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Profesores de Prcticas:
2016
INTRODUCCIN
La fisiologa es la ciencia encargada del estudio del funcionamiento normal de las estructuras
de los organismos vivientes y de la interrelacin entre ellos. Su conocimiento es esencial para
la preparacin de todo estudiante de Ciencias Biomdicas.
El presente Manual o Gua de Practicas, tiene como objetivo principal integrar la parte terica
que se imparte a lo largo del curso en el rea de fisiologa y la parte demostrativa a travs de
la cual se aplican y muestran de manera directa los conocimientos adquiridos.
Esta gua de prcticas est orientada a presentar de manera esencial y en forma accesible a
los diferentes sistemas y mecanismos fisiolgicos indispensables para el adecuado
conocimiento del funcionamiento del organismo humano.
NORMAS DE SEGURIDAD
El laboratorio es un lugar donde se desarrollan prcticas elegidas por el docente para confirmar y
reafirmar los conocimientos tericos impartidos en el saln de clase. Al realizar cada prctica deben
seguirse las instrucciones, observar y registrar lo que sucede. A continuacin se presenta una lista de
normas bsicas de prctica de seguridad de laboratorio que deben ser seguidas por todos.
- 3. 10 minutos para la discusin del informe desarrollado por los grupos, este estar a
cargo del docente y discutirn los resultados.
-
PRACTICA 1: POTENCIAL ELECTRICO DE LA MEMBRANA
OBJETIVOS
MATERIALES Y METODOS
Laptop.
Potencial de reposo.
a) Modifique los valores de Em y verifique que ocurre con los valores del potencial de
reposo promedio (conductividad de reposo, Vm) en el programa.
Potencial de accin.
ALUMNOS:
GRUPO:
MESA:
FECHA:
INFORME
DISCUSIONES Y CONCLUSIONES
a.
b.
c.
PRACTICA 2: ESPIROMETRIA
INTRODUCCION
La funcin principal del sistema respiratorio es hacer llegar a todas las clulas de la
economa el oxgeno necesario y eliminar el anhdrido carbnico a medida que se produce.
El intercambio de gases entre la sangre y el aire tiene lugar en la pared de los alvolos
pulmonares, y para que este intercambio ocurra de manera adecuada es necesario que tanto
la sangre como el aire se renueven constantemente. La renovacin del aire se produce merced
a los movimientos de expansin (inspiracin) y retraccin (espiracin) torcica y pulmonar.
La cantidad de aire en los pulmones vara constantemente y no todo este aire llega a
los alvolos, es decir, que no todo es aprovechado para la hematosis. Durante la respiracin
normal y tranquila, en el adulto, el aire que entra y sale en cada movimiento es ms o menos
de 500 ml, y slo llegan a los alvolos aproximadamente unos 360 ml, el resto,
aproximadamente 140 ml, queda en el llamado espacio muerto (grandes bronquios, trquea,
laringe y cavidad nasal).
Entre los factores que afectan la prediccin de los valores normales obtenidos en la
evaluacin de la funcin pulmonar tenemos : la talla, la edad, el peso corporal, el sexo, el
grupo tnico, la postura corporal durante el examen, la historia de tabaquismo, la altitud de
residencia y el grado de entrenamiento fsico.
- El volumen espiratorio forzado (FEV), medidos al 1er. (FEV1), 2do. (FEV2) y 3er. (FEV3)
segundo de iniciada la espiracin. Generalmente se expresan los resultados como el
porcentaje de la capacidad vital corporal, siendo los valores promedio de 83, 95, y 98 %,
respectivamente.
- El tiempo que tarda en eliminarse el primer litro del volumen espiratorio, despus de
descartar los primeros 200 ml y siendo til para determinar el flujo espiratorio mximo
(maximal expiratory flow rate : MEFR), denominado peak flow. En condiciones ATPS
normales debe ser ms de 400 L/min.
- El tiempo que tarda en eliminarse el volumen comprendido entre el 25 y el 75% (FEF 25-
75) de la capacidad vital, valoracin que permite conocer el flujo espiratorio mximo
medio [maximal midexpiratory flow: FEF 25-75 (L/seg) = 0.8 de la FEV].
