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UNIVERSIDAD DE CUENCA

FACULTAD DE ODONTOLOGA

EFICACIA DEL CHITOSAN EN LA REMOCIN DEL HIDRXIDO DE


CALCIO DE CONDUCTOS RADICULARES EN DIENTES BOVINOS

TESIS DE GRADO PREVIA A LA OBTENCIN DEL TTULO DE


ESPECIALISTA EN ENDODONCIA

AUTOR: Odont. Dborath Estefana Narvez Miranda

C.I. 0605186741

DIRECTOR: Odont. Ximena Espinosa

C.I. 1104021546

CUENCA-ECUADOR

2017
UNIVERSIDAD DE CUENCA

RESUMEN

Objetivo: Comparar la eficacia del Chitosan al 0,2% y el EDTA al 17% en la


remocin de hidrxido de calcio preparado en diferentes vehculos. Materiales y
mtodos: 132 incisivos bovinos fueron preparados, los dientes se dividieron
longitudinalmente y en la porcin apical se realiz un surco que se llen con
hidrxido de calcio en vehculo oleoso o viscoso de acuerdo a la aleatorizacin
correspondiente, posteriormente se reensamblaron y se incubaron a 37C y
100% de humedad relativa por 7 das, luego los especmenes de cada grupo se
subdividieron en dos para su irrigacin con: Chitosan al 0.2% y EDTA al 17%.
La evaluacin de la eficacia de remocin se realiz con dos
observadoresutilizando un sistema de puntuacin descrita por van der Sluis. La
tabulacin y el anlisis de datos se realiz en SPSS vs.21 y la prueba
estadstica Chi Cuadrado. Resultados: Existe diferencia significativa entre los
dos quelantes cuando se utilizaron para remover el hidrxido de calcio
asociado con propilenglicol (Calen), siendo el Chitosan al 0,2% ms efectivo
(p<0,0001). Pero no hubo diferencia significativa para la remocin de hidrxido
de calcio preparado con aceite de silicona (Metapex) (p=0,462). Conclusiones:
Ningn quelante fue suficiente para eliminar por completo el hidrxido de calcio.
Sin embargo, el Chitosan al 0,2% se comporta mejor para la remocin del
hidrxido de calcio asociado con propilenglicol. Y el hidrxido de calcio
mezclado con aceite de silicona resulta en la medicacin ms difcil e inestable
de remover.

Palabras claves: Hidrxido de calcio, EDTA, Chitosan.

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ABSTRACT

Objective: To compare the efficiency of Chitosan at 0.2% and EDTA at 17% in


the removal of calcium hydroxide prepared in different vehicles. Materials and
methods: 132 bovine incisors were prepared, the teeth were divided
longitudinally and in the apical portion a groove was made that was filled with
calcium hydroxide in oily or viscous vehicle according to the corresponding
randomization, later they were reassembled and incubated to 37 C and 100%
relative humidity for 7 days, then the specimens from each group were
subdivided into two for irrigation with: 0.2% Chitosan and 17% EDTA. The
evaluation of removal efficiency was performed with two observers using a
scoring system described by van der Sluis. The tabulation and data analysis
was performed in "SPSS vs.21" and the statistical test "Chi Square". Results:
There was a significant difference between the two chelators when they were
used to remove calcium hydroxide associated with propylene glycol (Calen),
with Chitosan being 0.2% more effective (p<0.0001). But there was no
significant difference for the removal of calcium hydroxide prepared with silicone
oil (Metapex) (p=0.462). Conclusions: No chelator was sufficient to completely
eliminate calcium hydroxide. However, 0.2% Chitosan performs best for the
removal of the calcium hydroxide associated with propylene glycol. And calcium
hydroxide mixed with silicone oil results in the most difficult and unstable
medication to remove.

Key words: Calcium hydroxide, EDTA, Chitosan.

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NDICE DE CONTENIDOS

RESUMEN ...................................................................................................................... 2
ABSTRACT ..................................................................................................................... 3
NDICE DE CONTENIDOS .......................................................................................... 4
NDICE DE TABLAS Y GRFICOS ............................................................................ 5
CLUSULA DE LICENCIA Y AUTORIZACIN PARA PUBLICACIN EN EL
REPOSITORIO INSTITUCIONAL ............................................................................... 6
CLUSULA DE PROPIEDAD INTELECTUAL ......................................................... 7
DEDICATORIA ............................................................................................................... 8
AGRADECIMIENTO ...................................................................................................... 9
1. INTRODUCCIN .................................................................................................. 10
2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACIN ............................ 11
3. MARCO TERICO............................................................................................... 13
3.1 MEDICACIN INTRACONDUCTO ............................................................ 13
3.2 HIDRXIDO DE CALCIO ............................................................................ 13
3.2.1 Mecanismo de accin ........................................................................... 14
3.2.2 Vehculos................................................................................................. 15
3.2.3 Remocin del hidrxido de calcio ....................................................... 17
3.2.4 Mtodos qumicos para la remocin ................................................... 17
4. OBJETIVOS .......................................................................................................... 20
4.2 Objetivo general ............................................................................................ 20
4.3 Objetivos especficos .................................................................................... 20
5. HIPTESIS............................................................................................................ 21
6. MATERIALES Y MTODOS .............................................................................. 22
6.2 Tipo de estudio .............................................................................................. 22
6.3 Universo y muestra ....................................................................................... 22
6.4 Variables ......................................................................................................... 23
6.5 Procedimiento ................................................................................................ 23
6.6 Tcnica de observacin ............................................................................... 27
6.7 Anlisis de datos ........................................................................................... 28
7. RESULTADOS ...................................................................................................... 30
8. DISCUSIN........................................................................................................... 34

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9. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES................................................... 37
10. LIMITACIONES ................................................................................................. 37
11. BIBLIOGRAFA ................................................................................................. 38
12. ANEXOS ............................................................................................................ 44

NDICE DE TABLAS Y GRFICOS

Tabla 1. Distribucin de la muestra .......................................................................... 30


