TIPOS DE BIOREACTORES

Introduccin
El diseo en bioingeniera no es solo la aplicacin de conceptos bsicos y tericos
que conlleven a lograr un prototipo; para la realizacin ntegra de un modelo, otra
gran parte, trata de la adaptacin creativa y de la utilizacin del ingenio propio para
lograr el objetivo de conjuntar el ambiente biolgico de un cultivo vivo con el
ambiente artificial de un dispositivo controlado; este es el resultado denominado
biorreactor o reactor biolgico. Un biorreactor es por tanto un dispositivo
biotecnolgico que debe proveer internamente un ambiente controlado que
garantice y maximice la produccin y el crecimiento de un cultivo vivo; esa es la
parte biolgica. Externamente el biorreactor es la frontera que protege ese cultivo
del ambiente externo: contaminado y no controlado. El biorreactor debe por tanto
suministrar los controles necesarios para que la operacin o proceso (bioproceso)
se lleve a cabo con economa, alto rendimiento (productividad) y en el menor tiempo
posible; esa es la parte tecnolgica.

BIORREACTOR

Es un recipiente o sistema que mantiene un ambiente biolgicamente activo. En

algunos casos, un biorreactor es un recipiente en el que se lleva a cabo un
proceso qumico que involucra organismos o sustancias bioqumicamente activas
derivadas de dichos organismos. Este proceso puede ser aerbico o anaerbico.
Estos biorreactores son comnmente cilndricos, variando en tamao desde
algunos mililitros hasta metros cbicos y son usualmente fabricados en acero
inoxidable.

Un biorreactor puede ser tambin un dispositivo o sistema empleado para hacer

crecer clulas o tejidos en operaciones de cultivo celular. Estos dispositivos se
encuentran en desarrollo para su uso en ingeniera de tejidos.
En trminos generales, un biorreactor busca mantener ciertas condiciones
ambientales propicias (pH, temperatura, concentracin de oxgeno, etctera)
al organismo o sustancia qumica que se cultiva. En funcin de los flujos de entrada
y salida, la operacin de un biorreactor puede ser de tres modos distintos:

1. Lote (batch)

2. Lote alimentado (fed-batch)

3. Continuo o quimiostato

Diseo de biorreactores

El diseo de biorreactores es una tarea de ingeniera bastante compleja.

Los microorganismos o clulas son capaces de realizar su funcin deseada con
gran eficiencia bajo condiciones ptimas.

Las condiciones ambientales de un biorreactor tales como flujo de gases (por

ejemplo, oxgeno, nitrgeno, dixido de carbono, etc.), temperatura, pH, oxgeno
disuelto y velocidad de agitacin o circulacin, deben ser cuidadosamente
monitoreadas y controladas.

La mayora de los fabricantes industriales de biorreactores usan

recipientes, sensores, controladores y un sistema de control interconectados para
su funcionamiento en el sistema de biorreaccin.

La misma propagacin celular (fenmeno conocido en ingls como Fouling) puede

afectar la esterilidad y eficiencia del biorreactor, especialmente en
los intercambiadores de calor. Para evitar esto, el biorreactor debe ser fcilmente
limpiable y con acabados lo ms sanitario posible (de ah sus formas redondeadas).

Se requiere de un intercambiador de calor para mantener el bioproceso a

temperatura constante. La fermentacin biolgica es una fuente importante
de calor, por lo que en la mayor parte de los casos, los biorreactores requieren
de agua de enfriamiento. Pueden ser refrigerados con una chaqueta externa o, para
recipientes sumamente grandes, con serpentines internos.

En un proceso aerobio, la transferencia ptima de oxgeno es tal vez la tarea ms

difcil de lograr. El oxgeno se disuelve poco en agua (y an menos en caldos
fermentados) y es relativamente escaso en el aire (20,8 %). La transferencia de
oxgeno usualmente se facilita por la agitacin que se requiere tambin para
mezclar los nutrientes y mantener la fermentacin homognea. Sin embargo,
existen lmites para la velocidad de agitacin, debidos tanto al alto consumo
de energa (que es proporcional al cubo de la velocidad del motor) como al dao
ocasionado a los organismos debido a un esfuerzo de corte excesivo.