Las enfermedades que afectan la funcin mecnica del pulmn pueden ser agrupadas en
dos categoras:
1) Enfermedades restrictivas, son aquellas que comprometen la aptitud para inspirar. Para
diagnosticar enfermedad restrictiva los estudios de la funcin pulmonar deben presentar
una disminucin de la capacidad vital, de la capacidad inspiratoria y de la capacidad
pulmonar total.
2) Enfermedades obstructivas, son las que comprometen la aptitud para espirar. En el
diagnstico de enfermedad obstructiva la capacidad pulmonar total est aumentada y el
volumen espiratorio forzado al primer segundo de iniciada la espiracin (VEF1) est
disminuido, aproximadamente ms del 25% de la capacidad vital forzada. (CVF).
DEFINICIONES
VT = 500 ml x 16 resp/min.
VT = 8000 ml
Es la cantidad de aire que entra o sale de los alveolos pulmonares en un minuto. Es igual al
producto de la diferencia entre el volumen corriente y el espacio muerto, por la frecuencia
respiratoria.
VA = 5760 ml/min.
Es la mxima cantidad de aire que los pulmones pueden retener. Est constituida por los
cuatro volmenes pulmonares primarios (VC, VRI, VRE, VR).
Es la mxima cantidad de aire que una persona puede emitir en una espiracin forzada
despus de una inspiracin mxima. Es la suma del volumen de reserva inspiratoria, el
volumen corriente y el volumen de reserva espiratoria.
9. Capacidad Vital Forzada (CVF).
Es la capacidad vital cuando se realiza un esfuerzo mximo para espirar con la mayor
rapidez posible. La CVF se mide a temperatura y presin ambiental normal. Teniendo en
cuenta el tiempo de la CVF, podemos calcular el volumen espiratorio forzado al primer
segundo de iniciada la espiracin.
Es la cantidad de aire que queda en los pulmones al final de una espiracin normal. Es
igual al volumen de reserva espiratoria ms el volumen residual.
CRF = VRE + VR
Es la cantidad de aire que puede respirar una persona comenzando desde el nivel de
espiracin normal y distendiendo sus pulmones hasta su mxima capacidad.
CI = VC + VRI
Espirograma de un sujeto sano normal.
Capacidad vital forzada (CVF). "A" es el punto de inspiracin
Mujeres :
Hombres :
VALORES DE REFERENCIA :
Volmenes Pulmonares:
Capacidades Pulmonares:
P1 x V1 = P2 x V2
T1 T2
V1 = V2 (P2 - PH2O) T1
(P1 - 47) T2
donde:
P1 = la presin baromtrica
OBJETIVOS
Entender el rol del sistema respiratorio de manera integral, comprender la parte mecnica
respiratoria y de los volmenes y capacidades pulmonares. Asimismo, entender los
cambios de la fisiologa respiratoria en funcin y de la composicin del aire ambiental.
Comprender los conceptos de ventilacin pulmonar, ventilacin alveolar y presiones
alveolares (PAO2, PACO2)
Manejar las conversiones ATPS, BTPS, BTPD.
Describir y entender la mecnica ventilatoria y la ley de Boyle.
Interpretar las relaciones de Delta volumen Delta presin.
Conocer las pruebas funcionales respiratorias ms usadas en la prctica mdica.
Procedimiento :
Procedimiento :
Procedimiento :
Hacer una espirometra a 8 voluntarios deportistas y a 8 voluntarios que tengan asma que
se desencadena con ejercicio.
Pesarlos y tallarlos.
Repetir los pasos 1 y 2.
UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA
FACULTAD DE CIENCIAS Y FILOSOFIA
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLOGICAS Y FISIOLOGICAS
INFORME DE PRCTICAS
ALUMNOS:
GRUPO:
MESA:
FECHA:
INFORME
DISCUSIONES Y CONCLUSIONES
a.
b.
c.
PRCTICA 3: INTOLERANCIA A LA LACTOSA
INTRODUCCIN
En condiciones normales, los hidratos de carbono de la dieta inician su digestin en la
boca por medio de la amilasa salival; en el intestino, la amilasa pancretica es la
principal enzima que transforma el almidn en olgo y disacridos (lactosa, sacarosa).
