PROTOCOLO DE VALIDACION DE PRUEBA DE DESAFIO DE

DESINFECTANTES

1. OBJETIVO

2. ALCANCE

3. RESPONSABILIDADES

4. EQUIPOS Y MATERIALES A UTILIZAR

5. METODOLOGA DE VALIDACIN

5.1. Caracterizacin de microbiota endgena

5.2. Evaluacin de la eficacia de desinfectantes: Mtodo de dilucin en uso

5.3. Prueba de desafo de superficies

5.4. Criterios de aceptacin.

1. OBJETIVO:

Demostrar mediante evidencia documentada que la metodologa para evaluar la eficacia de

los desinfectante en un entorno de fabricacin de productos farmacuticos, que
complemente un programa eficaz de limpieza y sanitizacin de ambientes controlados para
prevenir la contaminacin microbiana de los mismos, est totalmente bajo control y
proporciona de forma consistente y reproducible resultados que cumplen las
especificaciones establecidas.

2. ALCANCE:

Este protocolo se utilizar para la validacin de la eficacia de los desinfectantes: Alcohol

etlico, Tego, Hipoclorito de sodio

3. RESPONSABILIDAD:

3.1. Analista de Microbiologa, es responsable de Disear, planificar, desarrollar, registrar

datos y de preparar el reporte de validacin, adjuntando toda la documentacin
pertinente.
3.2. Jefe de Control de Calidad, es responsable de vigilar la correcta ejecucin de la
validacin
3.3. Jefe de Validaciones, es el responsable de mantener vigente la calificacin de los
equipos y calibracin de los instrumentos de medicin utilizados en la validacin.
3.4. Jefe de Aseguramiento de la Calidad es el encargado de la coordinacin de las
actividades que genere la validacin, as como de colaborar en la revisin de la
documentacin propia del proceso de validacin.
3.5. El Director Tcnico es responsable de la aprobacin del Reporte Final de la Validacin
y de darlo a conocer a los involucrados.
4. EQUIPOS Y MATERIALES A UTILIZAR

4.1. Equipos

FECHA
NOMBRE MARCA CDIGO
CALIBRACIN
Cabina de bioseguridad
Balanza Analtica
Estufa de Incubacin
Autoclave
Refrigeradora de 2-8C
Espectrofotmetro

4.2. Materiales de vidrio y accesorios

FECHA
NOMBRE MARCA CDIGO/LOTE
CALIBRACIN
Frasco 100mL con tapa
Frasco 250mL con tapa
Tubo 18x150mm
Tubo 25x150mm
Pipeta x 1 mL
Pipeta x 5 mL
Pipeta x 10 mL
Cilindros de acero inoxidable
Asa de siembra descartable
Placas Petri 20x90mm
Placas Rodac 15x65mm
Pinza de acero inoxidable
Papel whatman N2
Hisopo
Micropipeta 100 uL

4.3. Material de referencia, producto y activos

FECHA
NOMBRE MARCA LOTE
VENCIMIENTO
Escherichia coli, ATCC 11229
Sthaphylococcus aureus, ATCC 6538
Pseudomonas aeruginosa, ATCC 15442 / 9027
Candida albicans, ATCC 10231
A. brasiliensis, ATCC 16404
B. subtilis, ATCC 19659 / 6633
Alcohol etlico
Hipoclorito de sodio
Tego
Fenol

4.4. Medios de Cultivo, reactivos y excipientes

FECHA
NOMBRE MARCA LOTE
VENCIMIENTO
Bateria Gram
Agar CASO (TSA)
Agar Sabouraud
Caldo CASO (TSB)
Caldo Letheen
5. METODOLOGA DE VALIDACIN:

5.1. Consideraciones Generales

Los ensayos de cada concentracin o anlisis se harn por triplicado. Dichos anlisis
se harn sobre soluciones preparadas el mismo da del ensayo.

5.2. Ensayos a realizar:

Para demostrar la eficacia de un desinfectante en un entorno de fabricacin de

productos farmacuticos puede considerarse necesaria la realizacin de las siguientes
pruebas:

5.2.1. Caracterizacin de microbiota endgena: se asla e identifica los

microrganismos que histricamente se detectan con mayor frecuencia y aqullos
que por su naturaleza u origen puedan considerarse ms crticos y representativos
de los ambientes de trabajo.

5.2.2. Evaluacin de la eficacia de desinfectantes:

5.2.2.1. Prueba del coeficiente fenlico: Compara la eficacia del desinfectante

a evaluar respecto al fenol
5.2.2.2. Pruebas de dilucin de uso: analizar la eficacia de los desinfectantes a
concentracin y tiempos de contacto establecidos contra una amplia variedad
de organismos estndares de prueba.

5.2.3. Pruebas de desafo de superficie: Se determinando la reduccin del logaritmo

de los microorganismos estndares de prueba y microorganismos tpicos de
aislamientos ambientales, inoculados en superficies representativas de los
ambientes de trabajo luego de aplicar desinfectantes a la concentracin de uso
seleccionada y durante un tiempo de contacto especificado.

5.3. Referencias:

Caracterizacin de microbiota endgena: aislamientos obtenidos de la

aplicacin de los procedimientos xxxxx Control de ambientes de reas estriles y
reas no estriles, y xxxxxx Control microbiolgico de superficies crticas
Prueba del coeficiente fenlico: Adaptado de AOAC 2016 Mtodo oficial
955.11.
Prueba de dilucin de uso: Adaptado de AOAC 2016 Mtodo oficial 955.14,
955.15, 964.02.
Prueba de desafo de superficie: Adaptado de USP 39 <1072> Desinfectantes y
Antispticos. Pag. 1215-1216