- Biotecnologa tradicional
- Biotecnologa de los cidos nucleicos
4
La microbiologa industrial se puede definir como el estudio de la produccin a gran escala y con fines
de lucro, de los microorganismos o sus productos para uso directo o como insumos en la produccin de
otros bienes.
Microbiologa industrial es claramente una rama de la biotecnologa e incluye tanto los aspectos
tradicionales como los de los cidos nucleicos.
Existen varios tipos de biotecnologa que se diferencian por colores segn sus campos de aplicacin.
El trmino biotecnologa blanca fue propuesto inicialmente por los rganos de la Unin Europea.
"Blanco", tambin se hace referencia a los aspectos ambientales positivos.
Se ha convertido en un principal contribuyente a la llamada "qumica verde", rea, en la que los recursos
renovables, como los azcares o aceites vegetales se transforman en una gran variedad de sustancias
qumicas, tales como productos qumicos finos y grueso, productos farmacuticos, biocolorantes,
disolventes, bioplsticos, vitaminas, aditivos alimentarios, as como los biocombustibles como el bioetanol
y el biodiesel.
La industria qumica produce una amplia gama de compuestos: productos qumicos finos, productos
farmacuticos, productos qumicos en masa, plsticos y combustibles, etc. Pero al mismo tiempo un gran
uso de los recursos fsiles y una fuente significativa de residuos.
Qumica sostenible se basa en una serie de tecnologas diferentes, que van desde:
La crisis del petrleo entre 1973 y 1979, cuando la OPEP elev los precios del petrleo a partir del 2 a 30 dlares
EE.UU. por barril, dio lugar a un renovado inters por los
recursos renovables.
La produccin total anual de la biomasa en nuestro planeta se estima en 170 millones de toneladas y se
compone de ms o menos de:
De esta produccin de biomasa, 6 mil millones de toneladas (3,5%) estn siendo utilizados actualmente para las
necesidades humanas, distribuidos. 3,7 millones de toneladas (62%) para el consumo humano, posiblemente a
travs de la cra de animales como un paso intermedio. 2 millones de toneladas de madera (33%) para su uso,
el papel y las necesidades de energa de la construccin. 300 millones de toneladas (5%) para satisfacer las
necesidades humanas de tcnico materiales (no alimentarios) prima (ropa, detergentes, productos qumicos, etc.)
La biotecnologa industrial se utiliza para producir una amplia variedad de productos qumicos en masa
(alcohol, a cido lctico, cido ctrico, vitaminas, aminocidos, solventes, antibiticos, biopolmeros,
biopesticidas, biocolorantes, etc.).
Fermentacin industrial es la principal tecnologa, por lo que los microorganismos (bacterias, levaduras y
hongos) que se cultivan convierten de manera eficiente azcares en productos tiles.
Es el "nico mtodo de produccin industrial" para varios de estos productos y algunos se producen en
cantidades muy significativas.
Las enzimas dirigen la qumica de la vida sin necesidad de las temperaturas extremas, altas presiones, o
condiciones corrosivas que se requieren en los procesos de sntesis qumica (Biocatlisis).
Ventajas ecolgicas:
Si vamos a superar estos cambios, la base tecnolgica de nuestra sociedad tendr que cambiar
radicalmente.
En trminos de peso, los recursos fsiles son 2-3 veces ms caros que los recursos renovables como el
maz (paja 10 veces ms barato que el petrleo). Por lo tanto, los recursos renovables ofrecen un excelente
potencial como materia prima tanto para nuestras necesidades qumicas como para nuestras necesidades
energticas (biocombustibles), por razones de costo, la autosuficiencia, el desarrollo sostenible y la
conservacin de los recursos naturales.
En la actualidad, alrededor del 80% de todas las materias primas disponibles y la energa se utiliza en
aproximadamente un 20% de la poblacin mundial.
Naturalmente, se puede esperar que el otro 80% de la poblacin mundial vaya a hacer todo lo posible por
mejorar sus condiciones de vida y por lo tanto requieren muchas ms materias primas y energa que
antes.
Las leyes de la economa de mercado proporcionan fuertes presiones para mejorar continuamente la
eficiencia de todos los sistemas de produccin.
Los mtodos biocatalticos son particularmente eficientes y especficos, con menos residuos, el uso de
materias primas, y el consumo de energa como resultado.
La penetracin de la biotecnologa industrial en la industria qumica est casi siempre motivada por
principios econmicos normales, como ahorro de costes, mayor eficiencia, etc.
El mundo se enfrenta al gran reto de desarrollar los procesos de produccin limpios y sostenibles
que respeten el medio ambiente, mejoren nuestra calidad de vida y al mismo tiempo sean
competitivos en el mercado.
Los bioprocesos generalmente producen menos residuos y el uso de productos qumicos txicos
y peligrosos puede a veces ser eliminado por completo mediante el uso de una enzima.
Hay una creciente demanda de los consumidores para obtener informacin sobre los productos
que compran y esto va ms all de la calidad y el precio.
La biotecnologa industrial tiene el potencial de ser percibido como un trabajo en armona con la
naturaleza.
A la gente, en general, le gusta la idea de utilizar la biomasa en lugar de petrleo y los procesos
biolgicos en lugar de sntesis ms convencional.
As que los bioprocesos no slo tienen un precio competitivo y ofrecen beneficios ecolgicos,
tambin tienen una aceptacin pblica sobre los procesos clsicos.
Los microorganismos ms importantes para microbiologa aplicada don las bacterias y algunos
eucariotas. Aunque tambin son importantes las arqueobacterias por ser bacterias extremofilas.
Los microorganismos tienen las siguientes ventajas sobre las plantas o animales como entradas
en la biotecnologa:
7
8
Los microorganismos no estn sujetos a los problemas de las vicisitudes del clima. Ej. La
produccin agrcola
Los microorganismos no se ven afectados por las enfermedades de las plantas y los
animales. Ej. Los fagos y contaminantes
1.1 Bacterias
Los Firmicutes (G+) contienen muchas bacterias de importancia industrial y se dividen en tres grupos
principales:
- Formadores de esporas. Gnero Bacillus (bioinsectisidas) y Clostridium (patgeno de animales
y humanos).
- No formadores de esporas. Bacterias del cido lctico.
- Sin pared
El Actinobacteria son los Firmicutes con contenido de G+C del 50% o superior. Los miembros
industrialmente importantes de este grupo son:
8
9
10 9
Si uno est empezando de cero y no tiene idea de qu organismo produce un material industrial
deseado, puede buscar informacin
- en la web
- en la literatura, incluyendo literatura de patentes, acompaado por el contacto con una
o ms de las colecciones de cultivos establecidos y las oficinas reguladoras.
- Se pueden encontrar en cualquier sitio ecolgico. agua, aire, hojas troncos de rboles -
pueden proporcionar microorganismos.
- El suelo es la fuente preferida para el aislamiento de los organismos, debido a que es una
gran reserva de diversos organismos (mtodos de deteccin adecuados).
- En los ltimos tiempos, otros "nuevos" hbitats, especialmente el medio ambiente
marino, se han incluido en los hbitats a estudiar en las bsquedas de metabolitos
microbianos bioactivos o "bio-minera".
- Enriquecimiento con el sustrato utilizado por el organismo.
- Enriquecimiento con anlogos txicos del sustrato utilizado.
- Prueba de metabolitos microbianos para la actividad del bioactivo.
