BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE

PUEBLA

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

LABORATORIO DE QUMICA ORGNICA I

PRCTICA No. 7
CROMATOGRAFA EN CAPA FINA
EQUIPO

NGEL DE JESS SANTIAGO CABANZO

MELISSA CERVANTES DIYARZA
DIEGO MARCOS ROS ROMERO

Q. F. B. F
SECCIN 11

FECHA DE REALIZACIN: 16 DE OCTUBRE 2017

FECHA DE ENTREGA: 23 DE OCTUBRE 2017
INTRODUCCIN
La cromatografa de capa fina se conoce normalmente por sus siglas en ingls (TLC, thin la
yer chromatography). Es una tcnica muy utilizada para la identificacin y determinacin
de pureza de compuestos Tambin puede utilizarse como tcnica de separacin
(cromatografa de capa fina TLC preparativa) a muy pequeaescala. En esta tcnica la fase
estacionaria es una capa fina de gel de slice u otro soporte con propiedades adsorbentes (en
nuestro caso de 25 mm de espesor) dispuesta sobre un soporte de vidrio o aluminio que
denominaremos placa. El eluyente o fase mvil ser la mezcla de disolventes adecuada.

La cromatografa de capa fina es un procedimiento que se utiliza para separar molculas

pequeas. La separacin de mezclas de molculas mediante la cromatografa de capa fina
se basa en el principio del reparto entre dos fases. Al igual que otras cromatografas,
consiste de una fase estacionaria y una fase mvil y el principio es el mismo: la sustancia
de inters se adherir a la fase estacionaria o se mover con la fase mvil, viajando una
distancia que es inversamente proporcional a la afinidad por la fase estacionaria. La fase
estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel, de celulosa o de un gel de silicato
(vidrio molido bien fino) unido a una superficie slida (una placa de vidrio, aluminio,
plstico o papel). Esta superficie slida puede ser rgida o flexible. El tipo de fase
estacionaria que se utilice en un experimento depender del tipo de molculas que se
quieran separar. Incluso vienen algunas placas con indicadores fluorescentes. La fase
estacionaria consiste de un solvente que puede ser agua, un solvente orgnico o una mezcla
de ambos.

El procedimiento es sencillo: Se colocan las muestras a un centmetro del borde en uno de

los extremos de la placa, se deja secar, se coloca la placa en un envase (tanque de
desarrollo) que ya contiene una pequea cantidad del solvente, se tapa y se deja correr por
un rato. El solvente subir por capilaridad e ir arrastrando las molculas, las cuales se
movern segn la afinidad que muestren por la fase estacionaria. Si la mezcla demuestras
que se est analizando presenta color, se vern los distintos colores migrando a distintas
velocidades. Si son incoloras hay que someter la placa a algn tratamiento con una
sustancia desarrolladora (developer) para poder determinar la presencia de sustancias sobre
el silicato. El tipo de desarrollador depender del tipo de molculas que se analizan.

Proceso de Adsorcin: La muestra aplicada en la capa es adsorbida en la superficie del

material por la accin de fuerzas electrostticas (fuerzas de Van der Waals, puentes de
Hidrgeno, efectos inductivos, etc.). Luego, cuando la capa es expuesta a un flujo por
accin capilar, se inicia una competencia de enlaces entre los sitios activos del adsorbente y
la sustancia con el solvente. Los adsorbentes ms utilizados en la Cromatografa de Capa
Fina son:
Slice gel (se utiliza en el 80% de las separaciones)
oxido de aluminio o almina (cida, neutra o bsica)
Celulosa (Nativa o micro-cristalina)
Poliamidas

Estos adsorbentes deber tener las siguientes caractersticas:

Tamao de partcula
Volumen de poro
Dimetro de poro
rea superficial
Homogeneidad
Pureza

