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Curso: 3 Tema 1.
Fundamentos de espectroscopa.
La radiacin electromagntica.
The late Kolthoff, one of the great pioneers of analytical chemistry,
used the motto theory guides, experiment decides in his books. Propiedades ondulatorias de la radiacin.
Aspectos mecanocunticos de la radiacin.
Espectroscopa atmica y molecular.
Tema 2. Tema 3.
Diseo y componentes de los instrumentos espectroscpicos. Espectroscopa UV-visible.
Fuentes de radiacin. Sistemas que absorben en el UV-visible.
Celdas. Ley de Beer.
Selectores de longitud de onda. Instrumentacin.
Detectores. Mtodos y aplicaciones 0.5
A bsorbance
0.3
0.2
0.1
0
200 250 300 350 400
Wavelength/nm
Tema 5.
Tema 4. Principios de espectroscopa atmica.
Espectros atmicos de emisin y absorcin.
Trminos espectrales.
Espectroscopa de luminiscencia molecular.
Anchuras de lnea.
Singlet excited states Triplet excited states
Internal
and
external
Absorption Fluorescence
conversion
Phosphorescence Espectroscopa de emisin atmica.
Atomizacin por llama. Atomizacin con fuentes de plasma.
S0
Atomizacin con arco y chispa.
Ground
state 2 1 3 4 Aplicaciones.
1
Tema 6.
Espectroscopa IR y Raman. Tema 7.
Fundamentos de la absorcin en el IR.
Aparatos dispersivos y no dispersivos. Espectroscopa de rayos X.
Espectroscopa IR por transformada de Fourier. Generacin de rayos X.
Fluorescencia, Absorcin y Difraccin de RX.
Fundamentos de la espectroscopa Raman. Instrumentacin y Aplicaciones.
Instrumentacin.
Tema 1 Introduccin
La Qumica Analtica es la ciencia que identifica los componentes de una
muestra (anlisis cualitiativo) y que determina las cantidades relativas de cada
uno de ellos (anlisis cuantitativo). Generalmente se precisa una separacin
Fundamentos de espectroscopa. previa del analito de inters.
2
Regiones del espectro electromagntico Regiones del espectro electromagntico
3
La luz (radiacin electromagntica) Naturaleza corpuscular
La luz tiene una naturaleza dual: El principio de quantizacin de la energa implica que
Corpuscular (fotones)
slo son posibles ciertos valores discretos de energa.
Ondulatoria (ondas)
Frecuencia: nmero de ciclos por unidad de tiempo. Depende de la fuente emisora y permanece
invariante, independientemente del medio que atraviese. [ ]
ciclos
[ ] hertz [ ] s 1
s
Periodo: tiempo empleado en un ciclo completo. T = 1/ [=] s
h c
E h h c h, constante de Planck = 6,6310-34 J s
4
Interferencia constructiva Interferencia destructiva
c
ndice de refraccin ni
vi
Rayleigh
5
Dispersin de la luz (scattering) Polarizacin
La mayora de los fotones Se dice que la radiacin electromagntica est
dispersados tienen la misma despolarizada cuando los vectores magntico y elctrico
frecuencia que la fuente alcanzan la misma magnitud en todas las direcciones.
(dispersin Rayleigh); sin
embargo, la frecuencia de
algunos fotones (aprox. 1 en
107) ha variado (dispersin
Raman).
Polarizacin Polarizacin
c
sen 1 n2 v 2 v1 1 1
Principio de Fermat: la
sen 2 n1 c v 2 2 2
La longitud L de A a B es: luz sigue el camino ms
v1 corto (menos tiempo).
Si el medio 1 es el vaco, n1 = 1 Puesto que la velocidad es cte (mismo medio) la ruta de tiempo mnimo es la de distancia
mnima que se puede calcular igualando a cero la derivada.
n1 sen 1 n2 sen 2
6
Reflexin de la luz Reflexin de la luz
Si la rugosidad de la superficie lmite es menor que la longitud de
onda, entonces se produce una reflexin propiamente dicha, para la
cual se cumple la ley de la reflexin (ngulo de incidencia = ngulo de Ir Para un rayo que incida
reflexin). Por lo general se refleja nicamente una parte del rayo perpendicularmente a la superficie,
incidente, pues la otra penetra en el medio y es refractada. la reflectancia viene dada por:
Ii
(n2 n1 )2 Ir
Si la rugosidad de la superficie lmite es comparable a la longitud
y, en general,
de onda del rayo incidente se obtiene una difusin (reflexin difusa)
(n2 n1 )2 Ii
Si el rayo sobrepasa un ngulo lmite
determinado, se produce la denominada
Pasar del aire (n=1) a vidrio (n=1,5) supone una reflectancia de
reflexin total.
= 0,04 = 4%
Ver Skoog, pg 133
Ejemplo 6.2
Si hay muchas superficies en el camino ptico, se producen
muchas prdidas: stray light
Difraccin de radiacin monocromtica por rendijas Difraccin de radiacin monocromtica por rendijas
BCF DOE
Difraccin: todo haz paralelo de radiacin electromagntica se curva al
pasar por un objeto puntiagudo o por una rendija estrecha.
CBF
CF BC sen
m BC sen
m : orden de interferencia
DE OD sen
BC DE BC DE
m
OD OE
Ver Skoog, pg 129-130
La difraccin es consecuencia de la interferencia y fue demostrada en 1800 por Young
Ejemplo 6.1
7
Absorcin atmica y espectro Absorcin y resolucin espectral
8
Emisin de cuerpo negro Lneas de emisin de RX
1
mx (Wien)
T
W(B ) T 4 (Stefan)
W V 4 (en el VIS)
Selector
Diseo y componentes de los instrumentos de Celda Detector
espectroscpicos.
Fuente Detector y
Fuentes de radiacin. registrador de la
seal
Celdas.
Selectores de longitud de onda.
Detectores.
Tratamiento de seales.
Selector Selector
de Celda Detector de Celda Detector
Fuente Fuente
9
Instrumentacin general para espectroscopa Instrumentacin general para espectroscopa
Selector Selector
de Celda Detector de Celda Detector
M t
Absorcin
Fluorescencia
Emisin
10
Fuentes en EAM Fuentes en EAM
Caractersticas relevantes:
2. Intensidad
3. Estabilidad
5. Tiempo de vida
6. Geometra
11
I: Fuentes de continuo I: Fuentes de continuo
Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation
12
Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation
Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation
13
Proporcin emisin estimulada / absorcin Mecanismo LASER
R 21(estimulada) N2
R 12 (absorbida) N1
Output
Feedback mechanism
coupler
14
Sistema de aislamiento de Sistema de aislamiento de
1. Filtros
Absorcin (vidrio, pelcula o disolucin coloreada:
solucin ms barata)
Corte
Interferencia
Tres enfoques o planteamientos:
1) Bloqueo de la radiacin no deseada: FILTRO 2. Monocromadores
2) Dispersin de la radiacin y seleccin de la banda estrecha de de inters:
MONOCROMADOR
Prisma
3) Modulacin de las a diferentes frecuencias: INTERFERMETRO Red
El espectro visible
Color de la luz Color visible
absorbida absorbida
15
Filtros de absorcin (filtros de paso de banda) Filtros de corte (cut-off filters)
Relativamente baratos
%T
/ nm
0 cos 1
m ' 2 t
Capas metlicas
semi-reflectantes Radiacin Longitud de onda transmitida: t
transmitida
2tn
m
16
Filtros de absorcin vs de interferencia Filtro de interferencia
Tpicamente, el %T
disminuye con anchuras de
banda decrecientes.
Monochromatic
Radiation
17
Red de escalerilla: interferencia constructiva Red de escalerilla: interferencia constructiva
Una red que contiene 1.450 surcos/mm es irradiada con luz policromtica
No se puede mostrar la imagen en este momento.
CD d sen i
Para r = 20: = (689,7/m) (sen 48 + sen 20) = 748,4/m nm (748,4; 374,2; 249,5 nm, etc.)
AB d sen r
Para r = -10: = (689,7/m) [sen 48 + sen (-10)] = 397,9/m nm (397,9; 199,0; 132,6 nm, etc.)
m d (sen i sen r)
Monocromadores: red
18
Monocromador: dispersin Monocromador: poder de resolucin, R
Dispersin angular: cambio en el ngulo de reflexin a medida
que vara la
1 2
1 2 A = dr/d R ; ; 1 2
2
Dispersin lineal: variacin de la en funcin de la distancia
y a lo largo del plano focal.
Red: 103 - 104
D = dy/d = F dr/d = F A
F: distancia focal de la lente de enfoque Prisma: 101 - 102
Dispersin recproca lineal: D-1 = d/dy = 1/F d/dr [=] nm/mm
m d (sen i sen r) Orden de N de rayas
Ej.: Si R = 103 y = 500, entonces = 0,5 nm
interferencia
dr m
d
d d cosr Para r < 20 cos r 1 D 1 Si r es pequeo, D para Rred = mN Ej.: Calcular la resolucin necesaria para
mF una red- es constante
d d cosr observar procesos de absorcin a 599,9 y 600,1
1
D nm sin interferencia.
dy mF
Rprisma = b dn/d R = 600 / 0,2 = 3.000
A menor d le dr dr dn
corresponde una Para un prisma: D NO es constante. D F b
mayor dispersin d dn d
angular
Variable (ver curvas de dispersin)
F F: distancia focal
f f/nmero: 1 -10
d d: dimetro de la lente
m 2 dsen
El poder colector de luz es ~ f -2
19
Monocromador de red de escalera
Anchura de banda
Si la w se ajusta de modo
D 1 que ef = se
y consigue resolucin
Si y w ef espectral completa.
w
ef w D 1
nm
R 1,2 w?
ef
y mm
1
ef (589,6 589) 0,3 nm
2
ef 0,3 nm
w 0,25 mm
D 1 1,2 nm
mm
20
Anchura de rendija y resolucin Anchura de rendija y resolucin
Rendijas estrechas
garantizan mejor
resolucin
P
Rendija estrecha
Mejor resolucin: aptas para anlisis cualitativo
Prdida de potencia del haz: no recomendables para anlisis cuantitativo
21
Clula fotovoltaica Fototubo de vaco
Muy sencillo
S=kP
Poco sensible
Fatiga
22
Tubo fotomultiplicador (PMT) Detector de diodo de silicio
I1
+ -
h
R (a. u.)
