Universidad Jurez Autnoma de Tabasco.

Divisin Acadmica multidisciplinaria de

Comalcalco.
Licenciatura en Enfermera.
Asignatura: Bases de bioqumica. Propsito de la asignatura: Aplicar conocimientos y
habilidades relacionadas con principios bsicos que sustentan los procesos metablicos de
respuesta inmune, farmacolgica, microbiolgica y fisiolgica; desarrollando actividades
basadas en la comprensin de los procesos bioqumicos del cuerpo humano que permitan
brindar cuidados de Enfermera considerando la importancia de la regulacin de los
compuestos orgnicos en la recuperacin del paciente.
Profesor: M en C. Ma. Antonia Jimnez santos.
Laboratorio de Bioqumica.
Tiempo estimado de duracin 2 horas.
Prctica 1
Regulacin del equilibrio cido-base despus de la ingestin de bicarbonato de sodio.
Objetivo: Constatar las actividades reguladoras del pulmn y el rin para mantener el
equilibrio cido-base en condiciones que tienden a romperlo.
Conteste las siguientes preguntas:
1.- Por qu es importante que se mantenga constante, dentro de ciertos lmites, el pH en el
organismo?
2.- Cules son las fuentes de iones H+ en el organismo?
3.- Cules son los sistemas reguladores que facilitan la eliminacin del H+ producido en el
organismo con el fin de mantener constante el pH sanguneo?
4.- Cules son las reacciones de formacin del cido carbnico (H2CO3) a partir de CO2 y
H2O, y de su disociacin para formar el ion bicarbonato? Escrbalas.
5. - Qu sistemas amortiguadores participan directamente en la regulacin del pH
sanguneo?
6.- Cules son los sistemas extra sanguneos que tienden a mantener el pH extracelular?
NTRODUCCIN
Dentro de los mecanismos de regulacin de que dispone el organismo para mantener la
integridad fisiolgica, aquellos involucrados en la homeostasis del pH en los fluidos
extracelulares desempean un papel crucial para la supervivencia del individuo. En este
sentido cabe sealar humano adulto promedio produce alrededor de 20 moles de CO2 al da,
Al difundir a la sangre, gran parte de dicho gas se combina con al agua en el interior de los
eritrocitos, produciendo cido carbnico (H2CO3), reaccin que es seguida por la
disociacin del H2CO3 para producir el anin bicarbonato HCO3 - y un in hidrgeno (H+).
Dado el carcter de cido dbil del H2CO3, la fraccin disociada del mismo es pequea; sin
embargo, considerando la gran cantidad de CO2 que produce el organismo, la acidificacin
de los fluidos extracelulares sera importante en ausencia de mecanismos reguladores. En el
hombre, la intervencin de los pulmones y los riones evita que ocurra tal acidificacin
manteniendo en un nivel constante la concentracin de H+ y, por consiguiente, del pH.
Para entender el papel que juegan ambos rganos en la homeostasis del equilibrio cido-base,
debe tenerse presente que el sistema del cido carbnico implica la participacin de un
componente gaseoso o voltil (el CO2) y dos componentes no voltiles (el HCO3 - y el H+).