Tabla 2. Nmero y porcentaje de remocin de hidrxido de calcio de los grupos
experimentales ............................................................................................................. 30
Tabla 3. Nmero y porcentaje de eficacia de remocin de hidrxido de calcio de
los grupos experimentales ......................................................................................... 31
Tabla 4. Remocin de hidrxido de calcio (Calen) con Chitosan y EDTA ......... 31
Tabla 5. Eficacia de remocin de hidrxido de calcio (Calen) con Chitosan y
EDTA ............................................................................................................................. 32
Tabla 6. Remocin de hidrxido de calcio (Metapex) con Chitosan y EDTA .... 32
Tabla 7. Eficacia de remocin de hidrxido de calcio (Metapex) con Chitosan y
EDTA ............................................................................................................................. 33
Tabla 8. Operacionalizacin....................................................................................... 44

Figura 1. Recoleccin y almacenamiento de los especmenes ........................... 45


Figura 2. Decoronacin y divisin de los especmenes ........................................ 45
Figura 3. Especmenes divididos longitudinalmente y numerados ...................... 46
Figura 4. Colocacin de la medicacin y reensamblaje de los especmenes ... 46
Figura 5. Preparacin del Chitosan al 0,2% ............................................................ 47
Figura 6. Irrigacin ....................................................................................................... 47
Figura 7. 40 X de magnificacin. Puntuacin 0 = surco vaco ............................. 48
Figura 8. 40 X de magnificacin. Puntuacin 1 = menos de la mitad del surco
lleno con hidrxido de calcio ...................................................................................... 48
Figura 9. 40 X de magnificacin. Puntuacin 2 = ms de la mitad del surco lleno
con hidrxido de calcio ............................................................................................... 48
Figura 10. 40 X de magnificacin. Puntuacin 3 = surco lleno de hidrxido de
calcio .............................................................................................................................. 49

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CLUSULA DE LICENCIA Y AUTORIZACIN PARA PUBLICACIN EN


EL REPOSITORIO INSTITUCIONAL

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CLUSULA DE PROPIEDAD INTELECTUAL

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DEDICATORIA

A todas aquellas personas que de una u otra manera motivaron, orientaron y


contribuyeron en el desarrollo de esta tesis, de manera especial a mis padres,
hermanos y profesores.

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AGRADECIMIENTO

A Dios mi padre celestial, por el don de la vida y la sabidura para orientar mi


destino.

A mis padres: Rmulo y Mirella por apoyarme en todo momento y brindarme su


amor y confianza, adems de haberme dado la oportunidad de tener una
excelente educacin en el transcurso de mi vida, a mis hermanos: Ismael,
David y Cristian por su cario, amistad y motivacin, a mi novio Michael por
todo el amor y apoyo incondicional.

Mi gratitud tambin a la Universidad de Cuenca y mis maestros quienes me


brindaron sus conocimientos y me formaron como especialista. Le agradezco
de forma especial a la Odont. Ximena Espinosa por confiar en m y guiarme en
la elaboracin de este trabajo.

Y finalmente mi agradecimiento a mis compaeras y amigas de estudio, por el


apoyo y haber hecho de esta etapa un trayecto de vivencias que jams olvidar.

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1. INTRODUCCIN

La instrumentacin mecnica junto con la irrigacin con hipoclorito de sodio


reducen drsticamente la carga bacteriana en el conducto radicular, sin
embargo dado que no todas las bacterias son eliminadas, se opta por el uso
de un medicamento antimicrobiano en el interior del conducto para reducir
dicha carga bacteriana (1).

El hidrxido de calcio ha sido utilizado ampliamente en la terapia endodntica


como medicacin intraconducto por su accin antimicrobiana, inhibicin de la
actividad osteoclstica y reparacin de tejidos (2) (3).

El xito clnico con este material se atribuye principalmente a su pH alcalino y


su capacidad para disociarse rpidamente en iones hidroxilo e iones de calcio
que a su vez dependen del vehculo utilizado para su mezcla. Es importante sin
embargo que antes de obturar los conductos radiculares se lleve a cabo la
remocin completa del hidrxido de calcio por la influencia negativa que
pueden traer los residuos en el sellado final (4) (5), al respecto Lambrianidis y
cols., encontraron que una considerable cantidad de hidrxido de calcio se
mantuvo unido a las paredes del conducto radicular despus de la
instrumentacin y la irrigacin con varias soluciones (6). Calt y Serper tambin
determinaron que cuando el hidrxido de calcio no se remueve completamente
del conducto radicular, el sellador no penetr en los tbulos dentinarios (5)
comprometiendo el xito del tratamiento endodntico, es as que varios
mtodos y agentes irrigantes se han utilizado para cumplir con la remocin del
mismo del sistema de conductos radiculares.

Por lo tanto, el objetivo de este estudio es comparar la eficacia del Chitosan al


0,2% y el EDTA al 17% en la remocin de hidrxido de calcio preparado en
diferentes vehculos, en surcos simulados de dientes bovinos.

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2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACIN

Para el xito del tratamiento endodntico, es esencial que haya una reduccin
significativa de microorganismos en el sistema de conductos radiculares, por
tanto, la preparacin qumica y mecnica del mismo constituyen los pasos ms
importantes que conducirn al xito o fracaso del tratamiento. Sin embargo,
aun despus de realizada dicha preparacin, las bacterias pueden persistir
dentro de los conductos radiculares, por lo que se hace necesaria la
medicacin intraconducto entre sesiones (7), siendo el medicamento ms
utilizado el hidrxido de calcio por sus propiedades antibacterianas y de
biocompatibilidad (1) (2). La eficacia antibacteriana del hidrxido de calcio se
atribuye a su pH alcalino y a la disociacin en iones calcio e hidroxilo que a su
vez depende del vehculo utilizado para su preparacin (6). Un paso importante
antes de la obturacin final es la remocin completa del hidrxido de calcio
aplicado en el conducto radicular como apsito para el correcto sellado de los
conductos radiculares, ya que su retencin en las paredes de la dentina cambia
las caractersticas de los cementos selladores a base de xido de zinc y
eugenol (7), resina (8) y silicona (9). Sin embargo, al respecto algunos estudios
han encontrado que su remocin es difcil y por ello no se elimina por completo
(10).

