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23 a 35 23
Trabajo completo
at a pH=7.60 and an SDS concentration of 0.15 than the official method, because it is selective,
mol L . The color change was determined visually
-1
simple, inexpensive, of high sensitivity, and uses
and monitored instrumentally. a smaller volume of reagents of low toxicity.
The method was applied successfully to raw ma- Keywords: lead, dithizone, sodium lauryl
terial analysis. Its performance show to be better sulfate, pharmaceutical raw materials.
1. Introduccin
El plomo (Pb) es un metal txico que se El mtodo oficial para la determinacin
acumula en el organismo y, aun en bajos del contenido lmite de Pb codificado en
niveles de exposicin, puede provocar alte- la Farmacopea de los Estados Unidos (6)
raciones muy diversas, incluyendo inmu- y en la Farmacopea Argentina (7) se basa
notoxicidad, toxicidad reproductiva y dao en la generacin de un complejo coloreado
neurolgico, siendo la mayora de sus efec- insoluble en agua, formado por plomo
tos irreversibles. Se ha confirmado que, ditizona [Pb(HDz)2] (Fig. 1), seguido de
cuanto mayor es el nivel de exposicin a extracciones sucesivas con cloroformo, uti-
este metal, ms aumentan los efectos aso- lizando aproximadamente medio litro del
ciados a l (1, 2). solvente por muestra que se analiza. Esta
El Pb puede encontrarse como impureza gran demanda de solvente y de tiempo de
en materias primas de la industria farmacu- trabajo trae aparejado un alto costo del
tica, tanto en principios activos como exci- ensayo, adems del peligro de su manipu-
pientes, proviniendo del proceso de sntesis lacin y la generacin de residuos conta-
o por contaminacin (3, 4, 5). El contenido minantes. El cloroformo es txico, puede
lmite de plomo permitido por las farmaco- causar efectos nocivos en el sistema ner-
peas vara ampliamente para cada sustan- vioso central, hgado y rin; adems es
cia, encontrndose por lo general entre 2.0 considerado carcingeno humano poten-
y 20.0 g g-1. Estas variaciones en los conte- cial (8, 9, 10).
nidos lmites permitidos en las materias pri- Actualmente existe un nuevo desafo
mas se deben a la naturaleza de la sustan- para las investigaciones en qumica anal-
cia, la ruta de sntesis o purificacin que se tica impulsado por el creciente auge de la
emplea en su obtencin, como tambin a qumica verde: el de aplicar metodologas
la utilizacin que se har de la misma en la amigables con el medio ambiente, es decir,
formulacin farmacutica. Segn establece que utilicen reactivos no txicos o peque-
USP 37, los productos farmacuticos no as cantidades de los mismos (11, 12).
deben aportar ms de 5 g de plomo por da Para estos fines, los solventes organo-
cuando se administran en dosis habituales. clorados pueden reemplazarse por el uso
En este sentido, es indispensable el control de surfactantes que, debido a su estructura
riguroso de las cantidades de Pb que pudie- molecular anfiptica, permiten aumentar la
ran estar presentes en las materias primas solubilidad de compuestos orgnicos no
para la produccin de medicamentos a fin polares en agua mediante la formacin de
de asegurar la calidad de las mismas. micelas (Fig. 2) (13, 14, 15, 16).
Torregiani y col. Desarrollo de un mtodo para la determinacin del contenido lmite... 25
Figura 1. Estructura molecular del complejo Figura 2. Esquema de una micela de SDS en
plomoditizona medio acuoso, conteniendo en su interior hidr-
fobo el complejo plomoditizona [Pb(HDz)2].
DCC 1 DCC 2
factores entorno experimental rplicas punto factores entorno experimental rplicas punto
[-1; +1] central [-1; +1] central
a
Concentracin de SDS en mol L-1.
b
Relacin entre volmenes de solucin muestra y solucin de ditizona (3x10-5 mol L-1) en SDS.
Torregiani y col. Desarrollo de un mtodo para la determinacin del contenido lmite... 27
0,25
0,20
Absorbancia
0,15
0,10
0,05
0,00
420 450 480 510 540 570 600 630
Longitud de onda (nm)
Est a Alt a
pH SDS b
M/D c
Ad
a
Est: orden estndar del punto en el diseo, Alt: orden aleatorio en el que se realiz el experimento.
b
Concentracin de SDS en mol L-1.
c
Relacin entre volmenes de solucin muestra y solucin de ditizona (3x10-5 mol L-1) en SDS.
d
Diferencia de absorbancia (=525 nm) entre solucin estndar de Pb y solucin blanco.