Depletion layer
190 1100 nm
Diode Array
Multi-channel
Amplifier
23
Dispositivo de Carga Acoplada Charge-Coupled Devices (CCD) Dispositivo de Carga Acoplada Charge-Coupled Devices (CCD)
Dispositivo de Carga Acoplada Charge-Coupled Devices (CCD) Dispositivo de Carga Acoplada Charge-Coupled Devices (CCD)
Determining the brilliance distribution of an astronomical object (star, planet, galaxie,...) with
CCD Charge-Coupled Device, "dispositivo de cargas (elctricas) interconectadas the help of a CCD is pretty much similar to the measurments of the quantity of infalling rain
on a farm. As soon as the rain stops, collecting buckets are displaced horizontally on
Los primeros dispositivos CCD fueron inventados por Willard Boyle y George Smith en conveyor belts. Then the water content of the buckets is collected in other buckets on a
1969 en los Laboratorios Bell. vertical conveyor belt. The overall content is sent onto a weighting system.
Dispositivo de Carga Acoplada Charge-Coupled Devices (CCD) Dispositivo de Carga Acoplada Charge-Coupled Devices (CCD)
Pixel Output
register
(a) (b)
(a) (b)
Electrodes (a) By changing in a synchronized way the potential of the electrodes, electrons are
The way a CCD works is illustrated by means of a simplified CCD made of 9 pixels, an output register and an
transfered from pixel to pixel. Charges on the right are guided to the output register
amplifier. Each pixel is divided in 3 regions (electrodes who serve to create a potential well). (a) when an (b) The horizontal transfer of charges is then stopped and charge packages at the output
exposure is made, the central electrode of each pixel is maintained at a higher potential (yellow) than the register are transfered vertically, one by one, to an output amplifier and then read one
others ( green) and the charges collecting process takes place. (b) At the end of the exposure, the electrodes by one. The cycle starts again until all the charges have been read (reading time of about
potentials are changed and charges transferred from one electrode to the other.
1 minute for a large CCD).
24
Dispositivo de Carga Acoplada Charge-Coupled Devices (CCD)
Quantum efficiency curves of different types of CCDs as a function of the wavelenght A veces el ruido es tan pequeo que no se percibe.
compared to the one of other detectors. We can see on this plot the large domain of
wavelenghts for the spectral response of CCDs.
S media de la seal x 1
N desviacin estndar s DER
25
Estimacin del S/N Cociente Seal/Ruido (Signal/Noise ratio; S/N)
Un cociente S/N
bajo proporciona
muy poca
fiabilidad para la
x = 0.9 x 10-15 A
medida de
Nt = 1.0 x 10-15 A
seales
analticas.
El Lmite de
x = 0.9 x 10-15 Deteccin suele
s = Nt/5 = 1.0 x 10-15/5 = 0.2 x 10-15
tomarse para S/N
~23
S/N = x/s = 0.9 x 10-15/0.2 x 10-15 = 45
26
Mejora del cociente S/N Filtro de paso bajo
Hardware & software Deja pasar las seales de frecuencia baja, eliminando el ruido asociado a
frecuencias altas (ruido trmico y de disparo)
Raw Data Filtered Data
Hardware:
1. Toma de tierra y proteccin (caja de Faraday)
2. Filtracin analgica y RC Low Pass
Filter
3. Modulacin: conversin de la seal DC a AC de alta
frecuencia y posterior demodulacin
4. Chopping de la seal: disco rotatorio, ayuda a
discriminar seales contnuas de las transientes
5. Amplificadores operacionales til para instrumentos que miden seales analticas de baja frecuencia
1.0 1.0
Low Pass High Pass Band Pass
0.8 0.8
High Pass
Relative Signal
Relative Signal
0.01 0.1 1.0 10 100 1000 10,000 0.01 0.1 1.0 10 100 1000 10,000
Frequency, Hz Frequency, Hz
Time Time
27
Promediado conjunto Promediado conjunto
En este algoritmo, sucesivas series de datos (matrices) se recogen y suman punto Registro de sucesivos espectros, suma punto a punto y promediado
por punto como en una matriz de la memoria de un ordenador (COADICION).
Despus de la coadicin, los datos se promedian dividiendo la suma para cada n n
Sx y N(rms noise )
n n
Si la seal en x tiene un valor de Sx,
Donde: Sx = seal promedio (punto)
Al sumar n series de datos, la suma valdr: n Sx. Si = medida individual de la seal
n = nmero de medidas
La seal del ruido, Nx, contenido en Sx, tambin se sumar pero como las seales
de ruido son aleatorias se acumulan como la n
Entonces:
Por tanto la suma del ruido de x despus de sumar n series de datos es: n Nx
Sx Sx Sx
n
S n Sx S N n
S x S i
2
n
S x S i
2
n x i 1 i 1
N n Nx Nx n
0,5
0,0
0 100 200 300 400 500 600
Time (s)
Averageof
Average ofSixteen
Four Spectra
Spectra
1,5
1,5
SS N
N S/N
S/N
0.90
0.90 0.150
0.070 6.02
12.81
1,0
1,0
Signal
Signal
0,5
0,5
0,0
0,0
00 100
100 200
200 300
300 400
400 500
500 600
600
Time
Time (s)
(s)
S
S xx S
nn S11 16
4 33. 14
.14612
. 28.56
N N1
N
0.1 M Na2SO4
0.1 sec* 10 sec
1000 counts
1.0 sec
SO4-2
0.1 sec
30 sec
100 counts
400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000
Raman shift, cm-1
Raman shift, cm-1
* spectra were accumulated for period indicated Signal averaging is often required to increase signal above noise
28
High Sensitivity does not necessarily lead to low detection limit
good
1000 e- detector glassy carbon, 785 nm
3000 e-
(low noise)
400 600 800 1000 1200 1400 1600 800 1200 1600
For shot noise, sx = S1/2, so larger signal yields larger noise Raman shift, cm-1
SNR=17
100 ms, 50 um slit
SNR = 10 100 photons
S/B =
A SNR= 5
10 ms, 50 um
10 ms, 20 um SNR=2.8
SNR ~ 100
10,000 photons SNR < 2
S/B > 1000 B 10 ms, 10 um
medida de la seal
Sm2 40 m1
amplificacin
rpidamente con el tiempo
Sbl 0
Concentration (c)
de S C
29
Lmite de deteccin (LOD) y de cuantificacin (LOQ) Lmite de deteccin (LOD) y de cuantificacin (LOQ)
LOD: mnima concentracin o masa de analito que puede ser detectada por un
mtodo instrumental a un nivel dado de confianza (95%)
LOQ: mnima concentracin que puede ser fiablemente cuantificada
LOD
Seal analtica mnima detectable:
Sm: Seal mnima detectable
Sm = Savg, bl + ksbl Savg, bl: Seal promedio del blanco
k: nmero entero (3)
Sm Savg,bl k sbl
cm cm
m m
Ley de Beer.
Instrument Response
LOQ
Sistemas que absorben en el UV-Visible.
cm
Dynamic Range
Concentration
Instrumentacin.
LOQ
Seal mnima cuantificable: Concentracin mnima cuantificable: Mtodos y aplicaciones.
Sq = Savg, bl + 10sbl 10 sbl
cq
m
1. La radiacin es monocromtica
radiacional
160 780
concentracin
30
Ley de Beer dP N (n de partculas absorbentes) P (n de fotones)
mol 23 tomos 3
NC 6,02310 dV (L) 10- 6,02310
20
S db C
L mol
K'
dP = cte N P = cte K db C P = K db C P
S K
dP
K C db
P0 dP = - K db C P;
P
P0 S
P b
dP P
P0
P
K C db; ln
0
P0
K C b
P
db
P log
P
P
K
2,303
b C Abs = a b C Ley de Beer b
db 0
b [=] cm
b a = , absortividad molar; [=] L mol-1 cm-1
c [=] mol/L
cuveta
P'1 P1 P'1 P0
Treal ; Tmedida ; Abs logT log
P' P0 P' P1
P1
Experimentalmente se miden slo potencias salientes
b1 b
31
Ley de Beer Ley de Beer
En un medio absorbente, la potencia decae exponencialmente con la longitud En un medio absorbente, la potencia decae exponencialmente con la
de paso ptico concentracin
Potencia P P1 Potencia P P1
P P P0 10 b c b1 P P P0 10 b c C1
P1
P P2 P P2
b2
P1 C2
P2 P2
C1 C2
b1 b2 b C
1,8
1,6 de hasta 105 L mol-1 cm-1 para la
1,4 constante de proporcionalidad.