10
11
La seleccin de este tipo no slo es lento, pero su curso es en gran parte fuera del control del
biotecnlogo, una condicin intolerable en el mundo altamente competitivo de la industria
moderna.
Es importante la buena eleccin del mutgeno, ya que no todos los agentes mutagnicos
son igual de eficaces en todos los organismos.
Otros factores que hay que tener en cuenta, adems de la eficacia son:
La seguridad del mutgeno: muchos carcingenos son mutgenos
La simplicidad de la tcnica
fcil disponibilidad de los equipos y los productos qumicos necesarios.
Hay tres etapas antes de que un mutante pueda entrar en uso: la exposicin
de los organismos al mutgeno, la seleccin de mutantes y el screening.
11
12
b) Las manipulaciones que involucren ADN EXTRAO
1. Transduccin
2. Transformacin
3. Conjugacin
4. Recombinacin para sexual. rara forma
de reproduccin sexual que acurre en
algunos hongos)
5. Fusin del protoplasto
6. Mutacin dirigida. Mutacin causada in
vitro, cambio dirigido a un sitio
especifico de la molcula de ADN.
7. Ingeniera metablica. Disea o
redisea vas metablicas a travs de la
manipulacin de genes para maximizar la produccin.
8. Ingeniera gentica
12
13
14
A gran escala, un medio se reunir el mayor nmero posible de los siguientes criterios:
1. Producir el rendimiento mximo de producto o biomasa por gramo de sustrato
utilizado.
2. Producir la concentracin mxima de producto o biomasa.
3. Permitir que la tasa mxima de formacin de producto.
4. Habr el rendimiento mnimo de productos no deseados.
5. Ser de una calidad consistente y estar disponible durante todo el ao.
6. Causar problemas mnimos durante la elaboracin y la esterilizacin de
los medios.
7. Causar un mnimo de problemas en otros aspectos, en particular de aireacin y
agitacin, extraccin, purificacin y tratamiento de residuos.
Existen algunas materias primas que se utilizan para agravar los medios industriales, como es el
licor de maz fermentado, molasas, harina de soja, etc.
Los factores de crecimiento son materiales que no son sintetizados por el organismo y por lo
tanto deben ser aadidos al medio. Por lo general, funcionan como cofactores de enzimas y
pueden ser vitaminas, nucletidos, etc.
El agua, a pesar de su importancia que a menudo es pasada por alto, garantiza la constancia de la
calidad del producto, debe ser analizada peridicamente en busca de minerales, color, pH, etc y
ajustarse segn sea necesaria.
1.2 Fuentes potenciales de los componentes de los medios
industriales
Hay algunas fuentes de las que podemos obtener los componentes necesarios para los medios
industriales.
15 14
No solo son abundantes, sino que en comparacin con el petrleo, son una fuente importantes
de productos qumicos y adems son renovables. Sin embargo, contienen grandes cantidades de
polisacridos que no son inmediatamente utilizables por microorganismos industriales y tienen
que ser hidrolizados o sacarificados para proporcionar ms azucares disponibles.
Almidn
El almidn es una mezcla de dos polmeros de glucosa: la amilosa, un
polisacrido lineal (1-4) -D-glucano.
La Amilopectina, un polisacrido ramificado (1-4)/(1-6) -D-glucano.
Sacarificacin de almidn
Los grnulos cristalinos son altamente resistentes a la accin de la
enzima (se calientan a aproximadamente 55-82C, gelatinizan, se
disuelven en agua y pueden ser atacados por la enzima).
Uso de cidos. El material a ser hidrolizado se muele y se mezcla con cido clorhdrico diluido,
cido sulfrico o incluso cido sulfuroso.
15
16
Por el contrario, la molcula de lignina es muy compleja, y por lo tanto muy difcil de degradar.
Existe un tratamiento previo a la sacarificacin, para los materiales que contienen celulosa.
El xito que tendr la biomasa como material ser crucial para la biotecnologa.
Son medios definidos o sintticos, los que estn hechos con reactivos conocidos. La adicion de
componentes qumicos es distinta. Tiene una relacin de composicin 2:1:1 de C:NH4SO4:K2PO4,
en 10 ml de una solucin de sal y 990ml de agua destilada.
Los medios de cultivo requieren ---> Energa y Otros componentes (necesarios para el creciemiento)
16
17
Estas productividades son ms altas que las medidas en el contexto del proceso econmico,
donde el tiempo necesario para llevar a cabo una fermentacin incluye el tiempo de la propia
fermentacin ms el tiempo de respuesta.
- Limpieza
- Esterilizacin
- Relleno
- Inoculacin
- El crecimiento celular
- Vaciar el recipiente
Hay tres tipos de patrones de fermentacin: Tipo I, II, o III. Que ayudan a correlacionar el
rendimiento de la tasa de acumulacin de masa celular. Diferentes proporciones de la glucosa se
17
18
Ejemplos de Tipo III a (el metabolismo de la energa se maximiza con prcticamente ninguna
acumulacin de producto deseado, en la segunda fase de metabolismo oxidativo es
prcticamente terminado y la acumulacin de producto es mxima), tipo III b (dos fases de
crecimiento, con la segunda fase resulta en la formacin de los el producto).
Ejemplo de fermentacin Tipo III c (la propagacin del microorganismo se lleva a cabo para
maximizar la masa de clulas, y entonces la produccin de la protena es iniciada por un cambio en
la composicin en el caldo o la adicin de un inductor).
18
19
19
20
21
20
22
Metabolitos primarios son los que se producen durante el crecimiento activo. En general es una
consecuencia del metabolismo energtico y necesaria para el continuo crecimiento de los
microorganismos.
21
23
22
24
5. La hiptesis reguladora. Produccin de metabolitos secundarios se sabe que est
asociada con la diferenciacin morfolgica en la produccin de organismos.
6. La hiptesis del metabolismo secundario, como la expresin de las reacciones evolutivas.
Zahner ha presentado un papel ms emocionante para el metabolismo secundario. Las
propiedades antibiticas de algunos metabolitos secundarios son incidentales y no un
diseo para proteger a los microorganismos.
La principal fuente de carbono y energa en los medios industriales son los hidratos de carbono.
El catabolismo de estos compuestos suministrar los esqueletos de carbono para la sntesis de
primarios, as como para los metabolitos secundarios.
- Embden-Meyerhof-Parma ED
- Va de las Pentosas fosfato PPS
- Entner Duodoroff ED
- Fosfocetolasa
Alcanos: Los alcanos son hidrocarburos que tienen la frmula general C2Hn +2 saturados. Cuando
se utilizan los alcanos, el grupo metilo terminal generalmente se oxida al correspondiente
alcohol primario por lo tanto:
23
25
La formacin de los productos industriales resultantes del metabolismo primario puede ser
examinada en dos categoras:
Las vas de fermentacin. Caminos alternativos a partir de piruvato a productos finales, muchos
de los cuales se utilizan para la alimentacin o la industria. Las diferentes especies llevan a cabo
diferentes porciones de las vas que se muestran.
24
26
Los metabolitos secundarios pueden entonces ser clasificados de acuerdo a los siguientes seis vas
metablicas.
25
27
Los mecanismos de los microorganismos regulan su metabolismo asegurando que no haya una
sobreproduccin de metabolitos y por lo tanto evitan el desperdicio de bloques de energa.
