Prctica N 01

Mediciones con microscopio

Nombre del estudiante: ___________________________________ Cdigo: __________

Fecha de entrega: ______________ Calificacin: _____________
Observaciones del docente: ____________________________________________________
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Muchos fracasos de la vida han sido de hombres que no supieron darse cuenta, de lo cerca que
estaban del xito, cuando se rindieron (Thomas Alva Edison)

INTRODUCCIN

El estudio detallado de los componentes de clulas y tejidos animales o vegetales, por el tamao que poseen,
requiere el uso de instrumentos que permitan ampliar muchas veces ms la imagen de las estructuras que
los constituyen. El instrumento que fue empleado por los primeros bilogos para estudiar la clula y los
tejidos, es el microscopio. El nombre deriva etimolgicamente de dos races griegas: mikrs, que significa
pequeo y skopoo, que significa observar. Es decir el microscopio es un instrumento que sirve para
observar objetos o estructuras pequeas.

El microscopio corrientemente en los laboratorios corresponde al microscopio compuesto, el cual est

constituido por un do de lentes amplificadoras de la imagen. El microscopio compuesto, de hecho, es un
sistema de amplificacin de dos niveles en el cual la pieza es amplificada en primer lugar por un complejo
sistema de lentes del objetivo y de nuevo por una segunda lente en el ocular.

Existen dos caractersticas esenciales que debe tener un microscopio: el poder de amplificacin y el poder
de resolucin. El primero hace referencia al nmero de veces que puede amplificar el objeto, mientras el
segundo indica que tanto puede amplificarse un objeto sin perder detalle de l. El poder de resolucin es la
caracterstica ms importante ya que de nada servira un microscopio que permitiera ver los objetos de un
gran tamao si estos precisamente se observaran borrosos.

Gracias a este poder de amplificacin, con el microscopio se ha podido estudiar a la clula a nivel
morfolgico y fisiolgico. Sin embargo, uno de los primeros temas que se debe tratar para tener un buen
conocimiento de ellas es el de las medidas microscpicas. En la literatura encontramos que dentro de las
principales unidades de medicin estn: ngstrm (), micra () y nanmetro (nm). La unidad de medida
que se puede calcular con el microscopio es la micra que equivale 1/1OOmm. Un ejemplo real de la
naturaleza tenemos el dimetro de una bacteria que oscila entre 0.5 y 1.0 y generalmente se observa a 100
aumentos. Una mosca comn, con este mismo aumento, se vera un poco mayor de 75 m.

OBJETIVOS
 1. Reconocer el manejo y la importancia del microscopio ptico como herramienta de trabajo en el
campo de la biologa celular.
2. Realizar mediciones indirectas con base en la determinacin del dimetro del campo visual.
3. Proponer una escala de medicin de referencia con base en una red de puntos.
4. Estimar algunas medidas usando el micrmetro.

CONCEPTOS BASICOS

Instrumentos de medicin: se refiere a aparatos que se usan para comparar magnitudes fsicas mediante
un proceso de medicin. Como unidades de medida se utilizan objetos y sucesos previamente establecidos
como estndares o patrones y de la medicin resulta un nmero que es la relacin entre el objeto de estudio
y la unidad de referencia. Dentro de los instrumentos de medicin de longitudes encontramos: Cinta
mtrica, regla graduada, calibre, vernier, micrmetro, reloj comparador, interfermetro, odmetro, entre
otros.

Equivalencias: el sistema oficial de medicin en la mayora de los pases es la forma moderna del sistema
mtrico conocido como "Sistema Internacional de Unidades". Sin embargo, otros sistemas de medicin se
usan an en muchas partes del mundo, tales como EE.UU y el Reino Unido, por lo tanto se manejan tablas
de equivalencia para convertir unidades al sistema de medicin que cada persona use.

Algunas equivalencias tiles para esta prctica son:

MICRA o micrmetro: 1 m = 0,001 mm = 1 10-3 mm; 1 m = 0,000 001 m = 1 10-6 m

NANOmetro: 1 nm = 0,000 001 mm = 1 10-6 mm; 1 nm = 0,000 000 001 m = 1 10-9 m
ngstrm: 1= 0,000 000 0001 m = 1 10-10 m

Escala de medicin

Elementos de una circunferencia

Radio: de una circunferencia es cualquier segmento que une el centro a cualquier punto de dicha
circunferencia.
Dimetro: es una recta cualquiera (segmento) que pasa por el centro y que acaba en ambas direcciones en
la circunferencia del crculo; esta lnea recta tambin divide el crculo en dos partes iguales.
Circunferencia: es una curva plana y cerrada donde todos sus puntos estn a igual distancia del centro.

