UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Per, DECANA DE AMRICA

FACULTAD DE QUMICA E INGENIERA QUMICA

DEPARTAMENTO ACADMICO DE QUMICA ANALTICA E INSTRUMENTAL
LABORATORIO DE ANLISIS INSTRUMENTAL

PRCTICA N 2
TEMA: ESPECTROFOTOMETRA ULTRAVIOLETA. ANLISIS DE
NITRATOS DE AGUA

CURSO: LABORATORIO DE ANALISIS INSTRUMENTAL

DOCENTE: RODRIGUEZ BEST, MARIA ANGELICA

ALUMNOS:

LOPEZ ANTAYHUA, KARLA (15070032)

CRDENAS PADILLA, LUIS DIEGO (15070105)

FECHA DE REALIZACIN: 21/09/17

FECHA DE ENTREGA: 28/09/17

CIUDAD UNIVERSITARIA, SETIEMBRE DEL 2017

ndice

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS ...................................................................... 1

1. Fundamentos del mtodo de anlisis ......................................................................................... 3

2. Descripcin de la tcnica empleada ............................................................................................ 4

3. Reacciones qumicas importantes.................................................Error! Bookmark not defined.

4. Descripcin de los instrumentos o aparatos usados................................................................... 6

5. Clculos detallados tabla de resultados .................................................................................. 8

6. Grficos ..................................................................................................................................... 12

7. Discusin del mtodo usado ..................................................................................................... 13

8. Conclusiones.............................................................................................................................. 13

9. Recomendaciones ..................................................................................................................... 14

10. Bibliografa ............................................................................................................................ 14

11. Anexos ................................................................................................................................... 15

 1. Fundamentos del mtodo de anlisis

Nitratos en aguas:

El contenido de nitratos es un indicador importante de la calidad del agua y ha

demostrado tener un alto peso estadstico a la hora de clasificarla (Calvo-Brenes y Mora-
Molina, 2010). El ion nitrato tiene un origen natural pero por el uso de fertilizantes
inorgnicos, principalmente, o por residuos humanos o animales se puede introducir en
exceso, llegar por filtracin o escorrenta hasta las aguas superficiales y subterrneas y ser
acumulado en concentraciones muy altas para la salud humana (Galloway et al., 2003). Ya
sea por los procesos agroindustriales, residuos domsticos o residuos industriales, los
nitratos en altas concentraciones multiplican el crecimiento de organismos vegetales,
elevan el nivel de fotosntesis y agotan el oxgeno de las aguas superficiales frescas,
daando la vida y los ecosistemas.

La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) norma el mximo permitido en 50 mg/L

para proteger a los lactantes alimentados con bibern contra la metahemoglobinemiay
recomienda concentraciones menores a 10mg/L (OMS, 2013). A nivel nacional, el mximo
permitido de nitratos es tambin de 50 mg/L, segn lo indica el Reglamento para la Calidad
de Aguas Potables (Decreto N 32324-H).

Por otra parte, el ion nitrato presenta un mximo de absorcin de entre 200nm y
230nm, lo que permite cuantificarlo por espectrofotometra directa en el mbito de la
radiacin ultravioleta. Este mtodo es sensible a interferencias por cloruros y bromuros
que se encuentran en altas concentraciones en las aguas de estuarios y en materia
orgnica disuelta en aguas dulces

Mtodo Espectrofotomtrico UV Visible

La tcnica de monitoreo espectrofotomtrico ultravioleta (UV) mide la absorbancia del

nitrato (NO3) a 220 nm y es adecuada para la determinacin rpida de NO3 y el monitoreo
de aguas con bajo contenido de materia orgnica, como aguas naturales sin contaminar y
fuentes de agua potable. Debido a que la materia orgnica disuelta tambin puede
absorber a 220 nm y a que el NO3 no absorbe a 275 nm, se usa una segunda medicin a
275 nm para corregir el valor de NO3 .