1. Aplicacin de la muestra
La introduccin de la muestra se realiza utilizando un tubo capilar. Para ello se ha de
disolver una pequea cantidad de la muestra a analizar en un disolvente voltil. A
continuacin, el extremo del tubo capilar se introduce en la disolucin. La disolucin
ascender por el tubo por capilaridad. En uno de los lados de la placa, aproximadamente a 3
mm del borde, se ha de trazar a lpiz una lnea recta, lnea base, y sobre ella unos puntos de
referencia. Sobre dichos puntos se pincha con el tubo capilar, de modo que una pequea
cantidad de la disolucin pase a la placa. De esta manera, la muestra queda adsorbida por el
soporte slido en la placa.
2.-Realizacin del cromatograma: Correr una placa.
El cromatograma se realiza en una cubeta que contiene el eluyente elegido. El nivel del
eluyente debe de ser menor que la separacin entre el borde de la placa y la lnea base el
lugar donde se ha efectuado el pinchazo .La placa se introduce en la cubeta y se tapa. El
eluyente asciende por la placa por capilaridad, arrastrando a su paso a los componentes de
la mezcla. Naturalmente los componentes de la mezcla son arrastrados con diferente
velocidad, de acuerdo con su distinta polaridad. Cuando el frente del eluyente llega casi al
borde superior de la placa, esta se extrae de la cubeta. Se debe de trazar una nueva lnea
a lpiz indicando el nivel hasta el que ha ascendido el eluyente.

3.-Revelado del cromatograma

Una vez que el eluyente sobre la placa se ha secado se ha de proceder a la visualizacin del
cromatograma. En determinados casos, si los compuestos son coloreados esto puede
realizarse de forma directa. Sin embargo, para compuestos incoloros es necesario utilizar
diferentes tcnicas de revelado. Las placas de cromatografa comerciales portan un agente
fluorescente inorgnico en la fase estacionaria. Ello permite visualizar el cronograma
iluminando la placa con una lmpara de luz ultravioleta UV. Los diferentes compuestos
aparecen en la placa comomanchascirculares. Las distintas manchas deben de marcarse a
lpiz sobre la placa para su estudio posterior.Diferentes reactivos
orgnicos tambin permiten el revelado permanente de la placa,
obtenindose manchascoloreadas en ella. De entre los mtodos ms comunes puede
destacarse la utilizacin del Iodo. Para ello la placa se introduce en una cubeta que contiene
cristales con Iodo y se deja estar en ella durante unos minutos. Los vapores de iodo se
disuelven en las manchas de los compuestos orgnicos tindolas de color marrn.

4. Interpretacin: factor de retencin

Una vez que la placa ha sido revelada nos encontramos con una serie de manchas
circulares. Si la separacinha sido buena cada una de ellas se corresponder a un nico
compuesto de la mezcla inicial. Es importante tener en cuenta que un mismo compuesto
corre siempre de la misma forma en cromatogramasrealizados en las mismas
condiciones(mismo soporte y mismo eluyente). Para describir las
propiedadescromatografas de cada compuesto se define el factor de retencin Rf.

OBJETIVOS
Conocer y aplicar la tcnica de cromatografa en capa fina, c.c.f., sus caractersticas
y los factores que en ella intervienen.
Calcular valores de Rf de varias sustancias.
Deducir, a travs del Rf la relacin que existe entre la polaridad de las sustancias
que se analizan y la de los eluyentes utilizados.
Aplicar la tcnica de c.c.f. como criterio de pureza e identificacin de las sustancias.