Estos disacridos intestinales penetran al interior de los enterocitos que tapizan la
mucosa del epitelio intestinal donde son desdoblados en los monosacridos
constituyentes, merced a la presencia de disacaridasas especficas que poseen estas
clulas intestinales en su borde en cepillo (Iactasa, maltasa, isomaltasa, sacarasa). En
ltima instancia son los monosacridos o azcares elementales los nicos que
experimentarn el proceso de absorcin hasta el medio interno (glucosa, fructosa,
galactosa).
a) Primaria
Ausencia congnita desde el nacimiento del individuo o reduccin condicionada
genticamente que aparece en el nio o en el adolescente.
b) Secundaria
Consecuencia de ciertas enfermedades que lesionan la mucosa intestinal: enfermedad
celaca, Enfermedad Inflamatoria Crnica Intestinal (EICI), sobrecrecimiento
bacteriano, etc.
FISIOPATOLOGA
En ausencia de lactasa, y despus de la ingestin de alimentos que contienen lactosa
(especialmente leche), se producir la acumulacin intestinal de lactosa incapaz de
ser desdoblada y absorbida, lo que provocar un aumento de la osmolaridad
intraluminal y el incremento secundario de la secrecin de agua y electrolitos hacia la
luz intestinal; esta circunstancia originar la aparicin de diarrea, sntoma capital de
la intolerancia a la lactosa.
En el colon, la lactosa es fermentada por las bacterias cecales, lo que produce cidos
grasas de cadena corta y diversos gases (anhdrido carbnico, hidrgeno y metano), lo
que justifica la aparicin de flatulencia, borborigmos, nuseas, espasmos, dolor y
distensin abdominal que acompaan a la diarrea osmtica y configuran la
sintomatologia clsica de la intolerancia a la lactosa en particular y a los hidratos de
carbono en general.
Por otro lado, debemos mencionar que la lactasa es el disacrido ms superficial y con
menor actividad que las otras (maltasa y sacarasa) que se encuentran en el borde en
cepillo del intestino, por lo tanto, cualquier proceso patolgico que sufra el intestino
afectar la concentracin de esta disacaridasa. El dao ms frecuente que produce una
alteracin en la accin de la lactasa es la diarrea, sobre todo en aquellas diarreas
consideradas como de alto gasto, que, como bien se sabe, son aquellas que tienen una
prdida de lquido mayor a 10 mi/Kg. por hora; en estos casos entre 48 y 70%
padecen de intolerancia a la lactsa.
Cuando la lactosa no digerida alcanza el colon, las bacterias localizadas en esta zona la
consumen, produciendo tambin grandes cantidades de gas que distienden la pared
abdominal. En este mismo orden de ideas la lactosa no absorbida es metabolizada por
las bacterias colnicas, produciendo cidos grasos de cadena corta, C02 y metano. En
edades tempranas de la vida como en el recin nacido, los cidos grasas de cadena
corta son absorbidos por el intestino, agravando en ocasiones una acidosis
metablica presente o contribuyendo a que esta este presente. As mismo, la
presencia de cidos orgnicos presentes en la evacuacin, lesionan la piel alrededor
del ano.
SNTOMAS
Los sntomas de la intolerancia a la lactosa son el dolor abdominal, la diarrea, la
distensin del abdomen y la flatulencia, apareciendo perdida de peso, con
malnutricin Las manifestaciones clnicas estn directamente relacionadas con la
presencia de azcares no digeridos en el lumen intestinal, as como con el tiempo que
ha transcurrido desde la ingesta de la lactosa. Por lo tanto, las primeras
manifestaciones clnicas se presentan alrededor de las primeras 2 horas despus de la
ingesta de la leche o producto que contenga lactosa, ya que es el tiempo calculado que
tardan los azcares en llegar al colon. Sin embargo, durante su paso por el intestino
delgado pueden empezar a dar sintomatologa durante los primeros 30 minutos
despus de la ingesta, por lo que la diarrea ser el ltimo de los sntomas que se
presenta.
