UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA - FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS - 2015-I

MICROBIOLOGIA VETERINARIA PRCTICA DE SUSCEPTIBILIDAD ANTIBIOTICA

Objetivo general: Determinar la importancia clnica y microbiolgica de las pruebas de susceptibilidad

antibitica.

Objetivos especficos

Elaborar correctamente un antibiograma de acuerdo al mtodo de difusin del disco.

Conocer los criterios que permiten la escogencia adecuada de los discos de antibiticos a probar en
un antibiograma.
Interpretar y elaborar correctamente el reporte de un antibiograma.

Introduccin

El aislamiento e identificacin de un agente infeccioso a partir de una muestra clnica

proveniente de un paciente, no es suficiente para impartir una terapia anti-infecciosa adecuada.
Actualmente, numerosos microorganismos han desarrollado mltiples mecanismos que les permiten
resistir a la accin de los ms nuevos y potentes agentes antimicrobianos. Como no se puede predecir la
susceptibilidad de las bacterias a los antimicrobianos, en la actualidad se dispone de varios mtodos para
determinar el patrn de susceptibilidad de una bacteria a los antibiticos. Entre los mtodos ms
utilizados podemos mencionar:!

1. Mtodo de difusin del disco en agar (prueba de Kirby-Bauer).

2. Antibiograma ATB rapid (bioMrieux).

3. Mtodo de dilucin en caldo o en agar (Concentracin Inhibitoria Mnima [CIM]).

4. Mtodo de la cinta o Epsilmetro Etestr (AB BIoDISK).

El mtodo utilizado con mayor frecuencia para evaluar la sensibilidad de las bacterias a los
agentes antimicrobianos es el denominado prueba de difusin del disco. Esta tcnica fue estandarizada
por Kirby y Bauer en 1966, de all que dicho mtodo tambin se le conozca con el nombre de prueba de
Kirby-Bauer. Es un mtodo sencillo y fcil de realizar en los laboratorios de rutina que slo brinda
informacin cualitativa o semicuantitativa sobre la sensibilidad de un microorganismo a un antibitico
determinado. Sin embargo, los resultados obtenidos son de gran valor clnico para iniciar, mantener o
modificar una antibitico-terapia.

La resistencia a los antimicrobianos

La base del desarrollo de la resistencia bacteriana est en la presin de seleccin que constituye
la presencia de un abtibitico. Donde antes se seleccionaban las bacterias ms aptas para la supervivencia
en el sitio del organismo de que se trate, en presencia del antibacteriano, sobrevivirn solamente aquellas
variantes capaces de resistir a las concentraciones de antibitico presentes. El antibitico se convierte en
el primer factor de seleccin. Es casi inevitable que al cabo de un plazo variable de tiempo aparezcan
variantes resistentes de la bacteria contra la que se pretende luchar con una nueva droga. Esto se ha ido
cumpliendo inexorablemente con la mayora de los agentes antimicrobianos. Esto no implica que con el
uso conciente y racional de los antimicrobianos, no se pueda minimizar la emergencia de resistencias.!

Las denominadas resistencias intrnsecas son aquellas constitutivas de la bacteria. Por ejemplo
las diferencias de membrana entre bacterias Gram positivas y Gram negativas, hacen que ciertos
antibiticos beta-lactmicos no encuentren el receptor adecuado para fijarse y ejercer su efecto en las
ltimas. Sin embargo, es la resistencia adquirida la que nos interesa. El origen de la resistencia adquirida
es gentico, bien basado en mutaciones que modifiquen el blanco del antibitico y eliminar su
susceptibilidad; basado en la adquisicin horizontal de elementos genticos que confieran funciones que
neutralicen o eliminen el antibitico.!