El estudio detallado de los componentes de clulas y tejidos animales o vegetales, por el tamao
que poseen, requiere el uso de instrumentos que permitan ampliar muchas veces ms la imagen de
las estructuras que los constituyen. El instrumento que fue empleado por los primeros bilogos
para estudiar la clula y los tejidos, es el microscopio. El nombre deriva etimolgicamente de dos
races griegas: mikrs, que significa pequeo y skopoo, que significa observar. Es decir el
microscopio es un instrumento que sirve para observar objetos o estructuras pequeas.

Existen dos tipos de microscopios que emplean la luz como fuente de energa para formar
imgenes aumentadas y detalladas de objetos que a simple vista no es posible observar:

a) Microscopio fotnico simple o lupa.

b) Microscopio fotnico compuesto.

El microscopio simple o lupa es un instrumento de amplificacin de imgenes que consiste en la

utilizacin de una o ms lentes convergentes en un solo sistema ptico. Dependiendo de la
curvatura de la superficie de la(s) lente(s) las lupas pueden ampliar las imgenes de los objetos
desde 5, 8,10, 12, 20 y hasta 50 veces. Forman una imagen de mayor tamao, derecha y virtual.

Los microscopios fotnicos compuestos que se emplean actualmente tienen sus antecesores en los
instrumentos pticos desarrollados, en el periodo comprendido entre 1590 y 1610, por Hans
(padre) y Zacaras (hijo) Janssen; quienes mediante el tallado cuidadoso de lentes biconvexas
construyeron los primeros microscopios compuestos (Figura 1).
 Figura 1. Diagrama de los componentes del microscopio compuesto fabricado por los Jansen.

A partir de esa poca, el microscopio es el instrumento ms utilizado en el estudio de clulas y

tejidos. Se fue perfeccionando, tanto en su parte ptica como en su parte mecnica, gracias a los
adelantos tecnolgicos aplicados a los componentes antes mencionados. Se denominan
compuestos porque la imagen se forma mediante la utilizacin de tres sistemas de lentes, cada uno
de ellos constituidos por lentes convergentes y divergentes. Los sistemas de lentes son el
condensador, los objetivos y los oculares. En la actualidad, el microscopio fotnico es un
instrumento de uso cotidiano en los laboratorios de investigacin y de diagnstico as como en las
aulas de enseanza de Biologa, Embriologa, Histologa, Microbiologa y Patologa.

COMPONENTES DEL MICROSCOPIO FOTNICO. El microscopio fotnico compuesto esta

integrado por tres tipos de componentes:

a. COMPONENTES MECNICOS: Son aquellos que sirven de sostn, movimiento y

sujecin de los sistemas pticos y de iluminacin as como de los objetos que se van a
observar. stos se muestran en la imagen del microscopio de la Figura 2:

Figura 2. Principales componentes de un microscopio fotnico compuesto

o Base o pie. Es un soporte metlico, amplio y slido en donde se apoyan y sostienen los
otros componentes del microscopio.
 o Brazo, estativo o columna. Permite la sujecin y traslado del microscopio. Soporta al tubo
ptico, a la platina y el revolver.
o Platina. Superficie plana de posicin horizontal que posee una perforacin circular central.
En ella se apoya la preparacin (lmina portaobjetos que contiene a la muestra que se va
a examinar) que se sujeta a la platina mediante pinzas o con un carrito o charriot que,
mediante mandos especiales facilitan el movimiento de la preparacin de derecha a
izquierda y de adelante hacia atrs.
o Tubo ptico. Consiste en un cilindro metlico que suele medir 160mm o 170 mm de
longitud (dependiendo del fabricante del microscopio) el cual en un extremo, est
conectado al revolver o portaobjetivos y en el otro se relaciona con el (los) ocular(es).
o Revolver o portaobjetivos. Es un componente que gira alrededor de un eje con la finalidad
que los objetivos que sostiene coincidan de manera perpendicular con la perforacin
central de la platina. En su superficie inferior posee varios agujeros donde se atornillan los
objetivos.
o Tornillos macromtrico y micromtrico. Generalmente estn situados en la parte inferior
del brazo o columna. Pueden estar separados (en los microscopios antiguos) o el tornillo
micromtrico est incorporado en la circunferencia del tornillo macromtrico
(microscopios actuales). Ambos tornillos permiten el desplazamiento de la platina hacia
arriba y hacia abajo con la finalidad de acercar o alejar la preparacin hacia los objetivos
y as conseguir un enfoque ptimo de la imagen.
El macromtrico produce desplazamientos evidentes y rpidos de la platina, en cambio el
tornillo micromtrico produce movimientos imperceptibles de la platina y sirve para
efectuar el enfoque fino y definitivo de la imagen. En la actualidad los microscopios tienen
incorporados a los mecanismos de desplazamiento de los tornillos macro y micromtricos,
topes de seguridad que impiden que stos continen descendiendo indefinidamente y as
se evita roturas y daos a la laminilla y a las lentes de los objetivos.
o Engranajes y cremallera. Constituyen mecanismos de desplazamientos de las diferentes
partes del microscopio.
o Cabezal. Es un componente situado en relacin con el tubo del microscopio que alberga
principalmente prismas o espejos que sirven para acondicionar en l dos o ms oculares, o
sistemas mecnicos que soportan cmaras fotogrficas, de vdeo o sistemas de proyeccin
de la imagen.

b) COMPONENTES PTICOS: Son los objetivos, los oculares, el condensador y los prismas. Los
tres primeros estn constituidos por sistemas de lentes positivos y negativos.

Condensador: Es el componente ptico que tiene como funcin principal concentrar y

regular los rayos luminosos que provienen de la fuente luminosa (Figura 3).
 Figura 3. Diagrama de los principales componentes de un condensador y recorrido de los rayos
luminosos

Est formado por una o dos lentes convergentes que renen los rayos luminosos y los orientan
hacia la abertura central de la platina. Mediante un mecanismo de cremallera se acerca o aleja de
la platina. Tambin tiene incorporado un diafragma iris que regula la entrada de luz Todo ello con
la finalidad de concentrar la mayor cantidad de rayos luminosos en el plano donde est situado el
objeto a observar. La mayora de los condensadores de los microscopios actuales tambin poseen
una apertura numrica que indica la cantidad de luz que puede captar y luego enviar hacia la
preparacin.

El microscopio corrientemente en los laboratorios corresponde al microscopio compuesto, el cual

est constituido por un do de lentes amplificadoras de la imagen. El microscopio compuesto, de
hecho, es un sistema de amplificacin de dos niveles en el cual la pieza es amplificada en primer
lugar por un complejo sistema de lentes del objetivo y de nuevo por una segunda lente en el ocular.

MATERIALES
BIOLOGICOS MATERIALES Y VIDRIERIA REACTIVOS EQUIPO
ESTUDIANTES (se califica por mesn)
Agua estancada Papel milimetrado
Papel de revista colores
Pincel
Tijeras
Regla
LABORATORIO
Laminas Laminas Agua Microscopio
permanentes Laminillas destilada MICRMETRO
de tejidos Papel absorbente
humanos Gotero
PROCEDIMIENTO

PARTE I. MANEJO BSICO MICROSCOPIO

1. Prepare laminillas con los diferentes materiales, de la siguiente manera:

a. Laminilla con la letra e: En el papel impreso, busque una letra e, recrtela y pguela en
un portaobjetos. Realice observaciones en los aumentos de 4X, 10X y 40X.

b. Laminilla con papel milimtrico: Recorte 1 cm2, del papel milimtrico y pguelo por los
bordes en el portaobjetos. Realice observaciones en los aumentos de 4X, 10X y 40X.

c. Laminilla con agua estancada: Limpie un portaobjetos, coloque una gota de agua estancada
y coloque encima un cubreobjetos. Realice observaciones en los aumentos de 4X, 10X y 40X.

2. Coloque la preparacin sobre la platina y sujtela con las pinzas.

3. Observe la preparacin con el objetivo de menor aumento.
4. Accione el tornillo macromtrico lentamente, mirando por los oculares hasta que alcance el punto
enfoque.
5. Cuando pueda observar la preparacin, afine el enfoque con el tornillo micromtrico.
6. Observe la muestra con el siguiente objetivo girando el revlver.