Los biorreactores industriales usualmente emplean bacterias u otros organismos

simples que pueden resistir la fuerza de agitacin. Tambin son fciles de mantener
ya que requieren slo soluciones simples de nutrientes y pueden crecer a grandes
velocidades.

En los biorreactores utilizados para crecer clulas o tejidos, el diseo es

significativamente distinto al de los biorreactores industriales. Muchas clulas y
tejidos, especialmente de mamfero, requieren una superficie u otro soporte
estructural para poder crecer y los ambientes agitados son comnmente dainos
para estos tipos de clulas y tejidos. Los organismos superiores tambin
requieren medios de cultivo ms complejos.

Cultivos y fermentaciones

Lo primero que hay que entender en el diseo de reactores biolgicos es que

contrario a los qumicos, su cintica no est determinada exclusivamente por
la velocidad de reaccin y las variables que la determinan. Aunque se puede
describir de manera similar a la qumica, la cintica biolgica tambin depende de
caractersticas intrnsecas del organismo o cultivo tales como crecimiento y tasa
de divisin celular, as como del tipo de operacin que se lleve a cabo. Por eso, lo
primero que se define en el diseo de un biorreactor es el propsito de utilizacin;
es decir, qu tipo de cultivo se va a utilizar, el modo de operar y/o el proceso de
cultivo. El conjunto biorreactor-sistema de cultivo debe cumplir con los siguientes
objetivos:

1. Mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo el volumen de

cultivo.

2. Mantener constante y homognea la temperatura.

3. Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes.

4. Prevenir la sedimentacin y la floculacin.

5. Permitir la difusin de gases nutrientes a la velocidad requerida por el cultivo.

6. Mantener el cultivo puro.

7. Mantener un ambiente asptico.

8. Maximizar el rendimiento y la produccin.

9. Minimizar el gasto y los costos de produccin.

10. Reducir al mximo el tiempo.

Una fermentacin es un proceso biolgico o bioproceso que consiste en

la descomposicin de la materia orgnica por microorganismos fermentadores
(bacterias y hongos).

Un cultivo tambin es un bioproceso; pero generalmente se asocia a organismos o

microorganismos superiores (en orden jerrquico) a las bacterias; los cultivos son
casi todos del Reino Eucariota.
Clasificacin de los biorreactores

Clasificacin operativa

Tanto biorreactores como fermentadores se clasifican primeramente de acuerdo al

modo de operacin: discontinuo, semicontinuo, continuo.

Esta es una clasificacin operativa y se aplica a cualquier reactor, sea qumico o

biolgico (biorreactor). En los reactores biolgicos el modo de operacin define el
sistema de cultivo que es el mismo y delimita la clasificacin procesal-productiva del
bioproceso (cultivo). Al operar un biorreactor en una determinada categora
(discontinua, semicontinua, continua), automticamente queda determinado el
modo de cultivo del sistema y se definen los parmetros y las caractersticas
operativas y de diseo que intervienen en el proceso productivo del sistema.

Clasificacin biolgica

Los sistemas biolgicos deben interaccionar con el ambiente externo para poder
crecer y desarrollarse; es por eso que los biorreactores se clasifican biolgicamente
de acuerdo al metabolismo procesal del sistema de cultivo: anaerbico,
facultativo, aerbico.

Los bioprocesos de cultivo y las fermentaciones estn basados en el metabolismo

celular del cultivo. El metabolismo define los parmetros y caractersticas
operativas-biolgicas de diseo y de operacin del biorreactor. Estas caractersticas
son las que intervienen en la parte biolgica del sistema y tienen que ver con el
crecimiento, productividad y rendimiento del cultivo; por lo que, definen la
clasificacin biolgica-procesal del sistema de cultivo.
Clasificacin biolgica-operativa

Ambas clasificaciones; la biolgica y la operativa, son procesalmente

interdependientes y en su conjunto afectan el diseo final del biorreactor.

