Curs 2

Replicarea ADN
ADN-ul mitocondrial
Acizii ribonucleici
 Replicarea ADN
Replicarea ADN-ului este procesul prin care se
sintetizeaz ADN-ul
A fost descoperit de Watson i Crick: fiecare
caten a unei molecule de ADN se comport ca o
matri pentru sinteza unei noi molecule de ADN,
iar secvena de nucleotide din catena nou format
este determinat de complementaritatea bazelor
Are loc n timpul fazei S a diviziunii celulare
Pentru ca procesul replicrii s se desfoare ntr-
o perioad de timp rezonabil sunt necesare mai
multe puncte de start ale replicrii denumite
 Etapele replicrii
1. Iniierea
- Implic recunoaterea
regiunilor de pe o
molecul de ADN unde
va ncepe procesul de
replicare
 Mecanismele replicrii
1. Iniierea
Sub aciunea unor enzime numite
TOPOIZOMERAZE ADN-ul este
despiralizat
Catenele sunt separate de ctre alte enzime
numite HELICAZE, iar proteinele SSB
(strand binding proteins) stabilizeaz i
mpiedic respiralizarea lor
Desfacerea ADN-ului are loc simultan n mai
multe puncte denumite REPLICONI, la
aceste nivele aprnd furcile de replicare
 ADN-ul devine monocatenar, iar ambele catene
se replic simultan, servind ca matrie pentru
catenele nou formate
Pentru iniierea replicrii este nevoie de enzima
ARN primaz care va aeza primul nucleotid
(ARN primer), iar apoi enzimele necesare
replicrii numite ADN polimeraze vor elonga
catenele
ADN polimerazele prezint dou caracteristici
generale:
Toate ADN polimerazele sintetizeaz ADN
numai n direcia 5-3
Nu tiu s nceap sinteza unei catene ci numai
 Polimerizarea celor dou catene care sunt
antiparalele se va face diferit, deoarece ADN
polimeraza se poate deplasa doar n direcia 5-3
1. pentru catena matri 3-5 sinteza catenei
noi (denumit leading strand sau catena avansat)
se realizeaz continuu, ARN polimeraza fiind
necesar doar la nceputul replicrii, iar apoi ADN
polimeraza va aduga nucleotid cu nucleotid la
captul 3OH
2.pentru catena matri 5-3 sinteza catenei
noi (denumit lagging strand sau catena ntrziat)
se va face discontinuu cu ajutorul ADN polimerazei
gama, ncepnd din punctul mai ndeprtat al furcii
 ntr-o faz mai avansat a replicrii primerii
sunt ndeprtai att din structura catenei
avansate, ct i din cea ntrziat, dup care
golurile sunt umplute de ADN polimeraza
Replicarea este bidirecional , avnd loc n
ambele sensuri, terminndu-se cnd ADN
polimeraza ajunge la captul repliconului
Replicarea este semiconservativ, moleculele
de ADN fiice fiind formate dintr-o caten
veche i una nou
 ADN mitocondrial
Mitocondriile sunt organite celulare a cror
funcie este producerea de energie
Cu toate c majoritatea ADN-ului se regsete
n nucleul celulei (98%), mitocondriile
prezint i ele ADN-ul propriu.
Acest material genetic este denumit ADN
mitocondrial (ADNmt)
 Caracteristicile ADN-ului
mitocondrial
Genomul mitocondrial are un ADN circular,
bicatenar format din 16.569 perechi baze
Este format din dou catene: catena H (grea) i
catena L (uoar)
ntr-o regiune mic denumit bucla CR/D n
care se afl situsul de iniiere al transcripiei i
replicrii, ADN-ul este alctuit din 3 catene:
catena H, catena L i o secven ADN 7S
Genomul mitocondrial este compact i conine
37 de gene (28 pe catena H i 9 pe catena L)
- 13 gene codific enzime implicate n fosforilarea
 Caracteristicile ADN-ului
mitocondrial
Genele ADNmt nu conin introni
ADNmt nu este asociat cu proteine i nu
conine ADN repetitiv
Numrul copiilor de ADN variaz de la o
mitocondrie la alta, fiind ntre 2 i 20
Codul genetic mitocondrial are o semnificaie
diferit
ADNmt se transmite exclusiv pe cale matern
 Caracteristicile ADN-ului
mitocondrial
Rata mutaiilor n ADNmt este de 10-15 ori mai
mare ca n ADN nuclear i de obicei se produce
fenomenul de heteroplasmie, ntr-o mitocondrie
existnd att ADN normal ct i cu mutaie

Mutaiile ADNmt produc boli neurodegenerative

severe cu un debut tardiv i evoluie progresiv
precum:
- Miopatia mitocondrial
- Sindromul Kearns-Sayre
- Neuropatia optic ereditar Leber
 Acizii ribonucleici
Acizii ribonucleici sunt macromolecule prin
intermediul crora informaia genetic este
exprimat i vehiculat n organismul uman.