Los mtodos utilizados para el trastorno del control metablico de los metabolitos primarios
sern discutidos en los siguientes epgrafes:
a) El control metablico
regulacin de la retroalimentacin
la restriccin de la actividad enzimtica
b) Control de la permeabilidad.
i. Induccin
ii. Regulacin catablica
1. regulacin catablica por carbono
2. regulacin catablica por nitrgeno
iii. Regulacin por Feedback
1. auto-inhibicin por metabolitos secundarios
26
28
1.4 Mtodos empricos utilizados para desorganizar
mecanismos regulatorios en la produccin de metabolitos
secundarios
Mutaciones: las variantes de origen natural de los organismos que han mostrado
evidencia de buena productividad son sometidos a mutaciones
27
29
En la industria qumica, los buques en los que tienen lugar las reacciones se denominan
reactores. Fermentadores por lo tanto tambin se conocen como biorreactores.
Tipos de fermentaciones
En fermentaciones de estado slido, los microorganismos crecen en un slido hmedo, con poco
o nada de agua "libre", aunque el agua capilar puede estar presente. Ej. La fabricacin de queso,
pan, caf, estircol.
Para cada proceso de la biotecnologa, el sistema de contencin adecuado se disea para dar
ambiente correcta para optimizar el crecimiento y la actividad metablica de los
biocatalizadores.
29
30
La mayora estn diseados para mantener altas concentraciones de biomasa, esenciales para
muchos procesos de fermentacin, mientras que las estrategias de control dependen en gran
medida del proceso concreto y sus objetivos especficos.
Las fermentaciones de laboratorio pueden llevarse a cabo en botellas o frascos cnicos que
pueden ser sacudidas para proporcionar aireacin cuando sea necesario.
Los procesos industriales, los fermentadores (hasta varios cientos de miles de litros) son en su
mayora propsito-construido y diseado para un proceso especfico, aunque puede ser
necesario cierto grado de flexibilidad en ciertos casos.
30
31
Las partes ms
importantes son: La
carcasa exterior (de Es necesario utilizar
acero inoxidable) y la diferentes tipos de
carcasa suele estar aspas, ya que el
rodeada por una camisa proceso mejora el
de refrigeracin. Sensor proceso final.
de pH: Aade cido o
base, para mantener el
pH. Tambin hay
sensores de espuma, Esta enorme
que en ese caso aaden versatilidad
un antiespumante. Las tambin ocurre
aspas, que cambian en con los
funcin del fermentadores.
microorganismo que
exista. Debe existir una
buena condicin de
cizallamiento.
2. Fermentadores aerbicos
Las decisiones tomadas en el diseo del biorreactor pueden tener un impacto significativo en el
El biorreactor es el rendimiento general del proceso. Tambin se requieren conocimientos de cintica de la reaccin,
corazn de la masa y balances de energa, mezcla, transferencia de masa y la transferencia de calor.
cualquier proceso
qumico, ya que la
etapa bilgica, el El biorreactor es el corazn de cualquier proceso bioqumico.
bio, en perfecto
funcionamiento, El rendimiento de cualquier biorreactor depende de muchas funciones, tales como:
no sirve.
31
32
Hay tres grupos de biorreactores actualmente en uso para la produccin industrial:
Los biorreactores aerobios se clasifican en funcin de cmo se distribuye el gas (de aireacin).
32
33
(A) la fermentacin por lotes (Sist. Cerrado); (b) cultivo por lote alimentado, (c) de flujo continuo
bien mezclado fermentacin (lo mismo que se aade sale); (d) tapn de fermentacin continua
de flujo con y sin reciclado, (e) de fermentacin continua bien mezclada con reciclado de
biomasa concentrada (las depuradoras, etapa 2aria, todos los microorg estn metb activo, en
el tanque de sedimentacin se acumula el lodo 1ario, una parte circula y otra es reciclada.
Tpicamente, un cultivo iniciador puro (o semilla) se utiliza para inocular placas de Petri estriles
o medio lquido en matraces de agitacin. Despus de un crecimiento suficiente, el precultivo se
utiliz para inocular el fermentador de "semilla".
33
34
34
35
Una poblacin se mantiene constante en un volumen constante por el uso de cantidades sub-
mximos de nutriente (s)
Flexibilidad mnima (de algunos parmetros), ya que son posibles (la composicin del
medio, O2, y T) slo ligeras variaciones en el proceso.
Obligatorio uniformidad de la calidad de la materia prima es necesaria para
garantizar que el proceso sea continuo (Existe una homog, en el producto).
Mayores costos de inversin en equipos de control y automatizacin y la esterilizacin
continua.
Mayores costos de procesamiento con la reposicin continua de sustratos no solubles,
slidos, tales como paja.
Mayor riesgo de contaminacin y mutacin de las clulas, debido al relativamente breve
perodo de cultivo. La frecuencia de divisin
tambin aumenta la posibilidad
de mutacin, no cualquier micr.
Aplicaciones de lotes continuos incluyen sirve para cualquier proceso, se
debe saber cmo se regula la
- Los procesos con alto volumen de produccin; actividad y como se regula a lo
largo del tiempo, si es
- Los procesos que utilizan gas, lquido o sustratos slidos solubles; codificada por plsmidos o no.
- Procesos que involucran microorganismos con alta estabilidad de mutacin.
- Productos finales tpicos incluyen vinagre, levadura de panadero y aguas residuales
tratadas
35
36
Los niveles de productividad son ms bajos debido a procedimientos que requieren
mucho tiempo de llenado, calefaccin, esterilizacin, refrigeracin, vaciado y limpieza
del reactor.
Mayores gastos en mano de obra y / o el control dinmico de proceso para el proceso.
- Cuando los mtodos continuos no son factibles (ligera mutacin o la contaminacin del
microorganismo se produce).
- Cuando los mtodos de proceso por lotes no ofrecen los niveles de productividad
deseados.
(a) fermentador de tanque agitado, (b) de columna de burbujas, (c) fermentador de transporte
areo de bucle interno, (d) fermentador de transporte areo de bucle externo, (e) fermentador
de lecho fluidizado, (f) fermentador de lecho de goteo.
36
37
La estrategia en todos es la
misma, lo nico que cambia es
las caractersticas del
fermentador.
b) Fermentador en lecho esttico,
una lmina que est perforada,
por la parte inferior metemos aire
c) Fermentador en tnel cmara
a presin, el aire sube y va
mucho ms alargada e inclinada,
oxigenando esa biomasa vegetal,
para recoger el drenaje que pueda
los procesos se minimizan,
provenir. La lamina es porosa para
manteniendo la temperatura
que, entre el aire, presenta un
estable. El aire sale por la parte
motor (rueda), cuyo objetivo es
superior.
provocar un proceso de mezclado
con una cierta frecuencia. Hay
agua adherida, est hidratado.
d) Fermentador de disco
rotatorio, con dos pisos. Hay un
e) Fermentador con tanque
tornillo sin fin, que lleva el
agitado, hay un tubo que gira en
material (biomasa vegetal),
torno al sustrato, aqu el sustrato
rompiendo el mat. Vegetal y
es de tipo lechoso.
arrastrndolo al mezclador:
continua su transformacin y el
otro tornillo sin fin va eliminando
el producto.
g) Fermentador en tornillo
continuo, un solo tornillo con una
f) Fermentador con bidn
frecuencia, desde que entra hasta
rotatorio, una serie de lminas
que cae, es el tiempo necesario
que mezclan el producto, se va
hasta que los microorganismos
aireando tambin y finalmente se
llegan al punto de madurez o
recoge el fermentado para tener
producen el producto.
el producto final.