La aplicacin de esta correccin emprica est relacionada con la naturaleza y

concentracin de materia orgnica y puede variar de una muestra a otra.
Consecuentemente, este mtodo no es recomendado si se requiere una correccin
significativa para absorbancia de materia orgnica, aunque puede usarse en el monitoreo
de niveles de NO3 en un cuerpo de agua con un tipo constante de materia orgnica. Los
factores de correccin para la absorbancia de la materia orgnica se pueden establecer por
el mtodo de adiciones en combinacin con el anlisis del contenido original de NO3 por
otro mtodo. La filtracin de muestra tiene la intencin de remover la posible interferencia
de partculas suspendidas. La acidificacin con HCl 1N est designada para prevenir la
interferencia de concentraciones de hidrxido o carbonato hasta de 1000 mg CaCO3/L. El
cloruro no tiene efecto en la determinacin. La tcnica de monitoreo espectrofotomtrico
ultravioleta de NO3 obedece la ley de Beer entre 0.03 y 5 mg NO3 -N/L.

2. Descripcin de la tcnica empleada

La tcnica de monitoreo espectrofotomtrico ultravioleta (UV) mide la absorbancia del

nitrato (NO3 ) a 220 nm y es adecuada para la determinacin rpida de NO3 y el
monitoreo de aguas con bajo contenido de materia orgnica, como aguas naturales sin
contaminar y fuentes de agua potable.
Debido a que la materia orgnica disuelta tambin puede absorber a 220 nm y a que el
NO3 no absorbe a 275 nm, se usa una segunda medicin a 275 nm para corregir el valor
de NO3 . La aplicacin de esta correccin emprica est relacionada con la naturaleza y
concentracin de materia orgnica y puede variar de una muestra a otra.
Consecuentemente, este mtodo no es recomendado si se requiere una correccin
significativa para absorbancia de materia orgnica, aunque puede usarse en el monitoreo
de niveles de NO3 en un cuerpo de agua con un tipo constante de materia orgnica.
Los factores de correccin para la absorbancia de la materia orgnica se pueden
establecer por el mtodo de adiciones en combinacin con el anlisis del contenido original
de NO3 por otro mtodo. La filtracin de muestra tiene la intencin de remover la posible
interferencia de partculas suspendidas.
La acidificacin con HCl 1 N est designada para prevenir la interferencia de
concentraciones de hidrxido o carbonato hasta de 1000 mg CaCO3/L. El cloruro no tiene
efecto en la determinacin. La tcnica de monitoreo espectrofotomtrico ultravioleta de
NO3 obedece la ley de Beer entre 0.03 y 5 mg NO3 -N/L.

SELECCIN DE MTODO
La determinacin de nitrato (NO3-) es difcil debido a los procedimientos
relativamente complejos que se precisan, la elevada probabilidad de que
se hallen sustancias interferentes y los rangos limitados de concentracin
de las diferentes tcnicas.
Una tcnica con luz ultravioleta (UV) que mide la absorbancia de NO3- a 220
nm es adecuada para el estudio de aguas no contaminadas (con bajo
contenido en materias orgnicas).

ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS

Si se debe almacenar, consrvese a 4oC hasta 24 horas; para periodos mas
largos, adase 2 mL de H2SO4 concentrado/ L y mantngase a 4oC.
NOTA: Cuando se conserva una muestra con acido, no se puede
determinar NO3- y NO2- individualmente.

Detalles Experimentales

EQUIPOS Y MATERIALES

1. Espectrofotmetro UV - Visible, Shimadzu 1700.

2. Celdas de cuarzo.
3. Balanza analtica.
4. Desecador de vidrio, con agente deshidratante.
5. Pipetas volumtricas de 1, 2, 3, 5, 10, 15, 20 y 25 mL.
6. Fiolas de 50, 100, 500, 1000 mL.

REACTIVOS
Todos los reactivos deben ser de grado analtico.

