https://www.tplaboratorioquimico.

com/laboratorio-quimico/procedimientos-basicos-de-
laboratorio/que-es-la-cromatografia.html
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrficos_6700.pdf

http://www.buenastareas.com/ensayos/Interacciones-De-Un-Compuesto-Con-La/26219588.html
https://www.textoscientificos.com/quimica/cromatografia/parametros

http://www.relaq.mx/RLQ/tutoriales/cromatografia/Thin.htm#adsorbentes

sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/jrvc/QA_II/Cromatografia_de_Capa_Fina.doc

Preparacin de la placa.

El adsorbente se deshace en agua destilada. Para mezclar la papilla homogneamente es

preferible agitar de modo mecnico. La porcin de adsorbente y de agua depende del tipo
de adsorbente. Dos partes de aguan y una de adsorbente pueden tomarse como norma
general, no obstante, habr de consultarse las instrucciones del fabricante.

En general para realizar una separacin preparativa de un gramo de muestra es necesario

una placa de vidrio de 20 x 20cm., 35 gramos de adsorbente y 80ml de agua destilada.

Las propiedades de la fase estacionaria pueden alterarse mediante la adicin de compuestos

tales como disoluciones tamponadoras para mantener para mantener el pH deseado. En la
preparacin de las placas tambin se pueden adicionar indicadores fluorescentes o
aglomerantes.

La placa debe quedar libre de grumos y rugosidades. Para ello existen en el mercado
extensores que se utilizan para crear de forma mecnica placas homogneas del espesor
deseado. Si no se dispone de extensor, el proceso a seguir es el siguiente:

1) Mezclar en un matraz Erlenmeyer el agua y el adsorbente.

2) Agitar energticamente.

3) Extender la papilla sobre el soporte de vidrio.

4) Hacer oscilar la papilla de un lado a otro.

5) Golpear con el dedo la parte inferior del soporte.

Se dejan reposar un corto espacio de tiempo despus de cubrirlas; luego se colocan en

bandejas metlicas. Puede activarse el agente adsorbente, dejando las placas reposar toda la
noche a temperatura ambiente, bien calentndolas durante 30- 60 minutos a 105- 110C (las
placas de celulosa no deben calentarse ms de 10 minutos a 105C) para expulsar as el
aire.

Registro RF

El valor de Rf depende de las condiciones en las cuales se corre la muestra (tipo de

adsorbente, eluyente, as como las condiciones de la placa, temperatura, vapor de
saturacin, etc.) Se define como la distancia recorrida por la muestra desde el punto de
aplicacin entre la distancia que recorre el disolvente hasta el frente del eluyente.

https://es.scribd.com/document/225163028/CROMATOGRAfia-teoria
https://es.scribd.com/doc/63927220/Laboratorio-Quimica-Organica

7. Cromatografa en columna
La cromatografa de columna es una tcnica basada en la adsorcin y solubilidad. Es una
tcnica de particin slido-lquido, puesto que existe un equilibrio dinmico entre la
adsorcin y desorcin (elucin). Existen diferentes clases de interacciones intermoleculares
que originan que los compuestos orgnicos se unan a la superficie del adsorbente con
mayor o menor fuerza dependiendo de la naturaleza polar o no polar de los compuestos.
Los compuestos no polares interaccionan dbilmente con el adsorbente mediante fuerzas de
Vander Waals, mientras que las interacciones ms fuertes se manifiestan en compuestos
polares que van desde fuerzas del tipo dipolo-dipolo hasta interacciones ms directas como:
formacin de sales, enlace de coordinacin o puentes de hidrgeno. La fase mvil y la fase
estacionaria son las mismas que para el caso de cromatografa en capa fina, variando para el
caso del adsorbente, el tamao de partcula.

La columna de cromatografa est constituida por un tubo de vidrio en posicin vertical en

el cual por la parte baja, se colectaran las diferentes fracciones. En el fondo del tubo
seintroduce un pequeo trozo de algodn que cumple la funcin de un filtro que impide que
el gel de slice salga.

Posteriormente, por la parte superior, se introduce el adsorbente, el cual ha sido

previamente suspendido en el disolvente seleccionado (va hmeda) para la separacin con
el objeto de eliminar las burbujas que se encuentran en las partculas de adsorbente. Existen
otros tipos de empacados, el empacado por va seca consiste en introducir el adsorbente y
posteriormente el eluyente seleccionado.

La cantidad requerida de fase estacionaria se determina de acuerdo a la cantidad de muestra

a separar. Una regla comn es usar de 30 a 100 veces el peso de la muestra a separar de
adsorbente. Las dimensiones de la columna se disean segn las caractersticas de la
muestra a separar, siendo por lo general una relacin de 10:1 de largo de la columna por el
radio de sta. 6 Una vez que se ha preparado la columna, la muestra a separar se disuelve en
la mnima cantidad de disolvente y se aplica por la parte superior de la columna, llevndose
a cabo la elucin por gravedad, colectando por la parte baja de la columna, las diferentes
fracciones separadas. El grado de elucin de los diferentes compuestos separados depende
del grado de polaridad de cada uno de ellos. Es muy importante sealar que se debe cuidar
que no se seque la columna. La velocidad del flujo debe permitir el tiempo necesario para
que exista un equilibrio entre las dos fases. La identificacin de los compuestos separados
por cromatografa en columna se realiza por cromatografa en capa fina.

7.11 Conceptos

Adsorcin: es el proceso por el cual tomos o molculas de una sustancia que se encuentra
en determinada fase, son retenidas en la superficie de otra sustancia, que se encuentra en
otra fase. Como resultado de este proceso, se forma una capa de lquido o gas en la
superficie de una sustancia slida o lquida. Ejem: almina, gel de slice, carbn activo,
fosfato clcico, hidroxiapatito...

Absorcin: La absorcin es una operacin qumica que trata la separacin de los

componentes que conforman una mezcla gaseosa, ayudndose de un solvente en estado
lquido, con el que conseguir formar una solucin. El proceso incluye una difusin
molecular o un paso de masa del soluto a travs del gas.

Eluyente: Es un disolvente que se usa en tcnicas de cromatografa para extraer un

compuesto que se quiere separar de otra fase.

Eluato: Cada una de las sustancias que migran a travs del lecho de la fase estacionaria
(impulsadas por la fase mvil) dentro de un sistema de separacin cromatogrfico.

Fase estacionaria y mvil: La fase estacionaria, un lquido un slido o un gel, est

contenida en una probeta de largo cuello(llamada colector), formando una columna. La fase
mvil consiste en una disolucin de material que se desea analizar en una disolvente
apropiado que no se absorba a la fase estacionaria. A medida que la fase mvil pasa a travs
de la fase estacionaria, se va produciendo una absorcin selectiva: aquellos componentes de
la fase mvil que muestren mayor afinidad de absorcin con la fase estacionaria quedaran
retenidos en las capas superiores de la columna, y aquellos que muestren menor afinidad se
absorbern ms tarde, ms abajo en la columna. El resultado es una columna graduada o
cromatograma en donde cada especie qumica se ha absorbido en una capa concreta. Estas
capas reciben el nombre de platos.