Absorbance
1,2
1
0,8
0,6
0,4
0,2
0
220 270 320 370 420 Concentracin
Wavelength/nm
O
0.5
T vs [P340] y = 0,9224e-30498x Beer-Lambert plot for Parsol 340 in ethanol
R = 0,9995
max~45.000
SO 3H
HO 3S 0.4
0,6 1,6 O
y = 13245x + 0,0351
Absorbance
0,4 1 0.2
0,3 0,8
T
[P340]/M [P340]/M
ATotal A1 A2 A3 ...... An
T = P/Po
%T = (P/Po) x 100
A = -log T= abc
%A = 100 - %T
Elucidacin de muestras binarias o ternarias de
componentes absorbentes
32
Mezclas de sustancias absorbentes Ley de Beer: desviaciones
0,5
El punto isosbstico
Absorbance
Actual
0
400 450 500 550 600 650
analticamente til ya
que, a esta longitud de
-0,1
33
Ley de Beer: desviaciones Ley de Beer: desviaciones
Efecto de la radiacin policromtica Efecto de la radiacin policromtica
En la prctica, el monocromador deja pasar una banda de radiacin.
Dos factores relevantes:
Posicin de la banda
del haz incidente con
respecto al mximo de
absorcin del analito.
Anchura de banda del
haz.
La absorbancia medida Am
es:
Instrumentales Instrumentales
Slo cuando las absortividades molares
son iguales a las dos longitudes de
onda, y , la expresin anterior se
simplifica a: La ley de Beer se cumple cuando la anchura de paso de banda del
monocromador es <1/10 de la anchura de semipico de absorcin.
34
Especies absorbentes Especies absorbentes
* y n * alta energa, bajas
n * y * 200 700 nm
2. Cada grupo funcional posee bandas de absorcin caractersticas, como lo son Bandas de absorcin generalmente anchas
tambin las intensidades de las bandas (medida por el valor de ). La El anlisis detallado e inequvoco no es
absorcin de radiacin Vis-UV es debida a los Cromforos ms que a la
molcula en su conjunto (IDENTIFICACIN DE GRUPOS FUNCIONALES posible, si bien se puede hacer una estimacin
en base a su y ). del tipo de enlaces involucrados
Los efectos del disolvente y de los
3. La conjugacin de cromforos aumenta la intensidad y origina cambios substituyentes complican la situacin (y tambin
drsticos en la max de absorcin del cromforo.
pueden aportar informacin).
35
Cromforos comunes Cromforos y auxocromos
H3C H3CO
N Cromforos: Grupos funcionales que absorben radiacin visible o del UV prximo
C
O ( > 200 nm) cuando se hallan enlazados a una cadena orgnica saturada no
absorbente.
Auxocromos: Grupos funcionales que poseen electrones de valencia no-
O enlazantes, n, que no absorben a > 220nm, pero muestran absorcin intensa de
radiacin en el UV lejano (180-200 nm), debido a transiciones n *. Ej. -OH; -
O C
NH2; -Cl, etc.
Cocaine
Compuestose asocia a la cadena
Si un grupo auxocromo max
de.(nm) max el color
un cromforo se exalta
del mismo, lo que en trminos espectroscpicos significa que la banda de
absorcin del cromforo se desplaza a mas largas (Efecto Batocrmico o
Desviacin hacia el Rojo) a la vez que aumenta su intensidad (Efecto
Hipercrmico).
CH3CH2CH2CH=CH2 184 10.000
(Olefina)Cuando disminuye la intensidad de una banda.
Efecto Hipocrmico:
217 21.000
Si se desplaza la del mximo de absorcin de un cromforo a ms cortas (ej.
H2C=CHCH=CH 2
al cambiar a un disolvente ms polar) se ha producido un Efecto Hipsocrmico
(Diolefina Conjugada)
o Desviacin hacia el Azul.
La conjugacin de varios cromforos en una molcula produce un
desplazamiento Batocrmico o Desviacin hacia el rojo de la del mximo de
absorcin. Ej.
A menores Hipsocrmico
36
Substituyentes en los compuestos aromticos Efecto del disolvente
LYCOPENO
C2H5 SO3Na
OCH3 HO
N CH2
NaO3S N N
C
H3C +
SO3- N CH2
SO3Na
C2H5 SO3Na
37
Lantnidos y actnidos Color de los iones sencillos
Las capas d son ms externas y estn ms expuestas que las f. Sus espectros
son ms anchos y la mx se ve influenciada por el disolvente y/o los ligandos.
Haz simple
Se origina un estado excitado en el que ha Puede ser de unicanal o de barrido
tenido lugar una reaccin redox.
38
Instrumentacin Instrumentacin
Doble haz resuelto en el espacio Doble haz resuelto en el tiempo
Es el diseo comercial ms
frecuente
Las seales de la celdilla de muestra y de la celdilla de referencia se
miden simultneamente y se sustraen. Ventajas del doble haz frente al monohaz:
Corrige las variaciones en la intensidad de la fuente
Compensa la deriva del detector y del amplificador (resuelto en el
Se precisan 2 detectores coste elevado tiempo)
Compensa la variacin de potencia del haz con la longitud de onda
Lmpara de
filamento de
Wolframio y su
espectro
b = 10 mm Volumen (L): 160, 100 or 50
39
Instrumentacin: detectores Instrumentos tpicos
Fotmetros
Instrumentos sencillos que usan filtros para seleccionar la
Solo pueden hacer medidas secuenciales a cada
Escasa disminucin de la potencia del haz (ptica escasa) buena S/N
Baratos
Espectrofotmetros
Emplean un monocromador o un elemento dispersivo para seleccionar la
Pueden hacer barridos de registro de espectros
ptica ms compleja peor S/N
Caros
Fotmetro de sonda
Espectrofotmetros Espectrofotmetros
40
Espectrofotmetro Vis-UV de doble haz Espectrofotmetro Vis-UV de doble haz
La luz pasa dos veces por el sistema dispersante mejorando mucho la resolucin.
Caro: > 10.000
Ancho de banda: 0,07 nm
Luz dispersada o errtica: 0,0008%
41
Mezclas de sustancias absorbentes Determinacin de estequiometras. Ordenada de Job
Disoluciones del catin y del ligando con idnticas concentraciones
formales se mezclan en distintas proporciones de volumen, de tal
modo que el volumen total de cada mezcla sea igual.
Las absorbancias son siempre aditivas CM + CL = cte
M 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 mL
L 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 mL
': A' M' b [ M ] N' b [ N ]
xmL C
mol
L
10 x mL C mol
L C mol
' ': A' ' M b [ M ] N b [ N ]
'' '' 10mL 10mL L
XM 0........0,1........0,5........0,9........1 XM + XL = 1
XL 1........0,9.......0,5........0,1.........0
Kd
[M] [L]n
; K d [ML n ] [M] [L]n En el mximo de Aj:
K d [ML n ] [M][L]n
0
AJ = MLn [MLn] + M[M] + L[L] sin corregir. Introduciendo la correccin:
[ML n ] x x
CM = [M] + [MLn] [L]libre xC n[ML n ]
x : fraccin molar de L
AJ = MLn [MLn] + M[M] + L[L] - (MCM + LCL) = CL = [L] + n [MLn] = 1-x: fraccin molar de M [M]libre (1 x)C [MLn ]
0 0
42
Determinacin de constantes de complejacin. Job Clculo de estequiometras. Relaciones Molares
JOB M + nL MLn
C nC C(1-) Consiste en la medida de la absorbancia de disoluciones con una concentracin
constante de metal y una concentracin creciente de ligando, y su
MLn C 1 1 representacin frente al cociente CL/CM.
Kf
M Ln C ( nC ) n nC n
A
AJ
AM
AS
0 X L 1 n
CL/CM
1 XM 0
Partiendo de disoluciones isomolares, basta con mezclar un volumen
AM AS Lo que se ha disociado
constante de la disolucin de metal y volmenes crecientes de la del
Lo que debera haberse formado
AM ligando, midiendo a la a que absorbe el complejo.
M + nL MLn Kf
MLn Kd
In H HIn Kd
[H ] [In ]
; pK d pH log
[HIn]
C nC C(1-) M L n Kf [HIn] [In ]
A 3 A1
A 2 A1
43
Aplicaciones: Valoraciones Fotomtricas Aplicaciones: Valoraciones Fotomtricas
Anlisis de grupos funcionales (complemento de IR y RMN) A. DIRECTO: Componente absorbente en el VIS-UV: Compuestos orgnicos
Control de calidad: Ciertos productos tienen que ser transparentes al VIS-UV
Ej.: El alcohol etlico de 96 puede contener benceno y debe purificarse hasta no
absorber.
Elucidacin de ismeros. Ej.: bifenilos cis-trans B. INDIRECTO: Mucho ms comn en Inorgnica
OH O
245 nm Esta forma posee dobles enlaces conjugados
H3C C C C OC2H5
H = 18000 Lmol-1cm-1
http://omlc.ogi.edu/spectra/hemoglobin/index.html http://www.biologie.uni-hamburg.de/b-online/e24/3.htm
44
Ejemplos: estudios conformacionales Ejemplos: estudios conformacionales
Changes from
Form I to form
II
Recta de calibrado con patrones o estndares Recta de calibrado por adiciones estndar
Se emplea en los casos en que los analitos se encuentran en matrices
complejas en las que es fcil que surjan interferencias.
1. Preparar varias alcuotas idnticas, de un volumen Vx, de la muestra
desconocida
2. Aadir a cada muestra alcuota un volumen creciente, Vs, de una
disolucin estndar de concentracin conocida, Cs, del analito a medir.
