Objetivos

Determinar la formacin de conidios de Paecilomyces sp. mediante la tcnica de recuento en

cmara de Neubauer.

Determinar la biomasa fngica producida de Paecilomyces sp. en funcin del tiempo utilizando la
tcnica de peso seco.

Observar los cambios morfolgicos en funcin del tiempo, mediante la microscopia ptica.

OBSERVACIONES

MACROSCPICAS: microscpicas objetivos 10x y 40x

Aspecto algodonoso: Filamentoso

Color rosa claro: Hifas cenocticas

Borde color blanco: Sin formacin de estructuras secundarias

Anlisis:

Las dos tcnicas utilizadas en esta prctica para determinar el crecimiento de Paecilomyces sp. Se
diferencian en que el recuento de cmara de Neubauer es un mtodo directo que consiste en
expresar el nmero de partculas, para este proceso conidios, por unidad de volumen de un
liquido, contadas visualmente al microscopio, mientras la cuantificacin de Biomasa fngica g/ml
por peso seco es un mtodo indirecto ms apropiado debido al crecimiento filamentoso que
presenta el hongo. El aumento de esta masa no se podra ponderar con el primer mtodo, puesto
que se cuenta el numero de esporas asexuales, de otro modo el peso seco consiste en extraer el
hongo del medio de crecimiento liquido en este caso y filtrarlo, paso seguido colocarlo en el
desecador y pesar la cantidad de masa que se encuentra sobre el filtro, incluyendo la totalidad de
masa generada por el hongo.

Entre las tcnicas utilizadas como indicadoras de crecimiento se encuentra el recuento total de
mohos y levaduras, establecido como el nmero de colonias que se desarrollan a partir de 1
gramo o mililitro de muestra, sobre medio de Sabouraud dextrosa, durante 5 das a 22-25 C.
Consiste en contar las colonias a partir del 3er y luego el 5to, el numero de colonias contadas se
multiplica por el factor de dilucin de la placa obtenindose el numero de colonias de mohos y
levaduras por gramo o mililitro de muestra.
El ergosterol es una molcula que se encuentra en la membrana celular de los hongos, la funcin
es estructurar e impermeabilizar los lpidos de membrana, como hace el colesterol en clulas
animales, hay una buena correlacin entre la concentracin de ergosterol y la biomasa de hongos
(Stahl y Parkin 1996). La determinacin de la biomasa fngica mediante el anlisis de ergosterol se
basa en una extraccin de los lpidos y una separacin del ergosterol mediante cromatografa
liquida, el ergosterol se mide por absorbancia, la extraccin de los lpidos se puede realizar
mediante extraccin en fase solida o alternativamente mediante separacin con ciclohexano