37
38
- Para tratar las aguas residuales orgnicas a partir de (sistemas aerbicos / anaerbicos)
domsticos e industriales
- Para convertir material orgnico biodegradable para el metano, dixido de carbono y
nueva biomasa microbiana.
Ejemplos de..
fermentaciones
anaerbicas.
38
39
39
40
"SCALE-UP persigue la fabricacin de grandes cantidades de productos, si es posible, con un
aumento simultneo o por lo menos en la consistencia de los rendimientos especficos y la
calidad del producto"
41
Entre las posibles medidas para mejorar la precisin de los procesos metablicos
1.4 Biocatlisis
El uso de un biocatalizador para promover la transformacin qumica de un sustrato dado en un
producto, de una manera chemo-/regio-/stereo-selective (los productos pueden ser obtenidos
mediante transformacin qumica, pero se necesita mucha inversin y no siempre se
garantiza, pero aqu s est garantizado), bajo condiciones suaves, controladas.
El biocatalizador puede ser o bien una enzima aislada o una clula entera que contiene la enzima
requerida (s).
41
42
42
43
VENTAJAS DESVENTAJAS
43
44
Las representaciones esquemticas de las enzimas inmovilizadas: (a) la enzima inmovilizada
covalentemente sobre un soporte slido; (b) enzima adsorbido en la superficie de partculas
slidas a travs de intercambio inico; (c) enzima atrapado dentro de la clula microbiana que se
ha matado a travs de tratamiento trmico, manteniendo al mismo tiempo enzimtica actividad,
as como la permeabilidad de la membrana de la clula a menor - molecular - sustratos de peso y
productos; (d) la enzima retenida dentro del reactor de membrana.
44
45
Todas las fases de produccin deben ser llevadas a cabo aspticamente y monitoreados (por lo
general por ordenador) para la tasa de flujo (velocidad) y la calidad del producto.
Debe
desarrollarse
por un lado el
microorganis
mo, y por otro
los materiales
y sistemas
requeridos
para la
fermentacin.
45
46
- El aire es, invariablemente, se esteriliza por filtros de membrana (en fermentadores slidos, ni
importa la contaminacin).
- El medio de cultivo puede ser esterilizado junto con el fermentador, o por separado.
Por calentamiento a 121 C, durante 20 - 30 min.
Medios sensibles al calor se esterilizan por filtracin.
Algunas fermentaciones, una parte del medio por el calor y componentes
sensible por filtracin.
- Las soluciones de agua y de sal se esterilizan por microfiltracin.
Para esterilizar un gran volumen de medio es mucho tiempo con los procesos de
calentamiento y enfriamiento son lentos.
46
47
a) El contaminante puede utilizar los componentes del medio para producir productos no
deseados
b) El contaminante puede alterar las condiciones ambientales tales como el pH o el
potencial redox
c) La contaminacin por organismos lticos (fagos o Bdellovibrio) podra destruir el
organismo productor.
d) Los contaminantes podran incluso, si no reducen el rendimiento en un producto,
producir subproductos no extrables en el proceso de extraccin.
48
Calor hmedo, se puede emplear en la industria para matar los
microorganismos durante la ebullicin, tindalizacin, autoclave, etc.
Tindalizacin. consiste en ebullicin el material para una media hora en
tres das consecutivos. Ej. Medios donde la filtracin no es posible por
alguna razn, incluyendo que el medio es demasiado viscoso para la
filtracin
Pasteurizacin. consiste en exponer el alimento o material a una
temperatura durante un perodo suficientemente largo para destruir los
organismos patgenos o de descomposicin. Se puede utilizar ya sea ser
por lotes (LTLT) o continua (HTST). Ej. Ampliamente utilizado en la
industria alimentaria. Se utiliza para el tratamiento de la cerveza y el
vino
Vapor bajo presin. es til por las siguientes razones:
a) El contenido calrico alto y por lo tanto una alta
capacidad de esterilizacin.
b) El vapor libera su calor a una temperatura fcilmente
controlada y constante.
c) Puede ser producido y distribuido con bastante facilidad.
d) No hay productos de desecho desagradables son el resultado
de su uso y es limpio, inodoro e inspido.
Desventajas: no es adecuado para la esterilizacin de los suelos anhidras,
grasas, polvos, y su eficacia, puede ser limitado en la presencia de aire.
d) Radiaciones: Las longitudes de onda ms poderosas son las de rayos gamma, mientras que
los menos poderosas son las ondas de radio.
Radiaciones ionizantes. Son ondas electromagnticas extremadamente alta
frecuencia (rayos X y rayos gamma) .. Ej. para esterilizar jeringas de plstico,
guantes de goma, etc
La luz ultravioleta (UV). Oscila entre 100 y 400 nm. El "rango germinacin cidal"
es de aproximadamente 200 a 300 nm (254 nm). Ej. Principalmente en la
superficie.
48
49
Otros esterilizantes
b) La esterilizacin de medios
Los productos de degradacin pueden ser resultado de la calefaccin. El pH suele caer con la
esterilizacin. La mayora de los medios habran sido esterilizados a una temperatura de 120-125
C durante 15-20 minutos. Aceites (antiespumantes) son ms difciles de esterilizar. El orden y el
nmero de la adicin de los diversos componentes del medio pueden ser importantes.
49
Temperature-time Relationships in
Continuous and Batch Sterilization
50
Los virus son importantes en la microbiologa industrial por al menos dos razones:
1. Los que son patgenas para el hombre y los animales se utilizan para fabricar vacunas
contra la enfermedad causada por los virus.
2. Los virus pueden causar prdidas econmicas por la destruccin de los microorganismos
utilizados en unas fermentaciones.
Los fagos son ubicuos y estn presentes en el aire, agua, suelo, etc. La primera regla de oro para
evitar la contaminacin del fago, por tanto, es la limpieza general de la rutina y la asepsia
Los fagos pueden ser introducidos como contaminantes directos o ser lisognicos en el
organismo que se utiliza en la fermentacin.
Los mutantes son tan productivos como el parental original, pero resistentes a varios fagos
contaminantes.
50
51
2. Aireacin y agitacin
1.1 Aireacin
La aireacin tambin es til para purgar productos metablicos voltiles no deseados del medio.
El aire comprimido que entra un fermentador (a travs de un sistema de rociador) por lo general
se despoja de la humedad y los vapores de aceite que pueden originarse en el compresor.
1. Las condiciones fsicas que prevalecen; T, P y rea de superficie de las burbujas de aire
/ oxgeno
2. El composicin qumica del medio
3. El volumen de gas introducido / V Tiempo de reactor / unidad
4. El tipo de sistema de rociado, utilizado para introducir aire en el fermentador
5. La velocidad de agitacin
6. Una combinacin de estos factores
51
52
Elevar la presin,
Para subir OTR Enriquece la entrada de aire con oxgeno
Aumentar las tasas de agitacin y flujo de
aire.
La OTR se determina por la fuerza motriz, el gradiente de oxgeno, y la resistencia a la
transferencia de oxgeno.
1.3 Agitacin
... ciertos sistemas de agitacin desarrollan alto cizallamiento que pueden daar las
clulas sensibles al cizallamiento.
porque
... sistemas de baja cizalladura pueden conducir a la floculacin o el crecimiento celular no
deseado en las superficies.