Torregiani y col. Desarrollo de un mtodo para la determinacin del contenido lmite... 29
Est a Alt a
pH SDS b
Ad
a
Est: orden estndar del punto en el diseo, Alt: orden aleatorio en el que se realiz el experimento.
b
Concentracin de SDS en mol L-1.
c
Diferencia de absorbancia (=525 nm) entre solucin estndar de Pb y solucin blanco.
Tabla 4. Anlisis de varianza para la superficie de respuesta del modelo completo obtenido.
a
grados de libertad. // b valores p menores a 0,050 indican significancia.
30 FABICIB 2014 18
Tabla 5. Anlisis de varianza para la superficie de respuesta del modelo lineal simplificado obtenido.
a
grados de libertad. // b valores p menores a 0,050 indican significancia.
Torregiani y col. Desarrollo de un mtodo para la determinacin del contenido lmite... 31
racin del blanco se agregaron 10,0 mL de factorios para el tipo de ensayo desarro-
agua de smosis a un tubo de Nessler; en llado, ya que indican que el mtodo es unas
el caso del estndar se adicionaron 10,0 nueve veces ms sensible para plomo que
mL de solucin estndar de plomo de 1 mg para el cadmio y unas doce veces ms
L-1. La muestra tratada se agreg disuelta que para el mercurio. Las normas interna-
en 10,0 mL de agua de smosis. Poste- cionales para validacin no establecen el
riormente, se agregaron a cada tubo las valor mnimo que debe alcanzar este coe-
siguientes soluciones: 100 L de SCA; 400 ficiente para considerarse satisfactorio; sin
L de SCP y 2,0 mL de solucin reguladora embargo, de sus valores se puede deducir
de TrisHCl pH= 6,80 para lograr un pH que las materias primas deberan estar alta-
final de 7,60. Se homogeniz por inversin. mente contaminadas por cadmio (ms de
Se agregaron 10,0 mL de solucin de diti- 88 g g-1) o mercurio (ms de 117 g g-1)
zona (3x10-5 mol L1) en SDS (0,15 mol L-1). para dar un ensayo falso positivo. En estos
Se homogeniz y se ley inmediatamente casos debera confirmarse la naturaleza de
en espectrofotmetro a = 525 nm. la contaminacin mediante la utilizacin de
La lectura espectrofotomtrica se puede una tcnica analtica especfica, tal como
obviar, ya que la diferencia de color entre absorcin atmica.
la solucin blanco (amarillo) y la solucin
estndar (rojoanaranjado) puede detec-
tarse a simple vista. Tabla 6. Valores de absorbancia (A) a =525
nm de soluciones blanco y estndares de 10
5.3. Validacin mg L-1 de impurezas metlicas adicionadas
En la Tabla 6 se detallan las absorban- con 100 L de SCA y 400 L SCP. Conc. SDS
cias obtenidas para las soluciones blanco, = 0,015 mol L-1; conc. ditizona = 3x10-5 mol
estndar de Pb y de cada posible interfe- L-1; solucin reguladora de Tris-HCl pH = 6,80.
rencia estudiada (Hg, Ag, Cu, Cd y Zn).
Como puede observarse para Ag, Cu y Impureza A A
Zn, la seal obtenida es comparable con el
blanco, por lo que se concluye que estos Blanco 0,114 0,000
Pb 0,183 0,069
metales no producen interferencia en las
Hg 0,120 0,006
condiciones ensayadas.
Ag 0,115 0,001
Para Hg y Cd, cuyas seales son signi-
Cu 0,116 0,002
ficativas, se calcularon los coeficientes de
Cd 0,122 0,008
selectividad (Cs): Zn 0,001
0,115
6. Conclusiones
Se logr desarrollar, optimizar y validar un 4. Gorog, S. (2007). Drug safety, drug qua-
mtodo analtico eficiente, rpido y seguro lity, drug analysis. J. Pharm. Biomed. Anal., 48:
para la determinacin de concentraciones 247253.
trazas de plomo en materias primas de la 5. ICH (2006). Impurities in new drug substances
industria farmacutica, que puede aplicarse Q3A (R2). International Conference on Harmoni-
en reemplazo del mtodo oficial en los an- zation. Genova, Suiza.
lisis de control de calidad de materias pri- 6. USP 37: The United States Pharmacopeia
mas y medicamentos. El nuevo mtodo, (37th ed. 2014), United States Pharmacopeia
que puede aplicarse como ensayo lmite en Convention, Rockville.
los controles de rutina, result ser superior 7. Farmacopea Argentina. 7 edicin (2003).
al mtodo oficial, ya que es selectivo, ms 8. Fawell, J. (2000). Risk Assessment Case
sencillo, econmico y de mayor sensibili- StudyChloroform and Related Substances.
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puede utilizarse en determinaciones cuanti- Assessment. Regul. Toxicol. Pharm. 26: 142155.
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