3. Enrasar todas las disoluciones a un volumen idntico, Vt.
4. Hacer la medida instrumental de cada disolucin.
5. Trazar la recta de calibrado
m = y/x
6. Calcular la concentracin del analito, Cx, en la muestra.
Instrument Response (S)
b = y-intercept S mVs b
(Vs)0
Vs
http://www.unav.es/quimicayedafologia/quimanal/monografias/estadisti
ca/
Recta de calibrado por adiciones estndar Recta de calibrado por adiciones estndar
La expresin que nos da la seal analtica para cada adicin estndar Combinado las dos
es: expresiones:
kVsC s kVx C x kVsC s kVx C x
S S mVs b S
Vt Vt Vt Vt
Donde:
S seal analtica
k constante de proporcionalidad
Vs volumen de estndar aadido
Cs concentracin del estndar
Vx volumen de la muestra alcuota
bCs
Cx concentracin del analito en la muestra
Cx
Vt volumen total de las disoluciones diludas mVx
45
Adiciones estndar: ejemplo Adiciones estndar: ejemplo
Ej.: el As presente en una muestra biolgica se determina por el mtodo de Ej.: el As presente en una muestra biolgica se determina por el mtodo de
adiciones estndar. Para ello se pipetearon 10,00 mL de muestra en otros tantos adiciones estndar. Para ello se pipetearon 10,00 mL de muestra en otros tantos
matraces de 100,00 mL. A continuacin, se aadieron volmenes crecientes de un matraces de 100,00 mL. A continuacin, se aadieron volmenes crecientes de un
estndar de 22,1 ppm de As a 4 de los 5 matraces, y finalmente- se llevaron todos estndar de 22,1 ppm de As a 4 de los 5 matraces, y finalmente- se llevaron todos
hasta el enrase con agua desionizada. A partir de las medidas de absorbancia, hasta el enrase con agua desionizada. A partir de las medidas de absorbancia,
calcular la concentracin de As en la muestra problema. Arsenic Standard Addition calcular la concentracin de As en la muestra problema.Adiciones estndar con concentraciones
Muestra (mL) Estndar
Estndar Absorbancia Estndar Estndar Absorbancia
(mL)
(mL) 0,45 (mL) (g/mL)
0,40 0,35
10,00 0,00 0,156 m = 0.00818 0,00 0,00 0,156
0,35 0,3
b = 0.1554
10,00 5,00 0,195 0,30 sm = 0.000119 5,00 1,105 0,195 0,25
Absorbance
Abs
10,00 10,00 0,239 0,20
10,00 2,210 0,239 0,15
0,15 0,1
10,00 15,00 0,276 15,00 3,315 0,276 0,05
0,10
0
10,00 20,00 0,320 0,05 20,00 4,420 0,320 0 1 2 3 4 5
0,00
0 5 10 15 20 C (ppm)
Volume Standard (Vs)
5,00 mL 22,1g
1,105 g mL-1
100 mL mL A 0,1554 0,0370 C Para A = 0: C 4,2 ppm
Standard Addition Method (spiking the sample) (3) Dilute each solution to an equal volume, Vt.
- used for analytes in a complex matrix where interferences in the UV/Vis for
the analyte will occur: i.e. blood, sediment, human serum, etc..
- Method:
(1) Prepare several identical aliquots, Vx, of the unknown sample.
Estimacin de la concentracin por adiciones estndar Estimacin de la concentracin por adiciones estndar
Preparar dos disoluciones con alcuotas idnticas del problema. Una alcuota de 25,00 mL de una disolucin acuosa que contiene quinina fue
Hacer una adicin del estndar a una de ellas diluida a 50,00 mL y su absorbancia a 348 nm fue de 0,416 con una celdilla de
Llevar a volumen las dos disoluciones y medir 1,00 cm. A una segunda alcuota de 25,00 mL de disolucin problema se le
aadieron 10,00 mL de una disolucin de 23,4 ppm de quinina. Despus de diluir
a 50,00 mL la absorbancia result de 0,610. Calcular la concentracin de quinina
S S1 m Vs en la celda.
0,65
2
supone, tras la 0,55
0,50
dilucin, una 0,45
S concentracin de 0,40
1 Quinina
10 mL 23,4de:
g
0,35
348
-1
4,68 g mL 0,30
Abs
50 mL mL 0,25
Vs 0,20
0,15
S1Cs Vs
0,10
Cx
S1Cs Vs (0,416) (23,4)(10) 0,05
Cx 20,07 ppm
S 2 S1 Vx S2 S1 Vx (0,610 0,416)(25) 0,00
-13 -12 -11 -10 -9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0 1 2 3 4
[Quinina] / g mL
5
-1
46
Mtodo del estndar interno Mtodo del estndar interno: ejemplo
El Ca puede cuantificarse por espectroscopa de emisin. Al preparar la recta de
Esta metodologa intenta corregir fluctuaciones operacionales e instrumentales
calibrado, se aadi Sr a todos los patrones de Ca y a la disolucin problema, de
modo que todas las disoluciones contienen 2,50 g Sr mL-1. Se midieron las
Se aade una concentracin fija de un estndar (interno) de una sustancia
distinta de la analizada, tanto a los patrones del analito como a la muestra intensidades de emisin del Ca a 422,7 nm y las del Sr a 460,7 nm. En funcin de
problema. los datos, calcular la concentracin de CaCaen
(g la
mL muestra
) I (422,7 problema.
nm) I (460,7 nm)
-1 I(422,7)/ I(460,7)
posibles desviaciones se asumen que son las mismas que sufre el analito. 2,5 10,00 95,2 24,6 3,87
60
Se representa el cociente de seales analito/estndar interno, como en un 2,0
Muestra
problema
36,3 19,4 1,87
int
0,0 0
2 4 6 8 10
4,85 2 4 6 8 10
-1
Ca (g L )
Instrumentacin. Bioluminiscencia
47
Reglas de seleccin Mecanismos de excitacin y relajacin
S1
T1
Energy
Internal
and
external
conversion
Absorption Fluorescence Phosphorescence
S0
Ground
state 2 1 3 4
48
Diagrama de energa Franck-Condon Franck-Condon principle
Excitacin vibracional: Principio clsico de Franck-
Condon
De acuerdo con este principio, la absorcin de un fotn es un proceso
absorcin de la radiacin, los que se pueden mover son los electrones, pero
Las transiciones
ms probables
tienen lugar
cuando la lnea no los ncleos. El ncleo atmico, mucho ms pesado, no tiene tiempo de
vertical toca la
curva superior.
reajustarse durante la absorcin misma, pero s lo puede hacer despus, y
Stokes Shift is 25 nm
Fluorescein
molecule
495 nm 520 nm
Wavelength
49
Transiciones fluorescentes Rendimiento cunticco
fotones emitidos kr
= fotones absorbidos
= kr + knr
* rara vez conduce a
fluorescencia pues Eexc es tan kf
elevada que favorece Kd y Kpd
k f k isc k ec k ic k pd k d
*: ms probable y til para
fluorescencia. El cruce Tiempo de vida de la fluorescencia ()
intersistema S*1 T*1 no es
muy probable debido a una
diferencia notable de energa. Tiempo que transcurre entre la absorcin y la
emisin
1
n* tambin pueden
originar procesos
fluorescentes.
= k +k
r nr
Fluorescencia
Fosforescencia
La rigidez
estructural Fluoresce
previene la n
prdida de
energa por
desactivaciones
rotacionales y Fluorescena
vibracionales
50
Efecto de la rigidez estructural Efecto de la rigidez estructural
Fluoreno Bifenilo
O
N Zn
Fluorescena Fenolftalena 2
51
Amortiguacin (quenching) de la Fluorescencia Efecto de la T y del disolvente
H H H + H H H H
N N N+ Anilina: tres formas resonantes Colorante ANS (8-anilin-naftalen sulfonato)
:
- * ms bajo, menor E, mayor : SO3-
F ~ 0 en disolucin acuosa
-
se ve fluorescencia en el F = 0,98 cuando est enlazado a regiones
VIS hidrofbicas de proteinas y membranas
NH
F = 16 ns, max = 454 nm
H
H + H
N
In anilinio: una sola forma resonante Bromuro de etidio
No se observa fluorescencia en el VIS
H2 N NH2 F ~ 0 En disolucin
+ acuosa
N
CH2CH3
Necesidad de tamponar disoluciones patrn y muestra Unido a cidos
Br- nucleicos
F ~ 1, F = 26,5 ns
52
Efecto de la concentracin Autoabsorcin
P Auto-amortiguacin
F K' (P0 P) Beer : 10 bc F K' P0 (1 10 bc ) * (self-quenching)
P0
Colisiones entre las
molculas excitadas.
S1* 2
3 T1* 1A + h1 1A* 3A*
A h 1 A *
2 3A* 1A + 1A*
1 4
+ h 2
A *
h 2 A e fotooxidacin
1A* 1A
S0
A e A * paso lento
IF tipo p I02
2: Cruce intersistema
A *
A h 3
3: reexcitacin trmica
S1 y T1 muy prximos
Emisin excmera
1A + h1 1A*
1A* + 1A 1A *
2 dmero excitado
(excmero)
1A *
2 2 1A + h 2
53
Fluorescencia retardada
O O
R2
Luciferase Spontaneous
Luciferin + O2 O C C R2 CO2 + O C* Light
R1
R1
54
Time-resolved Fluorometry Propiedades de los compuestos lantnidos de coordinacin
Tiempo de vida elevado >500 s
Las medidas fluorimtricas estn limitadas por los blancos.
