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APLICACIONES DE WESTERN BLOT

Esta tcnica es hoy en da imprescindible en varios campos de la biologa, como la


biologa molecular, la bioqumica, la biotecnologa o la inmunologa:

Se usa principalmente para determinar la presencia o ausencia de una protena


concreta en una muestra. Tambin nos puede ser til para determinar los niveles
de dicha protena en esa muestra, o el tamao de esta protena, ya que en
determinadas enfermedades el problema no es la ausencia total de una molcula
sino su reduccin o la expresin de una forma truncada de dicha protena.
(Hongbao et al., 2006).
Prueba de VIH: Aunque el VIH suele detectarse mediante la tcnica ELISA, el
Western Blot se usa como prueba confirmatoria cuando el ELISA da un resultado
positivo en un grupo que no es de riesgo o en una poblacin donde la prevalencia
del virus es muy baja. Mediante el Western blot se buscan los anticuerpos anti-VIH
en una muestra de suero humano. Se transfieren a una membrana las protenas
de clulas que, se sabe, estn infectadas por el VIH. Entonces, se incuba el suero
que hay que probar con esta membrana. Este paso es equivalente a la incubacin
con el anticuerpo primario; si hay anticuerpos anti-VIH en el suero, sern estos los
que realicen el papel de anticuerpo primario. Se lava, para eliminar los anticuerpos
no unidos, y la membrana se vuelve a incubar con un anticuerpo secundario anti-
humano unido a una enzima-seal. La aparicin de bandas indica la presencia de
protenas contra las cuales el suero del paciente contiene anticuerpos, es decir, el
paciente es seropositivo (Ospina, 2006).
Par el diagnstico de la enfermedad de Lyme. Se utiliza para la confirmacin de
las pruebas de IFI y ELISA en base a que permite conocer frente a qu antgenos
ocurre la sntesis de anticuerpos. Su interpretacin debe de hacerse de forma
cuidadosa y estricta, existiendo en este momento diferentes criterios segn los
diversos autores. Estos criterios pueden ser de tipo cualitativo, valorando como
positiva la infeccin por Borrelia burgdorferi cuando aparecen determinadas
bandas, cuantitativo, valorando no tanto el tipo de bandas, sino el mayor o menor
nmero de las mismas, o una combinacin de ambos criterios (Engstrom, 1995).

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Engstrom SM, Shoop E, Johnson RC. 1995. Immunoblot interpretaticon criteria for
serodiagnosis of early Lyme disease. J Clin Microbiol 1995; 33:419-427.

OSPINA O, SIGIFREDO. (2006). Diagnstico de la infeccin por el virus de la


inmunodeficiencia humana Diagnstico del virus de la inmunodeficiencia humana. Infectio,
10 (4), 273 - 278. Obtenido el 15 de septiembre de 2017, de
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0123-
93922006000400010&lng=en&tlng=es.

Western Blotting Method (http:/ / www. sciencepub. Org/ american/ 0202/ am0202.
pdf#page=27) (pdf). The Journal of American Science (Department of Medicine, Michigan
State University) 4: pp. 23-27. ISSN 1545-0740 (http:/ / worldcat. org/ issn/ 1545-0740). .
Consultado el 18 de agosto de 2010.