Los protocolos de irrigacin sugeridos para la remocin del hidrxido de


calcio previo a la obturacin preconizan el uso de diferentes sustancias
quelantes como el EDTA (cido etilendiaminotetraactico) el cual ha sido
ampliamente utilizado y, el Chitosan que es recomendado en la actualidad por
poseer propiedades como biocompatibilidad, biodegradabilidad, y atoxicidad
(11) caractersticas que podran superar al EDTA. En un estudio al comparar la
eficacia de remocin con estos dos quelantes se determin que tanto el EDTA
al 17% y el Chitosan al 0,2% remueven el hidrxido de calcio preparado en
vehculo acuoso, y que el Chitosan al 0,2% se comport mejor que el EDTA
al 17% en la remocin del hidrxido de calcio preparado en vehculo oleoso
(12). Sin embargo, todava no se ha establecido el efecto del Chitosan para
remover el hidrxido de calcio en vehculo viscoso, el cual tiene una liberacin
ms lenta de los iones hidroxilo y se utiliza en situaciones clnicas que

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requieren medicacin intraconducto por ms tiempo como en la apexificacin


(7), de ah la importancia de conocer que tan eficiente es en dichos casos. Por
ello con el presente estudio se pretende comparar la eficacia del Chitosan al
0,2% versus el EDTA al 17% en la remocin del hidrxido de calcio preparado
en vehculo oleoso y viscoso.

Este estudio beneficiar a estudiantes de odontologa, odontlogos generales y


especialistas al momento de elegir el mejor irrigante para la remocin de
hidrxido de calcio y as mejorar la calidad de sus tratamientos.

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3. MARCO TERICO

3.1 MEDICACIN INTRACONDUCTO

En la terapia endodntica la accin mecnica de los instrumentos, en conjunto


con el flujo y los efectos antibacterianos de las soluciones irrigantes promueven
la eliminacin bacteriana especialmente en el conducto principal. Sin embargo,
los estudios han revelado que la instrumentacin y la irrigacin con hipoclorito
de sodio (NaOCl) no es suficiente para obtener conductos libres de bacterias
(13).

Las bacterias dentro de los tbulos dentinarios son un importante reservorio


durante y despus del tratamiento endodntico. Ocasionalmente, estas
bacterias restantes pueden causar una infeccin persistente que pone en
peligro el resultado de la terapia endodntica (13). Por lo tanto, las estrategias
de tratamiento que se dirigen hacia la eliminacin de la infeccin tubular deben
incluir medicamentos que penetren en los tbulos dentinarios y eliminen las
bacterias (13).

Por ello el uso de la medicacin intraconducto ha sido recomendada


principalmente para eliminar bacterias no afectadas por la preparacin quimio
mecnica (14) y para actuar como barrera fsico qumica impidiendo la
proliferacin de microorganismos residuales previniendo la reinfeccin del
conducto radicular por bacterias de la cavidad oral, cuando el tratamiento se
realiza en varias citas (13).

3.2 HIDRXIDO DE CALCIO

Es el medicamento intraconducto ms comnmente utilizado en endodoncia y


varios estudios clnicos han informado sobre su actividad antibacteriana (1) (2)
(3), que se atribuye principalmente a su pH alcalino y a su capacidad para
disociarse rpidamente en iones hidroxilo e iones calcio (15); adems, desde

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su introduccin en 1920 por Hermann, varias propiedades biolgicas se le han


atribuido, tales como: agente antimicrobiano (16), disolvente de tejidos (17),

inhibidor de reabsorcin (18), e inductor de reparacin por formacin de tejido

duro (13) relacionado con la liberacin de iones calcio por la activacin del
adenosin trifosfato dependiente del calcio (19).

3.2.1 Mecanismo de accin

La mayora de los patgenos endodnticos son incapaces de sobrevivir al


ambiente alcalino proporcionado por el hidrxido de calcio, cuyo pH es de
aproximadamente 12,5 (1).

La actividad antimicrobiana est relacionada con la liberacin de los iones


hidroxilo en un medio acuoso (20), estos iones son radicales libres altamente
oxidantes que muestran una reactividad extrema, reaccionando con varias
biomolculas, Sus efectos letales sobre las clulas bacterianas se atribuyen
entonces probablemente a los siguientes mecanismos (13):

Dao a la membrana citoplasmtica

El alto pH del hidrxido de calcio altera la integridad de la membrana


citoplasmtica por medio de lesiones qumicas a los componentes orgnicos o
mediante la destruccin de fosfolpidos o cidos grasos insaturados de la
membrana citoplasmtica durante el proceso de peroxidacin (21).

Desnaturalizacin de protenas

Las enzimas tienen una actividad y estabilidad ptima en un estrecho rango de


pH, que gira alrededor de la neutralidad. La alcalinizacin proporcionada por el

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hidrxido de calcio induce la ruptura de los enlaces inicos que mantienen la


estructura terciaria de las protenas (13) provocando que muchas funciones
celulares pueden ser afectadas por el pH, incluyendo las enzimas que son
esenciales para el metabolismo celular. La inactivacin enzimtica bacteriana
en condiciones extremas de pH durante un largo perodo de tiempo se ha
comprobado que es irreversible (21).

Dao al ADN

Los iones hidroxilo reaccionan con el ADN bacteriano e inducen la divisin de


los filamentos, por consiguiente, los genes se pierden, la replicacin del ADN
se inhibe y la actividad celular se desorganiza. Los radicales libres tambin
pueden inducir mutaciones letales. La evidencia cientfica sugiere que los tres
mecanismos pueden ocurrir. Por lo tanto, es difcil establecer, en un sentido
cronolgico, cual es el principal mecanismo implicado en la muerte de las
clulas bacterianas despus de la exposicin a una base fuerte (13).

3.2.2 Vehculos

Para que el hidrxido de calcio acte eficazmente como un apsito


intraconducto, los iones hidroxilo y calcio deben disociarse y ser capaces de
difundirse a travs del remanente de tejido dentinario (13), al tratarse de un
polvo seco, cuando se usa solo, resulta difcil de manejar por lo que se asocia
con diferentes sustancias y vehculos para mejorar su aplicacin en el conducto
(7). Es as que el vehculo juega un papel muy importante en la accin biolgica
del hidrxido de calcio (22).

Una gran variedad de sustancias se ha utilizado como vehculos para el


hidrxido de calcio, los cuales no deben cambiar sus propiedades o a su vez
potenciar los efectos antibacterianos (13), de esta manera a los vehculos se
los puede dividir entonces en: acuosos, viscosos y oleosos.
ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 15
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Vehculos acuosos

La baja solubilidad en agua del hidrxido de calcio y el alto pH que se consigue


al mezclarlo en soluciones acuosas son los responsables de los efectos
antimicrobianos. Los vehculos acuosos comnmente utilizados son: solucin
salina, suero fisiolgico y anestsicos (23). Las soluciones acuosas en general
promueven una liberacin rpida de iones y deben utilizarse en situaciones
clnicas que impliquen exudado intenso (22).

