TECNOLGICO NACIONAL DE MXICO

INSTITUTO TECNOLGICO DE TIJUANA

INTRODUCCIN A SENSORES
TTULO:
REPORTE DE PRACTICAS 2 Y 3
NOMBRE:
JACOBO ROSALES RICARDO
14211525

ING. EN NANOTECNOLOGA
Prcticas 2 y 3
Asignatura: Introduccin a los Sensores
Profesor: Georgina Pina Luis
Ttulo: Construccin de la curva de calibracin de un compuesto fluorescente,
determinacin del lmite de deteccin y el intervalo de linealidad del mtodo.
Determinacin de la concentracin de quinina en agua tnica.

Objetivo de la prctica:
1. Parte) Obtener la curva de calibracin, el lmite de deteccin y el intervalo de
linealidad de un compuesto fluorescente.
2. Parte) Determinar el contenido de quinina en muestras de agua tnica

Introduccin.

Los mtodos fluorescentes son aplicables a intervalos de concentracin ms bajos que las
determinaciones espectrofotomtricas UV visible y estn entre las tcnicas analticas ms
sensibles.
La intensidad de fluorescencia depende de la concentracin del fluorforo segn:
= 0
donde:
F = rendimiento cuntico
Io = intensidad de la radiacin incidente
= coeficiente de absortividad molar
b = trayectoria ptica
c = concentracin de la especie fluorescente (mol/L)
De tal manera que la dependencia de la intensidad de fluorescencia con la concentracin
es lineal. Sin embargo, existen factores que determinan la no linealidad de la seal
fluorescente con la concentracin del fluorforo.
Por otra parte debido a la naturaleza del proceso luminiscente la fluorescencia molecular
tiene una elevada dependencia de parmetros tales como el pH, el solvente, la viscosidad
del medio, entre otros.
En Medio Ambiente:
Obtencin de la curva de calibracin

1. Medir la intensidad de fluorescencia para las disoluciones patrn a las longitudes de

onda seleccionadas.
2. Registrar los datos en la tabla 1
3. Determine el lmite de deteccin y el intervalo lineal del mtodo utilizado.
 Excitacin Emisin
ppb 344 453
25 21.2 21.4
50 41.3 41.4
75 60.5 60.3
100 89.1 85.2
200 166.6 167

300 235.7 236.8

400 317.8 318.6
 Matraz mL ppb sulfato de IF
patrn quinina

1 250 L 25 21.2

2 500 L 50 41.3

3 750 L 75 60.5

4 1 mL 100 89.1

5 2 mL 200 166.6

6 3 mL 300 235.7

7 4 mL 400 317.8

LOD= 3(Sb/S) = 3(0.09793528/.7896) = 0.3720 ppb

2. Parte
1. Pasar el contenido de agua tnica a un vaso de precipitado y agitar vigorosamente
a temperatura ambiente durante 10 minutos.
2. Tomar 1 mL y enrasar con H2SO4 0.05 M en volumtrico de 25 mL y obtenga el
espectro de excitacin y de emisin correspondiente.
3. Determine la concentracin de quinina en agua tnica a partir de la recta de
calibrado.
 0.10 0.25 0.50 0.75 1
454.8399 100.6019 253.0588 491.9969 738.0585 987.0198
348 98.7537 250.6228 486.9004 731.0357 974.3251

0.10 0.25 0.50 0.75 1

454.8399 100.6019 253.0588 491.9969 738.0585 987.0198
[x]=IF- 0.9863 0.2539 0.4974 0.7481 1.0018
3.8015/981.3
Trabajo con los resultados
1) Obtener la curva de calibrado. Explicar los resultados obtenidos.
Se observa que hay un crecimiento lineal y proporcional en las seales obtenidas de
IF, respecto a las de concentracin de agua tnica, esto sin llegar a una sobre
saturacin que inhiba la IF.
2) Qu fenmeno se presenta a mayores concentraciones? Cmo se puede evitar?
Cuando hay mayores concentraciones de quinina hay una mayor intensidad de
fluorescencia, aunque cuando estas concentraciones estn demasiad altas
incrementa el nmero de choques moleculares y al disminuir esta, se pierde la
linealidad en el incremento de fluorescencia.
3) Por qu se mide la intensidad de fluorescencia del analito en medio cido?
Es necesario de un medio acido, pues as se llega a romper el equilibrio qumico de la
quinina y as ya podr solubilizarse en el medio polar para ser protonada.
4) Cmo influye la viscosidad del medio en la seal fluorescente? Y la temperatura?
La viscosidad har que los choques moleculares se limiten, por lo tanto, cuando exista
mayor viscosidad, menor ser la cantidad de los choques y mayor fluorescencia.
La temperatura es todo lo contrario haciendo que existan ms choques y promoviendo
una inhibicin de la IF.
5) Dada la estructura del analito explique a que se debe que este compuesto sea
fluorescente.
Esto se debe a la conjugacin y a la rigidez que presenta sus anillos aromticos.