La transmisibilidad de los factores de resistencia puede dar lugar a un problema an mayor: la

multi-resistencia. Estos microorganismos no solamente son resistentes a una serie de drogas, sino que esa
multi-resistencia sigue siendo transferible, por lo que se transforman en reservorios de resistencia. De
todas maneras, ante el uso de antibiticos, las bacterias desarrollarn, indefectiblemente resistencias. Es
muy difcil interpretar de donde viene la resistencia, algunos genes pudieron estar esperando evolucionar.
Otros genes pudieran haber existido en bacterias no patgenas y haber sido transferidos a especies de
inters mdico (OBrien, 1997). Sabemos que existan plsmidos codificados para resistencia en la era
preantibitica. Seguramente la resistencia es tan antigua como la sntesis de antibiticos por bacterias. Por
ejemplo, en el caso de actinomicetos, es frecuente hallar resistencias a los agentes que esos mismos
microorganismos producen (Burns, 1995). Heinemann y col (2000) argumentan que no hay coevolucin
entre resistencia y susceptibilidad, ellos dicen que la disminucin en el uso de antimicrobianos tanto en
medicina como en agricultura no reemplazar un cambio fundamental en el diseo de medicamentos para
frenar la evolucin de las resistencias y favorecer la evolucin de cepas susceptibles.

1. Las resistencias cromosmicas: Este tipo de resistencias dan lugar, en general, a cambios
estructurales. Son cambios, en general, graduales. Se producen por mutaciones que son errores, que se
producen en el proceso de replicacin del ADN. Estas mutaciones pueden generar muy profundos (y
algunas veces rpidos) cambios en el nivel de resistencia, como es el caso de la estreptomicina cuya CIM
puede aumentar mil veces a travs de una sola mutacin. Clsicamente, antes de conocerse los
mecanismos que la producan, el desarrollo de resistencias rpidas fue definido como resistencia tipo
estreptomicina. En el caso de resistencias ms lentas, se las conoca como resistencias tipo penicilina.
Esto indudablemente habla a las claras de que haba una comprensin intuitiva del fenmeno, pero
seguramente no de su gravedad (se desconoca en ese entonces la existencia de las resistencias
transmisibles). La mayora de las veces, las mutaciones son escalonadas, lentas, como en el caso de las
quinolonas. Esto requiere una mutacin a nivel del gen que codifica la produccin de una enzima (girasa
de ADN) que ayuda en el proceso de transcripcin de ADN. Sin embargo, el desarrollo de resistencia a
quinolonas es ms rpido, como en el caso de las enterobactericeas en que una sola mutacin da lugar a
un nivel bajo de resistencia, requiriendo una segunda mutacin para adquirir un nivel elevado. Por su
parte, en Campylobacter, una sola mutacin es capaz de generar un elevado grado de resistencia a
quinolonas. En este caso en particular, el desarrollo de resistencia no requiere de ADN externo, solamente
la droga y la bacteria.!

2. Las resistencias transferibles: En este caso, la bacteria obtiene la informacin gentica que
codifica resistencia de otra bacteria que es resistente.De dnde proviene el material gentico original? Se
piensa que los genes que codifican la resistencia pueden provenir de las mismas bacterias productoras de
antibiticos. La resistencia en este caso est codificada en ADN extracromosmico que se autoduplica
dentro de la bacteria y es transferido a otras por mecanismos varios. La primera descripcin de resistencia
transferible fue hecha en Japn en los aos 50 (Davies, 1997). Sin embargo se ignoraba la magnitud e
importancia que ese fenmeno iba a tener en el tratamiento de las enfermedades infecciosas humanas y
animales. Los genes que codifican resistencia a antibiticos fluyen desde y hacia bacterias Gram positivas
y Gram negativas y bacterias que habitan nichos extremadamente diferentes (Levy, 1997). Las
transferencias entre gneros bacterianos diferentes son lamentablemente frecuentes. Es muy importante
(Prescott, 2002), considerar al enfocar las prioridades cientficas sobre las bacterias patgenas, se
desestim lo que podra ocurrir con las saprfitas. Mientras tanto, esta porcin inofensiva de la
poblacin bacteriana de los organismos animales y humanos sigui actuando como reservorio de
resistencias. Esta hiptesis conocida como hiptesis del reservorio asume que cierta concentracin
umbral de antibitico es necesaria para seleccionar y luego mantener resistencias, asumiendo tambin que
los genes mutados y responsables de la resistencia, no son fenotpicamente neutrales, sino que implicaran
una cierta incompetitividad por parte de la bacteria en ausencia de la droga. La concentracin umbral
sera aquella capaz de seleccionar bacterias, an saprfitas. La droga debera ser utilizada en una escala
tal que las bacterias resistentes, aunque inicialmente excasas, prosperaran hasta hacerse cargo de todo
aquello dejado libre por las bacterias susceptibles. Segn esta hiptesis, la supresin del uso de
antibiticos debera generar un fenmeno inverso a travs del cual, la poblacin resistente, lentamente
dejara lugar a cepas susceptibles. Pese a ser una explicacin muy razonable del fenmeno de
diseminacin de la resistencia, esta hiptesis es fuertemente cuestionada por algunos autores.!

