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Figura 1. Las bases presentes en los cidos nuclecos.

Las bases guanina (G), adenina (A) y citosina (C) existen en


el ADN y el ARN. La timina (T) slo se encuentra en el ADN y es substituida en el ARN por el uracilo (U). Estas
bases estn unidas covalentemente a los azcares desoxirribosa y ribosa, para formar as los nucletidos del
ADN y ARN, respectivamente (ver figura 3).

Figura 2. Estructura qumica de los (a) ribonucletidos y (b) desoxirribonucletidos, constituyentes de los cidos
nucleicos. En el ARN, el C-1 de la D-ribosa est unido al N-9 de A o G, o al N-1 de C o U. En el ADN, la 2-desoxi-
D-ribosa est unida de la misma forma a las cuatro bases, pero la T toma el lugar del U (los nmeros con tilde se
refieren a los tomos de la pentosa; los nmeros sin tilde se refieren a los de la base nitrogenada). Los grupos
fosfato pueden estar unidos al C3 o al C5 de la pentosa. Si el grupo fosfato est ausente, el compuesto es un
nuclesido.
Figura 3. Representacin esquemtica de la estructura de la doble hlice del ADN.

Figura 4. El mtodo de Maxam y Gilbert para secuenciar ADN. Los nmeros de los carriles en el gel
corresponden a los distintos tipos de corte que se describen en el texto.
Figura 5. Las enzimas de restriccin reconocen secuencias especficas de ADN y pueden ser utilizadas para
separar las hebras etiquetadas antes de secuenciar por el mtodo de Maxam-Gilbert.

Figura 6. El mtodo de Sanger. Cuatro reacciones con ddNTPs diferentes permiten la sntesis de distintos
fragmentos con una terminacin especfica. Estos fragmentos se pueden separar por electroforesis y
comparando los tamaos, se puede determinar la secuencia del templado.
Figura 7. La reaccin de PCR consiste en varios ciclos de 3 pasos. Las temperaturas y los tiempos indicados son
ejemplos y varan dependiendo de las caractersticas del ADN que se desee amplificar.

Figura 8. La estrategia chromosome walking permite determinar la secuencia de un fragmento enorme de


ADN ensamblando muchas secuencias pequeas de distintas clonas
(www.bio.miami.edu/dana/250/25003_10.htm).
Figura 9. En la estrategia shotgun se secuencian fragmentos al azar y luego usando un programa
computacional se encuentran las regiones que se traslapan para determinar la secuencia del fragmento original
(http://www.bioteach.ubc.ca/Bioinformatics/GenomeProjects/shotgun%201.gif).

Figura 10. La forma en la cual se puede utilizar hibridizacin para secuenciar. La molcula de ADN se hibridiza
contra pequeos oligonucletidos que son como palabras. Despus, se determina la secuencia.

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