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NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE
MICROBIOLOGA
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1.- INTRODUCCIN.
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2.- PREVENCIN DE LA CONTAMINACIN EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA.
LEGISLACIN (R.D. 664/97).
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3.- CLASIFICACIN DE LOS AGENTES BIOLGICOS SEGN EL RIESGO.
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4.- VIAS DE INFECCIN EN EL ORGANISMO.
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5.- TIPOS DE BARRERAS O MEDIOS DE CONTENCIN. MEDIOS DE PROTECCIN
PERSONAL.
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6.- NORMAS DE TRABAJO EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA.
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7.- LABORATORIO DE MICROBIOLOGA.
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1.- INTRODUCCIN
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El trabajo con muestras biolgicas puede implicar riesgos para los trabajadores debido a la
posibilidad de la presencia de agentes infecciosos en el material objeto de estudio.
Los agentes biolgicos peligrosos pueden transmitirse, en el laboratorio, por va respiratoria
(inhalacin), va parenteral (inoculacin) y va digestiva (ingestin). La combinacin del nmero de
Os (MO) en el ambiente, la virulencia de los mismos y la resistencia del individuo determinar en
ltima instancia si la persona contraer o no la enfermedad.
En el medio ambiente del laboratorio es importante considerar no slo el riesgo asociado a
la presencia de agentes infecciosos sino tambin comprender que la exposicin a otros elementos
presentes en el ambiente (agentes qumicos y/o fsicos) pueden producir un efecto sinrgico.
Desde los inicios de la Microbiologa a mediados del siglo XIX, se notificaron y registraron
infecciones accidentales resultantes de la manipulacin de Os patgenos en los laboratorios. A par-
tir de 1950 empiezan a aparecer estudios publicados donde se presentan y analizan casos de infec-
cin de origen laboral en trabajadores de laboratorios.
Sin embargo, a pesar de que existe un riesgo en el trabajo en los laboratorios, la informacin
que se puede obtener, en trminos de frecuencia o de grado de severidad, de los casos de infeccio-
nes en el laboratorio, es escasa.
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La seguridad en el laboratorio:
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- Es aquella situacin carente de riesgos o con un riesgo limitado, que resulta del cumplimiento de
una serie de normas y prcticas.
- En el laboratorio existen unos factores potenciales de riesgo que pueden producir lesiones o en-
fermedades y que hay que identificar.
- La seguridad es, por tanto, un conjunto de protocolos de trabajo que deben incluir el conocimiento
de los riesgos, las normas de prevencin y las normas de actuacin en caso de accidente.
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2.- PREVENCIN DE LA CONTAMINACIN EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA.
LEGISLACIN (R.D. 664/97)
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El Real Decreto 664/1997, de 12 de mayo, sobre la proteccin de los trabajadores contra los
riesgos relacionados con la exposicin a agentes biolgicos durante el trabajo (B.O.E. 24 de mayo
de 1997), es el marco legal que fija los criterios, acciones y responsabilidades en trabajos con expo-
sicin a agentes biolgicos.
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Este R.D. 664/1997 es adaptado en funcin del progreso tcnico por la Orden de 25 de Mar-
zo de 1998. Existe adems una nueva Directiva 200/54/CE del Parlamento Europeo y del Consejo,
de 18 de septiembre de 2000, sobre proteccin de los trabajadores contra los riesgos relacionados
con la exposicin a agentes biolgicos durante el trabajo.
En el Captulo II del R.D. 664/1997, Obligaciones del Empresario, se recogen las medidas
preventivas generales aplicables ante una exposicin a agentes biolgicos. Se comentan a conti-
nuacin los aspectos generales.
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* Evaluacin del riesgo para la seguridad y salud de los trabajadores mediante la determinacin de
la ndole, el grado y la duracin de la exposicin de los trabajadores. Cuando el trabajo implique la
exposicin a varios grupos de agentes biolgicos, los riesgos se evaluarn basndose en el peligro
presentado por el conjunto de todos ellos. Esta evaluacin se repetir peridicamente y siempre que
se modifiquen las condiciones que puedan significar un cambio en el riesgo presente.
* Cuando la naturaleza de la actividad lo permita, se sustituirn los agentes biolgicos peligrosos
por otros que no lo sean.