DESARROLLO EXPERIMENTAL
1. Se prepararon tres disoluciones: acetanilida (A), nitrobenceno (N) y una mezcla de
ambos (M).
2. Con un tubo capilar se tom una pequea cantidad de la disolucin (A) y por su
extremo se coloc en una placa CCF (con gel de slice como adsorbente) una
mancha a unos 6 mm del borde izquierdo de la placa y a 5 mm del borde inferior. A
la misma altura, en el borde derecho se coloc con otro capilar una mancha de la
solucin (N) y otra en la parte central de la placa de la solucin M.
3. Una vez secada la placa se introdujo en el interior de una cuba cromatogrfica con
un conteniendo 3 mL de acetato de etilo/hexano 50:50, cuidando que el disolvente
no toque la zona en la que se encuentran las manchas.
4. Se retir la placa en el momento en que el disolvente migrcon 5 mm de diferencia
de llegar al borde superior y se hizo el marcado del nivel del disolvente en un
extremo de la misma.
5. Se dej secar y despus se revel la placa en una lmpara de luz ultravioleta. Se
llev a cabo la medicin de las distancias recorridas por el frente del disolvente y
para cada mancha, y se calcul el valor de Rf.
6. Una vez concluido, se repiti todo el proceso utilizando otros eluyentes.
 RESULTADOS

Etilo/Hexano 50:50 Etilo/Hexano 80:20 Etilo/Hexano 20:80

1= Acetanilida
2= Nitrobenceno
3= Mezcla
Etilo/Hexano 50:50

()
C RF = ()
3.5 cm C 3.3 cm
0.3
RFA = 3.5 = 0.08 Para 1 y 3.

1
RFB = 3.5 = 0.28 Para 2 y 3.
B
3.3
A RFC = 3.5 = 0.94 Para 3.
. . .
1 Las manchas A fueron visibles en luz UV.
0.3
cmcm cmcm
Las manchas B fueron visibles en yodo y en molibdato al
1 2 3
quemar la placa se intensificaron.

La mancha C fue visible en molibdato al quemar la placa.

 Etilo/Hexano 80:20 0.5
RFA = 3.5 = 0.14 Para 1 y 3.

C 1.1
3.5 cm RFB = 3.5 = 0.31 Para 1 y 3.
3.2 cm
3.2
B RFC = 3.5 = 0.91 Para 1 y 2.

Las manchas A fueron visibles en luz UV.

A Las manchas B fueron visibles en yodo.
. . .
1.1 cm La mancha C fue visible en yodo y molibdato al
0.5 cm
momento de quemar la placa.
1 2 3

Etilo/Hexano 20:80 0.3

RFA = 3.6 = 0.08 Para 1 y 3.

3.6 cm 2
RFB = 3.6 = 0.55 Para 1, 2 y 3.
B

Las manchas de los puntos A fueron visibles en luz

2 cm UV y en yodo.

A La mancha B fue visible en luz UV y en molibdato al

quemar la placa.
. . .
0.3 cm
1 2 3

DISCUSIN DE RESULTADOS
En la cromatoplaca que se eluy con etilo/hexano, no se apreciaba desplazamiento de
sustancia sobre la cromatoplaca, esto debido a que aplicamos una mala tcnica para
revelarlos, aunque en una de las que obtuvimos resultados, si se mostraron manchas de
adsorcin.
En el factor de retencin, las distancias han sido medidas con una regla a simple vista, por
lo que los valores de polaridad no son exactos sino una simple aproximacin.
CONCLUSIN
La cromatografa en capa fina resulta un mtodo muy til, si bien no tanto para separar
sustancias, si es muy til utilizar este principio de separacin para observar diferentes
situaciones de una muestra problema como es la pureza o la identificacin de compuestos
presentes en sta muestra de igual manera aplicamos esto para saber cundo una reaccin
ya ha terminado o no, para lograr observar un buen cromatograma debemos de tomar en
cuenta siempre la polaridad tanto del compuesto a analizar as como del eluyente, as
podremos ver las diferencias de Rf y asegurar los puntos anteriores por la distancia
recorrida de cada sustancia y cuando son distintas o cuando son las mismas.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

Pedersen; Myers. Organic Chemistry A laboratory course Brocks cole: USA

2011; pp 127-129.
Baltazar, Ricardo. Video Cromatografa en capa fina Universidad Nacional
Autnoma deMxico, Facultad de estudios Superiores Zaragoza: Mxico 2003
E. Stall (Editor) Thin Layer Chromatography. A Laboratory Handbook. 2nd. De.
Springer Verlag, New York, 1969.