1. Agua exenta de nitrato.

2. KNO3 p.a.
4. HCl. (reactivo controlado)

SOLUCIONES

1. Solucin patrn primario de nitrato (100 ppm NO3-N):

Colocar en un crisol de porcelana aproximadamente 0,3 g de KNO3 y secar en estufa a
1050C durante 24 horas. Retirar y enfriar en el desecador.
Pesar 0,1805 g de KNO3 disolver en agua, diluir a 250 mL en fiola, enrazar y homogenizar la
solucin por inversin; 1,00 mL= 100 g NO3--N..

2. Solucin patrn intermedia de nitrato (5 ppm NO3-_N):

Diluir 5 mL de solucin patrn primario de nitrato (1) con agua destilada, llevar a fiola de
100 mL, enrazar y homogenizar la solucin por inversin
 3. Soluciones para la curva de calibracin:
Preparar soluciones de calibracin en el rango de 0,1- 0,2- 0,3- 0,4- 0,5 ppm de NO3-
N, diluyendo las alcuotas de solucin patrn 5 ppm NO3-N, antes de
enrazar a 50 mL, aadir 1 mL de HCl 1N, homogenizar la solucin por
inversin.

4. Solucin de cido clorhdrico, HCl 1N:

Diluir 8,3 mL de HCl conc. En agua destilada y enrazar en fiola de 100 mL, homogenizar
la solucin por inversin.

5. Blanco:
En una fiola de 50 mL colocar aproximadamente 45 mL de agua redestilada, aadir 1
mL de solucin de HCl 1N y luego completar el volumen hasta el enrase, homogenizar la
solucin por inversin.

TRATAMIENTO DE LA MUESTRA

Procedimiento
En una fiola de 50 mL, aadir 1 mL o 2 mL o 5 mL o 10 mL, segn sea el
contenido de nitrato de la muestra transparente, filtrada si fuera preciso y
antes de enrazar, aadir 1 mL de la solucin de HCl 1N, mezclar bien y
completar a 50 mL con agua destilada, homogenizar la solucin por inversin.
Medida espectrofotomtrica: Leer la absorbancia o Transmitancia frente al
blanco reactivo en agua redestilada, ajustada a absorbancia cero.

3. Descripcin de los instrumentos o aparatos usados

Espectrofotmetro de doble haz

En un espectrofotmetro de doble haz, la luz pasa alternadamente por la cubeta de la

muestra y de la referencia, dirigida por un motor que gira un espejo, que de esta manera entra y
sale del paso de la luz. Cuando el cortador no desva el haz, la luz pasa a travs de la muestra, y el
detector mide la potencia radiante que llamamos P. Cuando el cortador desva el haz a travs de la
cubeta de referencia, el detector mide P0. El haz se corta varias veces por segundo, y el circuito
compara automticamente P y P0, dando as la transmitancia y la absorbancia.

En la figura 1 se muestra un espectrofotmetro visible de doble haz. La luz blanca procede

de una lmpara de halgeno de cuarzo (como la de luz larga de un automvil), y la fuente
ultravioleta es una lmpara de arco de deuterio, que emite en el intervalo de 200-400 nm. En un
momento dado slo se utiliza una de ellas. La red de difraccin 1 selecciona una banda estrecha de
longitudes de onda, que entra en el monocromador, y ste selecciona una banda an ms
estrecha, que es la que pasa a travs de la muestra. Despus de cortado el haz, y una vez que pasa
por las cubetas de la muestra y referencia, la seal es detectada por un tubo fotomultiplicador,
que produce una corriente elctrica proporcional a la potencia radiante que llega al detector.