Gran desplazamiento Stokes
Disolventes e impurezas presentan corrientes de fondo de
2 ns o menos. Se puede discriminar la seal del analito Perfiles de picos de emisin finos
midiendo a tiempos ms largos. La F est basada en procesos de transferencia de energa del ligando
al catin central.
naftilamina
+
-O S
N
procedente de las medusas es la SO3- N O
3
55
Compuestos naturales fluorescentes Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET)
Compuesto (nm) Compuesto (nm)
Hidrocarburos aromticos Esteroides
Naftaleno 300-365 Aldosterona 400-450
Pireno 370-460 Colesterol 600
Antraceno 370-400 Cortisona 570
1,2-benzopireno 400-450 Testosterona 580
Compuestos Heterocclicos Vitaminas
Quinolina 385-400 Riboflavina (B2) 565
Sulfato de quinina 410-500 Cianocobalamina (B12) 305
7-hidroxicumarina 450 Tocoferol (E) 340
3-hidroxi-indol 380-460 Frmacos
Tintes Aspirina 335
Fluorescena 510-590 Codena 350
Rodamina B 550-700 Estrgenos 546
Azul de metileno 650-700 LSD 365
Coenzimas, cidos nuclicos, pirimidinas Fenobarbital 440
Adenina 380
Adenosina trifosfato (ATP) 390
Molculas cercanas pueden transferirse energa entre ellas.
Dinucletido de la nicotinamida adenina 460
(NADH) Esto sucede cuando el espectro de emisin de una solapa con el de
absorcin de la otra.
Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET) Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET)
FRET es una interaccin dependiente de la distancia entre los estados
excitados de dos molculas. La transferencia resonante de energa
tiene lugar cuando las molculas donora y aceptora estn a menos de
100 una de la otra.
FRET vara con la potencia 1/6 de la separacin intermolecular, por lo
que funciona muy bien a distancias similares a las dimensiones de
macromolculas biolgicas.
FRET puede utilizarse para desplazar espectralmente la emisin
fluorescente de una combinacin molecualr.
El espectro de absorcin del aceptor debe solaparse con el espectro
de emisin del donor.
La transferencia de energa es por va no radiacional, es decir, el
donor no emite un fotn que es captado por el aceptor.
Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET) Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET)
Molecule 1 Molecule 2
Fluorescence Fluorescence
DONOR ACCEPTOR
Absorbance
Absorbance
D* + A D + A* Wavelength
Donor Aceptor
La FRET puede ser til para lograr un Molculas cercanas pueden transferirse energa entre ellas.
espectro de fluorescencia desplazado a Esto sucede cuando el espectro de emisin de una solapa con el de
superiores. absorcin de la otra.
56
Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET) Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET)
1
h FRET h 1 R0
6
2QD J ( ) 6
kT R0 9.78 10 3
~ 1/R6 D r
n
4
Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET) Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET)
Puede unirse
La ruptura del pptido supone la
+
covalentemen
prdida de FRET, desapareciendo la
te a la
F del aceptor
proteina.
Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET) Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET)
57
Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET) Luminiscencia en medios micelares
58
Solubilizacin micelar Solubilizacin micelar
59
Quimioluminiscencia Qumica fornsica
A + B C* C + h
C COO-
NH
O2/OH-
+ h + N2 + H2O
NH
C
COO-
O
Quimioluminiscencia Quimioluminiscencia
Quimioluminiscencia Quimioluminiscencia
Aplicaciones emergentes
Estudios atmosfricos
60
Bioluminiscencia Bioluminiscencia
O O
R2
Luciferase Spontaneous
Luciferin + O2 O C C R2 CO2 + O C* Light
R1
R1
N
S
510-670 nm
S
HO
N
O
HO
Plantas emisoras
Gen luciferasa clonado en plantas
61
Instrumentacin: espectrofluormetro Instrumentacin: espectrofluormetro
Emission
Catodoluminiscencia Catodoluminiscencia
62
Catodoluminiscencia Catodoluminiscencia
63
Alan Walsh y Fernando Burriel Mart Diagramas de energa atmico y molecular
E2 E2
E1 E1
UV-VIS UV-VIS
E E v2
v1
IR
v0
r2
r1
r0
E0 E0
Atomic Emission
Spectroscopy (AES) Modelos similares entre tomos, pero
diferente espaciado
64
Espectros atmicos Espectros de lneas
Espectros de lneas: transiciones electrnicas puras
Las posiciones de las lneas estn bien definidas y son
Anchura de pico:
caractersticas para cada elemento
Anchura expresada en unidades de frecuencia cuando la magnitud de
En espectroscopa atmica es factible hacer anlisis cualitativo
la seal es la mitad de la mxima
Valores tpicos: centsimas de
Ejemplos:
carbono
oxgeno
nitrgeno
2. Efecto Doppler
The more(agitacin
precisely trmica de los tomos que varan su posicin respecto del
the positionobservador)
is
determined, the less
precisely the 0 : frecuencia de la radiacin observada
momentum is u
1 cuando la fuente se mueve respecto al
cknownin this V detector
;
instant, 0and 1/ 2 V=c/n : velocidad de la radiacin en un medio
nviceversa. u 2
1
dado
Heisenberg, uncertainty paper,
1927
V u : velocidad del movimiento de la fuente
lumnica (tomo) hacia el detector
Si los tomos se 3. Ensanchamiento Lorentz (efecto de la presin; colisiones entre los tomos
alejan del detector, emisores y otras partculas presentes)
las ondas se
descomprimen, L P P: presin total del gas en cuyo seno se hallan los tomos del analito
frecuencia ms baja,
ms larga. Buena explicacin de lo que sucede en las alas de la lnea
65
Espectros de bandas de especies moleculares Espectroscopa de absorcin atmica
Fuente
P0 P
Selector de Procesador de la seal
Detector
Chopper
90o
Tipo Mtodo de atomizacin Fuente de
Radiacin Tipo Mtodo de Atomizacin Fuente de
Fuente
arco arco elctrico radiacin
Muestra
muestra
chispa arco de alto voltaje muestra atmica (llama) muestra disuelta muestra
llama disolucin de la muestra aspirada a la llama atmica (sin llama) muestra disuelta muestra
muestra evaporada y calcinada
a f a f a f
t t
66
Componentes instrumentales bsicos Absorcin atmica de una lnea de resonancia
67
Introduccin de la muestra Nebulizadores neumticos
Directa
Vaporizacin electrotrmica
Ablacin por Arco o Chispa
Ablacin por Lser
Descarga luminiscente
100g min-1
Chopper
68
Sistema atomizador (llama) Sistema atomizador (llama)
Nebulizador: transforma la muestra aspirada en una neblina de
gotas finsimas (spray)
Mechero: genera la llama en cuyo seno se vaporiza, atomiza y
excita la muestra.
Eficienica de
nebulizacin:
~5%
69
Procesos durante la atomizacin en llama Composicin de las llamas
Estructura y temperatura de una llama Distribucin de metales en llama rica y pobre (lean) en combustible
Max
temperature
Location about
1 cm above
the primary
combustion
zone.Optical
focus to this
region
70
Lmpara de ctodo hueco Seccin transversal de una LCH (HCL)
nodo: W, Ni, Zr
V 300 V; I = 5 20 mA
Inconveniente: autoabsorcin
0,1 5 torr
2450 MHz til en Fluorescencia Atmica
71
Interferencias Interferencias espectrales
Interferencias espectrales: correccin con dos lneas Interferencias espectrales: correccin con fuente continua
Se usa como referencia una segunda lnea procedente de la fuente que
est muy prxima a la lnea de absorcin del analito. El analito no debe
absorber a la longitud de onda de la lnea de referencia.
Number of 1.38x10-23 J/K Ej.: Calcular el cociente N*/No para un tomo que tiene 2 niveles de energa (ambos
atoms at each Boltzmann
energy Number of constant monodegenerados) que se diferencian en 3,9710-19 J/tomo que est expuesto a
levels at each
energy una llama a 2.500 , 2.510 y 6.000 K.
(degeneracy)
72
Interferencia de ionizacin Interferencia de ionizacin
73
Efecto de la concentracin (AA) Instrumentacin: monohaz
En AA tanto la luz procedente de la LCH como de la llama alcanzan el detector
- medida de una seal pequea en el seno de un fondo grande
- necesidad de restar el fondo (continuo) de la llama para recoger slo la seal
analtica procedente de la lmpara (P/P0)
0 , I0 I Modulacin de la fuente
Lmpara Abs = K b N0 = K b C Doble haz
Sistema dinmico de altas T Volumen mnimo de muestra lquida relativamente elevado (1,5 2 mL)
Tremendamente estable, reproducible, fiable Hay que mantener la cmara de premezcla llena para garantizar un
rgimen estacionario
Pocos efectos memoria
En disolucin acuosa la menor tensin superficial hace que el
Combinando adecuadamente combustible y comburente se logran
rendimiento de la nebulizacin sea bajo (se prefieren disolventes orgnicos;
intervalos de T muy amplios y se logran elevados grados de atomizacin adems se mejora la combustin y se aporta calor a la llama con la consiguiente
mejora en sensibilidad)
Atomizador barato y duradero Gotas gruesas que llegan a la llama: absorciones inespecficas
74
Desventajas de la llama: 2. Intrnsecas Ventajas de los atomizadores sin llama
Disolucin y expansin de la muestra en el caudal grande
1. Incremento de la sensibilidad. (>103)
(hasta 10 L/min) de gases que pasan por la llama: dilucin y
prdida de sensibilidad Los tomos no se expanden
Copa de Delves (Ni) Delves cup: primer intento de confinamiento del vapor
atmico en el paso ptico. Determinacin de Pb en sangre
SbH3 + Q Sb + 3/2 H2
75
Sensibilidad mejorada: fluorescencia Atomizadores electrotrmicos
Fundamentados en trabajos
iniciales de Lvov
Massmann: primer modelo con Introduccin de la muestra
posibilidades de comercializacin (solido, lquido, gas, lodo -slurry-)
Hg0 ascarita
Temp
Seal de tiempo
absorcin
Introduccin muestra
Secado (~ 100 oC)
Pirlisis (hasta cenizas)
(500 - 700 C)
Paso de Ar
Atomizacin
(2000 - 2800 C)
0
50 A, 20 s
76
Etapas de calentamiento Atomizadores electrotrmicos: horno de grafito
0-20 L muestra (disolucin o lodos); mg de slido (anlisis directo de slidos)
Es comn utilizar un modificador de matriz que estabiliza el analito o induce la volatilidad de la
3600 w; 10-12 V; 400-500 A
matriz
Las muestras estn habitualmente acidificadas (para minimizar la adsorcin sobre los recipientes;
Para muestras lquidas:
Rampas de calentamiento: hasta 1000C/s
30-45 s secado suave
30-60s pretratamiento trmico(charring)
5 s (rampa vertical de temperatura)
Vida limitada: 200-300 firings
10 s ciclo de limpieza (eliminacin de cualquier resto de la matriz)
Atomize
Atomize analyte Posibles efectos memoria
Temperature (CO)
2500-2700C
Thermal
pretreatment, ash Automatizacin sencilla:
or Char 1,000-2000 K/s
automuestreadores
Remove matrix or promote reactions in ETA
500-700C
Reproducibilidad exige usar
Dry
110C Desolvate tandas de tubos
Filamentos Filamentos
LCH
LCH
Paso ptico
Donega & Burgess
Navecilla de Ta +
-
(Geometra abierta)
vaco
77
Atomizadores electrotrmicos: horno de grafito Atomizadores electrotrmicos vs. llama
Composicin tpica del horno: Grafito + Sensibilidad: mejores lmites de deteccin (elevados tiempos de residencia
GFAAS: Graphite Furnace Atomic Absorption Spectroscopy del vapor atmico en el atomizador)
Longitud: 18 - 28 mm + Menor volumen de muestra
Volumen de muestra: 5 - 100 L + Amplia gama de estados de muestra.
