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UNIVERSIDAD DE CORDOBA

LABORATORIO DE QUMICA ANALITICA III


CROMATOGRAFIA EN PAPEL
Prof. Basilio Daz P.

Presentado por: Luis Atencia Polanco, Iveth Londoo Olivera, Wilmer Nuez De los Reyes
y Jorge Manjarres Nez.

1. RESUMEN
La cromatografa es una tcnica de separacin en la que los componentes que se han de
separar se distribuyen entre dos fases, una de las cuales est en reposo (fase estacionaria,
F.E.) mientras que la otra en movimiento (fase mvil, F.M.). La clave de la separacin en
cromatografa, es que la velocidad con la que se mueve cada sustancia depende de su afinidad
relativa por ambas fases (equilibrio de distribucin). En general, los componentes ms afines
a la fase estacionaria avanzan lentamente (ms retenidos) mientras que los ms afines a la
fase mvil (menos retenidos) se mueven con mayor rapidez. Por consecuencia, el medio
cromatogrfico funciona como un controlador de la velocidad de cada sustancia que
constituye la mezcla, logrando as su separacin y mediante el uso de un detector, su
caracterizacin qumica. Para el desarrollo experimental se llev a cabo la separacin de los
componentes de tres diferentes tintas de esferos (rojo, azul y fucsia), mediante la tcnica de
cromatografa en papel, en donde se evalu la polaridad de la fase mvil, una mezcla de dos
disolventes ( hexano y acetato de etilo) de carcter apolar y polar, con diferente volmenes.
2. INTRODUCCIN:
La cromatografa en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar
anlisis cualitativos, ya que pese a no ser una tcnica potente no requiere de ningn tipo de
equipamiento. La fase estacionaria est constituida simplemente por una tira de papel de
filtro. La muestra se deposita en un extremo colocando pequeas gotas de la disolucin y
evaporando el disolvente. Luego el disolvente empleado como fase mvil se hace ascender
por capilaridad. La separacin se realiza en funcin de la afinidad de los solutos con las dos
fases .Las sustancias separadas se identifican mediante diversos procedimientos fsicos o
qumicos. Se fundamenta en que las sustancias problema, pueden tener diferentes
coeficientes de reparto en dos disolventes de inmiscibilidad limitada, uno permanece fijo en
la superficie del papel fase estacionaria generalmente en agua, la fase mvil constituida
generalmente por una mezcla de disolventes parcialmente miscibles en ella. Hay varios tipos
de cromatografa, la ascendente (papel hacia arriba), descendente (papel invertido), radial y
de separacin de zonas y sectores

3. PROCEDIMIENTO
3. secado y
anlisis.

1. Siembra de la mezcla
de analitos. 2. Mezcla de disolventes,
elucin y separacin

4. DATOS

Tabla 1. Disolventes cromatografa en papel


DISOLVENTES
ndice de Polaridad (P')
Fase N 1 fase N 2 Fuerza Eluyente

Acetato de etilo 1.5 ml 0.5 ml 4.4 0.58

Hexano 0.5 ml 1.5 ml 0.1 0.01

Fase N 1
Frente del disolvente: 4 cm
Tinta Fucsia: Tinta Roja: Tinta Azul:

- Mancha 1: 0.5 cm - Mancha 1: 3.5 cm - Mancha 1: 0.4 cm


- Mancha 2: 3.57 cm - Mancha 2: 2.5 cm

Fase N 2
Frente del disolvente: 3.5 cm
Tinta roja Tinta azul

- Mancha: 3cm - Mancha: 1cm


5. RESULTADOS:

6. CUESTIONARIO

1) Analizar y explicar los resultados. Puede dibujar las placas y las posiciones de las
manchas de los compuestos antes y despus de la cromatografa; determine los Rf de
cada compuesto eluido.

Con base a los resultados obtenidos se tiene:


La fase 1, de carcter polar, es afn con la naturaleza de los analitos, la fase
estacionaria funciona como un controlador de la velocidad de cada sustancia
que constituye la mezcla, para el caso la tinta de color rojo eluyo con mayor
rapidez en la fase 1, presentando un tipo de separacin que avanz
rpidamente hasta llegar al lmite que marca el frente del disolvente, a la cual
se puede diagnosticar que el tipo de compuesto es polar, es afn con la
naturaleza polar de la fase mvil por lo cual asciende con mayor rapidez. Para
el caso de la tinta azul se dieron dos tipos de separacin, la primera mancha
se dio alrededor de 0. 4 cm del punto de siembra, a lo que se le puede
diagnosticar que el tipo del compuesto presenta un carcter apolar, es
mayormente retenido por la fase estacionaria, mientras que la segunda
separacin eluyo no tan rpidamente, por lo que se puede diagnosticar que
presenta cierta correlacin con la polaridad de la fase mvil, hablndose de
una compuesto mediamente polar. Para el tercer analito, la tinta de color
fucsia, presento dos separaciones, una de ella ascendi rpidamente hasta el
lmite del frente del disolvente, con un carcter polar, mientras que otra quedo
retenida muy cercanamente al punto de siembra, lo que concluye que es afn
con la fase estacionaria y se considera que es de carcter apolar.