El tracto gastrointestinal animal y humano ha sido considerado como el lugar de eleccin de las
transferencias de resistencias. Otros nichos, sin embargo, comienzan a ser considerados como de gran
importancia. As, el intestino de animales salvajes (especialmente roedores), animales de compaa, y,
esencialmente peces, en especial considerando explotaciones comerciales para produccin de stos,
representan lugares en que el fenmeno se producira en gran escala. El medio ambiente representa, en
ciertas circunstancias especiales, un lugar de intensa actividad microbiana, donde los intercambios
podran tener lugar en forma extensa. As, ciertos lugares como la tierra, especialmente en zonas en que
se produzcan descargas de materia fecal, producto, por ejemplo de limpieza de corrales, podra funcionar
de esta manera. Cursos de agua vinculados al vertido de desechos cloacales sin tratamiento seran lugares
ideales de intercambio. Como fue presentado en el Documento de Base de la Consulta de Expertos en
Uso No-humano de Antimicrobianos y Resistencia Antimicrobiana organizada en conjunto por
Organizacin Mundial de la Salud, Organizacin de las Naciones Unidas para la Agricultura y la
Alimentacin y la Organizacin Mundial de la Salud Animal (FAO/OIE/WHO, 2003), hay un conjunto
de factores que deben ser considerados en la diseminacin exitosa de clones resistentes en humanos y
animales, los cuales incluiran:!

Capacidad de la bacteria de sobrevivir y competir con otros clones en el mismo nicho u otros.
El potencial de adaptarse a nuevos ambientes.
La resistencia a las condiciones del medio, incluyendo factores fsicos y qumicos.
La capacidad de colonizar hospedadores animales y humanos y reproducirse luego de colonizar.
La habilidad para superar la respuesta inmune del hospedador.
La estructura de la industria animal: Infecciones arriba en la pirmide, en animales de lite
gentica pueden generar diseminacin hacia abajo en la descendencia.
El manejo de las explotaciones, esto incluye disposicin de materia fecal y movimientos de
animales.
La resistencia (esencial) a otros antimicrobianos usados para otros propsitos.

Los mecanismos de transferencia de resistencias pueden clasificarse en: Plsmidos, Transposones,

Integrones y casetes genticos

Los plsmidos son porciones circulares de ADN extracromosmico que puede estar codificado
para resistencia a un determinado antibitico. Cuando codifican resistencias se los denomina plsmidos R.
Los plsmidos son autorreplicantes, independientemente del ADN cromosmico. En general codifican
caractersticas que mejoran los rasgos de supervivencia de las bacterias, sin ser imprescindibles para la
misma. Pueden ser transferidos entre bacterias del mismo, o diferentes gneros. La adquisicin de
resistencia por parte de la bacteria receptora, por lo tanto, es en un paso. Un plsmido puede ser
incorporado por un virus y transferido a otra bacteria. En general se cita como ejemplos a los
bacterifagos. Tambin puede pasar de una clula a otra por conjugacin.!

Transposones: Son los ya clsicamente conocidos como genes saltarines. Son cadenas cortas de
ADN que saltan de cromosoma a plsmido, en uno u otro sentido, entre plsmidos o entre plsmidos y
bacterifagos. La caracterstica ms saliente de este tipo de material es la de integrarse con facilidad a
cadenas de ADN diferente del original. A diferencia de los plsmidos, los genes saltarines no son
autorreplicantes, deben mantenerse dentro de una estructura autorreplicante para replicarse. Un rasgo
central y peligroso de los transposones es la posibilidad de que varios de ellos, codificando resistencias a
mltiples drogas, estn incluidos dentro de un mismo plsmido, lo que permite, por transferencia de este
ltimo, la adquisicin de multirresistencia por parte de la bacteria receptora.