Vida del horno: 200 - 1000 ciclos + Menor dependencia de la seal de las caractersticas fsicas de la
Temperatura mxima: 3000C para evitar descomposicin del grafito muestra (viscosidad, tensin superficial y densidad)
El C puede actuar como reductor de iones metlicos + La purga con Ar disminuye la probabilidad de formacin de xidos y
Flujo de Ar: evita oxidacin del C graftico facilita una mayor poblacin de vapor atmico
- Serios efectos de matriz, de formacin de compuestos interelementales
Otros materiales: Ta, W, Pt y de memoria
Se requiere alto punto de fusin - Reproducibilidad inferior ( 5- 10%)
No debern emitir radiancia a alta temperatura (desventaja del W y Ta) - Tiempo de anlisis ms largo
- Elevado coste; necesita ms mantenimiento
Efectos de matriz detectados por adiciones estndar Eliminacin de los efectos de matriz
1. Adicin de modificadores de matriz
Sustancias que ayudan a que el proceso de atomizacin tenga lugar del modo
ms homogneo posible y en el momento adecuado.
Aditivos que modifican las propiedades fsico-qumicas de la muestra para
favorecer la vaporizacin y atomizacin
Recetas especficas para elementos y matrices particulares
78
3. Horno de grafito con plataforma de Lvov (1982) Horno de grafito con plataforma de Lvov
Calentamiento de la
muestra por radiacin
y no por contacto.
Horno de grafito con plataforma de Lvov Horno de grafito con plataforma de Lvov
La vaporizacin de MX
colocado en la plataforma Tpirlisis
se retrasa hasta que la
pared y el gas estn tiempo
suficientemente
calientes para atomizar MX
La muestra situada en la plataforma solo se atomiza cuando
la pared se calienta suficientemente para producir tomos
Horno de grafito con plataforma de Lvov Correccin de fondo con lmpara de Deuterio
Approx
gas temp
seen by
analyte
Appearance
temperature
79
LCH + abs Recuerde: ~35%T Correccin de fondo con efecto Zeeman
atmica Anchura de lnea ~ 5 pm
Paso banda ~100-1.000 pm
Zeeman normal: el
Lneas difieren ~0,01 nm campo magntico
produce
desdoblamientos
D2 + abs
~100%T idnticos en los
estados
atmica fundamental y
excitado
Niveles
energticos
Transiciones
LCH +
fondo
~55%T
Espectros
D2 +
~55%T - +
fondo Sin Campo magntico Con Campo magntico
A
Ingle and Crouch,
Spectrochemical Analysis
Correccin de fondo con efecto Zeeman Correccin de fondo con efecto Zeeman
DC en atomizador
AC en atomizador
1. Luz no polarizada procedente de la LCH (A) pasa a travs del polarizador rotatorio (B)
2. El haz se desdobla en componentes perpendiculares y paralelos (C)
3. La luz entra en el horno sometido a un campo magntico, dando 3 picos de absorcin (D) DC en fuente
4. El analito solamente absorbe radiacin polarizada paralela al campo magntico, mientras que el fondo
molecular absorbe siempre (E)
5. El resultado es un modelo cclico de absorcin (F)
6. La diferencia entre la absorbancia durante el semiciclo paralelo y el perpendicular proporciona el valor
corregido con respecto al fondo.
B=0
2P
1/2 + Corrige absorciones de fondo de hasta 2 unidades de absorbancia
2S
1/2
+ Es particularmente til en el anlisis de muestras slidas
B=0 B 0 Solo absorben
radiacin polarizada
paralela al campo
80
Zeeman vs Deuterio Correccin de fondo Smith-Hieftje
- Puede presentar lecturas dobles (para concentraciones altas puede dar la misma absorbancia que para concentraciones bajas)
Auto-inversin con
auto-absorcin
- Prdida de energa del sistema ptico debida a los polarizadores (prdida de sensibilidad)
- Hay elementos que presentan efecto Zeeman normal (Cd, Zn), pero la mayora presentan
elemento en un 10 - 50%
Directa
Vaporizacin electrotrmica
Ablacin por Arco o Chispa
Ablacin por Lser
Descarga luminiscente
100g min-1
81
Ejemplo de determinacin cuantitativa por AA
V. Atomic Fluorescence Spectroscopy
A. Instrumentation
Atomizer
Source Needs to be high intensity; Wavelength
usually EDL or laser. Selector
Detector
scatter.
Source
Atomizer most commonly flame;
also ETA, glow
discharge, or ICP.
Wavelength Selector grating monochromator (Dispersive) but not always
necessary (Nondispersive).
Emisin atmica
V. Atomic Fluorescence Spectroscopy
The fluorescence signal can be saturated so that it no longer depends upon the Comienzos S XIX: llama de alcohol (Brewster, Herschel, Talbot, Foucalt)
source intensity.
Mediados S XIX: Descubrimiento de Cs, Tl, In, Ga por espectroscopa
This is the desired situation because source fluctuations will not affect the
fluorescence signal. atmica (Bunsen, Kirchoff)
82
Emisin atmica en llama (FAES) LOD en llama (FES, FAES)
Barato
Limitado en prestaciones
Muy til para alcalinos y
alcalinotrreos
Temperaturas bajas para lograr
la atomizacin de otros muchos
elementos
Numerosas interferencias espectrales Claramente desplazada por la
absorcin atmica
Lneas: Bandas:
Reacciones de recombinacin
B) Bandas: grupos de lneas muy prximas entre s, que se acumulan en una zona
de mxima intensidad (cabeza de banda), causadas por emisin radiacional de
molculas excitadas elctricamente (ej.: OH, ciangeno CN, SiO, CaF2)
83
Arcos y Chispas: espectros de emisin Arcos y Chispas: espectros de emisin
Emisin con Arco y Chispa: instrumentacin Emisin con Arco y Chispa: instrumentacin
84
Mtodo del patrn interno Comparativa de caractersticas analticas
Sensibilidad
300 nm 400 nm
AA, FA EA, AA, FA EA
seal AA ruido AA
103 103 Fuentes principales de ruido:
seal FA ruido FA sputtering de la lmpara
oscilaciones de la llama
Selectividad shot noise del detector
AA FA > EA
FA: Hg, Zn, Cd, Pb, Pt, Ta, txicos y En FA no se percibe el ruido de la lmpara.
los ms voltiles El ruido limitante es el shot noise. Se
EA: Alcalinos y alcalinotrreos puede incrementar la potencia de la
AA: el resto lmpara lo que se desee: mejor
sensibilidad.
Generacin de plasmas:
Acoplamiento inductivo (ICP)
AA: Precisin < 1% a nivel de trazas (ppm) Corriente continua (DCP)
EA: Precisin 2 - 5 % Microondas (MIP)
FA: Precisin 2 -3 %
85
Inductively Coupled Plasma (ICP). Consumo de Ar Introduccin de muestra en el plasma
Antorcha
de cuarzo Ar que forma y sostiene el plasma (10-20 L min-1)
Preparacin de la muestra: similar a AAS Asociadas a los fenmenos de nebulizacin y transporte de la muestra
Determinacin de elementos: se pueden determinar casi todos los elementos Cambios de viscosidad y tensin superficial pueden originar resultados muy imprecisos, especialmente en
muestras con slidos disueltos
Sin embargo, hace falta un espectrmetro de vaco para medir B, N, P, S y C, muestras con elevada concentracin de cidos
Formacin de sales en la punta del nebulizador, que afecta a la nebulizacin y al flujo del aerosol
pues sus lneas de emisin caen por debajo de 180 nm donde absorben los
Las condiciones ptimas para la mayora de los metales no sirven para los Remedios
86
Modus operandi Desventajas del Plasma
(mtodo simplex)
87
Instrumentacin: multicanal con PMT Monocromador de red de escalera
Y
PMT
88
Caractersticas analticas: LODs Caractersticas analticas
GF-AAS ICP-AES
89
ICP MS. Control de calidad ICP-AES, ICP-MS whats next?
Its up to you!