Al conjuntarse ambas clasificaciones, se conjuntan tambin la funcin operativa y la

biolgica para establecer entre ambas un propsito de utilizacin, el modo de cultivo
y el bioproceso. Siendo el propsito de utilizacin, el destino de cultivo del
biorreactor; para qu tipo de cultivo va a ser utilizado el biorreactor; el modo de
cultivo es sinnimo de sistema de cultivo y el bioproceso es en s, todo el proceso.

Biorreactores y tipos de cultivo

Los sistemas biolgicos que determinan el metabolismo celular de cultivo y el modo

procesal-biolgico del sistema son:

Clulas y microorganismos anaerbicos

Bacterias en su gran mayora, son microorganismos de metabolismo degradativo

(catablico); generalmente unicelulares, estos microorganismos son autnomos y
nutricionalmente independientes (auttrofos); sus clulas (cuerpos) no respiran (no
utilizan la gluclisis para la respiracin celular), en cambio, utilizan vas alternas,
donde una molcula orgnica, producida durante el proceso metablico
(catabolismo), es utilizada como aceptor de electrones, en un proceso bioqumico
conocido como respiracin oxidativa; esta molcula es reducida a producto orgnico
en un proceso comnmente denominado fermentacin.

Clulas y microorganismos facultativos

Son ambivalentes, tienen la capacidad de vivir o sobrevivir entre ambientes:

aerbico (presencia de oxgeno) y anaerbico (ausencia de oxgeno); son
microorganismos de metabolismo mixto por lo que, pueden tanto degradar
(catabolismo) como construir (anabolismo) materia orgnica, a partir de diferentes
sustratos (materia prima), tanto orgnicos como inorgnicos. Pese a su versatilidad,
sus mayores representantes son microorganismos que presentan relaciones
parsitas o simbiontes tales como: hongos y levaduras, por lo que no son muy
extensos.

Clulas y microorganismos aerbicos

Pertenecen en su mayora al Reino Eucariota pero tambin los hay procariota

son microorganismos y clulas que respiran (utilizan la gluclisis como forma de
respiracin celular); por lo que su metabolismo es constructivo (anablico) y deben
obtener sus nutrientes de diferentes fuentes. Sus principales grupos estn
representados por: bacterias y microorganismos aerbicos, plantas y animales;
cuyas clulas se puedan cultivar en suspensiones celulares o bien, en diferentes
arreglos artificiales o modificadas.

A continuacin algunos de los posibles sistemas de cultivo que se pueden realizar

y el tipo de biorreactor asociado a cada uno:

Cultivos microbianos anaerbicos - fermentador bacterial (CO2)

Los microorganismos de metabolismo anaerbico son los ms simples de todos, tan

solo necesitan de un medio de cultivo adecuado, agitacin vigorosa y cierta cantidad
de CO2 (dixido de carbono) disuelto (COD) para crecer y multiplicarse.

Cultivos microbianos facultativos fermentador bacterial

Los microorganismos facultativos toleran la presencia de oxgeno en

bajas concentraciones y adems de un sustrato adecuado, slo requieren agitacin
moderada y un medio de cultivo para crecer y desarrollarse.
Cultivos microbianos aerbicos fermentador bacterial (O2)

Los microorganismos aerbicos necesariamente requieren la presencia

de oxgeno (aire) disuelto (OD) para sobrevivir; adems, agitacin moderada y un
medio de cultivo rico en nutrientes para poder crecer y desarrollarse.

