DEPARTAMENTO DE BIOQUMICA HUMANA

MATERIA QUMICA BIOLGICA - CICLO LECTIVO 2017

TRABAJO PRCTICO 11

Sntesis y degradacin de triacilglicridos

y cuerpos cetnicos
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CONCEPTOS GENERALES
La capacidad para almacenar y liberar energa en respuesta a las demandas es
crucial para la supervivencia de un organismo. Una comunicacin estrecha entre los
mltiples sistemas fisiolgicos de un organismo parece ser un requisito indispensable
para un manejo eficiente de la energa. Los depsitos de energa se repletan
intermitentemente a lo largo del da y tambin durante perodos prolongados, como en los
casos de ayuno o enfermedad. Para mantener las funciones celulares vitales, el humano -
y otros mamferos- ingieren ms caloras que las requeridas para las necesidades
metablicas inmediatas y almacena las caloras en exceso como glucgeno, y lpidos
fundamentalmente. Las protenas, si bien cumplen funciones especficas, pueden ser
utilizadas como reserva energticas en determinadas circunstancias. El tejido adiposo (o
tejido graso) es un tipo de tejido conectivo compuestos por clulas, denominadas
adipocitos, con gran contenido de lpidos rodeados por una matriz de fibras de colgeno,
vasos sanguneos, fibroblastos y clulas del sistema inmune. El tejido adiposo presenta
las siguientes caractersticas:
1) Los adipocitos tienen una gran capacidad para almacenar energa en forma de
lpidos.
2) Los lpidos almacenados pueden ser rpidamente metabolizados y liberados
como cidos grasos o bien ser usados para aumentar la termognesis, liberacin de calor
producido por un desacoplamiento entre la fosforilacin oxidativa y la cadena de
transporte de electrones.
3) Los adipocitos se comunican con otros sistemas incluyendo el sistema nervioso
central por hormonas (llamadas adipoquinas) de una manera endocrina o paracrina.

FUNCIONES DE LOS LPIDOS

Los lpidos son compuestos que se caracterizan fundamentalmente por la
propiedad fsica de ser no polares y en consecuencia hidrofbicos. La mayora de estas
molculas contienen cidos grasos o derivan de stos.
Los lpidos cumplen por lo menos 2 funciones principales: a) Por un lado, se ha
demostrado que la oxidacin de los cidos grasos representa la va principal de
produccin de energa metablica. As, su almacenamiento en la forma de triacilglicridos
es ms eficiente y cuantitativamente ms importante que el almacenamiento de hidratos
de carbono como glucgeno; b) Por otro lado, se ha observado que son un componente
fundamental de las membranas plasmticas, formando estructuras hidrofbicas que
permiten generar compartimentos celulares y estructuras subcelulares.
Los lpidos tienen otros roles de gran importancia fisiolgica. Por ejemplo, las
propiedades tensoactivas de algunos lpidos complejos se evidencian en el mantenimiento
de la integridad alveolar pulmonar y la solubilizacin de sustancias no polares en los
fluidos biolgicos. Adems, ciertas clases de lpidos como los esteroides y
prostaglandinas, cumplen roles fundamentales en el control del proceso metablico.
El metabolismo de los cidos grasos y triacilgliceroles es tan crucial para el
correcto funcionamiento del cuerpo humano, que un desequilibrio o una deficiencia en
este proceso puede llevar a severas consecuencias patolgicas. Los estados de
enfermedad relacionados con el metabolismo de los cidos grasos y triacilglicridos
incluyen obesidad, diabetes, cetoacidosis y anormalidad en el transporte de lpidos por la
sangre.