En la sangre, el equilibrio entre dichos componentes determina el valor del pH sanguneo,
que puede evaluarse mediante la bien conocida ecuacin de Henderson-Hasselbach. En el
individuo normal, dicho valor flucta en un promedio 7.4, siendo la sangre venosa
enriquecida en CO2 ligeramente ms cida en relacin con la sangre arterial. Ahora bien, ya
que a temperatura ambiente el CO2 existe en estado gaseoso, la cantidad de CO2 disuelto en
la sangre depender de la presin parcial (PCO2) ejercida por el mismo a nivel de los alvolos
pulmonares En el humano, la magnitud de dicha PCO2 es de aproximadamente 40 mmHg lo
que se traduce en una concentracin de CO2 sanguneo de aproximadamente 25 mM; este
ltimo valor incluye no solo el CO2 como tal, sino tambin el bicarbonato y el cido
carbnico. Considerando el pH sanguneo normal y el pKa del sistema bicarbonato-cido
carbnico, la relacin [HCO3 -] / [H2CO3 + CO2] es de aproximadamente 20. Es
precisamente la PCO2 la que es controlada por los pulmones, ya que durante el proceso de
la exhalacin se elimina CO2, manteniendo constante la PCO2 en los alvolos y evitando as
que aumente el nivel de CO2, disuelto en la sangre. Todo proceso o patologa que se
manifieste en una alteracin en la frecuencia y/o profundidad del proceso de inhalacin-
exhalacin, dar como resultado una alteracin de la PCO2 alveolar aumentndola o
disminuyndola, -con la siguiente modificacin del nivel de CO2 disuelto en sangre y, por
consiguiente, del pH. Por lo que respecta a los riones, su participacin en el mantenimiento
de un pH extracelular constante se da a travs de dos mecanismos: la excrecin de
equivalentes cidos (H+) hacia la orina y la regulacin de la cantidad de HCO3 - reabsorbido
hacia la sangre desde el filtrado glomerular. A diferencia del intercambio gaseoso en los
pulmones, los mecanismos de regulacin renal son de largo plazo, por lo que su efecto ser
manifiesto en cuestin de horas. Su importancia se enfatiza en situaciones patolgicas donde
se altera el intercambio de gases pulmonar (es decir, en la acidosis y alcalosis respiratorias),
en cuyo caso es necesario aumentar o disminuir la tasa de reabsorcin del HCO3 -, o bien en
estados fisiolgicos que producen cantidades importantes de cidos orgnicos (por ejemplo,
en la diabetes no controlada o durante el ejercicio intenso) donde se incrementa la excrecin
de H+ Gran parte de este ltimo aparece en la orina acomplejado con el amoniaco en forma
de in amonio (NH4 +) o asociado con el fosfato en forma de fosfato monobsico de sodio
(NaH2PO4), representando este ltimo la llamada acidez titulable. En general, el pH de la
orina ser un reflejo de la produccin de cidos no voltiles por el organismo. El resultado
final de los mecanismos fisiolgicos que participan en el mantenimiento del equilibrio cido-
base es el de mantener el pH extracelular en un rango compatible con el funcionamiento
adecuado del organismo.
Material
Diez probetas o vasos de precipitado. Recipiente para recolectar muestras de orina
(alumnos)
Orina.
 Solucin de bicarbonato de sodio a 3%.
Potencimetro calibrado.
Mtodo
1. Tomar 250 ml de agua una hora antes de la clase prctica. Vaciar la vejiga y descartar esa
orina.
2. Tomar 250 ml de agua inmediatamente antes de la clase prctica.
3. Orinar en un vaso de precipitado de 100 ml.
4. Ingerir 250 ml de agua con 7.5 g de bicarbonato de sodio.
5. Obtener muestras de orina cada 15 minutos, hasta completar por lo menos 5 muestras.
6. A cada muestra se le determinar el pH inmediatamente despus de haber sido obtenida.
Anlisis de resultados
Una vez obtenido el valor del pH para cada una de las 5 muestras de orina, trazar una grfica
de pH contra tiempo; interpretar los resultados y discutirlos en grupo.
Referencias
1. Devlin TM. Bioqumica. Libro de texto con aplicaciones clnicas. 4a. ed. Barcelona:
Editorial Reverte; 2004.
2. Montgomery R. Bioqumica: casos y texto. 6a. ed. Editorial Harcourt-Brace; 1998: cap.4.

Prctica 2. Determinacin de glucosa en sangre total

Tiempo de la prctica: 2 horas
Objetivos
1. Que el estudiante comprenda el metabolismo de la glucosa en sujetos sanos en diferentes
condiciones.
2. Que el estudiante corrobore los cambios de glucosa e insulina durante la ingesta de
alimentos.
3. Que el alumno sea capaz de interpretar y relacionar las mismas condiciones en ayuno.
4. Que el alumno sea capaz de ver las curvas de ndice glicmico de diferentes
monosacridos.