PARTE II: MEDIDAS EN EL MICROSCOPIO

1. Determinacin de la distancia Frontal: Con la ayuda de una reglita hecha con papel milimetrado
(10cm), enfoque un objeto y mida la distancia aproximada que existe entre la lente de cada uno de
los objetivos y la platina. Llene la tabla con los datos en donde relacione aumento y distancia
frontal, grafique. Por ltimo, concluya, como varan estas caractersticas en los microscopios.

2. Determinacin del dimetro del campo ptico: En los laboratorios de investigacin se utiliza un
instrumento, el micrmetro o retculo micromtrico, para determinar las medidas microscpicas. Si
no se dispone de un micrmetro es posible estimar el tamao de los objetos microscpicos en
observacin si se conoce el dimetro del campo. Para calcular lo que mide el campo de visin hay
que seguir los siguientes pasos:

a. Recortar un cuadrado de 1 cm2 de lado de papel milimetrado.

b. Realizar un montaje hmedo sin cubrir.
c. Enfocar con el objetivo de menor aumento hasta que se vea con claridad.
d. Medir el campo visual haciendo coincidir una de las lneas del papel milimetrado con el borde
del campo de visin. Contar el nmero de milmetros que se ven y estimar aproximadamente
la fraccin sobrante, si la hay.
e. Con el dato anterior es posible determinar el dimetro del campo correspondiente al objetivo
de mayor aumento, basta con dividir el dimetro encontrado por la razn entre las
magnificaciones del objetivo de mayor aumento y de menor aumento. Por ejemplo, si el
aumento del objetivo de mayor significacin es de 45X y el otro es de 15X la razn
mencionada ser 45/15=3; ahora si el campo correspondiente al objetivo de menor aumento
 tiene un dimetro de 1500mm, el dimetro de campo para el objetivo de mayor aumento ser
1500/3=500mm.
f. Calcular el dimetro del campo de visin para aumentos mayores. Llenar la tabla y concluir.

3. Elaboracin de una Escala de Referencia: Una vez determinados los dimetros de los campos
pticos, observe un montaje hmedo de un cuadrito de 1cm de papel de revista (recorte de la margen
de las hojas de la revista). A mayor aumento observar un retculo de puntos, calcule la distancia
en micras entre dos puntos y calcule el nmero de puntos por campo ptico.

Ahora tome una lmina permanente, que le indique su profesora, observe que las clulas se
distribuyan uniformemente, intente calcular de la misma forma la cantidad de clulas por campo y
el tamao aproximado de cada una de ellas.

REGISTRO DE RESULTADOS

1. Determinacin de la distancia Frontal:

Grfica

Aumento Distancia Frontal

Conclusin:
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_____________________________________________________________________________________

2. Determinacin del dimetro del campo ptico:

Aumento Distancia Frontal Dimetro de un punto

Conclusin:
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 3. Elaboracin de una Escala de Referencia:
Tamao aproximado de un punto

Aumento Nmero de puntos por Dimetro en micras rea en micras

dimetro

PROYECCIN DE APRENDIZAJE

Forma de presentacin: Grupo de laboratorio (2 o mximo 4 personas)

Formato: artculo cientfico y siguiendo las normas de la revista Caldasia de la Universidad Nacional de
Colombia (http://revistas.unal.edu.co/index.php/cal/about/submissions#authorGuidelines)

Medio de entrega: Impreso o a mano

Contenido: Deben buscar 3 artculos cientficos (mnimo 1 en ingls) en las bases de datos de la
Universidad en los que se utilice el microscopio como herramienta de investigacin en diversas reas de la
salud. En la introduccin puede incluir teora del microscopio pero debe citar cada informacin que incluya;
as mismo extraiga los objetivos de cada uno de los artculos y explquelos en esta seccin; en la
metodologa detallar el protocolo o procedimientos que emplearon los autores de los artculos, de una
manera muy resumida y realizar una comparacin con la metodologa empleada para esta gua. En la
seccin de resultados debe incluir de manera ordenada los registros del laboratorio. En discusiones explicar
la importancia actual del uso del microscopio. Si as lo consideran puede explicar tambin los avances que
han existido en el campo de la microscopia en las investigaciones en salud. Para el resto de secciones seguir
las instrucciones de la revista