52
53
c) Mecanismos hidrodinmicos
53
54
Sistemas de fermentacin deben ser controlados de manera eficiente con el fin de optimizar la
productividad y el rendimiento del producto, y asegurar la reproducibilidad.
Los parmetros fsicos y qumicos clave que participan en gran medida dependendel
biorreactor, de su modo de operacin y del microorganismo.
Son principalmente:
Aireacin
Mezclar
Temperatura
pH
Control de la espuma
Control y de mantenimiento a niveles ptimos el interior del reactor est mediado por los
sensores (electrodos):
54
55
3. Los sensores que no estn en contacto con el caldo de fermentacin o de los gases
(por ejemplo, tacmetros, clulas de carga)
Sensor in-line. Es una parte integrada del equipo de fermentacin y el valor medido
obtenido a partir de que se utiliza directamente para el control del proceso.
Sensor on-line. Es una parte integral del equipo de fermentacin, el valor medido no se
puede utilizar directamente para el control. Un operador debe introducir los valores
medidos en el sistema de control.
Sensor off-line. No es parte del equipamiento de fermentacin. El valor medido no se
puede utilizar directamente para el control de proceso. Se necesita un operador para la
medicin real (por ejemplo, anlisis medio o peso de la muestra seca).
El calor debe ser eliminado para mantener la Temperatura y una ptima productividad.
Su medicin ayuda a determinar el curso de la fermentacin. Los equipos actuales emplean tres principios
55
56
1.4 Determinacin y control de oxgeno
Winkler, que se utiliza de manera rutinaria para determinar la DBO del agua. Se basa en la
valoracin por retroceso, con el yodo y el almidn, de la sal de manganeso oxidada aadida al
lquido a analizar (las sustancias que interfieren estn normalmente presentes en los caldos de
fermentacin).
Sondas modernas de oxgeno disuelto son esterilizables en autoclave y se basan en uno o el otro de
dos principios:
Polarogrfica
Galvnico
La corriente que se mide despus de que ha pasado a travs del electrolito es proporcional a la
reaccin de oxgeno disuelto en el ctodo. Una membrana de plstico permeable a los gases pero
no iones separa el ctodo, nodo, y el electrolito desde el lquido a ser estudiado. El oxgeno
disuelto se difunde a travs de la membrana y su reaccin en el ctodo se mide en el medidor de
corriente. El electrolito pronto se agota por la sustitucin constante de Cl-por-OH (vanse las
ecuaciones de arriba) y el electrolito tiene que ser reemplazado.
56
57
Las dispersiones de gas en lquido como resultado de la agitacin / aireacin, con consecuencias
indeseables
Antiespumantes mecnicos.
En general, actan dispersando fsicamente las espumas por el rpido rompindolos.
Propiedades de antiespumantes
57
58
Puede ser difcil y costoso. Lo ideal es que uno trate de obtener un producto de alta calidad, tan
pronto como sea posible, a una tasa de recuperacin eficiente y usando la mnima inversin de
plantas a un coste mnimo.
El proceso seleccionado (su costo relativo) depender del producto especfico. Ej. 15% para el
etanol industrial, 20-30% para mayor penicilina G y hasta el 70% para las enzimas.
58
59
a) Filtracin
b) Centrifugacin
No se usa mucho para la separacin primaria de slidos (muchas industrias han operado
con xito con filtros)
c) Coagulacin y floculacin
La primera es inducida por los electrolitos y la ltima por polielectrolitos, de alto peso
molecular, compuestos solubles en agua que se pueden obtener en formas inicas,
aninicas o catinicos.
59
60
Las clulas propias como en las levaduras pueden ser el producto deseado. Estn secas
o refrigeradas y el lquido descartado.
El producto requerido se puede unir a los micelios o a las clulas bacterianas, las clulas
a continuacin, tienen que ser interrumpidas con cualquiera de las disferentes maneras
disponibles (calor, mecnicamente, ..)
Cuando el material est disponible extracelularmente, o si se ha obtenido por lixiviacin
con o sin disrupcin celular luego puede ser tratada por extraccin de lquido, extraccin
de la disociacin, sorcin, precipitacin ...
1.5 Interrupcin de la clula
Mtodos mecnicos
Homogenizadores ... muy alta presin (hasta 1.500 bar)
Molinos de bolas ... molino de bolas con pequeas partculas abrasivas
Disrupcin ultrasnica ... sonido de alta frecuencia
Mtodos no mecnicos
Permeabilizacin qumica ... con disolventes orgnicos
Permeabilizacin mecnica ... como choque osmtico
Permeabilizacin enzimtica... limitado a la liberacin de enzimas periplsmicas o
superficiales
Extraccin de lquido
Extraccin de disociacin
Precipitacin
1. Cromatografa
Cromatografa de adsorcin ... variaciones en las fuerzas dbiles solutos
vinculantes
60
61
Productos cristalinos son libres de filtrado y no compresible. Los cristales se lavan, se secan, o an
ms la eliminacin del disolvente.
61
62
63
6. Marketing eficaz
Para convencer a los clientes de su superioridad con respecto a los productos o procesos actuales.
63
64
1. Produccin de cidos orgnicos: cidos ctrico, actico, etc.
Compuestos orgnicos simples tales como disolventes y cidos orgnicos se pueden fabricar con
la ayuda de microorganismos.
Un gran nmero de cidos orgnicos con usos reales o potenciales son producidas por
microorganismos:
lctico mevalnico
ctrico giberlico
saliclico itacnico
actico diaminopimlico
mlico cidos propinicos
tartrico glucnico
Algunos usos:
65 64
El uso de Aspergillus niger en el salvado de arroz, Japn: cepas especiales de Asp. niger, en
solucin lquida en plancas de aluminio o sartenes de acero inoxidable.
b) Fermentacin sumergida
c) Fermentacin en sustrato-solido
67
a) Por mutacin
- Organismos mutantes que slo pueden utilizar parte de una ruta metablica
b) Por inhibicin
Inhibir el libre flujo del ciclo al alterar las condiciones ambientales:
- Temperatura
- pH
- Composicin del medio
(especialmente la eliminacin de los iones y cofactores esenciales para las enzimas
particulares).
65
68
Estrategias para alterar las condiciones ambientales:
Mecanismo de Recuperacin del cido Ctrico (En los dos procesos de fermentacin):
1. Precipitacin
- La mezcla se filtrahasta transparencia: es liquada + Ca (OH)2; Ratio 2:1; 50C, 20
min. 100% Ppdo.
o El caldo se filtra y es lavado (con agua deionizada)
- Se trata con sulfrico: (Ca SO4) + lquido que contiene el cido ctrico
- Se trata con: carbn activado + cationes y aniones exgenos.
- Se concentra (20-25C) CITRIC ACID-H2O; (>36,5C) CITRIC ACID.
2. Extraccin
- Se usa..
o Trideculamina o triisononilamina con ..
o Ester insoluble en agua, ketona o alcohol.
3. Absordcin
- Se usa una mezcla de
o N-octyl alcohol,
o Synthetic isoparaffin petroleum hydrocarbons -Tridodecylamine
66
69
Tipos de vinagre:
Sustrato:
La fermentacin alcohlica vara entre localidades
Europa Continental ... vinagre de vino (a partir de uvas)
Reino Unido ... vinagre de malta
Estados Unidos ... utiliza tanto malta y vinos vinagres
70 67
Composicin y especificaciones
Definida por los reglamentos establecidos por los gobiernos. Ej. EE.UU.: El cido actico, no
inferior a 4,0% (w/v). Contenido en 14C de origen biolgico. Metanol no ms de 0,5% (v/v).
cidez Total Espaa: Mnimo 50 g / L . Alcohol residual Mximo 1,5 por 100V/V
- Oxidacin de acetaldehdo
- Oxidacin de hidrocarburos
- Carbonilacin del metanol
Tambin puede ser producido por rutas biolgicas utilizando una ruta ...