Vehculos viscosos

Entre ellos estn: glicerina, polietilenglicol, propilenglicol son sustancias


solubles en agua que liberan los iones calcio e hidroxilo ms lentamente
durante perodos prolongados (22).

Se ha reportado que el propilenglicol tiene una accin antibacteriana contra


microorganismos que se encuentran con mayor frecuencia en los conductos
radiculares infectados y al mezclarlo con el hidrxido de calcio le imparte
excelentes cualidades de manipulacin por ello sugiri su aplicacin ms
amplia en endodoncia (19).

Vehculos oleosos

Las pastas que contienen vehculos aceitosos como: aceite de oliva, aceite de
silicona, paramonoclorofenol alcanforado, metacresilacetato, eugenol han sido
usadas en situaciones clnicas que requieren una disociacin inica muy lenta,
es decir, un relleno permanente de la raz para defectos de perforaciones o
reabsorciones (22). Tambin se ha determinado que los vehculos aceitosos

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aumentan los efectos antimicrobianos del hidrxido de calcio contra E. faecalis


y otras bacterias (24).

3.2.3 Remocin del hidrxido de calcio

El hidrxido de calcio que permanece en las paredes de dentina puede afectar


la penetracin de cementos selladores en los tbulos dentinarios y aumentar la
filtracin apical por lo tanto, se recomienda la remocin completa del mismo
antes de la obturacin final (25) (26). Desafortunadamente despus de la
liberacin de iones hidroxilo, esta pasta se endurece y forma una barrera fsica
que es difcil de eliminar (27).

Se han usado diferentes soluciones de irrigacin, tales como solucin salina,


suero fisiolgico, agua, NaOCl, EDTA y cido ctrico, solos o en combinacin
para eliminar el hidrxido de calcio, y est bien establecido que el NaOCl y la
solucin salina no elimina por completo dicha medicacin. Sin embargo las
soluciones cidas, como EDTA y cido ctrico, son significativamente ms
eficaces que el NaOCl o el agua por lo que se utilizan con mayor frecuencia
para este efecto (26).

3.2.4 Mtodos qumicos para la remocin

EDTA

Nygard Ostby en 1957 introdujo agentes quelantes en endodoncia para la


preparacin de los conductos radiculares estrechos y calcificados. La quelacin
es un proceso fsico-qumico que induce la absorcin de iones positivos
multivalentes, reacciona con los iones calcio en los cristales de hidroxiapatita y
provoca cambios en la microestructura de la dentina (28). El cido
etilendiaminotetraactico (EDTA) fue el primer quelante utilizado en
odontologa, su uso es una prctica comn en el tratamiento de endodoncia
para eliminar el componente inorgnico que queda en el sistema de conductos

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radiculares durante el tratamiento (29) y complementa la limpieza de los


conductos radiculares, es un cido aminopolicarboxlico y un slido incoloro,
soluble en agua cuya frmula es [ ] (30). Se utiliza
principalmente como irrigante final en una concentracin que vara de 15% a
17% como una solucin de sal disdica (31). Su reaccin con iones de calcio
en la dentina da lugar a la quelacin del calcio dependiendo del tiempo y del pH,
promoviendo la descalcificacin de la dentina a profundidades aproximadas de
20 - 30 m dentro de un perodo de 5 minutos (11). Esta propiedad ha hecho
del EDTA una opcin qumica para la eliminacin de la medicacin
intraconducto con hidrxido de calcio como lo demuestran varios estudios (6)
(9) (15) (32) que han puesto a prueba su capacidad de remocin con
resultados variables.

CHITOSAN

Es un polisacrido natural elaborado por la desacetilacin de la quitina cuya


frmula es [ ] , se encuentra en el exoesqueleto de crustceos
como: cangrejos, camarones y conchas (33), est dotado de propiedades de
biocompatibilidad, biodegradabilidad, atoxicidad y alta capacidad de quelacin
(11).

Esta sustancia se la utiliza principalmente en las reas de la medicina y la


industria farmacutica (antibacteriano, agente antitumoral, acelerador de la
curacin de heridas), biotecnologa (enzima, portador de clulas, resina de
cromatografa), medio ambiente (tratamiento de aguas), agricultura
(preparacin de semillas), cosmticos y alimentos (acelerador de absorcin de
hierro y calcio, fuente de fibra) (11) (12).

En odontologa, se ha demostrado su efecto antifngico contra la Candida


Albicans y su adicin a la pasta de hidrxido de calcio como un medicamento
intraconducto promueve la liberacin prolongada de iones de calcio (11),
tambin se ha utilizado como una membrana de barrera para la terapia
periodontal (12), se le atribuyen efectos antimicrobianos contra un amplio

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espectro de bacterias gram-positivas y gram-negativas, por ello se ha sugerido


como irrigante final durante el tratamiento del conducto radicular con el doble
beneficio de eliminar la capa de barrillo dentinario e inhibir la recolonizacin
bacteriana en la dentina (34). Adems, tiene una alta capacidad de quelacin
para diferentes iones metlicos en condiciones cidas. En un estudio (11) el
Chitosan al 0,2% elimin efectivamente la capa residual de barrillo de los
conductos radiculares despus de la instrumentacin. Su abundancia en la
naturaleza y bajos costos de produccin han hecho que sea una opcin
ecolgica como alternativa al EDTA (9).

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4. OBJETIVOS

4.2 Objetivo general

Comparar la eficacia del Chitosan al 0,2% y el EDTA al 17% en la remocin de


hidrxido de calcio preparado en diferentes vehculos, en surcos simulados de
dientes bovinos.

4.3 Objetivos especficos

Evaluar la remocin y la eficacia del Chitosan al 0,2% en la remocin del


hidrxido de calcio preparado con vehculo oleoso.
Evaluar la remocin y la eficacia del Chitosan al 0,2% en la remocin del
hidrxido de calcio preparado con vehculo viscoso.
Evaluar la remocin y la eficacia del EDTA al 17% en la remocin de
hidrxido de calcio preparado con vehculo oleoso.
Evaluar la remocin y la eficacia del EDTA al 17% en la remocin de
hidrxido de calcio preparado con vehculo viscoso.