Para cada tipo de analito se procede al clculo del Retention factor o Rf:
Tinta de color Rojo:

( ) 3.5
= = As: = = 0.875
( ) 4

Tinta de color azul:


Mancha 1: Mancha 2:
0.4 2.5
= = 0.1 = = 0.625
4 4

Tanta de color fucsia:


Mancha1: Mancha 2:
0.5 3.57
= = 0.125 = = 0.892
4 4

La fase 2, de carcter apolar, presento separacin en la tinta roja, con una velocidad
de ascenso relativamente rpida, pero solo se evidencio un tipo de mancha que eluyo
rpidamente con el disolvente, lo cual es evidencia que presenta un compuesto de
carcter apolar afn con la fase mvil. Para la tinta azul se presenta un tipo de
separacin muy cercano al punto de siembra caracterstico de un compuesto de tipo
apolar. La tinta fucsia no presento ningn tipo de separacin en la evaluacin de la
fase 2.

Se obtienen los siguientes coeficientes de reparto, para este experimento:

Tinta de color Rojo: Tinta de color azul:


3 1
= = 0.1 = = 0.625
3.5 3.5

Con base a los resultados obtenidos y al anlisis se puede concluir que la fase movil que
favorece la separacin de los analitos en el desarrollo experimental, es la numero 1 con una
mezcla de 1.5 ml de acetato de etilo y 0.5 ml de hexano con un carcter polar.

2. En la cromatografa de papel, Cul es la fase estacionaria y cul es la fase mvil?


La fase estacionaria est constituida simplemente por una tira de papel filtro. La muestra se
deposita en un extremo colocando pequeas gotas de la disolucin y evaporando el disolvente
a temperatura ambiente. Luego el disolvente empleado como fase mvil se hace ascender por
capilaridad.
3. Explique cmo y por qu se separan los componentes de la mezcla de tinta. Cul de
los pigmentos es atrado con ms fuerza por el papel? Por qu?
La separacin se realiza en funcin de la afinidad de la mezcla de los analtos con las dos
fases. Las razones de migracin de las substancias sern gobernadas por la solubilidad
relativa en la fase polar estacionaria y la fase polar mvil. Las molculas se separan de
acuerdo a su polaridad, con apolares movindose ms rpido que las polares.
4. Qu solvente o mezcla de solventes recomendara usted para hacer que el
desplazamiento de las manchas desde su posicin original fuera menor que el observado
por usted en la prctica?
En la prctica de laboratorio se usaron dos solventes (acetato de etilo y hexano) para el
proceso de cromatografa, sin embargo un solvente o mezcla de solventes que se recomienda
para hacer que el desplazamiento de las manchas desde su posicin original sea menor del
normal o el observado es acetato de etilo o hexano, pero con polaridad menor que la utilizada
en prctica.
5. Usted tiene un compuesto impuro y quisiera saber cuntas sustancias estn
contaminando su compuesto. Explique como lo hara utilizando cromatografa de capa
delgada.
Al realizar el procedimiento respectivo para una cromatografa de capa delgada la cual separa
compuestos orgnicos de una muestra, sirve para determinar si el compuesto orgnico est
impuro y que sustancias lo estn contaminando. Por consiguiente, en la placa cromatografa
de capa delgada al mirar el extendido de las sustancias en la placa se mostraran puntos o
manchas al ser absorbida o atradas con mayor fuerza por la capa estacionaria, por ende,
entre menos manchas haya en el extendido menos impura ser, esas manchas correspondern
a las sustancias que contaminan.
6. Consulte qu son los reveladores en cromatografa de capa fina:
Los reveladores son un tipo de compuestos o tcnicas utilizadas para facilitar la visibilidad
de las distintas separaciones de los compuestos en cromatografa.
Las manchas de color son, por supuesto, inmediatamente visibles; las incoloras pueden
revelarse mediante:
a) Luz UV: si la sustancia absorbe luz ultravioleta, se puede usar una fase estacionaria
impregnada con un indicador fluorescente (F254 F366), el nmero que aparece como
subndice nos indica Ia longitud de onda de excitacin del indicador utilizado"
b) La introduccin de la placa en vapores de yodo
c) El roco con una solucin de agua / H2SO4 1:1 (dentro de un compartimiento especialmente
protegido y bajo una campana de extraccin de gases). Despus calentar intensamente, por
ejemplo, con un mechero, hasta carbonizar los compuestos.

7. CONCLUSIONES:

Aunque hay muchas y variadas tcnicas cromatografas, el objetivo de todas es separar las
sustancias que conforman una mezcla y enviarlas secuencialmente a un detector para que las
determine y cuantifique. Realizada esta prctica se pudo comprender que la cromatografa en
papel, es una tcnica de separacin muy verstil, adems de ello presenta caractersticas tales
como: Es sencilla, rpida y principalmente no requiere de equipos complicados.
Experimentalmente, pudimos observar cmo los diferentes colorantes de la tinta de un esfero
se separaron, y con esto se permiti identificar los distintos componentes de la tinta.

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