Integrones y casetes genticos: Diferentes de los transposones pero de mecanismos algo

parecidos. Se recombinan en un sitio especfico y codifican resistencia a un solo antibitico. Junto con los
transposones, son los sistemas que ms actan en la adquisicin de resistencias por parte de los
plsmidos. Constan de tres regiones, dos invariables y una central variable, que es la que porta el casete.
El denominado casete es un elemento que incluye un gene y un sitio recombinante. Se han identificado
ms de cuarenta casetes y la mayora porta genes de resistencia (Hall, 1997).!
Mecanismos de resistencia: Las bacterias pueden volverse resistentes a los antimicrobianos, pero, por
qu mecanismos?:

Inactivacin enzimtica de los antibiticos!

Impermeabilidad de la membrana o pared celular!
Expulsin por mecanismos activos del antibitico!
Modificacin del sitio blanco del antibitico en la bacteria!

Existen otras denominaciones de resistencia como son:

Resistencia relativa o intermedia: ocurre un incremento gradual de la MIC a travs del tiempo.
Para obtener un efecto teraputico es necesario alcanzar niveles sricos y tisulares adecuados. La
susceptibilidad o resistencia del germen es en este caso dependiente de concentracin.
Resistencia absoluta: sucede un incremento sbito en la MIC de un cultivo durante o despus de la
terapia. Es inefectivo el incremento de la dosis clnica usual. Ejemplo de ello es la Pseudomonas
spp. resistente a gentamicina y el Streptococcus pneumoniae altamente resistente a penicilina y uso
de levofloxacina.
Seudorresistencia: ocurre una resistencia in vitro pero una gran efectividad in vivo.

Los antibiticos originan residuos y pueden causar problemas para el medio ambiente: Los
antibiticos se metabolizan por distintos mecanismos y persisten en diferentes tejidos hasta su correcta
eliminacin, situacin que genera dos nuevos problemas que es necesario conocer y solucionar. El
primero es la persistencia de residuos en los alimentos de origen animal (leche, carne, vsceras, huevo,
miel), que pueden desencadenar procesos alrgicos en las personas que consuman dichos alimentos y
contribuir a la seleccin de bacterias resistentes en el intestino humano, y el segundo, la bioacumulacin
en los residuos ganaderos (estircol, gallinaza), con los problemas de contaminacin ambiental de suelos
y aguas que potencialmente pueden derivarse. Para combatir el primer problema se han establecido los
tiempos de espera, destinados a garantizar niveles tcnicamente seguros de residuos de antibiticos en
alimentos, mientras que para minimizar los problemas medioambientales es necesario conocer las
peculiaridades de adsorcin y de degradacin de cada antibitico.!

Bacterias resistentes en medicina veterinaria: La resistencia de Escherichia coli a los