En ocasiones el cuadro clnico se confunde con otra entidad que es menos frecuente
que la que estamos tratando; ste se refiere a la alergia a la protena de la leche. En
este ltimo cuadro no se presente distensin abdominal, la diarrea no es explosiva y
usualmente se acompaa de rasgos de sangre, existe vmito y palidez.
DIAGNSTICO
Adems de las manifestaciones clnicas que suelen ser caractersticas, los exmenes
de laboratorio nos orientan en forma clara al diagnstico de intolerancia a la lactosa.
La primera condicin para hacerla es que el paciente tenga diarrea, por consiguiente'
deber de usarse slo la parte lquida de las evacuaciones, ya que si se usa la parte
slida los resultados sern siempre negativos.
Una vez que se tiene la parte lquida deber ponerse en un tubo de ensaye una parte
de evacuacin lquida con dos partes de agua simple, se agita y de esa mezcla debern
tomarse 15 gotas y ponerlas en otro tubo de ensayo limpio, a continuacin se agrega
la pastilla de clinitest, se espera a que termine la ebullicin y se compara el color
resultante de la reaccin con los colores que tiene el instructivo; de esta manera
podremos saber la positividad o no de las sustancias reductoras.
Por otro lado, en ocasiones se buscan sustancias reductoras con las tiras reactivas que
se usan para medir glucosa en orina; pueden ser tiles, pero slo medirn la cantidad
de glucosa presente en las evacuaciones y quedar fuera el otro azcar que compone
a la lactosa que es la galactosa, por lo que los resultados son poco confiables.
TRATAMIENTO
Consiste en la eliminacin de la dieta de todos aquellos productos que contengan
lactosa. La leche y sus derivados deben evitarse, excepcin hecha del yogur, que
contiene lactosa autodigerida. La lactosa de la leche podra predigerirse con la adicin
de un preparado comercial de lactasa (Lactored, Polidasa).
Una pregunta que continuamente hacen las mamas es en cuanto tiempo debe
permanecer el nio recibiendo las formulas libres de lactosa; debemos de recordar
que la concentracin le lactasa en el borde en cepillo del intestino se recupera
aproximadamente 10 a 15 das despus de que el cuadro diarreico desapareci. Por lo
tanto, deber mantener este tipo de formula por un mnimo de 15 das.
Lo mas importante es que se debe de prevenir con las medidas higinicas antes
descritas as como prevenir la deshidratacin y desnutricin.
Objetivos
Comprobar la accin enzimtica de la lactosa
Conocer el uso del glucmetro.
Entender por qu la intolerancia a la lactosa es considerada una anomala
frecuente en la poblacin peruana.
Comprender la formacin de gases en el sistema digestivo y el efecto de los
medicamentos antiflatulencia.
Asociar los efectos ocasionados por la intolerancia a la lactosa con l formacin
de gases en el sistema digestivo.
Materiales
Lactosa contenida en la leche Tiras recativas
Cpsulas de lactasa Pipetas Pasteur
Beackers de 50 ml Termmetro
Glucmetro Agitar magntico
Agua destilada
Procedimiento
Uso del Glucmetro:
a. Mantenga la tira reactiva de tal manera que la zona de aplicacin y las flechas
impresas se encuentran arriba. Introduzca la tira reactiva y en direccin de la
flecha en la ranura prevista para este fin. Active hasta que la tira encaje
perceptiblemente.
c. Si decide aplicar una gota de solucin mientras la tira reactiva se encuentra dentro
del aparato, proceda de la manera siguiente: aplique la gota de solucin en medio
de la zona de aplicacin rectangular, color anaranjado. En caso de que tema que la
cantidad de solucin no sea suficiente, puede agregar una segunda gota en el
trmino de 5 segundos. Por favor, ponga atencin a no tocar en ningn caso la tira
re activa durante la medicin puesto que esto puede conducir a resultados
errneos.
h. En otro beacker con la dilucin del lcteo aadimos una capsula de lactasa
Resultados
INFORME DE PRCTICA
Explique como acta la lactasa en el tracto gastrointestnal.
Por qu cree que obtuvo resultados diferentes en cada una de las
mediciones?
Por que ocurre la Intolerancia a la Lactosa?
Dnde se produce la absorcin de la los carbohidratos?