Cultivos celulares aerbicos y facultativos fermentador mictico (CO2)

Los cultivos celulares se diferencian de los bacteriales (microbios) en que no son
microorganismos procariota, son eucariota. Son microorganismos aerbicos o
facultativos pertenecientes al Reino Fungi (hongos y levaduras), generalmente
llamados micticos, requieren de la presencia de CO2 disuelto en el medio como
sustrato limitante de la velocidad de reaccin y generan
estructuras reproductivas muy particulares.

Cultivos Celulares aerbicos estrictos Fermentador con aireacin (O2)

El cultivo de microorganismos celulares (no bacteriales) aerbicos estrictos requiere
la presencia de oxgeno disuelto en el medio de cultivo para el metabolismo celular;
as como una adecuada agitacin.

Clulas vegetales en suspensin biorreactor de levantamiento por aire (O2)

en rgimen turbulento (Re3000)

Las clulas vegetales pueden ser cultivadas en suspensiones celulares: pequeos

agregados celulares que se suspenden en el medio de cultivo mediante agitacin.
Dado que las clulas vegetales respiran, el diseo del biorreactor debe incorporar
una lnea de aireacin (aire) para suministrar oxgeno disuelto (OD) al medio de
cultivo. El diseo debe contar con agitacin vigorosa, pues los agregados celulares
vegetales tienden a agruparse (clusters) y de alcanzar gran tamao y
peso, precipitaran. Por eso, la operacin de este tipo de biorreactores debe ser en
rgimen turbulento (Re3000). Los biorreactores para clulas vegetales en
suspensin generalmente son diseados con un mecanismo de levantamiento por
aire air lift que combina una agitacin vigorosa (turbulenta) con una adecuada
aireacin (oxgeno disuelto) del medio de cultivo.
Protoplastos vegetales - biorreactor de levantamiento por aire (O2) en rgimen
laminar (Re2300)

Los protoplastos son clulas vegetales desprovistas de su pared celular, esto se

logra utilizando enzimas proteolticas (proteasas y lipasas) que degradan la pared
celular. Actualmente, el cultivo de protoplastos no es muy comn, pero de realizarse,
requiere de una cama de aire (burbujas muy finas) que opere en rgimen laminar
(Re2300), para evitar que los esfuerzos cortantes (esquileo) e hidrodinmicos
(agitacin) generados en el medio de cultivo daen (lisis celular) las clulas en
suspensin (tamao de Kolmogorov de los Eddies). Tambin es indispensable que
el medio de cultivo contenga las proteasas y lipasas necesarias para evitar la
regeneracin de la pared celular.

Clulas animales biorreactor de lecho fluidizado (O2)

Los cultivos de clulas animales requieren de proximidad mutua y de un soporte

slido (anclaje) para interactuar (comunicacin clula-clula) y poder metabolizar
(producir); esto por cuanto, las clulas animales, por lo general, no son
independientes y deben estar unidas a un sistema (pre- heptico) para funcionar
adecuadamente. Para suministrar esa proximidad y el soporte necesario, los
diseos de biorreactores para clulas animales deben aumentar la densidad celular
(concentrar) de las clulas en cultivo. Una forma de hacerlo es incorporar un lecho
fluidizado formado por cantidad de microesferas acarreadoras hechas de
material cermico poroso inerte que, por su tamao (micromtrico) forman una
interfase con el medio de cultivo (fluido) que permite la transferencia de masa
(nutrientes y OD), energa (calor) y momentun (agitacin) entre el medio de cultivo
y las clulas en cultivo; lo que es llamado lecho fluidizado. Los cultivos celulares
animales, por la delicada naturaleza de las membranas plasmticas requieren
adems de oxgeno disuelto (OD) en el medio de cultivo (tamao de Kolmogorov de
los Eddies) y de un rgimen de agitacin laminar (Re2300).
Clulas Inmovilizadas biorreactor de Fibra Hueca (O2)

La inmovilizacin celular es otra forma de lograr proximidad celular y aumentar la

densidad celular y la concentracin de metabolitos dentro de las clulas. La
inmovilizacin es un mtodo mucho ms eficiente y logra rendimientos muy
superiores a los del lecho fluidizado. Pero, los fenmenos de transferencia (masa,
momentun y energa) se ven muy limitados por la inmovilidad. Esto es
especialmente crtico en cultivos de clulas de mamfero por cuanto ya clula no
recibe la nutricin adecuada.

