IPN-ENCB

Efecto de concentracin de sustrato e Inhibicin enzimtica.

Equipo: seccin 1. Integrantes: Gmez Barrios Hugo Vargas Snchez Linda Carmen.
Introduccin.
La temperatura afecta a todas las reacciones qumicas. Cuanto mayor
curva tipo de azucares reductores
es la temperatura, mayor es la velocidad de reaccin. La velocidad de 1.2
reaccin aumenta debido a que hay ms molculas con la energa 1
suficiente para entrar en el estado de transicin. Las velocidades de
0.8
las reacciones catalizadas por enzimas aumentan tambin al
incrementarse la temperatura. Sin embargo, las enzimas son protenas 0.6

A
que se desnaturalizan a temperaturas elevadas. Cada enzima tiene una 0.4
temperatura ptima a la que acta con su mxima eficacia (Fig.
0.2
6.17). Debido a que las enzimas son protenas, los valores de
temperatura ptima dependen del pH y de la fuerza inica. Si la 0
temperatura se incrementa ms all de la temperatura ptima, la 0 5 10 15
actividad enzimtica desciende bruscamente. La temperatura ptima [( )/2.0]
de una enzima normalmente est cerca de la temperatura normal del
organismo del que procede. Por ejemplo, la temperatura ptima de la Grafica 1. Curva de calibracin de azucares reductores.
mayora de las enzimas del ser humano est prxima a los 37 oc.

Una reaccin qumica tiene lugar cuando las molculas que chocan
Tabla 2. Resultados del efecto de temperatura sobre la velocidad de
poseen una cantidad mnima de energa denominada energa de
reaccin.
activacin (Ea) o, con mayor frecuencia en bioqumica, energa libre
de activacin (G*). No todas las colisiones producen reacciones
qumicas, debido a que slo una fraccin de las molculas posee la T1 T2 T3 T4 T5 T6
energa suficiente o la orientacin correcta para reaccionar (es decir, (0C) (25C) (37C) (50C) (75C) (92C)
para romper los enlaces o para reagrupar los tomos en las molculas Absorbencia 0.297 0.423 0.551 1.102 0.197 0
de producto). 2.5328 3.7878 5.0627 10.5507 1.5368 -0.4252
[AR]
()
Los catalizadores (como las enzimas) realizan esta hazaa debido a 0.2532 0.3787 0.5062 1.0550 0.1536 -0.0425
UI
que disminuyen la energa de activacin que se requiere para una
reaccin qumica.
Para obtener concentracin de AR en efecto de temperatura con la ec.
Objetivos: Y=0.1004x+0.0427 obtenida de la curva de calibracin.

Demostrar que las reacciones enzimticas son afectadas por =

.
X= [AR]
.
la temperatura.
Sustituyendo en el tubo 1.
Calcular el valor de de la energa de activacin de la
reaccin catalizada por la invertasa, asi como el valor de . .
[] = = .
Q10 para la misma reaccin, a diferente intervalos. .

Para obtener UI (unidades de invertasa)

Resultados: [ ]
= Donde Vo = actividad o UI

Tabla 1. Ecuacin obtenida de la curva de calibracin de azucares
reductores. Sustituyendo en tubo 1.

. ]
= = . .

Ecuacin obtenida Valor de r

y = 0.1004x + 0.0427 0.9935
 Efecto de la temperatura m= pendiente de la grfica 3

1.5 m = -2535

1 Sustituyendo.

Ea= (-2535) (1.987cal/mol*grado)

UI

0.5

0
Ea=5037.045 cal
0 20 40 60 80 100
Ea= 5.037 Kcal
-0.5
TC
Discusin:
Grfica 2. Efecto de temperatura sobre la velocidad de reaccin. Se realizaron experimentos por medio de los cuales se
Tabla. 3 Resultados Ln V0 y 1/T (K) corroboro que la actividad enzimtica aumenta conforme
aumenta la temperatura, mas al tratarse de protenas, estas se
T Vo LnVo K 1/K desnaturalizan, por lo que en cierta temperatura (50C) la
0 0.25 -1.386294361 273.15 0.003660992
actividad llega a su valor ptimo y despus se desploma
drsticamente. Tambin se determin mediante el grafico y
5 0.26 -1.347073648 278.15 0.003595182
ecuacin de Arrhenius que la energa necesaria para que ocurra
10 0.27 -1.30933332 283.15 0.003531697 la reaccin (Ea) es de 5.037 Kcal valor que se aproxima con la
15 0.28 -1.272965676 288.15 0.003470415 encontrada por el doctor Oscar Nez Gaona, en sus
20 0.31 -1.171182982 293.15 0.003411223
investigaciones en el ao 2004 acerca de la invertasa, que es de
5.6 Kcal.
25 0.37 -0.994252273 298.15 0.003354016

30 0.42 -0.867500568 303.15 0.003298697 Conclusiones:

35 0.47 -0.755022584 308.15 0.003245173 Las reacciones enzimticas son afectadas por la
40 0.63 -0.46203546 313.15 0.003193358 temperatura.
45 0.9 -0.105360516 318.15 0.003143171
La temperatura optima de la invertasa es de 50C
El calor de activacin de la invertasa es de 5.037 kcal
50 1.05 0.048790164 323.15 0.003094538

Bibliografa:

Lenhninger A. Bioqumica. Segunda edicin.

lnVo vs Ln 1/T(K) Editorial Ediciones Omega. Pas Barcelona,
Espaa.
0.5
Voet D. Fundamentos de Bioqumica.
0 Segunda edicin. Editorial Mdica Panamericana.
-0.5 Pas Mxico.
Ln Vo

-1 Trudy McKee y James R. McKee, Bioqumica,

las bases moleculares de la vida tercera edicin,
-1.5
Editorial McGraw-Hill, Mxico.
-2
1/T(k)

Grfica 3. Ln V0 contra 1/T (K)

Tabla 4. Ecuacin obtenida de la grfica 3 Ln V0 contra 1/T (K)

Ecuacin obtenida y = -2535x + 7.6516

Coeficiente de correlacin r = 0.883

Para calcular la Energa de activacin (Ea).

Ea=mR en Kcal

Donde R (constante de los gases ideales) 1.987 cal/mol grado