antibiticos es un fenmeno descrito hace tiempo y la vinculacin entre la aplicacin de antibiticos y su
emergencia estara demostrada segn Linton. La manutencin de animales en condiciones de crianza
intensiva, bajo presin quimioterpica, es la forma ideal de generar resistencias. Este hecho fue
demostrado por primera vez en 1957 por Smith, en cerdos tratados con tetraciclinas en la dieta. Debemos
tener presente que fue en esa poca cuando la actividad promotora del crecimiento de los antibiticos fue
descubierta y utilizada en forma extensiva. Con el paso del tiempo, esas cepas resistentes de E. coli
compitieron con xito con las susceptibles en el contenido intestinal. Uno de los problemas actuales es
que incluso la suspensin de los tratamientos con tetraciclinas puede no resolver el problema dado que
por accin de los transposones, la codificacin de la resistencia radica, en muchos casos, en los
cromosomas. En general, y cuando un tratamiento es corto, hay una eliminacin de cepas saprfitas
sensibles de E. coli y una enorme predominancia de cepas resistentes. Sin embargo, no se trata de un
fenmeno permanente. Las bacterias persistirn, si el antibitico contina siendo administrado. Si no,
pierden su defensa, y las bacterias susceptibles vuelven a predominar. Cuando, por el contrario, el uso del
antibitico es por tiempos prolongados, aqu los organismos resistentes pueden persistir, incluso sin el
antibitico que los proteja. El caso de la Salmonella Thyphimurium es interesante, dado que la
multirresistencia en aislamientos animales ha sido descrita extensivamente. Hay ciertos bacterifagos que
toman plsmidos codificadores de resistencia de E. coli y los pueden transferir a S. Typhimurium. Los
casos de resistencia de S. Typhimurium son comunes en aislamientos de terneros. Algunas variantes
resistentes de Salmonella tienen la caracterstica de emerger y, un tiempo variable despus declinar en
prevalencia. Histricamente, aislamientos de serotipos multirresistentes de S. Typhimurium, fagotipo 29,
fueron hechos en 1965. En esa poca el microorganismo comenz a presentarse en la poblacin humana.
En la dcada del 70, el fagotipo 29 se haba transformado en raro, pero emergieron cepas
multirresistentes, causando estragos en la poblacin bovina en G. Bretaa, los fagotipos 204, 193 y 204c.
Este brote cruz al continente europeo y tambin se presentaron casos humanos. Tambin en USA se
describieron casos de antibioticorresistencia en Salmonella, relacionndosela con infecciones y resistencia
en animales. El fagotipo 204c predomin hasta los aos 90, cuando comenz a declinar. Recientemente
una cepa multirresistente de S. Typhimurium muy patgena tanto para humanos como para bovinos fue
aislada de estos ltimos. Esta cepa fagotipo DT 104, al parecer originada en Inglaterra y difundida luego a
todos los continentes, causa enfermedad severa en aves, bovinos y cerdos. A diferencia de los anteriores
fagotipos en este caso la multirresistencia parece estar integrada en el cromosoma. Este microorganismo
es el ms utilizado en la argumentacin sobre uso de antibiticos en animales y el desarrollo de
resistencias que puedan causar enfermedad seria en el hombre.!

Las fluoroquinolonas de uso veterinario, aparecen en la dcada del 90 en medio de discrepancias

porque era el nico grupo nuevo de antibacterianos disponible. Se trata de un grupo de drogas que se
puede utilizar en forma teraputica y eventualmente preventiva en el hombre y de la misma manera en los
animales, ya que, en estos ltimos no se las usa como promotores del crecimiento. Luego de varios aos
de uso en Europa, aparecieron cepas de Campylobacter jejuni resistentes a fluoroquinolonas.

La llegada de las bacterias animales a la poblacin humana: Escherichia coli

multirresistentes, Salmonella Typhimurium multirresistentes, Enterococcus vancomicina resistentes,
Campylobacter quinolonas resistentes, son microorganismos que habran emergido, por lo menos en parte
de explotaciones agropecuarias. Este hecho se debe sumar al conocimiento de la enorme capacidad de
intercambio gentico existente en el intestino, y de la magnitud del reservorio de resistencia representado
por los microorganismos saprfitos que lo pueblan. Esto ha generado una permanente discusin sobre el
tema de la transferencia de resistencias de los animales al hombre. En esta discusin el punto central es la
utilizacin de antibiticos a dosis por debajo de las teraputicas para la prevencin de enfermedades o,
simplemente para el aprovechamiento de los efectos productivos de los antimicrobianos. Sin embargo,
este fenmeno de transferencia no es fcil de demostrar, y menos an, de medir. Por otra parte una de las
piedras angulares de esta discusin ha sido siempre el origen de estas resistencias: Provienen las mismas
de la utilizacin animal? O provienen del uso en seres humanos? Indudablemente, provienen de ambas
partes, en proporciones difciles de cuantificar. Es evidente que, a nivel mundial, la utilizacin de
antimicrobianos en seres humanos dista de ser consciente y correcta, la automedicacin alcanza niveles
alarmantes, la compra de antibiticos sin recetas es habitual en muchos pases y, por lo tanto, mientas esto
ocurra, la emergencia de resistencias no podr ser controlada de ninguna manera. Algo similar podemos
decir de la utilizacin de antimicrobianos en explotaciones agropecuarias. Si drogas de grupos qumicos y
mecanismos de accin similares a las utilizadas en tratamientos humanos, son usados para promocin del
crecimiento, a dosis subteraputicas y durante prolongados perodos de tiempo, tampoco se podr ejercer
ningn control. Finalmente, y a la luz de los ms modernos conocimientos sobre terapia antimicrobiana,
probablemente muchos de los actuales conceptos que hacen a la antibioterapia humana y animal deban ser
revistos, a efectos de, efectivamente, transformarla en racional y eficaz. Clsicamente, desde que el
Gobierno de Gran Bretaa form un comit para que se expidiera sobre el tema en 1969, se comenz a
proponer que se podra continuar con la utilizacin de antibiticos como suplementos en los alimentos en
el caso que las drogas utilizadas fueran de uso limitado en el hombre, no fueran capaces de inducir
resistencias cruzadas con drogas usadas en el hombre y si redujeran el costo de la produccin animal. En
esa poca estas conclusiones dieron lugar a una gran discusin. Como hemos mencionado antes, esta
discusin an contina, aunque no por el informe en s, sino porque an en nuestros das no es
globalmente aplicado. Si las conclusiones del informe hubieran sido aplicadas globalmente, posiblemente
no hubiramos padecido el incremento de resistencias que actualmente conocemos, aunque, de ninguna
manera se hubiera detenido su avance, que es un fenmeno normal de seleccin bacteriana frente al uso
de antimicrobianos.!