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LIPOGNESIS
En un estado de saciedad o post-ingesta, se produce la sntesis de los
triacilglicridos, proceso que se denomina lipognesis. Esta va metablica tiene al
cido fosfatdico como intermediario.
Para sintetizar estos triacilglicridos se necesita como sustrato, adems de los
cidos grasos, el glicerol-3-fosfato. En el hgado, el glicerol-3-fosfato es producido por
fosforilacin del glicerol, reaccin catalizada por la glicerol quinasa o bien por la reduccin
de la dihidroxiacetona fosfato proveniente de la gliclisis. El tejido adiposo carece de
glicerol quinasa, y puede producir glicerol 3-fosfato solamente a partir de glucosa
utilizando la dihidroxiacetona fosfato (intermediario de la gluclisis) por la enzima glicerol-
3-fosfato deshidrogenasa. Tanto en el tejido adiposo como en el hgado, los
triacilglicridos son sintetizados en el citoplasma a partir de glicerol-3-fosfato el cual
reacciona con dos acil-CoA para formar el cido fosfatdico. La desfosforilacin del cido
fosfatdico produce diacilglicerol. Otro acil-CoA reacciona con el diacilglicerol para formar
el triacilglicerol, reaccin catalizada por la diacilglicerol acil transferasa.
Los triacilglicridos formados en el tejido adiposo son almacenados en los
adipocitos. En el hgado, en cambio, los triacilglicridos (sintetizados en el retculo
endoplsmico liso) son empaquetados junto con colesterol, fosfolpidos y protenas
(sintetizadas en el retculo endoplsmico rugoso) para formar la lipoprotena VLDL. La
principal apoprotena de la VLDL es la apo B100. La VLDL es procesada en el Golgi y
secretada por el hgado hacia el torrente sanguneo.

DESTINO DE LOS TRIACILGLICRIDOS DE LA VLDL

La enzima lipoproteinlipasa (LPL), enzima unida a la membrana basal de las
clulas endoteliales de los capilares, cliva los triacilglicridos de las VLDL y de los
quilomicrones, para formar cidos grasos y glicerol.
La apo CII (apoprotena que las VLDL captaron de su interaccin con HDL) activa
la LPL. El bajo Km de la isoenzima LPL muscular permite que el msculo utilice cidos
grasos aportados por los quilomicrones y VLDL como fuente de molculas combustibles
cuando la concentracin sangunea de estas lipoprotenas es muy baja. La isoenzima LPL
de tejido adiposo tiene un alto Km y es ms activa luego de una ingesta cuando los
niveles en sangre de quilomicrones y VLDL son elevados.

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Tejido adiposo e hgado
Hgado

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almacenamiento a la circulacin como VLDL

(tejido adiposo) (hgado)

ALMACENAMIENTO DE TRIACILGLICRIDOS EN EL TEJIDO ADIPOSO

Despus de una comida aumenta el depsito de triacilglicridos en el tejido
adiposo. Los adipocitos sintetizan la enzima lipoprotein lipasa (LPL) y la secretan en los
capilares del tejido adiposo cuando la relacin insulina/glucagon es alta. Esta enzima
degrada los triacilglicridos tanto de los quilomicrones como de la VLDL. Los cidos
grasos entran al adipocito y son activados para formar acil-CoA, el que reacciona con el
glicerol 3-fosfato para formar triacilglicridos por una va similar a la heptica. Como el
tejido adiposo no tiene glicerol quinasa y no puede usar el glicerol producido por la LPL, el
glicerol va por va sangunea al hgado, el cual lo usa para la sntesis de triacilglicridos.
En el tejido adiposo, el glicerol-3-fosfato es formado a partir de la glucosa.
Adems de estimular la sntesis y liberacin de la LPL, la insulina estimula la
captacin y el metabolismo de la glucosa en los adipocitos. La insulina activa la enzima
fosfofrutoquinasa I aumentando los niveles de fructosa-2,6-bisfosfato. Tambin estimula la
desfosforilacin de la piruvato deshidrogenasa, y por lo tanto el piruvato producido por
gluclisis puede ser oxidado en el ciclo de Krebs. Adems, la insulina estimula la
conversin de glucosa a cidos grasos en el tejido adiposo, aunque el hgado es el
principal sitio de sntesis de cidos grasos en humanos.