Los reactores de fibra hueca son los dispositivos ms utilizados para inmovilizar y
concentrar cultivos celulares animales. Su diseo consiste en una batera de fibras
hueca y porosa en su interior, colocadas en paralelo. Las clulas se concentran y
aumenta la densidad celular, en los intersticios de las fibras huecas. El medio de
cultivo fluye en contrasentido desde el exterior del reactor o a travs de una carcasa
como si fuera un intercambiador de calor de doble tubo. Para solventar el problema
de la escasa transferencia de masa (nutrientes y OD) dentro de la fibra hueca, un
diseo novedoso es el tambor rotativo en el cual, el tambor externo rota sobre la
batera de fibras huecas, generando una circulacin constante de masa y de
momentun, aumentando las tazas de transferencia.

Clulas empaquetadas - biorreactor de Lecho Empacado (O2)

El empaquetamiento celular es una forma menos drstica de inmovilizacin; pues

sta es parcial. Tambin tiene el objetivo de aumentar la concentracin y la
densidad celular; pero al no estar enclaustradas las clulas, la transferencia de
masa es mayor, aunque siempre limitada. Un lecho empacado es una matriz de
soporte slido que retiene las clulas, bien por geometra (dentro de los intersticios
o espacios huecos de la matriz), bien por afinidad (paso o adherencia selectiva). Un
biorreactor con este propsito debe contener un lecho de soporte slido, sumergido
en el medio de cultivo. La oxigenacin generalmente se realiza en el exterior del
lecho, a travs del medio de cultivo.
Cultivos enzimticos Reactores de Lecho Cataltico

Los cultivos enzimticos se comportan en algunos aspectos como cultivos celulares

y en otros como reactivos qumicos. Debido a que un sustrato enzimtico es un
cataltico de una reaccin biolgica, la cintica de estos reactores puede simularse
como la qumica, pero sin olvidar que el compuesto es biolgico. Los sustratos
enzimticos deben estar anclados a un lecho semislido o a uno semifluido - segn
sea el caso - dependiendo de la naturaleza enzimtica del sustrato; que por la
naturaleza de la enzima se conocen como lechos catalticos. Muchas veces el medio
de cultivo, adems de la enzima, requiere, para un sustrato determinado, su
respectivo precursor metablico llamado cofactor, ms algn componente especial
que agilice el proceso metablico.

Modo de Operacin y Sistemas de Cultivo

El modo de operacin de un sistema de cultivo, es sinnimo del modo de operar del

biorreactor o fermentador. ste no solo influye en el diseo propio del reactor,
tambin, en el modelo cintico de crecimiento del cultivo y en el proceso de
produccin. Existen tres modos de cultivo aunados a tres modos bsicos de
operacin:

Discontinuo(batch): por lotes o tandas, sin alimentacin (F); se coloca dentro del
biorreactor la carga total de cada proceso (tanda o lote) de cultivo o fermentacin y
se dejar que se lleve a cabo el proceso productivo o la fermentacin por el tiempo
que sea necesario; el cul se denomina tiempo de retencin.
Semicontinuo (fed-batch): por lotes alimentados, con alimentacin de entrada (F1);
se alimenta una lnea de entrada o alimentacin (F1) para que el sistema de cultivo
tenga un producto (biomasa) con mximo de crecimiento (exponencial) y aumente
la productividad.

Continuo (continuos): por quimioestato, se alimenta una lnea de entrada F1 o

alimentacin y se drena una lnea de salida F2 o lavado; de manera que los flujos o
caudales de ambas lneas sean iguales y la produccin sea continua
http://biorincon.blogspot.mx/2012/06/biorreactor.html