Introduccin
En el estado de postabsorcin (ayuno) de los individuos normales, la relacin
insulina/glucagn sangunea es baja, haciendo que el glucgeno muscular y heptico sea
degradado como una fuente de glucosa. Un ayuno adicional resulta en la degradacin de las
protenas a aminocidos en el msculo esqueltico, y en la liplisis de los triacilglicroles a
cidos grasos en el tejido adiposo. El aminocido alanina y el glicerol son usados para
sintetizar glucosa por medio de la gluconeognesis estimulada por glucagn. Adems, los
cidos grasos libres pueden ser usados como combustible por el corazn, los msculos
esquelticos y el hgado. Algunos minutos despus de la ingesta de una comida, los niveles
de insulina sangunea aumentan. La glucosa y los aminocidos de la dieta tales como la
leucina, isoleucina y lisina, son estimulantes potentes de las clulas beta del pncreas
haciendo que stas segreguen insulina. La mayor parte de las clulas perifricas responden
al aumento de la glucosa sangunea con un aumento rpido del transporte de la glucosa dentro
de las clulas. De esta manera, los niveles de glucosa sangunea aumentan solamente de un
20% a un 40% en los individuos no-diabticos. Sin embargo, aproximadamente el 80% de la
entrada de glucosa no es insulino dependiente, ya que el cerebro, los glbulos rojos, el hgado
y los intestinos no requieren de insulina para la entrada creciente de glucosa cuando est
presente glucosa sangunea elevada. El msculo es el tejido dependiente de insulina ms
importante. Los niveles crecientes de insulina y glucosa sanguneas inhiben la liplisis as
como a aproximadamente el 60% de la liberacin normal de glucosa heptica. Las
concentraciones de glucosa en el suero son aproximadamente 15% ms altas que las
concentraciones de glucosa en la sangre total. Debe tomarse en cuenta que las
concentraciones totales en la sangre varan con el hematocrito. La glucosa sangunea total se
aproxima muy marcadamente a la glucosa plasmtica cuando el hematocrito es bajo. La
diferencia del 15% entre la glucosa sangunea total y la glucosa plasmtica descrita arriba es
para un valor del hematocrito de aproximadamente el 45%.
Requisito para la prctica: ayuno de 8 horas
Podr participar un integrante por equipo, de manera que en todo el grupo se puedan trabajar
las diferentes condiciones.
Glucmetros One Touch Ultra.
Tiras reactivas One Touch Ultra [Glucosa Oxidasa (Aspergillus
nger)].
Lancetas estriles.
Recipiente para material punzo cortante.
Recipiente para material biolgico infeccioso
Jabn para manos.
Torundas de algodn con alcohol.
Sujetos con diferentes ingesta de carbohidratos:
a).-15 gramos de glucosa.1er Equipo
b).-15 gramos de sacarosa. 2 Equipo
c).-15 gramos de cereal. 3er Equipo
Repetir, los mismos procedimientos con los equipos restantes (4, 5, 6,7).
Mtodo.
Determinacin de glucosa.
1.-A cada uno de los sujetos se les determinar la concentracin de glucosa en sangre total
por medio de un glucmetro en los siguientes tiempos:
0 minutos (antes de ingerir la carga de los diferentes monosacridos).
30 minutos, 60 minutos y 90 minutos, despus de ingerir los alimentos.
Para realizar la determinacin de glucosa en sangre total seguir los siguientes pasos:
1.-Lave sus manos y limpie con una torunda de algodn con alcohol la zona donde se
realizar la puncin.
2.-Aplique un suave masaje a la punta de su dedo que le ayudar a obtener una gota de sangre
adecuada. No exprima en exceso el rea de puncin.
3.- Acerque y mantenga la gota de sangre en el canal estrecho del borde superior de la tira
reactiva.
4.- a) Muestra adecuada. Cuidar la obtencin suficiente de muestra.
5.- Inserte la tira reactiva en el puerto de anlisis, con el extremo de las barras de contacto de
primero y mirando hacia arriba. Empjela hasta que no avance ms.
6.- Hasta que la ventana de confirmacin este completamente llena de sangre, antes que el
medidor comience la cuenta regresiva.
7.-Lectura: el resultado de la prueba de glucosa de su sangre aparecer despus de que el
medidor cuente en forma regresiva de 5 a 1.
8.-Es importante desechar con mucho cuidado la lanceta usada luego de cada uso, con el fin
de evitar que se produzcan lesiones accidentales con las puntas de la lancetas. Para el desecho
de las lancetas siga los siguientes pasos:
9.-Deposite la lanceta en un recipiente para material punzo cortante.
10.-Deseche las tiras reactivas en una bolsa para material biolgico-infeccioso junto con las
torundas de algodn empleadas en la prctica.
