FACULTAD DE:

FARMACIA Y BIOQUIMICA

TEMA:

ANALISIS TOXICOLOGICO DE BENZODIAZEPINAS EN ORINA

CURSO:
TOXICOLOGA

DOCENTE:
DRA. MARA SUSANA ROQUE MARROQUIN

INTEGRANTES:
Cordova azaero renzo
Durand neyra Javier
Garcia Toribio Alexandra
Sosa rosales maura
Torres Vergara Cinthya

GRUPO: A TURNO: NOCHE

 INTRODUCCION

Las Benzodiacepinas son psicotrpicos que actan sobre el SNC utilizados

como para la el tratamiento de la ansiedad, insomnio. A pesar de que el uso
clnico tambin pueden causar tolerancia, dependencia y adiccin. Las muertes
por BZD son extremadamente raras, a no ser que se ingieran con otros frmacos
como barbitricos, etanol y antidepresivos. Para identificar si una persona ha
consumido o no Benzodiacepinas se realiza un anlisis toxicolgico en muestras
biolgicas (nuestra muestra de orina), consistente en una investigacin o
anlisis general que tiene por finalidad confirmar o descartar la presencia de
sustancias toxicas que en este caso ser Benzodiacepinas. La cromatografa es
una tcnica que consiste en la separacin de una mezcla de dos o ms
compuestos Todas las tcnicas cromatogrficas dependen de la distribucin de
los componentes de la mezcla entre dos fases inmiscibles: una fase mvil,
llamada tambin activa, que transporta las sustancias que se separan y que
progresa en relacin con la otra, denominada fase estacionaria. La fase mvil
puede ser un lquido o un gas y la estacionaria puede ser un slido o un lquido.
1 MARCO TEORICO

Las benzodiacepinas, frmacos tranquilizantes menores del sistema nervioso

central y que son indicados en los casos de ansiedad, Calman la tensin y
alivian el insomnio. A dosis algo elevadas provoca somnolencia y an ataxia.
Por va I.M. produce sueo sin llegar a la anestesia. Es anticonvulsivante en
especial el Diazepam.

Para investigar la presencia de las benzodiacepinas en esta sesin es con la

finalidad de conocer la posibilidad de intoxicacin par abuso de estas
sustancias y cuyo resultado contribuye a determinar una situacin de ndole
Criminalstico, es decir especialmente en el caso de los denominados
"pepazos".

Cromatografa:
La cromatografa es una tcnica de separacin de una mezcla de solutos
contenidos en un mismo disolvente, que se basa en la distinta movilidad de
cada uno de los solutos en la fase estacionaria, cuando la mezcla es
arrastrada por un fluido (un lquido, un fluido supercrtico o un gas), o fase
mvil, que se mueve en el seno de la fase estacionaria.
Las sustancias incoloras, pueden ponerse de manifiesto mediante diversos
mtodos, como puede ser la luz ultravioleta en algunos casos, o formando
un compuesto coloreado mediante un reactivo qumico en otros; a este
proceso se lo denomina revelado.
De acuerdo con el estado de la fase mvil podemos distinguir los siguientes
tipos de cromatografa (fase mvil - fase estacionaria):

Cromatografa de gases: Gas-Lquido o Gas-Slido

Cromatografa de lquidos: Lquido-Slido o Lquido-Lquido
Cromatografa con fluido supercrtico: Fluido supercrtico Lquido

Rf

Cada componente de la mezcla se mueve siguiendo una lnea vertical. La

distancia que recorre es proporcional a la distancia recorrida por el
disolvente en el papel, a la constante de proporcionalidad se le llama Rf (del
ingls, "retention factor"):
2 COMPETENCIAS
Al realizar el examen toxicolgico se deber separar y luego identificar estas
sustancias en las muestras de orina y en sangre con la finalidad de conocer el
estado de toxicidad de una persona cuando se ha consumido un compuesto
benzodiazepnico.

3 MATERIALES

1) Vaso de 250 ml 9) Viales

2) Bagueta 10) Capilares
3) Pera de bromo 11) Lminas de vidrio
4) Cmara fotogrfica 12) Bao mara.
5) Pipeta de 5 ml 13) Mechero
6) Tubos de ensayo 14) Baln
7) Varilla de vidrio 15) Tapn de jebe
8) Gradilla 16) Probeta de 25 ml

REACTIVOS
1) HCl concentrado 5) Sulfanilato Na al 0.1%
2) HCI (6N) 6) Fuente de luz U.V.
3) NaNO2 (0.1%) 7) H2SO4 (2N)
4) Sulfato de amonio (0.5%) 8) ter etlico
4 PROCEDIMIENTO

- ACONDICIONAMIENTO

Tomamos 30 ml de muestra de orina Ponemos el contenido en una Pera

Aadimos 3ml de Cloroformo Medimos el pH del extracto de cloroformo

en fase acuosa (pH 7)
- ALCALINIZAR:

Aadimos 3ml de Amoniaco Medimos el pH del extracto de amoniaco en

fase acuosa del extracto anterior (pH 9)

- MUESTRAS
Despus de separar las fases se coloca en un vial previamente rotulado.

