Prueba de ASTO

Es la prueba de deteccin de anticuerpos de tipo de IgM e IgA frente al antgeno

llamado Streptolisina O, producido por un coco grampositivo llamado Streptococcus
pyogenes. El anticuerpo antiestreptolisina O se encuentra presente en casi todas las
personas en ttulos bajos, debido a que las infecciones estreptoccicas son comunes.
Sin embargo un ttulo alto o creciente de antiestreptolisina O, indica una infeccin
reciente producida por este estreptococo beta hemoltico de grupo A

Enfermedades causadas por el Streptococcus pyogenes

Causa
Por el mismo germen
Por las toxinas del germen
Por reaccin de autoinmunidad
Enfermedad
Infecciones respiratorias: Faringitis, otitis,
sinusitis, neumonas. Infecciones
cutneas: piodermitis, erisipela, imptigo.
Otras infecciones: artritis, osteomielitis,
pielonefritis, sepsis
Escarlatina
Fiebre reumtica (cepas farngeas)
Glomerulonefritis postestreptoccica
(cepas cutneas)
PASOS PARA LA REALIZACIN DE LA PRUEBA DE ASTO (tcnica
de aglutinacion por latex)
- Material:
1. Placas de vidrio de color negro
2. Muestra del paciente (suero plasmtico)
3. Control negativo o solucin fisiolgica
4. Control positivo o suero con anticuerpos conocidos
5. Varillas descartables
6. Reactivo de ltex que contiene Estreptolisina O

Llevar los reactivos y la muestra a temperatura ambiente. Agitar el Reactivo de ltex

antes de usar, vaciando previamente la pipeta del gotero.

- Procedimiento

Tcnica cualitativa
I- La primera prueba debe realizarse siempre con un control positivo y un
control negativo para verificar la confiabilidad del reactivo. Para ello, se
utiliza una placa de vidrio negro con tres crculos, y se coloca una gota de 50
ul de control +, muestra del paciente y control -, en los crculos 1, 2 y 3
respectivamente. Se coloca una gota de reactivo en cada uno de los
crculos, se mezcla con una varilla descartable cada crculo, hasta obtener
una suspensin uniforme en la superficie delimitada de la placa, se hace
rotar la placa de vidrio por 2 minutos y se observa.
II- Para las futuras pruebas, se utiliza solo un crculo de la placa de vidrio, y se
coloca: Reactivo latex 1 gota (50 ul) y Muestra 1 gota (50 ul). Mezclar con
varilla descartable (uno para cada muestra) hasta obtener una suspensin
 uniforme en la superficie delimitada de la placa. Inmediatamente,
balancear suavemente la placa y observar macroscpicamente el resultado
dentro de los 2 minutos.

Interpretacin
Se considera positiva la prueba cuando se observa la presencia de floculos o
grumos blancos (aglutinacin), que indican que ha habido reaccin antgeno
anticuerpo entre los anticuerpos antiestreptolisina O de la muestra y la
estreptolisina O del reactivo latex.

Se considera negativa la prueba ante la ausencia de aglutinacin que indica que no

ha habido reaccin antgeno anticuerpo

Prueba positiva Prueba negativa

Tcnica cuantitativa
I- Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas, para
ello: utilizar una placa de vidrio de color negro con 3 crculos, colocar 50 ul
de solucin fisiolgica en cada uno de los crculos. Agregar 50 ul de suero
del paciente al crculo No 1 y mezclar aspirando y expulsando 8 veces con
una pipeta descartable. Transferir 50 ul de esta dilucin al tubo No 2 y
mezclar, transferir 50 ul de esta dilucin al tuvo No 3, mezclar y sacar 50 ul
de la mezcla y reservar, pues no se conoce si se continuar as las
diluciones, dependiendo de los resultados obtenidos. Las diluciones as
obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, etc. Colocar ahora el reactivo ltex
en cada uno de los crculos, mezclar con una varilla descartable desde el
crculo de mayor dilucin al de menor dilucin. Rotar la placa de vidrio
durante 2 minutos y observar
 Interpretacin

Se observa si hay aglutinacin en cada uno de los crculos y se da un valor a cada

crculo, como sigue:

1. Prueba cualitativa es igual a 200 UI/ml, sirve como constante para obtener los
valores en la prueba cuantitativa, ya que se multiplica 200 x el denominador de
la dilucin, as:
2. 1 crculo: dilucin es igual a 400 UI/ml
3. 2 crculo: dilucin es igual a 800 UI/ml
4. 3 circulo: dilucin 1/8 es igual a 1600 UI/ml
5. Se puede seguir obteniendo ms resultados segn sea necesario

Los valores obtenidos en la prueba deben compararse con los valores normales de la
prueba en nuestra poblacin:

- Nios: 250+/- 50 UI/ml

- Adultos: 200 +/-50 UI/ml

Los valores varan de acuerdo al tipo de poblacin y tambin de acuerdo a la edad.

Ventajas y desventajas de la prueba de ASTO por ltex

Es una prueba fcil, y no necesita de personal entrenado para su realizacin. Es
econmica y accesible para todos. Es rpida y de interpretacin cuantitativa, adems
que permite el diagnstico presuntivo de una infeccin estreptoccica cuando la
clnica del paciente lo sugiere.

Sin embargo, puede dar falsos negativos, ya que no es una prueba sensible, y no
detecta niveles bajos de anticuerpos. Probablemente este problema, pueda mejorarse
utilizando otro tipo de tcnica para la determinacin de estos anticuerpos (ELISA,
hemoaglutinacin). Puede dar falsos negativos tambin cuando el paciente se
encuentra al inicio de su enfermedad, puesto que los anticuerpos tardan en aparecer,
o cuando ha recurrido a un tratamiento antibitico previo a la prueba.

Por otro lado, no es una prueba especfica, es posible encontrar tambin falsos
positivos, ya que da margen a reacciones cruzadas con otras infeccios. Adems, los
anticuerpos IgM , suelen permanecer hasta 6 meses en el plasma del paciente, por lo
que un paciente asintomtico podra tener una prueba de ASTO positiva, si ha tenido
una infeccin estreptoccica en este margen de tiempo. Requiere confirmacin con un
cultivo bacteriano.