Mencione el tratamiento de los Intolerantes a la Lactosa.
UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA
FACULTAD DE CIENCIAS Y FILOSOFIA
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLOGICAS Y FISIOLOGICAS
INFORME DE PRCTICAS
ALUMNO
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MESA:
FECHA:
INFORME
DISCUSIONES Y CONCLUSIONES
a.
b.
c.
PRACTICA 4: ESPERMATOGRAMA
08/02/2009
INTRODUCCIN
Uno de los componentes ms importantes para el diagnstico de la infertilidad
masculina es el anlisis del lquido seminal. En el semen se encuentran tanto los
espermatozoides como los productos de la secrecin del epiddimo, vesculas seminales y
prstata, por lo cual la funcin de cualquiera de estas estructuras pueden ser evaluadas a
travs de la medicin de los productos de su secrecin. (Figura 1)
Para la evaluacin del varn ser necesario realizar diversas pruebas, entre las
cuales la que nos dar un diagnstico ms acertado de la funcin reproductiva ser la
prueba del espermatograma.
Figura 1: Gnadas y glndulas accesorias del sistema reproductor masculino, de cuyas
secreciones est conformado el lquido seminal.
La muestra debe ser obtenida en el laboratorio, aunque algunas veces los pacientes
no logran obtener satisfactoriamente una muestra. En tal caso se recomienda que la
muestra tomada en la casa sea enviada al laboratorio antes de transcurrir 30 minutos de
su recoleccin. Una vez que la muestra se encuentra en el laboratorio se procede a su
anlisis, en la que se obtendrn los datos de:
1- Filiacin
2- Caractersticas Macroscpicas del Semen
3- Caractersticas Microscpicas del semen
4- Bioqumica Seminal
FILIACION
COLECCIN DE LA MUESTRA
1. Coagulacin y licuefaccin
Despus de ser eyaculado, el semen coagula, debido a las secreciones de las
vesculas seminales, por lo tanto, una pobre o ausente coagulacin podra sugerir una
hipofuncin de las vesculas seminales.
3. Aspecto
El aspecto puede ser lmpido o grumoso, esto depende de la licuefaccin del semen.
4. Volumen
El semen contiene a los espermatozoides as como tambin los productos de las
vesculas seminales (60% del liquido seminal), la prstata (30% del liquido seminal) y de
las glndulas sexuales accesorias (10% del liquido seminal).
El volumen normal se encuentra entre 1.5-5ml. Valores por debajo del valor normal
(hipospermia) sugeriran una hipofuncin de las vesculas seminales. Un volumen mayor
a 5 ml es considerado hiperspermia. La ausencia de lquido seminal se llama aspermia.
5. Consistencia
La consistencia o viscosidad se evala empujando con suavidad el semen a travs de
un tip (en un pipeteador automtico de 25l) colocndolo en una lamina
portaobjetos.
6. pH
El rango normal de pH es de 7.2-7.8. Este valor es mantenido por las secreciones de las
vesculas seminales (alcalinas) y la prstata (cida). De modo que un pH <7.2
indicaran una vesiculitis o hipofuncin de vesculas, mientras que valores por encima
de 7.8 sugeriran una prostatitis.
1. Conteo de espermatozoides
Se realiza despus de diluir la muestra de semen 1:10, 1:20 o 1:100 en agua destilada.
2. Movilidad
Para la evaluacin de la movilidad se coloca una gota del lquido seminal en una
lmina portaobjetos y se cubre con una lamilla cubreobjetos. La lmina es examinada
al microscopio a un aumento de 400x.
Grado 0: inmviles
Se considera una movilidad normal cuando los grados 3 y 2 superan el 50% y el grado
3 supera el 25%. Valores inferiores a estos son considerados como astenozoospermia.
3. Morfologa
La morfologa puede evaluarse tanto en fresco como en un extendido.
La morfologa se clasifica:
Normales
Inmaduros: cuando presenta la gota citoplasmtica en el segmento intermedio
Anomalas de cabeza: puede ser alargada, acintada, macrocfala, microcfala,
en alfiler, piriformes
Anomala de segmento intermedio: cuando la cabeza y la cola forman un ngulo
Anomala de cola
Se considera la muestra normal cuando los normales e inmaduros superan el 50% y los
inmaduros son menores de 10%. Caso contrario se tratara de una teratozoospermia.