- Identificacin por cromatografa de capa fina.-

 Pulverizamos el frmaco Obtenemos la muestra de Benzodiazepinas

Colocamos el contenido en un vial Le aadimos:

Metanol III gotas
cido Clorhdrico III gotas

Ponemos a bao Mara por 40 min,

- EN CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA

Seguidamente en la placa cromatografa previamente cortada y rayada se realiza el

sembrado con un capilar.

Con un lpiz marcar en la placa Con un capilar, tomar un poco de la

los puntos en donde se van a disolucin y picar cada uno en la placa de
depositar ambas muestras. cromatografa varias veces.

- Preparacin de la cmara, desarrollo y corrida cromatografa:

Corrida cromatografa: Luego de

sembrar las MP y el estndar se coloca
Colocamos 20ml de la fase mvil en la lmina en la cmara. Retirar la
la cmara (en este caso utilizamos lmina al llegar al frente de solvente y
vaso). evaporar dicho solvente.
- Observacin luz UV:

Colocamos las placas que han corrido en la cuba, bajo

la luz UV

a) Fase estacionaria : Silicagel G

b) Fase mvil : Metanol: NH3 (100: 1.5)
c) Reveladores : lodoplatinato
Luz U.V. a 254 nm.
Formacin de un colorante azoico.
5. RESULTADOS
1) Indique el color observado en su placa cromatogrfica.
2) Indique el Rf de la sustancia inalterada y del metabolito
3) Indique el Rf de la sustancia patrn utilizado

6. CUESTIONARIO
1) Escriba la reaccin qumica de acuerdo al mtodo.
2) Indicar otros mtodos operatorios de examen toxicolgico de una benzodiazepina.
3) Escriba una tcnica por Cromatografa de gas para compuestos benzodiacepinicos.
4) Reaccin qumica de las benzodiacepinas con el lodoplatinato acidificado
5) Escriba el nombre de diversas especialidades farmacuticas que presentan un solo principio activo, y de
otras cuando estn asociadas
1 MARCO TEORICO

Las benzodiacepinas, frmacos tranquilizantes menores del sistema nervioso central y que son indicados en
los casos de ansiedad, Calman la tensin y alivian el insomnio. A dosis algo elevadas provoca somnolencia y
an ataxia. Por va I.M. produce sueo sin llegar a la anestesia. Es anticonvulsivante en especial el Diazepam.

Para investigar la presencia de las benzodiacepinas en esta sesin es con la finalidad de conocer la
posibilidad de intoxicacin par abuso de estas sustancias y cuyo resultado contribuye a determinar una
situacin de ndole Criminalstico, es decir especialmente en el caso de los denominados "pepazos".
BIBLIOGRAFIA

I. OBRAS DETEXTO
1) Buzzo A. Toxicologa. Editorial Lpez y Etchegoyen. Bs. Aires.2,012.
2) Calabrese y Astolfi. Toxicologa. Editorial Kapeluz. Bs. Airess.2009
3) Dreisbach R. Manual Envenenamientos. Ed.El Manual Moderno. Mxico 2008
4) Guatelli. Manual de Prcticas de Qumica Toxicolgica.
Editorial Universitaria M.A. Bs. Aires. 2004
5) Simonin. Medicina Legal Judicial. Bs. Aires, 2002.
6) Gisbert Calabuig Juan. Medicina Legal y Toxicologa Editorial Masson 2010

II. OBRAS DE CONSULTA

1) Clarke E.G.C. Isolation and identification of drugs in Pharmaceuticals, body fluids and post mortem
material. The Pharm. Press. London. 1988.
2) Curry A. S.Advance in Forensic and Clinical Toxicology. CRC. Press USA 2004.
3) Levinson A.S. Diagnstico Clnico de Laboratorio. Ed. Librera El Ateneo Bs. Aires. 2002
4) LOPEZ GOMEZ Leopoldo.Tcnica Mdico Legal Editorial Saber. Valencia. Espaa. 2010

III. REVISTAS
1) Analytical Chemistry.
2) Clinical Chemistry.
3) Forensic Sciences International.
4) Journal of Analytical Toxicology.
5) Journal of Chromatography.
6) Journal of Forensic Sciences