SPECTROMETRIA DE ABSORBIE MOLECULAR N VIS-UV

Tehnica de lucru n spectrometria de absorbie molecular n vizibil i ultraviolet

De cele mai multe ori spectrele de absorbie molecular n VIZ i UV, se nregistreaz pentru probe n
soluie. n aceste domenii spectrale benzile de absorbie cele mai importante (din punctul de vedere al analizei
cantitative) au valori mari pentru astfel c probele trebuie s fie diluate (10-4 - 10-5 molL-1).
Domeniul de precizie maxim al absorbanelor este situat ntre A = 0,25 i 0,75.
Solvenii necesari dizolvrii probelor i obinerii soluiilor pentru realizarea msurrilor
absorbiometrice n VIZ i UV trebuie s fie transpareni n acest domeniu spectral. Dac n domeniul VIZ se
poate lucra practic cu orice solvent incolor, pentru UV cei mai uzuali solveni sunt compuii ce conin numai
legturi , de exemplu, hidrocarburi saturate, alcooli etc.

Aplicaii analitice ale spectrometriei de absorbie molecular n vizibil i ultraviolet

Aceast tehnic este utilizat pentru obinerea i interpretarea spectrelor de absorbie molecular
datorate tranziiilor energetice electronice pe molecule peste care se suprapun tranziiile energetice de rotaie i
de vibraie. Datorit acestei suprapuneri a celor trei tipuri de tranziii, spectrele de absorbie molecular n VIZ
i UV apar sub forma unor benzi largi, ceea ce face ca tehnica s fie mai puin aplicat n analiza calitativ,
aceste spectre nemaifiind aa de caracteristice ca spectrele de absorbie molecular n IR. n schimb, tehnica
este foarte aplicat n analiza cantitativ. Lungimea de und la care se fac msurrile de absorbie n scopuri
cantitative este fix i se alege astfel nct analitul absorbant s prezinte absorbie maxim (deci absorbtivitatea
molar s fie maxim). Pentru a stabili poziia maximului de absorbie molecular a analitului se traseaz nti
spectrul de absorbie ntr-un anumit domeniu de pentru o concentraie medie. De asemenea trebuie ca celelalte
componente din prob, care sunt compensate cu ajutorul probei martor, s prezinte o absorbie ct mai mic la
selectat.
La baza determinrilor cantitative prin aceast tehnic st legea BouguerLambertBeer, A = cb, astfel
c pe cuvele din sticl sau cuar folosite trebuie s fie nscris grosimea stratului absorbant, b. De asemenea
trebuie avut n vedere c legea BouguerLambertBeer se aplic atunci cnd n soluia de cercetat nu au loc
reacii al cror echilibru depinde de concentraia analitului deoarece ar apare n sistem compui cu alte
absorbtiviti molare. Astfel de reacii apar n general, la concentraii mai mari ale analitului i de aceea se
observ abateri de la liniaritate ale graficelor de etalonare.
Pentru determinari cantitative, spectrometria de absorbie molecular n VIZUV poate fi aplicat att n
varianta direct, folosind n acest sens metoda curbei de etalonare, metodele adaosurilor standard, metodele de
calcul pentru rezolvarea amestecurilor absorbante folosind legea aditivitii absorbanelor, ct i varianta
indirect, cea a titrrilor spectrometrice. Astfel, o larg aplicabilitate a spectrometriei de absorbie molecular n
VIZUV o constituie posibilitatea determinrii ionilor metalici la nivel de urme din diferite medii colorate sau
pe baza reaciilor de culoare pe care acetia le dau cu diferii reactivi de culoare (colorimetrie).
O specie chimic neabsorbant poate fi transformat ntr-o specie chimic absorbant n mod obinuit
printr-o reacie de complexare. Dac se alege un agent complexant adecvat se pot obine absorbtiviti molare
foarte mari i tehnica este aplicat la determinarea ionilor metalici la nivel de urme.
O metod de determinare spectrometric cantitativ care folosete o reacie de culoare cu un agent
complexant trebuie s ndeplineasc urmtoarele condiii:
 reacia de culoare trebuie s fie complet i stoechiometric;
complexul format s fie stabil;
complexul format trebuie s absoarb n vizibil i ultraviolet;
banda de absorbie a complexului colorat format nu trebuie s se suprapun peste banda de absorbie a
ligandului.
Prin transformarea unui ion metalic ntr-un complex care absoarbe n VIZ si UV se obin n plus nc
dou avantaje: (1) un agent complexant va reaciona numai cu civa ioni metalici, ceea ce confer selectivitate
determinrilor pe aceast cale;
(2) chiar dac mai muli ioni metalici formeaz compleci cu acelai reactiv, caracteristicile de absorbie ale
compleci difer destul de mult pentru a putea permite determinarea unui anumit ion n prezena altora.
Pentru deplasarea echilibrului n sensul formrii complexului sau complecilor respectivi trebuie s se
lucreze n exces mare de reactiv fa de cantitatea necesar complexrii cantitative a ionilor din soluie.
Absorbana fiind o mrime aditiv la o anumit pentru o soluie ce conine un amestec de compui
absorbani care prezint benzi spectrale de absorbie n VIZ i UV suficient de diferite este posibil s fie
determinate concentraiile acestora. Acest lucru se poate realiza prin efectuarea unor msurri de absorban la
un numr de lungimi de und egal cu numrul de componeni. Alegerea lungimilor de und se face n aa fel
nct la fiecare dintre ele componenii absorbani s prezinte absorbane molare ct mai diferite ntre ele. n
cazul ideal, la fiecare dintre lungimile de und alese, unul dintre componenii absorbani prezint absorbie
maxim, iar ceilali absorb puin.
Inti se determina la alese pentru componeni individuali puri. Cunoscnd absorbana amestecului i
ale componenilor puri, determinarea acestora dintr-un amestec n soluie se realizeaz prin formarea i
rezolvarea unui sistem de i ecuaii cu i necunoscute, astfel:

unde: A i este absorbana amestecului la lungimea de und selectat i;

- absorbtivitatea molar a componentului i la lungimea de und i; ci - concentraia componentului

absorbant i exprimat n moliL-1, iar b - grosimea stratului absorbant.
Pentru un sistem de doi componeni absorbani (figura 4.38) se poate scrie sistemul de dou ecuaii cu
dou necunoscute c1 i c2:

A1 A(1) A(2) (1)c1b (2)c2b

1 1 1 1

A 2 A(1) A(2) (1) c1b (2)c2b

2 2 2 2
prin rezolvarea cruia se obin soluiile: c1 i c2
 A

1 . 2
a)
A

1 2
b)
Spectrele de absorbie molecular n vizibil i ultraviolet pentru un sistem de doi componeni absorbani: a)
solutia (1): concentratia C1 si 1; solutia (2): concentratia C2 si 2 iar solutia amestec contine concentratiile C 1
si C2; b) solutia (1): concentratia C1 si 1; solutia (2): concentratia C2 si 2 iar solutia de amestec este obtinuta
prin amestecarea unui volum dat din solutia 1 cu un anumit volum din solutia 2 = C1` si C2` unde C1`<C1 si
C2`<C2

Aceast metod este cel mai convenabil de aplicat pentru sisteme cu doi componeni absorbani, dar
poate fi aplicat i unor amestecuri cu mai muli componeni absorbani.

Spectrometria de absorbie molecular n vizibil i ultraviolet se poate utiliza i n varianta indirect n

analiza cantitativ prin stabilirea punctului de echivalen ntr-o reacie de culoare (titrarea spectrometric), n
cazul n care cel puin una dintre speciile chimice (reactivii de titrare sau produii de reacie) implicate n reacia
de titrare este colorat, deci absoarbe n vizibil sau ultraviolet. n acest caz se lucreaz la lungime de und fix
care este stabilit n funcie de absorbia compuilor implicai. Pentru a se obine rezultate corecte speciile
absorbante implicate n reacia de titrare trebuie s aib absoarb la lungimi de und ctmai diferite.
Astfel, de exemplu, dac reactanii (titrant - T, soluia titrat - S) nu absorb la lungimea de und aleas,
ci doar produsul de reacie P, curba de titrare va avea aspectul din figura a. Absorbia crete pe msur ce se
formeaz produsul de reacie pn la echivalen dup care rmne constant deoarece excesul de reactiv
adugat nu absoarbe. Din volumul corespunztor punctului de echivalen, Ve, se calculeaz concentraia sau
masa analitului din proba analizat. Pot exista i alte situaii, ca de exemplu, doar titrantul s absoarb radiaiile
la lungimea de und aleas i atunci se obine o curb cu aspectul celei din figura b sau s absoarb numai
compusul titrat (figura c) sau ambii reactivi s absoarb, iar produsul reaciei s nu absoarb la lungimea de
und aleas (figura d). Alte situaii posibile sunt prezentate n figura e,f,g,h. Coreciile volumelor msurate, care
trebuie luate n considerare la modificarea volumului probei datorit adugrii titrantului ce o dilueaz se pot
evita utiliznd o soluie de titrant care se adaug cu microbiureta astfel nct variaia de volum s fie neglijabil.
Curbele de titrare spectrometric sunt curbe liniare (curbe cu variaia pantei). n acest caz pe ordonat se
reprezint absorbana, a (mrime dependent liniar de concentraie conform legii BouguerLamertBeer) n
funcie de volumul de titrant adugat.
Titrarea spectrometric prezint urmtoarele avantaje:
- cu ajutorul spectrometrului pot fi detectate rapid uoare schimbri de culoare;
- metoda poate fi aplicat n cazul soluiilor intens colorate, care ar interfera cu indicatorii de culoare;
- ntruct pentru a se ajunge la punctul de echivalen se folosete o metod de extrapolare pot fi utilizate
adeseori reacii pentru care constantele de echilibru nu sunt favorabile. n aceste cazuri datele experimentale
descriu o curb n domeniul punctului de echivalen;
- instrumentaie nu este prea complicat.