- aerbico
- anaerbico
d) Proceso aerbico
1. Produccin de etanol a partir de una fuente de carbohidratos. 30-32C Anaerbico.
Saccharomyces cerevisiae
Acetobacter aceti
(Rendimiento del 76%)
e) Procesos anaerbico
En la dcada de 1980, surgi otro proceso utilizando Clostridia.
Estos organismos pueden convertir glucosa, xilosa, otros
Y Clostridium thermoaceticum
Para reducir los costos de sustrato, una variedad de sustratos, se han
utilizado (fructosa, xilosa, lactato, formiato, y piruvato).
68
71
Fabricacin de Vinagre
Mtodo Orleans
Mtodo de goteo
Fermentacin sumergida
69
72
B. Mtodo generador de goteo (rpido o alemn)
Sin modificar durante poco ms de un siglo, cuando varias modificaciones fueron introducidas en
el mtodo Frings, que incluye:
a) aireacin forzada
b) control de temperatura
c) operacin semicontinua
Desventajas
Los aminocidos son un importante producto industrial con una produccin anual mundial de
ms de 2.000.000 toneladas.
71
74
1908, Kikunae Ikeda identificado y aislado el glutamato monosdico (MSG), ('kombu', un agente
de condimento tradicional utilizado en Japn, a partir de algas marinas).
a) Hidrlisis de protenas
b) Sntesis qumica
Se aade un
determinado sustrato
para conseguir el aa
76
77
Model for the induction of l-glutamate production in C. glutamicum. Treatments triggering l-glutamate
overproduction alter membrane tension. The change in tension induces a structural transformation in
NCgl1221, which enables it to secrete l-glutamate. OdhI is phosphorylated and dephosphorylated by
PknG, B, and Ppp, respectively. The nonphosphorylated form of OdhI inhibits ODHC activity, which
shifts the metabolic flow of 2-oxoglutarate (2-OG) from succinylCoA to l-glutamate.
78
OJO
73
79
Most industrial enzymes are obtainable from microorganisms. The advantages of using microorganisms
are numerous, in contrast with their production from plants (e.g. malt diastase) and animals (e.g. pepsin)
and are as follows:
o Enzymes form only small portions of the total plant or animal and large tracts of land as well as
huge numbers of animals would be necessary for substantial productions. These limitations
make plant and animal enzymes expensive. Microbial enzymes on the other hand are not
subject to the above constraints and may be produced at will in any desired amount.
o By far the greatest attraction for the production of microbial enzymes, however, is the great
diversity of enzymes which reflects the diversity of microbial types in nature. Thus largely, though
not entirely, because of the widely varying environmental conditions in nature, microbial
enzymes have been isolated which operate under extreme environmental conditions. For
example microorganisms produce amylases functioning at temperatures as high as 110C and
proteases operating at pH values as high as 11 or as low as 3.
o Finally, following from greater understanding of the genetic basis for the control of physiological
function in micro-organisms it is now possible to manipulate microorganisms to produce
virtually any desired metabolic product, including enzymes
- Cuajos microbianos
- La lactasa
- La industria textil
- Las pectinasas para su uso en el zumo de fruta y la
produccin de vino
- Naringinasa
- Las enzimas en la industria de la panificacin
- Las enzimas en la industria de las bebidas alcohlicas
- Cebo de cuero
- Algunos de los usos mdicos de las enzimas
microbianas
Slo alrededor de 200 de unas 2.000 enzimas conocidas ahora se producen comercialmente.
82 74
a) Medio "semislido"
"Koji" o "Mohoso salvado" mtodo de la SSF
El medio de:
Hmedo (8%) de trigo o salvado de arroz estril se acidific con HCl
Sales minerales: minerales
Un inductor tambin se suele aadir;
10% de almidn para la amilasa,
Gelatina y pectina de protenas y pectinasa, respectivamente.
Los organismos utilizados son los hongos (Aspergillus oryzae)
Temperatura, 30 C
Perodo: 30/40 horas - 7 das
Enzimas: amilasa, Glucoamylose y proteasa
b) Produccin sumergida
Requerir menos mano de obra y por lo tanto es ms barato
Presente un menor riesgo de infeccin
En general, ms facilidad de control de la temperatura, el pH, ..
83 75
Acetona
Impacto histrico durante la Primera Guerra Mundial
(Industria Allied: Acetona para fabricar plvora explosiva)
La produccin tradicional: destilar bosque, haya, abedul, arce (Cerca del 1% del volumen
de la madera produce acetona)
Producido por la fermentacin por Clostridium acetobutylicum. (De origen ruso
Judio, Chaim Weitzman)
Tambin Ejrcito Alemn: Se utiliza microbios para hacer los productos qumicos (glicerol)
necesarios para la produccin de explosivos (nitroglicerina).
Carl Neuberg, descubri que S. cerevisiae aumentar su produccin de glicerol en condiciones de
cultivo determided.
Ms tarde, se descubri que el alga halfila Dunaliella salina produce grandes cantidades de
glicerol para actuar como un estabilizador osmtico.
Objetivos de desarrollo ambiciosos ... EE.UU. y la Unin Europea tienen previsto llevar la
produccin de biocombustibles del 1% actual de los combustibles del motor hasta el
10%.
76
84
La pregunta es saber ...
Si los recursos de biomasa suficientes estn disponibles
Si la tecnologa est lista para una progresin tan rpida
Ser posible para garantizar que tales niveles de produccin sean sostenibles?
Produccin de
Biofuel a partir
de Biomasa
Lignocelulsica
Concepto:
Biorefinera
85
86
Variedades de Biofuel
77
87
88
1.2 Etanol vs Biodiesel
Proceso qumico: hidratacin cataltica del etileno (slo una pequea fraccin del etanol
producido en el mundo de hoy).
78
89
79
90
Clonacin de los genes (Z. mobilis) que codifica PDC y ADH (va
homoetanol, opern de PET) en un
plsmido y se expresa a partir del
promotor PFL en E. coli.
Biocombustibles slidos
Distintas formas de BIOMASA usadas directamente o pretratadas para producir calor o
electricidad. Actualmente, la combustin representa el volumen mayor de conversin de
biomasa a energa.
Produccin de METANO
91
Hidrocarburos Isoprenoides
Botryococcus braunii (Alga verde; 86% Lpidos: combustibles)
Glicerol
Dunaliella (Alga verde; 85% peso seco: Etanol y n-Butanol
CH4
A partir de carbohidratos de micro y macroalgas
Hidrocarburos gaseosos
Emiliania huxleyi: Pirlisis en vaco de biomasa
H2
1. Fermentacin de sustratos orgnicos por Clostridium
2. Actividad fotosinttica de bacteria marina Rhodovulum
3. Hidrlisis del agua por cianobacterias y algas verdes
81
93
94
95
96 83
Un ejemplo de biotransformacin por microorganismos en la produccin industrial de las
hormonas esteroides. Hormonas deseados como la cortisona y la progesterona pueden requerir
de muchos pasos y microbios, y rara vez puede un solo microbio llevar a cabo todos los pasos de
sntesis necesarios. (a) A partir de compuesto de partida 4-pregnen-3,20-diona, (b) dos especies
de moho pueden producir 11-dehidrocortisona en tres pasos. (c) Otras dos especies de moho
pueden convertir este compuesto de partida a la cortisona en dos pasos, y (d) dos especies de
moho pueden producir 15-hidroxiprogesterona en un solo paso.