1 1
Aplicaciones de las espectroscopas IR y Raman. [ ] cm 1 ; K
i vi
90
Absorcin en el IR Absorcin en el IR
La absorcin de radiacin en el IR se
produce por parte de molculas con
pequeas diferencias de energa
entre los distintos estados
vibracionales.
m1 m2
req
Molcula absorbente: aquella que sufre Molcula absorbente: aquella que sufre
un cambio neto en su momento dipolar un cambio neto en su momento dipolar
al tensionarse o al flexionarse. al tensionarse o al flexionarse.
Molcula de N tomos: 3N-6; lineal: 3N-5 modos normales de vibracin simtrica asimtrica simtrica
Ejemplos:
91
Vibraciones de flexin Modos de vibracin del CO2
Tensin
154 pm
Para un enlace C-C con una
longitud de 154 pm, la variacin es
10 pm
de ~10 pm.
Flexin
92
Espectro IR de la respiracin de Fernndez Algunos regiones tpicas de absorcin en el IR (tensin)
100 (m)
2.5 4 5 5.5 6.1 6.5 15.4
80 O O
H H H H O-H C-H C N C=O C=N C-Cl
Muy C-O
60 N-H C C pocas C=C
C-N
%T
bandas
X=C=Y C-C
40 O C O (C,O,N,S) N=O N=O *
Oscilador armnico. Modelo mecnico: energa potencial Oscilador armnico. Modelo mecnico: frecuencia
Hooke: F = - k y; Newton: F = m a
Ley de Hooke: F = - k y
d2 y d2 y
a m ky
dt 2 dt 2
Un desplazamiento implica una
variacin de la energa potencial: d2 y
y A cos 2 m t; 4 2 m2 A cos 2 m t
dt 2
dE F dy; dE k y dy 4 m m
2 2
A cos 2 m t A cos 2 m t
k
E y
0
dE k
0
y dy m
1 k
2 m
m f (E )
1 m1 m2 1 k 1 k (m1 m 2 )
E k y2
m1 m2
; m
2 2 m1 m2
2
h k
=
C=C > C=C > C-C
E radiacin h E h m
2 2150 1650 1200
1 k
m
2 Regla de creciente
seleccin:
= 1 C-H > C-C > C-O > C-Cl > C-Br
1 k k
5,31012 3000 1200 1100 750 650
k[=] N/m; c[=]cm/s; m[=]kg 2 c
93
Oscilador armnico. Influencia de la masa Espectros IR de cloroformo y deuterocloroformo
Oscilador armnico. Influencia de la fortaleza del enlace Efecto de la masa, de la fuerza de enlace y de la conjugacin
1 K
= 2c
Wavenumber vs. Bond Energy
5000
Wavenumber (cm-1)
4000
3000
2000
1000
0
200 300 400 500 600
Bond energy (kJ/mole)
94
Espectroscopa IR: Alquenos Espectroscopa IR: Alquinos
95
Vibracin de tensin: Cetona Vibracin de tensin: Aldehdo
Benzaldehdo
Ciclohexanona
96
Vibracin de tensin: Amida Vibracin de tensin C-N
97
Anlisis cualitativo Matching de espectros: identificaciones
La interpretacin de espectros IR requiere requiere un cierto juicio, fcilmente
adquirible con la prctica.
La asignacin de seales en la regin 1660-3600 cm-1 es factible con ayuda de
tablas y bases de datos (paquetes informticos). Es necesario indicar tanto el
enlace involucrado como el tipo de tensin, e.g. tensin O-H flexin C-H
Las regiones ms tiles suelen ser:
1680-1750 cm-1: las tensiones C=O producen seales muy intensas en los
espectros IR, y puede determinarse el tipo de carbonilo por la
posicin exacta de la banda.
2700-3100 cm-1: diferentes tipos de vibraciones de tensin C-H.
La regin 600-1600 cm-1 presenta demasiadas seales como para realizar una asignacin
cmoda y fiable. Sin embargo esta regin es la denominada huella dactilar de una
molcula, de modo que si el espectro coincide (casi) exactamente con el de una sustancia
pura de referencia, se le puede asignar esa identidad.
O OH
O
HN CH2CH3
O
HN
O
98
Modos de vibracin Acoplamientos
Molcula de N tomos: 3N-6; lineal: 3N-5 modos normales de vibracin
Acoplamiento de tensin: tomo comn.
O OH
O
HN CH2CH3
O
HN
O
IR cercano: Lmpara de wolframio Emisor de Nerst (Nernst glower): barra cilndrica o tubo compuesto por una mezcla
de xidos (ZrO2, Y2O3, Er2O3, 90:7:3 en peso) que precisa calentamiento inicial a 2000
C (aislante a temperatura ambiente). Mejor para cortas. Bajo consumo de energa.
IR medio: Emisor de Nernst, Globar, Filamento de Nicromo
Globar (glow bar): SiC Funciona a 1100 C. Buen conductor a cualquier T.
Slidos inertes que se calientan elctricamente a 1.500-2.220 K. Mejor para grandes . Ms estable. Su resistencia cambia con el uso.
Radiacin continua. Cuerpo negro.
Se consumen (queman al aire) si la temperatura sube mucho: refrigeracin Filamento de Nicromo: espiral empaquetada de alambre de nicromo elctricamente
calentada. Posee menor intensidad, pero su tiempo de vida es mucho ms largo. Es la
fuente ms barata
1
mx (Wien)
T
W(B ) T 4 (Stefan)
Longitud de onda ( m)
99
Fuentes IR Detectores IR
Lmpara de arco de Hg: Se usa el el IR lejano, donde las otras fuentes no Trmicos:
proporcionan potencia radiante suficiente. Termopares
Termistores (bolmetros)
Lser de CO2: Se usa para la cuantificacin de contaminantes gaseosos
Piroelctricos
Emite una banda entre 900 y 1100 cm-1, que es donde suelen absorber los
Neumticos
contaminantes
Termistor de silicio La radiacin IR cambia la T del TGS y se altera la distribucin de carga a lo largo del cristal,
dopado (no visible) que se puede detectar como una corriente en un circuito elctrico externo
Bao frio a temperatura fija
Patilla: unin trmica y
enlace elctrico La radiacin es absorbida, el absorbente se
calienta, y el cambio de temperatura es medido
por el termistor
100
Detectores neumticos (Golay cells) Detectores fotoconductores
Semiconductor: PbS (NIR 10.000-333 cm-1), T ambiente
CdTe/HgTe (M,FIR), 77 K (minimizar ruido trmico) HPLC-FTIR
tr ~ 4 ms
Transferencia de calor en h
fase gas ms rpida que en
slidos Promocin de e- a bandas de
conduccin, disminuyendo R.
semiconductor
vidrio (no conductor)
(Xe)
vaco
Instrumentacin IR Instrumentacin IR
(anlisis cualitativo)
3. Fotmetros no dispersivos
4. Fotmetros de reflectancia
101
Superposicin de ondas Dominios de tiempo y de frecuencia
FTIR: consiste en recoger los datos en el dominio de tiempo y convertirlos al FTIR: consiste en recoger los datos en el dominio de tiempo y convertirlos al
dominio de frecuencias mediante la transformada de Fourier dominio de frecuencias mediante la transformada de Fourier
Los detectores no son lo suficientemente rpidos para responder a Los detectores no son lo suficientemente rpidos para responder a
fluctuaciones de la potencia radiante a altas frecuencias (1012 1015 Hz) por lo fluctuaciones de la potencia radiante a altas frecuencias (1012 1015 Hz) por lo
que la seal se modula con un interfermetro de Michelson a una frecuencia que la seal se modula con un interfermetro de Michelson a una frecuencia
mucho ms baja que es directamente proporcional a la alta frecuencia. mucho ms baja que es directamente proporcional a la alta frecuencia.
102
Interfermetro de Michelson Interferogramas y espectros pticos
espejo mvil
VM 2t
2 P B1 ( ) cos2 1 B 2 ( ) cos2 2
f: frecuencia del
B( ) P cos 2 d
interferograma 2 VM
f
: frecuencia ptica de la c Resolucon de un 2 1
espectrofotmetro con 2 1 1
radiacin Transformada de Fourier
1 1
2 1 ; 2 1
103
Interferogramas Interferogramas y espectros pticos
104
Ventajas de la espectroscopa de Fourier Espectrmetro FTIR
Si registrar cada e.r. lleva 0,5 s 1.500 0,5 s = 750 s = 12,5 min
Promediado de espectros
S nS x S
n x
N n Nx Nx
Mejora en un factor 2 2 n n4
S S S
1.500 x 39 x
N Nx Nx
105
Espectrmetro FTIR monohaz Espectrmetro FTIR monohaz
reas de inters para el FTIR Fotmetro IR porttil no dispersivo para anlisis de gases
catalizadores)
Estudios cinticos
Fuente: alambre de nicromo
Deteccin cromatogrfica Detector: piroelctrico
Filtros intercambiables (3.000 - 750 cm-1)
Aplicaciones ms comunes: CO, COCl2 , acrilonitrilo, HCN
106
Disolventes para el IR Materiales para las ventanas transparentes al IR
Los materiales se escogen atendiendo
a:
coste
intervalo de transparencia
solubilidad en el disolvente
reactividad con la muestra y con el
disolvente.
Ms usados y
menos caros
Cubeta desmontable para muestras lquidas Cubeta desmontable para muestras lquidas
Las Deben
ventanas estar
son de sal secas y
(KBr),
107
Cubeta desmontable para muestras lquidas Aplicacin de muestras lquidas
Libres de
defectos.