Uso Racional de los Antibiticos: Puesto que los antibiticos son imprescindibles para
garantizar la salud de los animales, es necesario que su uso se lleve a cabo de acuerdo con las normas
estrictas que han sido enunciadas por distintas organizaciones, y que podemos resumir en las siguientes
lneas de utilizacin:

Slo se deben prescribir en infecciones producidas por bacterias y cuando dichas bacterias sean
sensibles al antibitico. Esto implica que el proceso debe ser correctamente diagnosticado y que la
sensibilidad de la bacteria debe estar comprobada.
Se debe emplear el antibitico de espectro ms restringido y ms antiguo de entre los posibles.
Los antibiticos deben administrarse siguiendo estrictamente las condiciones de autorizacin (la
ficha tcnica) de cada medicamento.
 Respetar la dosificacin y las pautas especficas de administracin del medicamento.
Respetar el tiempo de espera establecido para cada medicamento. Hay que tener en cuenta que si se
varan las condiciones de administracin (por ej. dosis, posologa), el veterinario debe establecer un
nuevo tiempo de espera
Los antibiticos no son la solucin global para los problemas de una granja. No se pueden emplear
como sustitutos de buenas prcticas de manejo e higiene, o para desinfeccin de las explotaciones.!
Se debe promover la instauracin de las tcnicas de prevencin basadas en el empleo de vacunas.!
Los antibiticos pueden generar problemas de salud pblica, que se minimizarn si: Se respetan los
tiempos de espera; se siguen procedimientos de gestin de residuos ganaderos; se restringe su uso a
los procesos en los que est garantizada su eficacia.
Otro aspecto MUY importante que se debe tener en cuenta en la realizacin de las pruebas de
susceptibilidad, es la eleccin correcta de los antibiticos, basado en los siguientes criterios:
!
Microorganismo aislado.
Mecanismo de accin del antibitico.
Espectro de accin del antibitico.
Biodisponibilidad del antibitico en rganos y sistemas (localizacin de la infeccin).
Origen o fuente de la infeccin (hospitalaria o extrahospitalaria).
Estados fisiolgicos del paciente (edad, gestacin, entre otros).
Estados patolgicos subyacentes (inmunosupresin, tratamiento previo con antibiticos,
insuficiencia renal o heptica, entre otros).
La prescripcin de algunos medicamentos est sujeta en muchas ocasiones a factores o
circunstancias inherentes al hospedero. Los antibiticos no son la excepcin. Es por ello que el
veterinario deber conocer las restricciones que tiene el uso clnico de algunos antibiticos, con el
fin de elaborar pruebas de susceptibilidad que proporcionen una valiosa informacin. !