4. Vitalidad
En una muestra siempre existe un porcentaje de espermatozoides inmviles, lo que se
busca es determinar que porcentaje de estos estn vivos.
5. Coloracin de leucocitos
Para la coloracin de leucocitos se utiliza la ortotoluidina (OPT) debido a que cambia
de coloracin, de incoloro a marrn, por la accin que tiene la peroxidasa de los
neutrfilos sobre el peroxido de hidrgeno.
6. Test hipo-osmtico
Se coloca 0.9ml del buffer hipo-osmtico y se agrega 0.1ml de muestra seminal, y se
incuba por media hora a 37C.
Despus de la incubacin se coloca una gota en una lmina portaobjetos, se cubre
con la laminilla cubreobjetos y se cuentan al microscopio a 400x los espermatozoides
con colas hinchadas vs los espermatozoides con colas normales.
BIOQUIMICA SEMINAL
La bioqumica seminal sirve para valorar las funciones de las glndulas sexuales
accesorias y de los conductos de transporte espermtico. El 60% del lquido seminal es
secretado por las vesculas seminales, 30% por la prstata y 10% por el epiddimo y
fluidos testiculares.
OBJETIVOS
Visualizar la morfologa y motilidad de los espermatozoides, asi como el pH de la
muestra.
Analizar los resultados de un espermatograma realizado a un varn con algn tipo de
infertilidad.
Dar un diagnstico aproximado de la patologa del paciente, en caso de tenerla.
Relacionar la fisiologa reproductiva masculina con los valores del espermatograma.
Otorgar un posible tratamiento para los individuos que tengan alterado los valores
normales del espermatograma.
MATERIALES:
Frascos estriles para coleccionar la muestra
Micropipeta y tips de 1000 ul
Probeta de 20 cc
Portaobjetos
Cubreobjetos
Micorscopios compuestos
Tiras de pH
PROCEDIMIENTO
1. Los jefes de prctica, el mismo da de la prctica, traern una muestra de semen
fresco en un frasco estril.
2. Con ayuda de una pipeta, se vaciar la muestra en una probeta de 20 cc para medir
el volumen y se determinar el pH.
3. Una gota es vaciada a un cubreobjeto, con ayuda del microscopio se determinar el
porcentaje de los espermatozoides con motilidad progresiva, no progresiva o
inmviles.
RESULTADOS
Presencia de coagulacin si
Volumen 2-5 cc
Viscosidad Normal
Color Perlado
Consistencia
pH 7.2-7.8
P: 32%
MATERIALES
PROCEDIMIENTO
1. Los alumnos recibirn una hoja con los resultados de un espermatograma realizado a
diversos varones, ya sean normales o con algn grado de infertilidad.
2. Los estudiantes sern capaces de analizar estos resultados de acuerdo a los valores
normales y discutirn sus resultados, de acuerdo a los grupos formados, expondrn sus
resultados y su posible diagnstico clnico del individuo al que perteneci el
espermatograma.
RESULTADOS
NOMBRE:
EDAD:
ESPERMATOGRAMA
I. PARTE MACROSCOPICA
MOTILIDAD MORFOLOGIA
P Normal
NP Inmaduro
IM Anomalia de cabeza
Anomalia de cola
VITALIDAD
MACROFAGOS
LEUCOCITOS
CONCENTRACION
SPTZDS/ml
SPTZDS/eyaculado
SPTZDS/motiles/ml
SPTZDS/motiles/eyac
FRUCTOSA:
FRUCTOSA CORREGIDA:
ZINC:
ALFA GLUCOSIDASA:
INFORME DE PRCTICA
El informe de prctica deber incluir los resultados observados y la discusin de la
prctica. Finalmente se incluirn las conclusiones y las preguntas de la prctica.
PRACTICA N 4.ESPERMATOGRAMA
ALUMNOS:
GRUPO:
MESA:
FECHA:
INFORME
DISCUSIONES Y CONCLUSIONES
a.
b.
c.