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LIPLISIS
Generalmente, los lpidos son almacenados en forma de gotas lipdicas, con un
ncleo de colesterol esterificado y triacilglicridos rodeado por una monocapa de
fosfolpidos. La superficie de estas gotas est recubierta con perilipinas. Las perilipinas
son una familia de protenas que restringen el acceso a los lpidos contenidos en la gota,
previniendo la movilizacin lipdica inoportuna. Cuando, en funcin de las seales
hormonales, hay una necesidad de energa metablica (ayuno, ejercicio prolongado, etc.)
se movilizan las reservas de triacilglicridos almacenados en el tejido adiposo y los cidos
grasos son transportados a aquellos tejidos (msculo esqueltico, corazn, corteza
adrenal) en los que se oxidan cidos grasos para producir energa.
Los cidos grasos son transportados en la sangre por la albmina y llegan hasta el
msculo, hgado y otros tejidos para ser oxidados, liberando energa en un proceso que
se denomina -oxidacin. Durante el ayuno, el acetil-CoA producido por -oxidacin de
los cidos grasos en hgado es convertido en cuerpos cetnicos, los cuales son liberados
a la sangre y sirven como fuente de energa para otros tejidos. El glicerol derivado de la
liplisis en los adipocitos es usado por el hgado durante el ayuno como fuente de
carbono para la gluconeognesis.

REGULACIN DE LA LIPASA HORMONA SENSIBLE (LHS)

El glucagon, secretado en respuesta a bajos niveles de glucosa sangunea, activa
sus receptores especficos en las membranas de los adipocitos. El receptor acta va
protena Gs, AMPc y PKA. La PKA fosforila a la perilipina A y esta protena fosforilada
moviliza a la Lipasa Hormono Sensible (LHS) que est en el citosol hacia la superficie
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de la gota lipdica donde puede comenzar a hidrolizar los triacilglicridos liberando los
cidos grasos. La PKA tambin fosforila a la LHS aumentando su actividad. La LHS
activada hidroliza el enlace ster de los triacilglicridos liberando los cidos grasos y
glicerol.
La actividad de esta enzima tambin es aumentada por las catecolaminas, la
hormona de crecimiento, la ACTH y los corticosteroides, mientras que la insulina se opone
a la accin de las anteriores.

REGULACIN DE LA LIPLISIS
La liplisis es estimulada por el fro, el ejercicio, el glucagon y la hipoglucemia a
travs de la activacin hipotalmica del sistema simptico, cuyas terminales simpticas
liberan noradrenalina en los tejidos efectores, estimulando al receptor .
La liplisis es inhibida por la insulina, que estimula a la fosfodiesterasa, quien a su
vez inactiva al AMPc. La insulina tambin podra inhibir a la adenilciclasa o internalizar a
los receptores adrenrgicos (provocando resistencia a la accin lipoltica de las
catecolaminas).
La velocidad de la liplisis es menor en el tejido subcutneo perifrico, mayor en el
subcutneo abdominal y mayor an en el rea visceral. La liplisis basal es mayor en los
territorios subcutneos, mientras que la liplisis estimulada, es mayor en la grasa visceral.
Los obesos tendran una mayor liplisis en condiciones basales y niveles de cidos
grasos circulantes ms elevados, an en ayunas, comparado con un individuo de menor
peso.
El volumen del tejido adiposo est en equilibrio dinmico, dependiendo de la
relacin entre la lipognesis y la liplisis, consecuencia de una mltiple regulacin;
hormonal, metablica y nerviosa. Lipognesis y liplisis son en ltima instancia
consecuencia de la actividad de la LPL y de la LHS, quienes son modificadas por las
catecolaminas, insulina, glucagon, hormona estimulante de la tiroides, colecistoquinina,
hormona de crecimiento, cortisol, ACTH, esteroides sexuales, paratohormona, etc. Sin
embargo, estas hormonas no tienen igual accin en todos los territorios adiposos. Algunas
localizaciones son ms sensibles que otras a los mismos estmulos, determinando
diferencias en la respuesta regional.