A A A A
a b c d

Ve V (mL) Ve V (mL) Ve V (mL) Ve V (mL)

A A f A g A
e h

V (mL) Ve V (mL) Ve V (mL) Ve V (mL)

Ve

Curbe de titrare spectrometric: a - absoarbe numai produsul de reacie P; b - absoarbe numai T; c - absoarbe numai S; d absoarb
S i T; e - absorb S i P (S < P); f - absorb S i P (S > P); g - absorb T i P (T < P); h - absorb T i P (T > P)

Metodele spectrometrice bazate pe absorbia molecular n VIZ i UV, datorit preciziei i rapiditii cu
care se pot efectua determinrile, sunt folosite n cele mai diverse domenii i scopuri, ca de exemplu:
determinarea elementelor n urme din aliaje, minereuri i minerale; controlul proceselor tehnologice; controlul
materiilor prime i a produilor finii; determinarea impuritilor anorganice n materialele de nalt puritate;
determinarea unor substane organice; controlul mediului; n laboratoarele clinice etc. De multe ori aceste
metode se utilizeaz combinate cu un procedeu de separare pentru nlturarea interferenelor i, dac este cazul,
se apeleaz la un procedeu de concentrare cnd concentraiile sunt mici.
 Spectrometria de absorbie molecular n vizibil i ultraviolet poate fi folosit n studiul echilibrelor
chimice, avnd n vedere c speciile chimice participante absorb intens la diferite lungimi de und.

Implicaii ale spectrometriei de absorbie molecular n VIZ i UV n analiza structural

Spectrometria de absorbie molecular n vizibil i ultraviolet este implicat n rezolvarea unor probleme
de structur att pentru compuii organici, ct i cei anorganici. n acest sens, se ntlnesc adesea urmtoarele
noiuni: (figura de mai jos).
Cromoforul este o grupare covalent nesaturat (de exemplu, cromofor carbonilic, etilenic etc), deci un
sistem care conine electroni de obicei de tip n sau , datorit crora are loc absorbia de energie radiant n
domeniul VIZ i UV. Noiunea de cromofor poate fi extins asupra oricrei grupri care provoac absorbie n
vizibil i ultraviolet.
Auxocromul este o grupare nesaturat, deci care posed atomi cu electroni neparticipani i care, ataat
unui cromofor, produce o deplasare a maximului de absorbie i modific intensitatea maximului de absorbie.
Deplasarea batocrom sau deplasarea spre rou reprezint deplasarea spre lungimi de und mai mari a
maximului de absorbie, adic aa-numita nchidere a culorii.
Deplasarea hispocrom sau deplasarea spre albastru reprezint deplasarea maximului de absorbie spre
lungimi de und mici, adic deschiderea culorii.
Efectul hipercrom reprezint efectul de cretere a intensitii de absorbie, deci de intensificare a culorii.
Efectul hipocrom reprezint efectul de descretere a intensitii de absorbie, adic slbirea culorii.
Punctul izosbestic sau izoabsorbiometric este punctul comun de egal absorban a tuturor spectrelor
electronice ale unui compus chimic, generate prin modificri de timp sau de pH. Ele indic o transformare
chimic progresiv A B (de exemplu, transformarea formei acide a unui indicator colorat n forma
bazic.
Efect hipercrom
A
Deplasare Deplasare
hipsocrom batocrom

Efect hipocrom Tipuri de deplasri ale unui maxim de

absorbie molecular n vizibil i
ultraviolet

max [nm]
 0 .6

0 .4

Ab s
0 .2

-0 . 1
4 0 0 5 0 0 6 0 0 6 5 0
W a v e l e n g t h [n m ]

Punct izosbestic n spectrele de absorbie molecular ale fenolsulfonftaleinei la diferite valori ale pH-ului: 6.8
(rou),7,00; 7,2; 7,4; 7,8; 13,3 (mov); [H2L]T=10-4 mol L-1; =0,1.