Disolvente
orgnico
Interferencia constructiva:
= 2b/N
2b 2b
N 2 b 1 2 b 2
1 2
b: 0,003 0,6 mm
Thanks to
Jos Antonio Daz Navas
Catedrtico de Escuela Universitaria
Departamento de ptica
Facultad de Ciencias
Avda. Severo Ochoa S/N
18071-Granada Spain
email: jadiaz@ugr.es
web: www.ugr.es/~jadiaz
108
Medidas cuantitativas Registros con un aparato dispersivo de doble haz
Pdisolvente P0
A log
Pmuestra Ps
P0 Ps
T0 ; Ts
Pr Pr
Ts P
T
T0 P0
Especular
s : coeficiente de dispersin
k 2,303 C
109
Espectros normal (de absorcin) y de reflectancia difusa Reflectancia difusa
110
Reflectancia interna Reflectancia Total Atenuada (ATR)
Espectros similares.
1,34 0,2
i 3 arc sen 49,3 i = 49,3 - 3 = 46,3
2,03
111
Disolventes en el IR cercano Campos de aplicacin en todas las regiones del IR
Dispersin Rayleigh: producida por molculas o Dispersin Rayleigh: producida por molculas o agregados de molculas de
agregados de molculas de dimensiones dimensiones bastante menores que la de la radiacin.
bastante menores que la de la radiacin.
La mayora de los fotones dispersados tienen La mayora de los fotones dispersados tienen la misma frecuencia que la
la misma frecuencia que la fuente (dispersin fuente (dispersin Rayleigh); sin embargo, la frecuencia de algunos fotones
Rayleigh); sin embargo, la frecuencia de (aprox. 1 en 107) ha variado (dispersin Raman).
algunos fotones (aprox. 1 en 107) ha variado
(dispersin Raman).
El dipolo oscilante re-emite de un modo prcticamente instantneo toda la energa El dipolo oscilante re-emite de un modo
incidente por va radiacional con una frecuencia idntica a la incidente (dispersin prcticamente instantneo toda la energa
Rayleigh) incidente por va radiacional con una
frecuencia idntica a la incidente
(dispersin Rayleigh)
112
Espectroscopa Raman Espectroscopa Raman: Transiciones involucradas
La espectroscopa Raman puede detectar enlaces
simtricos, complementado as a la espectroscopa IR
En esta tcnica la molcula se irradia con luz UV a
la vez que se recoge su espectro IR
La radiacin UV promueve electrones de orbitales enlazantes a los
antienlazantes. Esto causa la formacin de un dipolo en grupos que
inicialmente eran inactivos en el IR y que ahora absorbern en el IR
* . -
+ Dipolo inducido
.. C h .C R
R C R R C
UV
transicin absorbe IR
Simtrica: no dipolo *
El desplazamiento de la en la dispersin
Raman se corresponde con la energa
involucrada en la vibracin del analito, es
decir, en Raman es igual a la de
absorcin en IR.
La luz incidente causa la excitacin a un estado virtual excitado, que luego reemite un
fotn de menor (Stokes) o mayor (anti-Stokes) energa
E 16 4 4 2
I
3 c3
Como consecuencia de la pequea magnitud de las frecuencias dispersadas, la espectroscopa
Raman slo resulta factible cuando se usa una fuente monocromtica intensa (lser).
113
Espectros IR y Raman Espectros IR y Raman
La frecuencia de
absorcin en el IR
y el
desplazamiento
Raman coincide
exactamente para
varios picos.
El tamao relativo de
los picos
correspondientes
difiere bastante.
Algunas seales
que aparecen en
uno de los
espectros estn
ausentes en el
otro.
Cociente de despolarizacin:
I
p
III
Una lnea est despolarizada si p > 0,75
Vibraciones simtricas:
baja despolarizacin.
Asimetra:
despolarizacin creciente.
114
Condiciones para generar espectros Raman normales Instrumentacin
El fotn incidente tiene que poseer una
energa sustancialmente mayor que la
requerida para excitar el modo de
vibracin.
Ambas condiciones se cumplen con b) no es lo suficientemente energtico como para poblar significativamente
estados electrnicos excitados que pudieran producir emisiones
en la zona VIS-IR cercano. fluorescentes.
Instrumentacin Instrumentacin
IR cercano: a) se puede trabajar con potencia radiante elevada (50 W) sin causar
fotodescomposicin de la muestra
b) no es lo suficientemente energtico como para poblar significativamente
estados electrnicos excitados que pudieran producir emisiones
fluorescentes.
115
Instrumentacin Instrumentacin
a) En la espectroscopa Raman
Raman resonante (RRS) 102-106 (L.D. :10-8 vs. 10-1 M)
convencional, la radiacin incidente
no coincide con una frecuencia de
Raman de superficie aumentada (SERS) 103-106 (L.D. 10-8-10-12 M)
absorcin de la molcula, y
solamente se da una transicin
virtual a un estado excitado no
Tcnicas espectroscpicas Raman no lineales cuantizado.
Los procesos fluorescentes son potenciales Los procesos fluorescentes son potenciales
interferentes interferentes
116
Dispersin Raman de Resonancia (RR) Surface Enhanced Raman Spectroscopy (SERS)
Surface Enhanced Raman Spectroscopy (SERS) Surface Enhanced Raman Spectroscopy (SERS)
Surface Enhanced Raman Spectroscopy (SERS) Surface Enhanced Raman Spectroscopy (SERS)
117
Surface Enhanced Raman Scattering (SERS) Spectroscopy
Applications of Reproducible SERS Substrates for Trace Level Detection
Netti and Stanford
(sic 300 ppm should read 300 ppb)
Applications of Reproducible SERS Substrates for Trace Level Detection Applications of Reproducible SERS Substrates for Trace Level Detection
Netti and Stanford Netti and Stanford
118
Coherent Anti-Stokes Raman Spectroscopy (CARS) Coherent Anti-Stokes Raman Spectroscopy (CARS)
Tema 7
Raman spectra can be obtained from aqueous Absorcin, Fluorescencia y Difraccin de RX.
solutions Instrumentacin y Aplicaciones.
Main advantage over IR
Premios Nobel por investigacin relacionada con RX Regiones del espectro electromagntico: RX
119
Regiones del espectro electromagntico. RX Obtencin de RX con fines analticos
Claves:
1. Bombardeo de un blanco metlico con un haz de electrones
Intervalo de :
0,1 10 nm de elevada energa
Proceso caracterstico:
2. Exposicin de una sustancia a un haz primario de RX, que
excitacin de electrones de capas internas
genera un haz secundario de fluorescencia de RX
Espectro tpico:
lneas electrnicas puras, independientes del 3. Utilizacin de una fuente radiactiva: desintegracin y captura
estado qumico de los tomos
electrnica (rayos )
Energas involucradas en las transiciones:
~1,2105 kJ/mol (1,2 keV/mol) 4. Por partculas aceleradas en un sincrotrn
120
Transiciones tpicas que dan lugar a emisin de RX Transiciones involucrados en los RX del Au
Serie K: transiciones electrnicas desde
niveles energticos ms elevados hacia la
capa K
121
Coeficiente de absorcin
La ley de Beer se cumple tambin en espectroscopa de absorcin de RX.
Suele escribirse con una notacin ligeramente diferente:
Los efectos matriz suelen dificultar muchsimo el anlisis cuantitativo. Sin embargo,
en condiciones especficas se pueden obtener resultados fiables (por ej.:
cuantificacin de impurezas azufradas en hidrocarburos).
Fluorescencia de RX Difraccin de RX
Es el modo ms prctico de determinacin cuantitativa Quizs es el uso ms comn, despus de las aplicaciones mdicas.
Basta con usar una fuente de excitacin con una energa que exceda a un
canto de absorcin del analito, y medir la fluorescencia correspondiente. Requisitos:
La fuente excitatriz por va lumnica puede ser cualquiera espaciado entre capas de tomos
aproximadamente igual a
centros de dispersin regularmente
distribuidos en el espacio
AP + PC = n
AP = PC = d sen
122
Seleccin de : filtros Filtros para los elementos blanco ms comunes
Detectores
Contador de centelleo
Semiconductores
123
Detector de gas Detector de cmara de gas
Cada fotn ioniza un tomo de Ar, expulsando un fotoelectrn.
El fotoelectrn, a su vez, ioniza otros tomos de gas, produciendo ms electrones.
Los electrones son atrados hacia el nodo.
Los cationes son atrados hacia la pared circundante que hace de ctodo.
Tiempo muerto:
Geiger: 50-200 s
Proporcional: 1 s
Detectores de centelleo
124
DETECTOR DE SEMICONDUCTOR Li depositado sobre el Si(p), difunde hacia el seno del cristal (400-
500C)
Si tipo p Si(Li) tipo n
El Li (electropositivo) cede e- al cristal convirtindolo en tipo n
Por cada fotn incidente, se promocionan gran n de e- a la banda de
conduccin
Lmina de Al Energa para formar un par electrn-agujero: 3,65 eV(Si) ; 2,95
eV(Ge)
Lmina de Au Energa para formar un par inico en un detector de gas : 30 eV
Energa para formar un fotoelectrn en un escintilador NaI(Tl) : 500
eV
Proporcionan mejor resolucin que los contadores proporcionales y
que los de centelleo
La seal de salida es directamente proporcional a la energa del fotn
Regin intrnseca
RX Seal al amplificador
de RX incidente
+ Opera a 77K y al vaco
- Si(Li)
Es el detector ms usado en instrumentos dispersivos de energa
Si(Li) >0,3; Ge(Li)<0,3
XRF Detectors
Energy-dispersive
XRF
Semiconductor
Wavelength
dispersive XRF
Scintilation
Counter
125
XRF Analysis
Samples can be in
any form
Solid
Powder
Liquid
126
127