* Cuando sea necesario usar agentes biolgicos peligrosos, se reducir el riesgo de exposicin al
nivel ms bajo posible. Se establecern procedimientos de trabajo adecuados y se reducir al mni-
mo el nmero de trabajadores expuestos. Se establecern medidas de contencin correspondientes y
se definirn los niveles de contencin necesarios segn el Anexo IV.
* Los laboratorios que manipulen material con respecto al cual existe incertidumbre acerca de la
presencia de agentes biolgicos que puedan causar una enfermedad en el trabajador, pero que no
tengan como objetivo manipular los agentes biolgicos como tales (cultivarlos o concentrarlos), de-
beran adoptar por lo menos el nivel de contencin 2.
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4.- VIAS DE INFECCIN EN EL ORGANISMO
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Las principales vas de entrada de contaminacin por microorganismos en el laboratorio son:
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A travs de la piel o las mucosas, inoculacin (va parenteral), debido normalmente a la
utilizacin de ropas sucias, salpicaduras o derrames de cultivos en el suelo, mesa de trabajo
y otras superficies. Esta penetracin se ver muy favorecida si el estado de integridad de la
piel es deficiente: cortes o excoriaciones de la piel con vidrio contaminado. (Streptococcus,
Staphylococcus)
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A travs del aparato digestivo (va digestiva), debido a una inadecuada limpieza de las ma-
nos, onicofagia, consumir bebidas y comidas y fumar en el lugar de trabajo. (Salmonella,
Shigella, Campilobacter)
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A travs del aparato respiratorio (va respiratoria), por inhalacin de aerosoles formados en
procesos de centrifugacin, mezclado, trituracin, flameado, etc. con una distribucin de
tamao de partcula suficientemente pequeo para permitir su entrada en el pulmn. (Bruce-
lla, Mycobacterium, Tuberculosis)
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Prevencin de la contaminacin por va parenteral:
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* Utilizar guantes.
* Evitar cortes (no romper material de vidrio).
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Prevencin de la contaminacin por va digestiva:
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* Evitar fumar, comer o beber en el laboratorio.
* No pipetear con la boca.
* No llevarse ningn objeto a la boca.
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Prevencin de la contaminacin por va respiratoria:
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* Hay que evitar la formacin de aerosoles o protegerse de ellos usando mascarillas.
* Los aerosoles se forman por dispersin de los microorganismos en el aire cuando: se agitan lqui-
dos de cultivo; se abren cultivos en tubos; se siembra o se manejan las asas de siembra sin cuidado;
se flamean las asas; se centrifugan muestras.
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5.- TIPOS DE BARRERAS O MEDIOS DE CONTENCIN. MEDIOS DE PROTECCIN
PERSONAL.
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Los principios de contencin de la contaminacin microbiolgica suponen la creacin de una serie
de barreras.
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Barreras primarias:
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- Se localizan en torno al riesgo (rodeando al microorganismo).
- Son tcnicas y equipos creados para la contencin de microorganismos e impedir su acceso directo
al operador o su difusin por el laboratorio en forma de aerosoles.
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Una barrera primaria es la desinfeccin de la zona de trabajo; otra barrera primaria es la zona asp-
tica creada en torno al mechero Bunsen, otra la campana de flujo laminar, trabajar con orden y lim-
pieza.
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Barreras secundarias:
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- Se localizan alrededor del operador.
- Actan como red de seguridad por si fallan las barreras primarias.
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Algunas son: bata, guantes, mascarilla, lavado de manos, recogida del pelo, etc...
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Barreras terciarias:
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- Se localizan alrededor del laboratorio.
- Impiden que cualquier germen que no sea contenido por las barreras primarias y secundarias al-
cance a la comunidad.
- Estn relacionadas con el diseo arquitectnico del laboratorio.
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Ejemplos: no debe salir nada del laboratorio de microbiologa, prohibicin de paso de personal no
autorizado.
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Las medidas de contencin que han de tomarse y en qu grado han de cumplirse para cubrir
cada nivel de contencin quedan establecidas en el Anexo IV. Se refieren tanto a la ubicacin del
lugar, a la ventilacin, como al personal que puede acceder.
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CABINAS DE SEGURIDAD BIOLGICA
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Las cabinas de seguridad biolgica son cabinas proyectadas para ofrecer proteccin al usua-
rio y al ambiente de los riesgos asociados al manejo de material infeccioso y otros materiales bio-
lgicos peligrosos. Debern usarse siempre que se realicen tareas con grandes posibilidades de pro-
ducir aerosoles peligrosos.