84
97
a) Efectos beneficiosos
La comida se fermenta por la adicin de microbios o productos microbianos para alterar o mejorar
el sabor, el gusto, o la textura.
b) Efectos perjudiciales
c) Efectos neutral
Por lo tanto, ... limitar el crecimiento microbiano puede preservar la calidad de los
alimentos y prevenir enfermedades transmitidas por los alimentos
(enlatados, pasteurizados, irradiados, almacenamiento fro, conservantes).
85
98
Factores intrnsecos
Depender de las caractersticas inherentes de ese alimento.
Disponibilidad de Agua
pH
Nutrientes
Potencial Redox
Barreras biolgicas
Productos qumicos antimicrobianos
Factores extrnsecos
No sustrato dependiente: propiedades del entorno de almacenamiento.
Temperatura de almacenamiento
Humedad relativa del ambiente
Presencia y concentracin de gases de presencia y las actividades de
otros microorganismos
a) Disponibilidad de Agua
La mayora de los alimentos frescos tienen una aw por encima de 0.98
0.91 jamn, mermelada de 0,85, 0,70 y algunos pasteles. (Bacterias aw por encima de 0.90 y hongos 0,80)
86
99
Los hongos pueden crecer a un pH ms bajo, lo que lleva a algunos alimentos, como las
frutas, llegando a ser mohoso. Ej. Limn (pH 2,2) inhibe el crecimiento de bacterias, (incluyendo
LAB): algunos hongos pueden crecer.
c) Potencial de oxidacin-reduccin
Aerobios requiere valores de Eh positivos (oxidados) anaerobios requieren valores de Eh
negativos (reducidos).
d) Nutrientes
Determinar los tipos de organismos que pueden crecer en ella.
Un organismo que requiere una vitamina no puede crecer en una comida deficiente que la
vitamina.
Pseudomonas puede sintetizar nutrientes esenciales.
e) Barreras biolgicas
Cortezas, conchas, etc, la ayuda en la proteccin de algunos alimentos Ej. Huevos, conservan
su calidad mucho ms tiempo con las cscaras intactas.
Algunos microorganismos pueden degradar los materiales de proteccin
87
100
1.4 Factores extrnsecos
a) Temperatura de almacenamiento
Por debajo del punto de congelacin, el agua es inaccesible detener el crecimiento
microbiano.
A bajas temperaturas, las reacciones enzimticas son o muy lento / inexistente
Los microorganismos en los alimentos refrigerados (psicrfilos; Pseudomonas)
101 88
Para las infecciones alimentarias, una dosis infecciosa (clulas suficientes para iniciar
la infeccin) debe estar presente.
Intoxicacin de alimentos, suficientes clulas para producir la toxina debe estar presente.
Intoxicacin alimentaria. La
toxina es liberada por los microbios que
crecen en la comida. Despus se ingiere la
toxina, que acta sobre su tejido diana y
provoca sntomas.
89
102
En general, las bacterias son pobres competidores por el agua que queda libre, pero los
hongos son buenos competidores.
En la prctica: una alta concentracin de solutos tales (azcares, sales), normalmente
inhiben el crecimiento bacteriano.
90
103
1.4 Calefaccin
Se utiliza para reducir la carga bacteriana o incluso esterilizar un alimento
til para la preservacin de los lquidos y los alimentos hmedos.
La pasteurizacin no esterilizar lquidos (reduce la carga bacteriana de organismos de
putrefaccin y patgenos, que se extiende significativamente la vida til): lquidos
perecederos, como leche, jugos de frutas, y cerveza.
LTLT: a los 63 C (145 F) durante 30 segundos
HTST: a los 71 C (160 F) durante 15 segundos.
UHT: a 138 C (238 F) durante 2-4 segundos (UHT) (leche en Europa)
Este tratamiento mata todos los microorganismos, se extiende la vida til de lquidos como la leche
a 6 meses o ms, sin la necesidad de refrigeracin.
1.5 Envasado
"La comida est sellada en un envase (frasco puede / vidrio) y luego se calienta"
Proceso de uso:
Flash de calentamiento (ciclo de calentamiento rpido y corto)
La esterilizacin por medio de la coccin.
Los alimentos se envasan en envases aspticos (cajas de cartn forradas con papel de
aluminio y plstico).
El proceso puede requerir la "sala limpia" ( quirfano). EE.UU.: los jugos de frutas (cajas
de jugo) y sustitutos de la leche, en Europa (muchos pases): productos lcteos, el flash
se calienta a 133 C
Acelerador de haz de electrones. Estas mquinas generan una corriente de electrones que se
acelera por un tubo largo por electroimanes de la carga opuesta. En el dibujo, el haz de
electrones se dobla por un "imn de flexin" Esto sirve para filtrar los electrones de los niveles
de energa no deseados. Proporcionar un haz de energa uniforme. El haz vertical es barrido
hacia atrs y adelante por encima del objetivo, ya que se mueve ms all de la . haz el poder de
penetracin del haz es limitado: si la sustancia diana se expresa como un espesor equivalente de
106 93
Ej. (2010, Iowa EE.UU.), 1.500 afectados por salmonelosis (alimento para pollos) Cada ao
(EE.UU.) estima que los brotes de enfermedades transmitidas por los alimentos 25000. (76
millones, 13 millones de enfermedades adquieren afectadas, 325.000 hospitalizados y 5.000
personas mueren).
Los brotes se deben:
Manipulacin de alimentos inadecuada y preparacin (por lo general en el hogar).
La ruptura de manipulacin segura de alimentos y preparacin (fbrica).
La mayora de las enfermedades se denuncian (alimentos y la enfermedad no result).
Staphylococcus - Prevencin
Intoxicacin estafiloccica se puede prevenir mediante el saneamiento y
la higiene en
la produccin de alimentos, preparacin de alimentos y el almacenamiento de
alimentos.
107 95
Los alimentos cocidos deben refrigerarse tan pronto como sea posible a las
temperaturas ms bajas rpidamente e inhiben el crecimiento de C. perfringens.
108
a) Otros Envenenamientos
El moho crece rpidamente en los granos y maz bajo condiciones de humedad.
Claviceps purpura (ergotismo).
Alcaloides alucingenos (comportamiento alterado, aborto, muerte).
Estructura de fumonisinas. La
estructura bsica de las fumonisinas FB1
y FB2 producida por Fusarium
moniliforme, un contaminante fngico
que puede crecer en maz almacenado
incorrectamente. Un total de al menos
diez fumonisinas diferentes han sido
aislados. Estos son compuestos
fuertemente polares que causan
enfermedades en los animales
domsticos, y tambin en los seres humanos. FB1, ROH; FB2, RH.
109
Algas marinas toxinas. Estructuras de toxinas de algas marinas que pueden afectar
a los seres humanos a travs de los marinos y de agua: (a) la saxitoxina, (b) brevitoxin, (c) la
ciguatoxina, (d) el cido okadaico, (e) el cido domoico.
98
110
111
Protena unicelular
- Puede ser utilizado como una fuente de alimento humano o animal.