11.-Con los datos obtenidos organizarlos en una tabla y hacer una grfica de todas las
variantes en papel milimtrico.
Anotar el resultado en la tabla correspondiente
Nombre: Fecha
Edad sexo
Tiempo en minutos Glucosa miligramos/decilitros
0
30
60
90
Referencias
1.-Kaplan LA, Pesce AJ. (2002). Qumica Clnica. Teora, anlisis y correlacin. 3 Edicin.
Ed. Pesce Kaplan Publicaciones, Captulos: 32.
2.-NORMA OFICIAL MEXICANA, NOM-015-SSA2-1994, Para la prevencin,
tratamiento y control de la diabetes mellitus en la atencin primaria. Listado de Normas
Oficiales Mexicanas de la Secretara de Salud.

La revisin de los reportes de laboratorio se realizara al concluir el ciclo escolar en las fechas
que seleccionen a partir de 21 al 30 de Noviembre del 2017. Se realizara una presentacin
oral que explique la relacin de la prctica con los procesos bioqumicos en el cuerpo
humano. Todos deben participar. Tambin podrn organizar mini expociencia, es opcional.
La presentacin le dar a cada integrante el derecho a examen ordinario. Nota. Los que estn
exentos, tambin deben exponer.
 CUESTIONARIO PRACTICA
1. Por qu es importante que se mantenga constante, dentro de ciertos
lmites, el pH en el organismo?
R= Para evitar que se puedan producir grandes alteraciones en las
reacciones qumicas celulares. El cuerpo tiene un pH fisiolgico de 7.4 que
es ptimo mediante el cual las enzimas y en general la mayora de las
reacciones metablicas funcionan adecuadamente, por lo que su buena
regulacin es esencial en el organismo.
2. Cules son las fuentes de iones H+ en el organismo?
R= CO2, producto final del catabolismo oxidativo de la glucosa y cido
graso. En la respiracin celular en forma de CO2 que reacciona con el agua
para formar cido carbnico y bicarbonato. Otros cidos provienen del
metabolismo de los hidratos de carbono y las grasas, de las nucleoprotenas
(cido rico) y de los compuestos orgnicos fosforados.
3. Cules son los sistemas reguladores que facilitan la eliminacin del H+
producido en el organismo con el fin de mantener constante el pH
sanguneo?
R= Son los sistemas reguladores cido-bsicos
Regulacin respiratoria del equilibrio cido-bsico.
Regulacin renal del equilibrio cido-bsico.
-Se combina de forma inmediata con un cido o una base para evitar
cambios excesivos en la concentracin de iones H+.
-Regula la eliminacin de CO2 (por lo tanto, de H2CO3) del lquido
extracelular (acta en pocos minutos)
4. Qu sistemas amortiguadores participan directamente en la regulacin
del pH sanguneo?
R= La manera en que podemos regular el pH dentro de los lmites
compatibles con la vida son: 1) los tampones fisiolgicos y 2) la eliminacin
de cidos y bases por compensacin respiratoria y renal. Los tampones
fisiolgicos son la primera lnea de defensa frente a los cambios de pH de los
lquidos corporales, entre los que destacan: el tampn fosfato, el tampn
bicarbonato y el tampn hemoglobina.
5. Cules son los sistemas extra sanguneos que tienden a mantener el pH
extracelular?
R= El pH extracelular se mantiene a travs de la excrecin de los
equivalentes de cidos y por la regulacin de HCO3 que se absorbe de la
sangre.
6. Cmo participan el aparato respiratorio y el rin en el control del pH
sanguneo?
R= MECANISMO RESPIRATORIOS: Ejerce primordialmente el control del cido
carbnico y es un evento rpido.
MECANISMO RENAL: Regula en especial las bases; es un proceso lento pero
ms preciso.
La clula tubular renal emplea cuatro procesos reguladores del pH.
Reabsorcin de HCO3: en condiciones normales, prcticamente,
todo el HCO3 filtrado es reabsorbido; sin embargo, si su concentracin
plasmtica es muy elevada se logra su Tm y el HCO3 restante se
elimina.
Secrecin de H: este H es intercambiado por un Na+, el cual, a su vez,
atrae HCO3- o Cl- hacia los lquidos orgnicos.
Amionognesis: la clula tubular sintetiza amonaco. (NH3)