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5. HIPTESIS

H1: La eficacia del Chitosan al 0,2% y del EDTA al 17% en la remocin del
hidrxido de calcio es estadsticamente diferente.

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6. MATERIALES Y MTODOS

6.2 Tipo de estudio

Estudio comparativo in vitro transversal.

6.3 Universo y muestra

Para el clculo del tamao muestral se utiliz la frmula de muestreo para


comparacin de proporciones (35):

[ ]

Donde:

= nmero de especmenes por grupo


= constante de confiabilidad 1,96
= potencia del estudio de 1,645
= valor de la proporcin en el grupo de referencia, placebo, control o
tratamiento habitual es de 0,5
= valor de la proporcin en el grupo del nuevo tratamiento, o tcnica
es de 0,9 (12).
= Media de las dos proporciones y es de 0,7.

Dando un total de = 31 que corresponde al nmero de dientes por grupo, a


esto se le suma 4 especmenes para los grupos control positivo y negativo con
un total de 128 de unidades de estudio.

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6.4 Variables

Remocin de hidrxido de calcio

Eficacia de remocin de hidrxido de calcio (Tabla 1).

6.5 Procedimiento

El diseo experimental se basa en el modelo descrito por Lee y cols, que se ha


aplicado en diversas investigaciones en relacin a la remocin de hidrxido de
calcio (9).

Seleccin de la muestra

Se utilizaron 128 incisivos de bovino que luego de su extraccin se


sumergieron en 0,5% de NaOCl durante 24 horas para eliminar los residuos
orgnicos y obtener la desinfeccin de la superficie (Figura 1), luego se
almacenaron en agua destilada hasta su uso para evitar la deshidratacin (36).

Todos los dientes fueron examinados bajo el microscopio operativo dental


(Labomed LTS Prima DNT), los dientes con fracturas, laceraciones, formacin
incompleta de la raz o reabsorcin fueron excluidos (37).

Preparacin de la muestra

Las coronas de los dientes se seccionaron con un disco de diamante de doble


lado montado en una pieza recta de mano de baja velocidad (NSK) para

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obtener especmenes de 16 mm de longitud, medidos desde el pice (Figura 2)


(37).

La longitud de trabajo se estableci mediante la reduccin de 1 mm de la


longitud real del conducto, que se determin mediante la insercin de una lima
K #15 en el conducto hasta que la punta de la lima sea visible en apical (38).

Las races se instrumentaron a la longitud de trabajo con limas Flexofiles


(Dentsply Maillefer) con una tcnica de fuerzas balanceadas hasta una lima de
dimetro 60, las races de mayor calibre se excluyeron. Se irrig con 2 ml de
solucin de NaOCl al 5% usando una aguja de 30 G entre lima y lima (38).

Divisin de las races

Usando un disco de diamante de doble lado montado en una pieza recta de


mano de baja velocidad (NSK) se cre un surco extendido en toda la longitud
de la raz tanto en mesial como en distal, pero sin llegar a la luz del conducto,
posterior a esto se dividi la raz con la ayuda de un cincel (Figura 2), los
especmenes que no se pudieron ser reensamblar correctamente se
descartaron (37).

Todos los dientes se numeraron utilizando un esfero de tinta azul tanto por
vestibular como lingual y para proteger la tinta se coloc una capa de esmalte
transparente (Figura 3).

Creacin del surco

En el segmento vestibular de los especmenes, una marca de grafito se registr


a 2 mm del pice indicando el extremo apical del surco luego se realiz una
segunda marca a 4 mm de la primera marca que indic el extremo coronal del
surco, esto se realiz con un calibrador manual, los especmenes se sujetaron
a una prensa de mesa para inmovilizarlos y con la ayuda de un disco de

ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 24


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diamante de doble lado de 0,8 cm de dimetro y 0,2 mm de ancho colocado a


en una pieza de mano recta (NSK) se profundiz en dichas marcas hasta que
desaparezcan para la creacin de un surco de 4,0 mm de longitud, 0,2 mm de
ancho y 0,5 mm de profundidad (37).

Colocacin de la medicacin

Se limpi cuidadosamente las mitades de las races usando un cepillo de


dientes, los especmenes se dividieron de forma aleatoria generada por
www.randomizer.org. (37) en dos grupos experimentales de 62 unidades de
estudio cada uno. Adicional a esto un grupo control positivo de 2 dientes y un
grupo control negativo de 2 dientes.

Se seleccionaron dos pastas de hidrxido de calcio en diferentes vehculos:

Hidrxido de calcio con vehculo oleoso: Metapex (Meta Biomed Corp.


Ltd., Elmburst, NY) aceite de silicona y yodoformo (presentacin en
jeringa)
Hidrxido de calcio con vehculo viscoso: CH/polyethylene glycol (Calen;
SS White Artigos Dentarios Ltd, Rio de Janeiro, Brazil) (presentacin en
cartucho)

En los grupos experimentales y en el grupo control positivo los surcos


longitudinales se llenaron con las pastas de hidrxido de calcio desde la misma
jeringa (Figura 4) (38), con una punta de ultrasonido se activ por 10 segundos
la medicacin para homogenizar (39) y se retiraron los excesos con un
aplicador superfino (37).

Incubacin

Las mitades de la races se volvieron a unir y se fijaron usando una ligadura de


ortodoncia de 0,20 mm (morelli), y el pice se sell con cera, las cavidades de
acceso se sellaron temporalmente con una bolita de algodn y Cavit, los

ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 25


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grupos experimentales de acuerdo al tipo de pasta de hidrxido de calcio se


almacenaron en cajas Petri por separado a 37C y 100% de humedad relativa
durante 7 das (37).

Preparacin del Chitosan al 0,2%

Para la preparacin de la solucin de Chitosan al 0,2%, se diluy 0,2 g de


Chitosan con 100 ml de cido actico al 1% y se mezcl durante 2 horas
usando un agitador magntico. El pH de la solucin se midi usando un
medidor de pH digital y se ajust a 3,2 (Figura 5) (12).

Irrigacin

Despus de 7 das cada grupo experimental se subdividi aleatoriamente en


dos utilizando www.randomizer.org de acuerdo al irrigante utilizado para la
remocin del hidrxido de calcio: Chitosan al 0,2% y EDTA al 17% (Figura 6).

Se retir el Cavit y la bolita de algodn con la ayuda de una pieza de mano de


alta velocidad (NSK) y para la irrigacin se utilizaron una aguja de extremo
abierto de 30-G de 21 mm, a 2 mm de la longitud de trabajo con movimientos
de arriba hacia abajo.