SPECTROMETRIA DERIVAT N UV-VIZ

1. Generaliti
Spectrometria derivat este o tehnic analitic folosit n scop calitativ i cantitativ care se bazeaz pe
interpretarea spectrelor derivate.
Un spectru derivat de ordin unu (doi, ) al unei molecule este definit ca prima (a doua, ) derivat a
unui spectru de absorbie adic derivata absorbanei analitului n funcie de ~ sau .
dA dA d2A d2A
; - derivate de ordin I ; - derivate de ordin II
d~ d d~ 2 d2
Spectrometria derivat mrete rezoluia n cazul spectrelor suprapuse (figura 1.) permind evidenierea
maximelor de absorbie slab conturate care apar fie datorit prezenei componenilor n concentraii mici ntr-un
amestec, fie datorit prezenei impuritilor.

Figura 1. Exemple de suprapunere a spectrelor de absorbie molecular n UV-VIZ

Sensibilitatea i specificitatea metodei cresc deoarece prin derivare crete raportul S/N, prin reducerea
zgomotului de fond.
Un spectru derivat se poate obine prin:
1. -prelucrarea matematic a spectrului de ordin zero;
2. -modularea (optic sau electronic) a lungimii de und a radiaiei ce ajunge la detector.
 Spectrele derivate de ordin impar (I, III) (figura 2) ncep i se termin la absorban egal cu zero. Ele
intersecteaz axa lungimilor de und (adic au A=0) la valoarea la care n spectrul de ordin zero exist un
maxim de absorbie.
Spectrele derivate de ordin par (II, IV) (figura 2) au minime/maxime ce indic punctele de inflexiune ale
maximelor de absorbie. De exemplu, spectrul derivat de ordin doi are un minim negativ la lungimea de und
corespunztoare maximului de absorbie din spectrul de ordin zero i dou benzi laterale pozitive, denumite
benzi satelit. Spectrul derivat de ordin patru are o band pozitiv cu maxim corespunztor max din spectrul de
ordin zero.

Figura 2. Spectre derivate de diferite ordine

Amplitudinea Dn a derivatei de ordin n este proporional cu inversul limii W a maximului de

absorbie de form gausian sau lorentzian:
n
1
Dn ~
W
n cazul unor maxime, x i y, care au aceeai valoare a absorbanei A x=Ay, dar limi diferite (Wx mai
larg, Wy mai ngust) amplitudinea Dn a derivatei de ordin n a maximului y, mai ngust, va fi mai mare ca
amplitudinea celuilalt maxim.
n
1
n
1
i
Dn , x D n ,y
W
Wx y
Dar cum Wy<Wx rezult c Dn,y>Dn,x.
Pe aceasta se bazeaz determinarea unui analit cu maxim de absorbie ngust n prezena unui analit cu
maxim de absorbie larg, aflat n exces.
Dac legea Bouguer Lamber Beer este respectat pentru un analit, atunci aplitudinile derivatelor de
diferite ordine care apar sub form de maxime sau minime sunt proporionale cu concentraia analitului. Prin
urmare legea Bouguer Lambert Beer nu este afectat de derivare i se poate scrie:
dA d d 2A d 2
cl i cl
d d d2 d2
 2. Metode de apreciere a amplitudinii spectrelor derivate
1. METODA TANGENTEI. Se traseaz tangenta care unete maximele a dou semnale vecine i se msoar
distana de la vrful minimului situat ntre cele dou maxime pn la tangent. Este o metod mai rar ntlnit.

2. METODA MINIM-MAXIM (SEMNAL-SEMNAL, PIC-PIC). Se msoar amplitudinea ntre un maxim i un

minim vecin n spectrul derivat.

3. METODA LINIEI DE ZERO (PEAK-ZERO LINE) = METODA INTERSECIEI CU AXA ABSCISELOR A SPECTRULUI
DERIVAT = METODA DE ZERO-CROSSING este metoda msurrii n raport cu axa absiciselor. Se msoar
amplitudinea maxim sau minim pornind de la axa absciselor.

Aceast metod se aplic mai ales n analiza cantitativ a amestecurilor binare, deoarece aceast
amplitudine a derivatei se msoar la o lungime de und la care spectrul derivat al unuia dintre compui trece
prin zero (n englez: zero-crossing); astfel se elimin interferena acestui compus ntruct indiferent de
concentraia acestuia, spectrul su derivat va trece mereu prin zero.
Metodologia se aplic i la amestecuri multicomponent. Este cea mai folosit metod n analiza
amestecurilor binare sau multicomponent deoarece n funcie de lungimea de und aleas se pot elimina pe rnd
interferenele anumitor specii chimice.
Metoda de zero-crossing se aplic indiferent de ordinul spectrului; important este ca la lungimea de und
aleas, ntre concentraia speciei care se determin i intensitatea derivatei s existe o proporionalitate direct.