Structura lor molecular este foarte asemntoare

cu a ADN-ului cu diferenele c:
- Glucidul din compoziie este reprezentat de riboz
n loc de dezoxiriboz
- Timina este nlocuit cu uracilul

ARN-ul se regsete n majoritate sub form

monocatenar, ns poate forma i dublu helix n
anumite condiii.
 Tipuri de ARN
1. ARN mesager (ARNm
2. ARN de transfer (ARNt)
3. ARN ribozomal (ARNr)
4. Alte tipuri de ARN:
- ARN mic nuclear (ARNsn)
- ARN mic nucleolar (ARNsno)
- Micro ARN (ARNmi)
- ARN interferent mic (ARNsi)
- ARN necodant lung
 ARN mesager (ARNm)
1. Rezult din ARN mesager precursor (pre-
ARNm) printr-un proces de maturare
(matisare) care presupune nlturarea
intronilor i protejarea extremitilor

2. Este o copie a secvenei codante a unei gene

i servete ca i matri pentru sinteza unei
proteine

3. Este exportat din nucleu n citoplasm unde

se leag de ribozomi i translatat n protein
cu ajutorul ARNt
 ARN mesager (ARNm)
5. Mrimea moleculei ARNm este direct
proporional cu dimensiunea peptidului pe care
l codific, de exemplu o secven codant de
1000pb va determina formarea unei proteine de
333 aminoacizi

6. Unele ARNm sunt comune tuturor celulelor

specificnd proteine house-keeping, iar altele
sunt specifice anumitor celule, de exemplu
hemoglobina regsit doar n hematii
 ARN de transfer (ARNt)
Se gsete n citoplasma celulelor

Este o molecul mic de ARN format din 70-93

de nucleotide care transfer la situsul ribozomal
n timpul translaiei un aminoacid specific
lanului polipeptidic n formare

ntr-o celul care sintetizeaz activ proteine se

regsesc simultan cel puin 50 de tipuri de ARNt

Exist cel puin un ARNt pentru fiecare dintre

cele 20 de tipuri de aminoacizi regsii n
proteine
 ARN ribozomal (ARNr)
1. Este sintetizat n nucleu

2. n citoplasm se combin cu proteine fiind

elementul majoritar din structura ribozomului
avnd att rol catalizator ct i structural n
sinteza proteinelor prin procesul translaiei

3. Ribozomii umani conin patru tipuri de

ARNr: 5S; 5,8S, 18S i 28S care intr n
componena celor dou subuniti (mare i
mic)

4. Ribozomii leag ARNm i realizeaz sinteza

 ARN mic nuclear (ARNsn)
Reprezint un grup heterogen de ARN de 60-
360 nucleotide

Intr n constituia spliceozomului participnd

la convertirea pre-ARNm n ARNm prin
secionarea i ndeprtarea intronilor

Particip la procesarea altor clase de ARN

Reglez factorii de transcripie

 ARN mic nucleolar (ARNsno)
Reprezint un grup heterogen de ARN de 60-
360 nucleotide

Particip la biogeneza ARNr i ARNt

Particip la reglarea matisrii alternative a unor

gene
 Micro ARN (ARNmi)
Este o molecul de ARN de 21-22 nucleotide
Blocheaz translaia sau produce degradarea
ARNm prin fenomenul de interferen ARN

ARN interferent mic

(ARNsi)
Este o molecul de ARN de 20-25 nucleotide

Este utilizat posttranscripional

 ARN necodant lung
Molecul de ARN cu o lungime ce depete
200 de nucleotide

Este implicat n reglarea expresiei genelor prin

modificarea:
- cromatinei
- a biologiei telomerelor
- amprentare
- inactivarea cromozomului X