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ESQUEMA GENERAL DE LA SNTESIS Y DEGRADACIN DE
CIDOS GRASOS Y TRIACILGLICRIDOS

CETOGNESIS: SNTESIS DE CUERPOS CETNICOS

Los cuerpos cetnicos son un grupo de compuestos de bajo peso molecular que
incluyen: el -hidroxibutirato, acetoacetato y acetona. Para la sntesis de estos
compuestos, que ocurre en el hgado, 2 molculas de acetil-CoA reaccionan para formar
acetoacetil-CoA por una reaccin inversa a la catalizada por la tiolasa. Otra molcula de
acetil-CoA reacciona con el acetoacetil-CoA, produciendo 3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA
(HMGCoA) y liberando a la coenzima A en forma libre, no acetilada (CoASH). La enzima
que cataliza esta reaccin es la hidroximetil-glutaril-CoA sintetasa (HMGCoA sintetasa).
Esta enzima es inducida durante el ayuno y es inhibida por CoA-SH. En la siguiente
reaccin HMGCoA liasa cataliza la ruptura de HMG-CoA para formar acetil-CoA y
acetoacetato.

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El acetoacetato tiene 3 destinos posibles. Puede pasar directamente a la sangre o

bien puede ser reducido por una deshidrogenasa dependiente de NADH a un segundo
cuerpo cetnico, el hidroxibutirato, el cual pasa a la sangre. Esta reaccin de la
deshidrogenasa es facilmente reversible y sirve para interconvertir estos 2 compuestos los
cuales pasan a la sangre y van desde el hgado a otros tejidos donde son utilizados como
molculas combustibes, es decir, son oxidados para proveer energa. El tercer destino del
acetoacetato es su decarboxilacin. En esta reaccin se libera CO 2 y se forma acetona.
La acetona no se metaboliza y como es voltil se expira por los pulmones.
La relacin NADH/NAD determina la cantidad relativa de acetoacetato y -
hidroxibutirato que son producidos. Los humanos generalmente, producen ms -
hidroxibutirato que acetoacetato.

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CETOLISIS: OXIDACIN DE CUERPOS CETNICOS
Los cuerpos cetnicos proveen combustible para los tejidos particularmente
durante el ayuno. Cuando los cidos grasos son liberados del tejido adiposo, por la
hidrlisis de los triglicridos, el hgado usa estos cidos grasos para sintetizar cuerpos
cetnicos los cuales van hacia los tejidos, tales como msculo y rin, donde son
oxidados.
Durante el ayuno, el nivel plasmtico de los cuerpos cetnicos se eleva y en casos
de inanicin pueden entrar en el cerebro, donde son oxidados, reduciendo la cantidad de
glucosa requerida por este tejido.
El acetoacetato puede entrar a las clulas
directamente o puede ser producido dentro de ellas por
oxidacin del hidroxibutirato. Esta reaccin catalizada
por la -hidroxibutirato deshidrogenasa, produce NADH
el cual genera ATP por fosforilacin oxidativa. Por lo
tanto, ms energa se produce por oxidacin del -
hidroxibutirato que por oxidacin del acetoacetato.
La activacin de acetoacetato se produce en
mitocondrias y es catalizada por la succinil-CoA
acetoacetato-CoA transferasa. Como el nombre lo
sugiere, CoA es transferida desde el succinil-CoA, un
intermediario del ciclo de Krebs, a acetoacetato. Los
productos de esta reaccin son acetoacetil-CoA y
succinato.
Aunque el hgado produce cuerpos cetnicos, no
los utiliza porque no hay en el hgado suficiente
cantidad de tiotransferasa.
La -cetotiolasa, la misma enzima involucrada en
la -oxidacin, cataliza la ruptura de acetoacetil-CoA.
Una molcula de acetoacetil-CoA produce 2 molculas
de acetil-CoA, las cuales entran en el ciclo de Krebs.