Al final se obtuvo 6 grupos:

Grupo 1: Metapex con 1 ml de EDTA al 17%; dejndolo actuar por 1


minuto, a continuacin, se succion y removi, repitiendo el
procedimiento dos veces ms, dando un total de 3 ml EDTA en un
tiempo de 3 minutos, finalmente un enjuague con 3 ml de agua
destilada.
Grupo 2: Calen con 1 ml de EDTA al 17%; dejndolo actuar por 1
minuto, a continuacin, se succion y removi, repitiendo el
procedimiento dos veces ms, dando un total de 3 ml EDTA en un

ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 26


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tiempo de 3 minutos, finalmente un enjuague con 3 ml de agua


destilada.
Grupo 3: Metapex con 1 ml de Chitosan al 0,2%; dejndolo actuar
por 1 minuto, a continuacin, se succion y removi, repitiendo el
procedimiento dos veces ms, dando un total de 3 ml Chitosan al
0,2% en un tiempo de 3 minutos, finalmente un enjuague con 3 ml de
agua destilada.
Grupo 4: Calen con 1 ml de Chitosan al 0,2%; dejndolo actuar por 1
minuto, a continuacin se succion y removi, repitiendo el
procedimiento dos veces ms, dando un total de 3 ml Chitosan al
0,2% en un tiempo de 3 minutos, finalmente un enjuague con 3 ml de
agua destilada (27).
Grupo 5 control positivo: hidrxido de calcio sin irrigacin.
Grupo 6 control negativo: sin hidrxido de calcio y sin irrigacin.
Despus de la irrigacin los conductos se secaron con puntas de papel de
tamao 60 (9).

6.6 Tcnica de observacin

Las mitades de las races se separaron y los surcos se observaron bajo el


estereomicroscopio (Boeco Germany) a 40 X. Las fotografas fueron tomadas
usando una cmara digital, colocando las muestras en una misma posicin,
luego las imgenes se descargaron a un computador porttil marca hp con
formato (jpg) usando un cable USB (38), esto se llev a cabo en la Facultad de
Ciencias Agropecuarias de la Universidad de Cuenca.

La observacin del remanente de hidrxido de calcio de los surcos


longitudinales fueron evaluadas utilizando un sistema de puntuacin descrito
por van der Sluis con la siguiente puntuacin: 0 = toda la ranura o surco se
encuentra vaco; 1 = menos de la mitad del surco con hidrxido de calcio; 2 = la
mitad o ms del surco con hidrxido de calcio; y 3 = el surco lleno de hidrxido
de calcio (9).

ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 27


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Se crearon cuatro modelos de referencia de acuerdo a cada nivel de la escala


descrita anteriormente, cuando se trata de la puntuacin 0; 1; 2 o 3 (Figuras 7,
8, 9 y 10). Para la calibracin intraobservador se utiliz 30 imgenes del
estudio obtenidas al azar hasta obtener un nivel de concordancia aceptable por
dos ocasiones y en das sucesivos, despus de la calibracin completa, se
pudo mostrar un acuerdo intraobservador con un ndice Kappa de 0,826
equivalente a muy buena.

Los observadores que participaron en el estudio son dos estudiantes del


posgrado de Endodoncia de la Universidad de Cuenca, que estn
familiarizados con la escala de van der Sluis, puesto que realizan sus
respectivos trabajos de titulacin basados en dicha escala, se utilizaron los
mismos modelos de referencia para la calibracin interobservador y 30
imgenes del estudio obtenidas al a azar hasta obtener un nivel de
concordancia aceptable, al final se obtuvo una reproducibilidad interobservador
con un ndice Kappa de 0,874 que equivale a muy buena.

Despus de las 24 horas de la calibracin los observadores cegados recibieron


un archivo digital con una secuencia de imgenes asignadas al azar utilizado el
sistema www.randomizer.org, cada observador obtuvo 62 imgenes digitales y
anotaron los resultados en un formulario de acuerdo a lo observado.

6.7 Anlisis de datos

Se cre una base de datos donde la primera columna se denomin GRU que
significa grupo pudiendo tener los valores: 0= control negativo o vaco; 1=
control positivo; 2= Hidrxido de calcio oleoso/Chitosan; 3= Hidrxido de calcio
viscoso/Chitosan; 4= Hidrxido de calcio oleoso/EDTA; 5= Hidrxido de calcio
viscoso/EDTA.
La segunda columna se denomin REM que significa remocin y se asign
valores de: 0 = vaco; 1= menos de la mitad del surco lleno con hidrxido de

ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 28


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calcio; 2= la mitad o ms del surco lleno de hidrxido de calcio; 3= surco lleno


completamente con hidrxido de calcio.
Por ltimo, una tercera columna que se denomin EFI que significa eficacia y
se asign valores de: 1= eficaz (le corresponde el valor de 0 y 1 de la columna
REM); y 0= no eficaz (le corresponde los valores 2 y 3 de la columna REM).
Con los datos obtenidos se realiz un anlisis descriptivo univariado, con
frecuencias y porcentajes de la variable eficacia y remocin. Para el anlisis
bivariado se utiliz la prueba de Chi cuadrado tanto para la variable eficacia
como para la variable remocin. El anlisis de los datos obtenidos se realiz
por medio del paquete estadstico SPSS vs.21.

ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 29


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7. RESULTADOS

La distribucin de la muestra se puede observar en la tabla 1.

Tabla 1. Distribucin de la muestra

Grupo n %

Control positivo 2 1,6

Control negativo 2 1,6

Metapex + Chitosan 31 24,2

Metapex + EDTA 31 24,2

Calen + Chitosan 31 24,2

Calen + EDTA 31 24,2


Total 128 100

Fuente: Formulario de distribucin. Cuenca, 28/06/2017

En la tabla 2 se muestra que la diferencia en trminos de remocin de hidrxido


de calcio entre los grupos experimentales fue estadsticamente significativa.