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Se pueden clasificar en cabinas de seguridad biolgica de CLASE I, CLASE II Y CLASE
III.
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Cabinas de seguridad biolgica de CLASE I, el aire procede del local, se introduce por la
abertura frontal y es extrado al 100% de la misma. Unas correctas dimensiones de la abertura fron-
tal (20 cm) y de la velocidad de entrada de aire (0,4-1,0 m/s) aseguran un adecuado grado de pro-
teccin para el trabajador. El aire extrado de la cabina es descontaminado antes de su vertido a la
atmsfera a travs de filtros HEPA (High Efficiency Particulate Air). El uso de estas cabinas no ga-
rantiza la proteccin del producto manipulado.
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Cabinas de seguridad biolgica de CLASE II, protegen a los trabajadores de los materia-
les manipulados y tambin dichos materiales de la contaminacin externa. La proteccin del traba-
jador viene dada por la creacin de una barrera de aire formada por la entrada de aire desde el local,
a travs de la abertura frontal, y por un flujo descendente de aire filtrado estril, que recorre el rea
de trabajo.
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Existen bsicamente dos tipos de cabinas de seguridad biolgica de CLASE II, el A y el B,
que difieren en la proporcin de aire recirculado, en las velocidades de aire en la abertura frontal y
sobre el rea de trabajo.
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Cabinas de seguridad biolgica de CLASE III, estn hermticamente selladas, separando
completamente al trabajador del trabajo que est realizando mediante barreras fsicas, el panel fron-
tal est completamente cerrado. El aire es tomado del local o del exterior y filtrado (filtro HEPA).
En su extraccin (100%), suele haber dos filtros HEPA montados en series para la completa purifi-
cacin del aire extrado. Este tipo de cabinas ofrece el grado mximo de proteccin al trabajador,
evitando tambin la exposicin por contacto. Son las usadas en laboratorios donde se manipulen
agentes biolgicos de los grupos 3 y 4.
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6.- NORMAS DE TRABAJO EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
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Cuando se trabaje en un laboratorio de Microbiologa se deben tener en cuenta las siguientes
normas generales fundamentales y base de una prctica segura de laboratorio:
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1. Evitar toda contaminacin del material a estudiar. Las manos del operador, la mesa de traba-
jo, todos los objetos usuales y, sobre todo, el aire circundante, contienen normalmente nume-
rosos MO, debe evitarse su contacto accidental.
2. Evitar toda contaminacin por el material bacteriano estudiado. Cuando se suponga la pre-
sencia de MO patgenos, tomar precauciones, tanto para el operador como para su entorno.
Esta regla debe se tendr en cuenta, sea cual sea el MO estudiado. Todo material contamina-
do debe ser esterilizado antes de ser desechado.
3. Nunca se abrir ningn recipiente donde se suponga la presencia de MO, fuera de zona asp-
tica y no se dejar abierto si contiene elementos potencialmente patgenos.
4. Todas las muestras deben ir claramente rotuladas y etiquetadas.
5. El operador debe conocer los riesgos que su trabajo implica.
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Ms concretamente, para un laboratorio de enseanza en el que se trabaja con MO no pat-
genos bien conocidos y patgenos oportunistas, se observarn las siguientes normas:
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Las puertas del laboratorio permanecern cerradas mientras se trabaja. Evitar las corrientes
de aire y desplazamientos bruscos.
Trabajar sentado y no hablar cuando se encuentra trabajando.
Las mesas de trabajo se desinfectan diariamente al terminar el trabajo y cada vez que sea
necesario (derrame de productos contaminados).
Para pipetear utilizar siempre dispositivos de aspiracin mecnica. No se deber insuflar aire
en un lquido que contenga agentes infecciosos, tras ello sumergir las pipetas contaminadas
en desinfectante antes de otras tcnicas de descontaminacin.
No comer, morder los lpices o bolgrafos, aplicarse cosmticos, fumar o tener alimentos en
el laboratorio. El pelo largo debe recogerse.
Lavarse y desinfectarse las manos antes, y sobre todo, despus del trabajo.
Deber llevar una bata limpia, cerrada y lo suficientemente larga, que se quitar al salir del
laboratorio.