METODO MICROKJELDAHL

MATERIAL REACTIVOS
Matraz microkjeldahl de digestin Acido borico al 4%
Vaso precipitado de 50 ml Acido clorhdrico 0.1 N
Bureta de 25ml Acido sulfrico concentrado
Soporte universal Hidrxido de sodio al 50%
Pinzas para bureta Mezcla reactiva de selenio
Pipeta de 10 ml Reactivo de Wesslow 0.2 %
Perilla de succin
Esptula acanalada

Introduccin

DIGESTIN: Pesar exactamente 0.15-0.2 g de muestra y colocar en un matraz microkjeldahl.

Anadir 0.6 g de mezcla reactiva de selenio y homogenizar. Agregar 5 ml de H2SO4 concentrado
calentndola suavemente por 5 minutos y despus fuertemente durante 45 minutos. El
trmino de la digestin se aprecia cuando la solucin se aclara totalmente (amarillo verde=.
Procedindose a enfriarla, cuando esto se logra se disuelve la muestra con 5 ml de agua
destilada y se pasa al aparato de destilacin. Se realizan 3 lavados con 5 ml de agua destilada
cada uno.

DESTILACIN: colocar el vasos de precipitado con 5 ml de acido borico y 6 gotas de reactivo

Wesslow, teniendo precaucin de que el extremo del tubo de condensacin quede por debajo
de la superficie del acido borico. A la muestra digerida y en solucin agregar 13 ml de NaOH al
50% dentro del aparato de destilacin manteniendo el reflujo del agua del refrigerante
continuo, e indicndose el calentamiento. Encender el aparato de destilacin microkjeldahl.
Continuar la destilacin hasta alcanzar un volumen de 80ml, entonces retirar el vaso con el
destilado y apagar el destilador.

TITULACIN: titular el destilad con HCL 0.02 N

Clculos PM Peso de la muestra

V mL de HCL gastados
% Protena = V * N * meq * F * 100
N Normalidad
PM F Factor de conversin
de nitrgeno a protena
Meq Miliequivalentes del
nitrgeno : 0.014
 PREPARACIN DE SOLUCIONES PARA DETERMINAR PROTENA

Acido borico al 4%: pesar 40g de H2BO3 y aforar a 1 L con agua destilada.

Acido clorhdrico 0.02 N: Diluir 1.66 ml de HCl concentrado aforar a 1L con agua destilada.

Hidroxido de sodio al 50%: disolver 500g de NaOH y aforar 1 L con agua destilada.

Reactivo de Wesslow al 2%: disolver 0.2 g de rojo de metilo en 60 ml de etanol y aforar a 100
ml con agua destilada. Disolver 0.2 g de azul de metileno y aforar a 100 ml con agua destilada.
La relacin rojo de metilo-azul de metileno debe quedar en 2-1.

LAVADO DEL DESTILADOR MICROKJELDAHL

1. una vez destilado al residuo: 80 ml se intercambia por un vaso con 60 ml de agua

destilada bajo condensador.
2. Se apaga el destilador .Aqu se revisa si el tubo de drene esta vacio, de lo contrario
abrir la vlvula de purga unos segundos. (De excederse se regresa el agua de la salida
del condensador).
3. El agua comenzara a subir por el tubo del condensador, si lo hace rpidamente abrir
poco a poco la vlvula de la cmara para evitar rpido el vacio. Al ir subiendo legara al
cuello del condensador y al bajar har un rpido lavado por el sifn producido.
4. Inmediatamente abrir la vlvula de la cmara asegurando que pierda el vacio (de lo
contrario se contaminara la cmara de calentamiento) abrir la vlvula de purga se
coloco mucha agua en el vaso del destilado se producir uno o dos sifones mas. Aqu lo
importante es revisar la cmara que el tubo de drene no se llene (de lo contrario se
contaminara la cmara de calentamiento) , de ser necesario se abre unos segundos la
vlvula de la cmara cuantas veces sea necesaria para drenar completamente los
residuos en el equipo.