En resumen, los cidos grasos liberados de los triglicridos del tejido adiposo
sirven como principal combustible para el organismo durante el ayuno. Estos cidos
grasos son completamente oxidados a CO2 y H2O por algunos tejidos. El hgado oxida
cidos grasos, convirtiendo la mayora del acetil-CoA en cuerpos cetnicos, los cuales
van por sangre hacia tejidos perifricos. En estos tejidos los cuerpos cetnicos son
oxidados a CO2 y H2O y se genera ATP.
La cantidad total de energa obtenida por oxidacin parcial de cidos grasos en el
hgado y enviar los cuerpos cetnicos a otros tejidos para su oxidacin completa, aporta la
misma cantidad de energa que se obtiene por oxidacin completa de los cidos grasos
en un nico tejido. La ventaja ganada por la formacin de cuerpos cetnicos es que:
1.- el hgado obtiene la energa requerida para realizar ciertos procesos, tales como
gluconeognesis, de la oxidacin parcial de los cidos grasos y adems forma cuerpos
cetnicos
2.- otros tejidos usan estos cuerpos cetnicos como combustible
3.- durante el ayuno, el cerebro puede oxidar cuerpos cetnicos, reduciendo las
necesidades de glucosa. Consecuentemente, durante el ayuno, la gluconeognesis
disminuye, y las protenas musculares, las cuales proveen amino cidos como fuente de
carbono para la produccin de glucosa, no son degradadas.
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REGULACIN DE LA OXIDACIN DE LOS CIDOS GRASOS Y DE LA
UTILIZACIN DE CUERPOS CETNICOS
La oxidacin de los cidos grasos est regulada por el mecanismo que controla la
reoxidacin de FADH2 y NADH por la cadena de transporte de electrones, es decir, por la
demanda de ATP.
El msculo usa preferentemente cidos grasos como combustible. Cuando los
cidos grasos son abundantes, la oxidacin de la glucosa en el msculo es inhibida. La -
oxidacin produce NADH y acetil-CoA, la que causa que la piruvato deshidrogenasa sea
fosforilada e inactivada. Por lo tanto, el piruvato producido a partir de glucosa por medio
de la gluclisis no puede ser convertido a acetil-CoA para entrar en el ciclo de Krebs. Por
lo tanto, los intermediarios de la gluclisis se acumulan si la produccin de ATP a partir de
cidos grasos es adecuada para satisfacer las necesidades energticas de la clula. La
glucosa-6-P inhibe la hexoquinasa, disminuyendo la velocidad de entrada de glucosa al
camino glucoltico. Adems, otros mecanismos pueden operar para disminuir la gluclisis:
por ejemplo: accin de citrato sobre fosfofructoquinasa I. Sin embargo, la importancia
fisiolgica de este mecanismo en humanos est actualmente discutida.
Despus de una ingesta de hidratos de carbono, cuando los cidos grasos estn
siendo sintetizados en el citosol de las clulas hepticas, su oxidacin inmediata en las
mitocondrias hepticas es impedida por el malonil-CoA, un intermediario en la sntesis de
cidos grasos. El malonil-CoA inhibe la carnitina aciltransferasa I, involucrada en el
transporte de cidos grasos hacia la mitocondria donde se localizan las enzimas de la -
oxidacin. Por lo tanto, en el estado alimentado, los cidos grasos no son oxidados en el
hgado ni convertidos en cuerpos cetnicos.
Durante el ayuno, en el hgado, la sntesis de cidos grasos, y en consecuencia, los
niveles de malonil-CoA, disminuyen. La movilizacin de los triglicridos del tejido adiposo
ocurre como resultado de una alta relacin glucagon/insulina. El hgado puede ahora
tomar estos cidos grasos y transportarlos a la mitocondria. Debido a que el flujo de
oxalacetato y malato es hacia la sntesis de glucosa (porque est ocurriendo
gluconeognesis), el acetil-CoA se acumula y es usado para la sntesis de cuerpos
cetnicos. A medida que el ayuno progresa, la HMG-CoA sintetasa, enzima clave en la
sntesis de cuerpos cetnicos, se induce.

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