Tabla 2. Nmero y porcentaje de remocin de hidrxido de calcio de los


grupos experimentales
REMOCIN
0 1 2 3
GRUPOS n % n % n % n %

METAPEX + CHITOSAN 1 3,2 6 19,4 18 58,1 6 19,4


METAPEX + EDTA 0 0 11 35,5 20 64,5 0 0
CALEN + CHITOSAN 0 0 7 22,6 14 45,2 10 32,3
CALEN + EDTA 0 0 3 9,7 12 38,7 16 51,6
TOTAL 1 0,8 27 21,8 64 51,6 32 25,8
Prueba Chi cua dra do (p<0,001)

0: Vaco; 1: Menos de la mitad del surco lleno; 2: La mitad o ms del surco lleno; 3: Surco lleno de
hidrxido de calcio.

Fuente: Formulario de todos los grupos. Cuenca, 28/06/2017

ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 30


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Sin embargo, en trminos de eficacia de remocin de hidrxido de calcio no


hay diferencia estadstica, como se observa en la tabla 3.

Tabla 3. Nmero y porcentaje de eficacia de remocin de hidrxido de


calcio de los grupos experimentales

NO EFICAZ EFICAZ

GRUPOS n % n %

METAPEX + CHITOSAN 24 77,4 7 22,6


CALEN + CHITOSAN 20 64,5 11 35,5
METAPEX + EDTA 24 77,4 7 22,6
CALEN + EDTA 28 90,3 3 9,7
TOTAL 96 77,4 28 22,6
Prueba Chi cuadrado (p=0,116)

Fuente: Formulario de todos los grupos. Cuenca, 28/06/2017

Adems, se pudo determinar que existe diferencia significativa cuando se


utiliz el Chitosan al 0,2% para remover el hidrxido de calcio asociado con
propilenglicol (Calen). En trminos de remocin, ningn espcimen de este
grupo mostr una puntuacin de 3, por ello la prueba de Chi cuadrado nos
muestra un valor de (p<0,0001). Tabla 4.

Tabla 4. Remocin de hidrxido de calcio (Calen) con Chitosan y EDTA


REMOCIN
1 2 3
GRUPOS n % n % n %

CALEN + CHITOSAN 11 35,5 20 64,5 0 0


CALEN + EDTA 3 9,7 12 38,7 16 51,6

TOTAL 14 22,6 32 51,6 16 25,8


Prueba Chi cuadrado (p<0,0001)

1: Menos de la mitad del surco lleno; 2: La mitad o ms del surco lleno; 3: Surco lleno de hidrxido de
calcio.

Fuente: Formulario Calen. Cuenca, 28/06/2017

ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 31


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En trminos de eficacia, el Chitosan al 0,2% result ser eficaz en un 35,5% de


los casos comparndolo con EDTA al 17% el cual fue solamente un 9,7% y
mediante la prueba Chi cuadrado se obtuvo un valor de (p=0,015). Tabla 5.

Tabla 5. Eficacia de remocin de hidrxido de calcio (Calen) con Chitosan


y EDTA

NO EFICAZ EFICAZ
GRUPOS n % n %

CALEN + CHITOSAN 20 64,5 11 35,5


CALEN + EDTA 28 90,3 3 9,7

TOTAL 48 77,4 14 22,6


Prueba Chi cuadrado (p=0,015)

Fuente: Formulario Calen. Cuenca, 28/06/2017

Se demostr tambin que no existe diferencia significativa entre los dos


quelantes cuando se los emple para la remocin de hidrxido de calcio
preparado con aceite de silicona (Metapex) en trminos de remocin y
eficacia (p=0,462) y (p=1) respectivamente. Tabla 6 y 7.

Tabla 6. Remocin de hidrxido de calcio (Metapex) con Chitosan y EDTA

REMOCIN
0 1 2 3
GRUPOS n % n % n % n %

METAPEX + CHITOSAN 1 3,2 6 19,4 18 58,1 6 19,4


METAPEX + EDTA 0 0 7 22,6 14 45,2 10 32,3

TOTAL 1 1,6 13 21 32 51,6 16 25,8


Prueba Chi cuadrado (p=0,462)

Fuente: Formulario Metapex. Cuenca, 28/06/2017

ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 32


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Tabla 7. Eficacia de remocin de hidrxido de calcio (Metapex) con


Chitosan y EDTA
NO EFICAZ EFICAZ
GRUPOS n % n %

METAPEX + CHITOSAN 24 77,4 7 22,6


METAPEX + EDTA 24 77,4 7 22,6

TOTAL 48 77,4 14 22,6


Prueba Chi cuadrado (p=1,000)

Fuente: Formulario Metapex. Cuenca, 28/06/2017

ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 33


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8. DISCUSIN

El presente estudio compara la eficacia del Chitosan al 0,2% y el EDTA al 17%


en la remocin de hidrxido de calcio preparado con vehculo viscoso y oleoso,

Se utilizaron dos trminos para la evaluacin del remanente de hidrxido de


calcio, el primero Remocin que corresponde a la escala descrita por van der
Sluis (9), y un segundo trmino Eficacia que corresponde a los valores: 0 =
surco vaco y 1 = menos de la mitad del surco lleno de hidrxido de calcio, esta
evaluacin se consider puesto que ningn irrigante elimin completamente la
medicacin del surco.

En este estudio se pudo determinar que existe diferencia significativa cuando


se utiliz el Chitosan al 0,2% para remover el hidrxido de calcio asociado con
propilenglicol (Calen). En trminos de remocin, ningn espcimen de este
grupo mostr una puntuacin de 3, por ello la prueba de Chi cuadrado nos da
un valor de (p<0,0001); y si se analiza en trminos de eficacia, result ser
eficaz en un 35,5% de los casos comparndolo con EDTA al 17% el cual fue
solamente un 9,7% y mediante la prueba Chi cuadrado se obtuvo un valor de
(p=0,015). Estos resultados son similares a los obtenidos por Kutarc y cols
(2016) quienes demostraron que la eliminacin de hidrxido de calcio utilizando
solo aguja de irrigacin la remocin era efectiva en un 40% cuando utilizaron
EDTA al 17 % y en un 37% cuando utilizaron QMix 2 en 1 (40). Sin embargo,
en otro estudio realizado por Ballal y cols. (2011) demostraron que el hidrxido
de calcio preparado con propilenglicol, se remueve en un 85% cuando
utilizaron cido maleico al 7%, en un 78% cuando utilizaron EDTA al 17% y en
un 91 % cuando irrigaron con cido ctrico al 10%, probablemente debido a que
utilizaron agitacin ultrasnica o un mtodo diferente de evaluacin del
remanente de hidrxido de calcio, en este caso fue con tomografa
computarizada espiral (32).

ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 34


UNIVERSIDAD DE CUENCA

En esta investigacin tambin se demostr que no existe diferencia significativa


entre los dos quelantes en cuanto a la remocin de hidrxido de calcio
preparado con aceite de silicona (Metapex) en trminos de remocin y
eficacia (p=0,462) y (p=1) respectivamente, mostrando una eficacia del 22,6%
los dos irrigantes. Esto puede deberse a que el Metapex utilizado en este
estudio tiene como vehculo el aceite de silicona que es ms resistente a la
disolucin (6), lo cual probablemente lo hace ms difcil de eliminar
independientemente del quelante utilizado como irrigante, sin embargo en una
investigacin realizada por Vineeta y cols. (2014) en la cual incluye Chitosan al
0,2% y EDTA al 17% para eliminar hidrxido de calcio preparado a base de
agua y a base de aceite de silicona, se determin que el Chitosan al 0,2% fue
mejor en un 82% para eliminar el hidrxido de calcio preparado con aceite de
silicona que el EDTA al 17%, estos resultados pueden deberse a que en este
estudio tambin se incluy agitacin ultrasnica pasiva que pudo ayudar en la
remocin de la medicacin (12).

Con los resultados obtenidos del presente estudio se puede determinar que el
vehculo utilizado para la preparacin del hidrxido de calcio es de importancia
al momento de retirarlo del conducto radicular, en el caso del hidrxido de
calcio mezclado con aceite de silicona resulta en la medicacin ms difcil e
inestable de remover, ya que el Chitosan en ciertos casos lo remueve por
completo, pero en otros no. Sin embargo, Faria y cols. (2012) manifiestan que
no hay diferencia estadstica despus de la eliminacin de hidrxido de calcio
asociado con aceite de silicona, gluconato de clorhexidina y propilenglicol,
encontrando restos de medicamento en todas las races, independientemente
del vehculo utilizado (41).

En cuanto al diseo experimental se basa en el modelo descrito por Lee y cols,


que se ha aplicado en diversas investigaciones en relacin con la remocin de
hidrxido de calcio (9) a diferencia de otros estudios (12) (15) (32) que utilizan
tomografa computarizada como mtodo de evaluacin, la ventaja del modelo
de surco es el tamao estandarizado y la ubicacin del mismo, adems el
surco puede ser considerado como similar a las irregularidades tpicas de un
conducto radicular en donde la medicacin resultara ms difcil de eliminar,
aunque evidentemente la complejidad de la anatoma del sistema de conductos

ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 35


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radiculares no puede ser completamente replicada por este modelo (42);


adems este modelo permite una evaluacin con un alto grado de
reproducibilidad (9).

Otro factor a considerar es el relacionado con el volumen de irrigacin, en este


caso se utiliz 3 ml de cada quelante, ya que en investigaciones anteriores se
ha podido determinar que la accin del EDTA dentro de los conductos
radiculares es autolimitante y que su efecto est en funcin del tiempo de
contacto y no con el volumen (43), esto se contrapone a un estudio realizado
por Rdig (2010) en el cual se usa mayor cantidad de irrigante 20 ml pudiendo
el volumen de irrigacin tener un efecto de remocin fsico que contribuya a
una mayor limpieza afectando el resultado final (9).

ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 36


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9. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

Se puede concluir que la accin quelante tanto del EDTA al 17% como del
Chitosan al 0,2% no es suficiente para eliminar por completo el hidrxido de
calcio independientemente del tipo de vehculo utilizado.

Comparando los grupos experimentales se puede determinar que el Chitosan


al 0,2% se comporta como mejor irrigante para la remocin del hidrxido de
calcio asociado con propilenglicol (Calen).

En el caso del hidrxido de calcio mezclado con aceite de silicona (Metapex)


resulta en la medicacin ms difcil e inestable de remover, ya que el Chitosan
en ciertos casos lo remueve por completo, pero en otros no, por lo tanto, se
sugiere mayor investigacin al respecto.

10. LIMITACIONES

El presente estudio se realiz con dientes bovinos tomando en consideracin


que muchos estudios han demostrado que hay poca o ninguna diferencia entre
los dientes de la especie humana y bovina, tanto a nivel macro y microscpicos,
son fcilmente disponibles y tienen una baja prevalencia de caries, adems el
uso de dientes humanos en estudios cientficos tiene varias implicaciones
ticas.
ESTEFANA NARVEZ MIRANDA 37
UNIVERSIDAD DE CUENCA

Al tratarse de un estudio que mide una variable cualitativa se observ la


presencia o no de hidrxido de calcio despus de la irrigacin, sin embargo, la
cantidad exacta de residuos no fue posible determinar y por ende tampoco la
eficacia cuantitativa de los quelantes.

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12. ANEXOS

Tabla 8. Operacionalizacin
TIPO
DEFINICIN DEFINICIN INDICADOR ESCALA
VARIABLE ESTADSTICO
TERICA OPERATIVA

0: Vaco
1: Menos de
la mitad del
Capacidad de Cantidad de Cualitativo
Remocin surco lleno Ordinal
remocin de hidrxido de
de 2: La mitad o
hidrxido de calcio
hidrxido ms del
calcio del tercio removido de
de calcio surco lleno.
apical (44) los surcos
3: Surco lleno
simulados
de hidrxido
de calcio (9)

Eficacia de Hidrxido de
Nivel de
remocin calcio que
remocin de 0: No eficaz
del ocupa menos Cualitativo Dicotmica
hidrxido de 1: Eficaz
hidrxido de la mitad del
calcio
de calcio surco

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Figura 1. Recoleccin y almacenamiento de los especmenes

Figura 2. Decoronacin y divisin de los especmenes

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Figura 3. Especmenes divididos longitudinalmente y numerados

Figura 4. Colocacin de la medicacin y reensamblaje de los especmenes

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Figura 5. Preparacin del Chitosan al 0,2%

Figura 6. Irrigacin

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Figura 7. 40 X de magnificacin. Puntuacin 0 = surco vaco

Figura 8. 40 X de magnificacin. Puntuacin 1 = menos de la mitad del


surco lleno con hidrxido de calcio

Figura 9. 40 X de magnificacin. Puntuacin 2 = ms de la mitad del surco


lleno con hidrxido de calcio

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Figura 10. 40 X de magnificacin. Puntuacin 3 = surco lleno de hidrxido


de calcio

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