PREGUNTAS

1. Cul es el mtodo ms utilizado para evaluar la sensibilidad antibitica de una bacteria?

2. Qu es el CIM y cul es su importancia en la prctica veterinaria?
!" En qu consiste la hiptesis del reservorio?!
#" Por qu el tracto gastrointestinal, las aguas y el suelo han sido considerados como lugares de
eleccin de las transferencias de resistencias?!
5. Decriba brevemente cada uno de los mecanismos de transferencia de resistencia?
$" Cul es la diferencia entre Resistencia relativa, absoluta y Seudorresistencia?!
%" Por qu los gneros Salmonella y E. coli son bacterias de inters veterinario con alto grado de
resistencia antibitica?!
8. Describa los principales factores a tener en cuenta para el uso racional de los antibiticos en la
prctica veterinaria?
9. Qu criterios se deben tener en cuenta para seleccionar un antibitico en la prueba de sensibilidad?
&'" En el Laboratorio de Microbiologa de la FCA, de acuerdo a la casustica, a la experiencia clnica y
de campo, se ha diseado una lista de antibiticos a evaluar en un antibiograma; teniendo en cuenta
esto, proponga 3 antibiticos a evaluar en un caso de: cistitis, dermatitis, diarrea, conjuntivitis,
aborto y septicemia (Ver documento adjunto).!

!
 PROCEDIMIENTO

1. Cepa bacteriana a estudiar: Debe provenir de un cultivo fresco, preferiblemente de un cultivo en agar,
de manera que podamos comprobar la pureza de la cepa.!

2. Inculo: Se transferirn una o dos colonias del cultivo a un tubo que contenga solucin fisiolgica
estril. Ajustar a la turbidez del patrn 0.5 del estndar de McFarland.

3. Se introducir un hisopo de algodn estril al tubo con el inculo estandarizado en el paso anterior. El
exceso de lquido se eliminar haciendo rotar suavemente el hisopo contra las paredes del tubo.!

4. Con el hisopo debidamente humedecido, se inocular en tres o cuatro direcciones toda la superficie de
una placa con agar Mueller-Hinton, girando sucesivamente dicha placa en ngulos de 90. Se deja secar el
inculo a temperatura ambiente durante algunos minutos (no ms de 20 minutos).

5. Se colocarn con una pinza estril hasta un mximo de 6 discos de antibiticos en forma equidistantes,
presionndolos suavemente contra la superficie de agar (Se podr usar la torreta dispensadora).

6. Se colocarn las placas a 37C, en atmsfera aerbica durante toda la noche.

7. Lectura: Se realizar despus de 18 horas de incubacin. Con una regla milimetrada, se medir la zona
clara alrededor del disco de antibitico, el cual se corresponde con la inhibicin del crecimiento
bacteriano. Estos datos se compararn con los dimetros de zona establecidos para cada antibitico en las
tablas de interpretacin internacional. La interpretacin de los halos de inhibicin nos permitirn expresar
los resultados como sensible, sensibilidad intermedia o resistente. Estas categoras indican lo siguiente:

Sensible (S): la infeccin debida al microorganismo aislado puede ser tratada apropiadamente con el
antibitico a la dosis recomendada, de acuerdo a la gravedad de la infeccin. Sin embargo, para la
prescripcin definitiva del medicamento, el veterinario tratante tendr en cuenta algunos factores tales
como biodisponibilidad del antibitico en el tejido o sistema afectado, presentacin del medicamento,
edad del paciente, condiciones patolgicas subyacentes o fisiolgicas, entre otras.

Intermedia (I): indica que el antibitico tiene aplicabilidad clnica en sitios corporales donde el
antibitico alcance concentraciones teraputicas adecuadas, como es el caso de !-lactmicos y quinolonas
en el tracto urinario. En otros casos, puede utilizarse el medicamento con seguridad en dosis elevadas que
no alcancen los niveles de toxicidad pero que garanticen actividad teraputica. Sin embargo, es
recomendable evitar el uso de la categora intermedia cuando sea posible.

Resistente (R): la bacteria aislada no es inhibida por el antibitico a las concentraciones teraputicas
ideales o la bacteria ha generado mecanismos de resistencia que evaden la actividad del antibitico, por lo
tanto, la eficacia clnica de ste no es confiable. Es recomendable que ante el aislamiento de un
microorganismo multirresistente clnicamente significativo se ensayen otras pruebas de susceptibilidad
adicionales (CIM).

8. El reporte de los resultados del antibiograma debe ser realizado en forma clara y precisa y enviados en
forma inmediata al veterinario tratante. Utilice la siguiente tabla para registrar los resultados obtenidos en
los antibiogramas problema:
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