- Podra ser til que las condiciones climticas hacen que los cultivos agrcolas a
fallar, donde la tierra cultivable es escasa.
- Cuando las poblaciones estn en peligro de morir de hambre.
El rpido crecimiento
El crecimiento en gran parte no afectada por el clima
Bajo requerimiento de tierras
Sustratos de bajo costo para el crecimiento
1.2 Algas
Se utiliza como ingredientes de diversos alimentos, helados (o como paales y cosmticos).
El uso de algas como alimento humano acorta la cadena alimentaria. Aprox. Se requieren
100.000 kg de algas para hacer 1 kg de pescado
Cada hectrea de estanque puede producir 40 toneladas de alga seca (40 veces la de la protena
de la soja, 160 veces mayor que el de la carne de vacuno)
La gente acepta productos de algas como alimento, (peligro potencial para la salud)
114 102
Porphyra, (alga roja) forma grandes hojas multicelulares cultivadas de nori (envolver el arroz, el
pescado y las verduras para formar el sushi).
Laminaria, (algas pardas) se cultivan para la alimentacin o para extraer los aditivos alimentarios.
Como fuente de sabor aditivo glutamato monosdico.
Macrocystis, (kelp gigante), se cultiva en la costa de California para la produccin del polmero de
alginato, un espesante comn para helados, aderezos para ensaladas, y pinturas.
1.3 Bacteria
115
Cuerpos fructferos-hongos, son comnmente conocidos como setas (Agaricus bisporus y Lentinus
edulus son dos de varias setas cultivadas comercialmente en EE.UU. y por lo general se venden en
las tiendas de comestibles).
116
5. Microbiologa de los alimentos fermentados.
La elaboracin del pan depende de CO2 para generar espacios de aire que
la levadura de la masa, por lo que su contenido ms fcil de masticar y digerir.
Para las bebidas alcohlicas, sin embargo, el etanol es el producto clave, acompaada
de burbujas de dixido de carbono para "fizz", conocido como carbonatacin.
Vino dulce: una parte del azcar se queda o azcar adicional se aade despus
de la fermentacin
Vino espumoso: considerable CO2 est presente, que surge de una fermentacin
final (levadura) en la botella sellada.
Lder pases: Italia, Espaa (ambos, 60%), Francia, Portugal, Estados Unidos, Australia, Sudfrica y
Argentina.
La mejor zona para vias productoras de vino est entre 30 y 50 N o 30 y 40 de latitud sur del
ecuador.
105
122
En la prctica, la mayora de las bodegas para matar las levaduras salvajes presentes en el
mosto mediante la adicin de metabisulfito de sodio (Na2S2O5, 50-100 mg / l).
Aclaracin: con agentes (casena, tanino, arcilla bentonita) filtrados por, tierra de diatomeas,
amianto, o membrana multar.
El vino tinto es tpicamente envejecido durante meses a varios aos. No vino blanco.
Vino tinto: las uvas se fermentan con las pieles a una temperatura que aumenta la
extraccin de color y taninos.
124
125
107
126
Muchos vinos tintos secos de alta calidad y unos vinos blancos, como los Chardonnay se
someten a una segunda fermentacin.
Variedades de uva (vinos secos), contenido de una alta concentracin de [cido mlico]
(un cido fuerte y bastante amargo, que vara a nivel local debido a las condiciones climticas y
del suelo.
La fermentacin malolctica es
Catalizada por especies de bacterias del cido lctico incluyendo Lactobacillus, Pediococcus, y
Oenococcus (cidotolerante y llevar a cabo la fermentacin de pH 3.5)
Bodegas comerciales
La fermentacin malolctica puede tomar varias semanas, pero es por lo general vale la
pena la esperar:
el producto final es a menudo mucho ms suave y muy
superior a la del material de partida ms fuerte sabor amargo
Los ingredientes de partida para las versiones antiguas y actuales de la cerveza, ale, stout,
porter, y otras variaciones son: agua, malta (cebada en grano), el lpulo, y las cepas de
levaduras especiales.
108
127
As, los dos productos son muy diferentes bebidas fermentadas, y cada uno tiene sus propias
propiedades caractersticas.
Y, como el vino, el
producto final elaborado cerveza puede verse muy
influenciada por las diferencias regionales y culturales
malteado
maceracin
aadiendo saltos
fermentacin
envejecimiento
acabado
Durante la germinacin:
- el endospermo (alimentos almacenados) del grano
segrega giberelina, una hormona que Estimula a el
crecimiento de las raicillas y el vstago emergente.
- Giberelina induce la aleurona (revestimiento del
endosperma) para producir hidrolasas, enzimas que
descomponen:
o el almidn en maltosa
o protenas a aminocidos para el uso de la planta en
crecimiento.
- Las hidrolasas en realidad se activan durante la segunda
etapa, llamada de maceracin, cuando los granos se
trituran y se agit en grandes cubas de agua.
128
1.2 Maceracin
mosto.
109
129
1.4 Fermentacin
130
- Estos oxidado subproductos pueden ser reducidas por las pocas clulas de
levadura restantes durante un periodo de fermentacin secundaria.
131
Levadura : Gas producir producto poroso y esponjoso. ( Sin levadura , masa de pan sigue siendo
densa y plana , y duro ) varios microbios y agentes de fermentacin pueden ser utilizados ,
Saccharomyces cerevisiae .
Otros microorganismos formadores de gas (coliformes , Clostridium , LAB
heterofermentativo , levaduras salvajes).
111
133
Amasado : que incorpora aire en la masa, y las enzimas microbianas : rompe las protenas de la
harina ( gluten ) y dar la elasticidad de la masa .
Fermentacin: genera cidos y alcoholes que imparten sabores y aromas delicados orgnicos
voltiles.
Sabor picante del pan de centeno , proceden en parte de los cultivos iniciadores de LAB como el
L. plantarum , L. brevis , L. bulgaricus , Leuconostoc mesenteroides , y Streptococcus
thermophilus.
134
Injera est hecho de teff (sin gluten, pan plano) un grano con granos pequeos y redondos que
crece en Etiopa a gran altura.
La masa se extendi a una amplia panqueque, se deja fermentar (3 das), sobre la base de los
organismos presentes en el grano y el aire.
135
1.1 Vitaminas
Utilizado como suplementos para la alimentacin de los alimentos y de los animales humanos
- Sin embargo, algunos son demasiado complicados para ser sintetizado a bajo costo, pero
se pueden realizar en cantidades suficientes con relativa facilidad
mediante procesos microbianos.
112
137
Produccin industrial
138
139
Rivoflavina
Produccin industrial
140
Vitamina C
Produccin: supera 35.000 toneladas por ao. Vitamina C (Tambin se usa como un antioxidante)
Produccin industrial
1.2
141
Durante siglos (Japn) han utilizado las algas secas, bonito seco, u otro pescado seco como
aromatizantes.
142 113
Como potenciadores del sabor, el orden decreciente de eficacia entre los nucletidos es cido
guanlico, cido inosnico y cido xantlico.
Estos nucletidos se aaden para mejorar el sabor de sopas y salsas y son eficaces a
concentraciones muy bajas (0.005% a 0.01%).
Produccin
143
pueden haber evolucionado su diversidad inusual como una forma de evitar las respuestas de
anticuerpos (ventaja de esta caracterstica se puede tomar en el desarrollo de vacunas)
144
Extraccin y Produccin de:
crestas de gallo
fermentacin microbiana (Streptococcus
Usos
145
146