Fig. 1 Diagrama esquemtico de un espectrofotmetro de doble haz

Instrucciones para el manejo del Espectrofotmetro UV-Visible SHIMATZY 1700

1) Retirar la bolsa de silice, del compartimiento de portaceldas del

espectrofotometro UV. visible.
2) Encender el supresor de picos, el estabilizador, el espectrofotometro
(boton lado izquierdo), levantar la pantalla del espectrofotometro UV.
Visible, se completa la verificacion del instrumento (Inicio y Mode).
3) Encender la PC, el monitor. Presionar en el espectrofotometro PC
CONTROL (F4) y cerrar la pantalla.
4) Ingresar al software UV PROBE, luego al modo SPECTRUM y presionar
CONNECT.
5) Ir a EDIT e introducir datos solicitados:
Wavelengh rang: Start: 350, End: 190. Scan: fast. Single: simple.
Parametros instruments: Absorbancia.
No modificar: Path lenght: 10 nm. Slit wicht:1.0 mm fixed.
Light source: 340,8
S/R Exchange.
Click en ACEPTAR.
4. Clculos Detallados - Tabla de Resultados
Clculo de la concentracin de la solucin estndar madre en PPM

1) Preparacin del patrn primario:

Partiendo de la solucin madre de KNO3 =0.1805 g/250 ml, se calcula el
nmero de mg NO3-N / 1L solucin:

Entonces:
0.1820g 3 14 g 3 N 103 3 1000
= 100
250 ml 101.11g 3 3

2) Preparacin de la solucin patrn intermedia de 10ppm a partir de la solucin

patrn primario.
100patrn primario 1 = 100 5 solucin patrn intermedia
1 = 5

3) Preparacin de patrones a partir de la solucin 5ppm:

- P1: Obtener 0.1ppm a partir de 5ppm en 50 ml

5ppm x 1 = 0.1ppm x 50ml

1 = 1

- P2 : Obtener 0.2ppm a partir de 5ppm en 50 ml

5ppm x 1 = 0.2ppm x 50ml
1 = 2

- P3 : Obtener 0.3ppm a partir de 5ppm en 50 ml

5ppm x 1 = 0.3ppm x 50ml
1 = 3
- P4 : Obtener 0.4ppm a partir de 5ppm en 50 ml
5ppm x 1 = 0.4ppm x 50ml
1 = 4

- P5 : Obtener 0.5 ppm a partir de 5ppm en 50 ml

5ppm x 1 = 0.5ppm x 50ml
1 = 5
Clculo de la concentracin de la muestra de aguas
De todos los valores registrados en la tabla para mxima =205.6 nm, se grafic
Absorbancia Vs. Concentracin (grfica N1).

Mediante esta grafica se obtienen: C M1 = 0.263 ppm

C M2 = 0.365 ppm

C M3 = 0.229 ppm

Estos datos son concentraciones de nitrgeno, pero nosotros deseamos nitratos en las
muestras de aguas consumibles.

A) Hallamos la concentracin de nitratos en agua vida (M1)

Con los datos de C muestra segn grafico

M1 x 1ml = C M1 *50ml

M1= 0.263 x 50ml / 1ml

M1= 13.15 mg NO-3 N x 62 g/ mol NO-3

L 14 g/ mol N
C1 = 58.24 mg NO-3 N = 58.24 ppm NO-3

B) Hallamos la concentracin de nitratos en Agua Vida (M2)

M2 x 2ml = C M2 *50ml

M2= 0.365 x 50ml / 2ml

M2 = 9.125 mg NO-3 N x 62 g/mol NO-3

L 14 g/ mol N

M2 = 40.41mg NO-3 N = 40.41 ppm NO-3

C) Hallamos la concentracin de nitratos en agua Cielo (M3)

M3 x 10ml = C M3*50ml

M3= 0.229 x 50ml / 10ml

M3=1.145mg NO-3 N x 62 g/mol NO-3

L 14 g/ mol N

M3 = 5.07 mg NO-3 N =5.07 ppm NO-3

L
TABLA DE DATOS Y RESULTADOS

TABLA N 1

Solucin estndar madre (100 ppm)

Solucin de KNO3 0.1820 g /250ml

TABLA N 2

Preparacin de patrones a partir de la solucin intermedia (5ppm) para la curva de patrn:

Estndar Solucin Concentracin

intermedia (ml) (ppm)
Std1 1 0.1
Std 2 2 0.2
Std 3 3 0.3
Std 4 4 0.4
Std 5 5 0.5
Bk 0 0

TABLA N 3

Muestra de Aguas Cielo (M1) Y Vida(M2)

Muestra Volumen (ml)

M1 1
M2 2
M3 10

TABLA N 5

ABSORBANCIA Vs. CONCENTRACION (ver grfico 1)

MXIMA = 205.6 ABSORVANCIA = 0.020

Patrn ABSORBANCIA CONCENTRACIN N

(ppm)
P1 0.067 0.1
P2 0.129 0.2

P3 0.170 0.3

P4 0.244 0.4
 P5 0.313 0.5
Bk 0 0

TABLA N 6

Calculo de la concentracin de la muestras de aguas bebibles

Muestra Por el mtodo grfico (ppm

NO-3)

M1 58.24
M2 40.41
M3 5.07
5. Grficos

Grfico N1
0.35
y = 0.6106x + 0.0012
0.3 R = 0.9953

0.25
ABSORVANCIA

0.2

0.15

0.1

0.05

0
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
CONCENTRACION (ppm)

DATOS DEL EQUIPO:

6. Discusin del mtodo usado
El mtodo espectrofotomtrico ultravioleta, no es un mtodo especfico
para la determinacin de ion nitrato en agua y debe ser utilizado con los recaudos
necesarios. Este mtodo presenta la dificultad de no ser adecuado para el estudio
de aguas contaminadas, es decir slo es vlida su aplicacin para muestras de agua
con bajo contenido en materia orgnica.
Para la determinacin de ion nitrato en aguas subterrneas, el mtodo
espectrofotomtrico ultravioleta selectivo presenta como caractersticas
principales la baja demanda de tiempo y reactivos necesarios y su fcil ejecucin.
Comparativamente, esta es una ventaja frente al mtodo de la reduccin con
hidracina.

7. Conclusiones

La sensibilidad del instrumento empleado permite la identificacin de sustancias que

pueden estar presentes como trazas.

Los instrumentos de doble haz hacen medidas de forma prcticamente continua de la luz
que atraviesa las celdas de la muestra y de la referencia.

Los datos obtenidos de esta experiencia resultaron beneficiosos para las aguas
Cielo y Vida debido a su baja concentracin de nitratos presentes en estas que son
menores al lmite mximo permisible de nitratos en aguas consumibles (Anexo 1).
Mientras que para el agua Vida no fueron muy beneficiosas debido a que est muy
cerca del lmite mximo permisible de nitratos en aguas consumibles.
 8. Recomendaciones

Agitar vigorosamente los patrones y muestras antes de cada lectura ya que si no se efecta
este procedimiento el equipo no leer correctamente las absorbancias.

No tocar con los dedos las paredes de las celdas por donde debe pasar la luz, las huellas
dactilares dispersan y absorben la luz es por eso que se coge de las partes opacas.

La boca de la pipeta debe estar seca para que el lquido contenido baje con facilidad.

Los resultados obtenidos de la concentracin de NO3-, N- son por debajo de lo permitido de

50 ppm segn la OMS. Por tanto de esto se concluy que el Agua Vida es apta para el
consumo humano.

9. Bibliografa
- Skoog D. West D. Analisis Instrumental Edit. Mc. Graw Hill Mexico 1992
- http://www.sma.df.gob.mx/sma/download/archivos/secofi_nmx_aa_079_s
cfi_2001.pdf
- Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater.
American Public Health Association, American Water Works Association,
Water Pollution Control Federation. 21ed., New York, 2005
- Methods for Chemical Analysis of Water and Wastes. United States
Environmental Protection Agency. Cincinnati, 1983
10. Anexos
Espectrofotmetro de ultravioleta visible SHIMADZU