Microbiologia Industrial

Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Facultad de Estudios Superiores Zaragoza
PLANTAS Y HONGOS
MICORRIZAS ARBUSCULARES: UN MUTUALISMO
ESENCIAL EN ZONAS SEMIARIDAS
Unidad de Investigacin en Ecologa Vegetal
Arcadio Monroy Ata

Rosalva Garca Snchez
Editores
PLANTAS Y HONGOS
MICORRIZAS ARBUSCULARES: UN MUTUALISMO
ESENCIAL EN ZONAS SEMIARIDAS
Arcadio Monroy Ata

Editores
Unidad de Investigacin en Ecologa Vegetal
Mxico, D.F. noviembre de 2009

Plantas y Hongos
Micorrizas arbusculares: un mutualismo
esencial en zonas semiridas
1 Edicin, 16 de noviembre de 2009.
Universidad Nacional Autnoma de Mxico

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza
Juan Crisstomo Bonilla No. 66
esquina Calz. Ignacio Zaragoza
Col. Ejrcito de Oriente
Mxico 09230 D. F.
Diseo de portada: Maribel Flores Estrada

Diseo y formacin de interiores: Claudia Ahumada Ballesteros
ISBN:
Impreso y hecho en Mxico

Donde crece el rbol del conocimiento,
ah est el paraso.
Friedrich Nietzsche
Lo de arriba es igual a lo de abajo

y lo de abajo igual a lo de arriba
para la perfecta realizacin de la unidad
atribuida a Hermes Trimegisto
Se agradece el financiamiento de la
Direccin General de Asuntos del Personal Acadmico
de la UNAM, a travs del proyecto con clave PE-205109,
del Programa de Apoyo a Proyectos para la Innovacin
y Mejoramiento de la Enseanza (PAPIME),
para la impresin de este libro.
Indice
Introduccin 7
Los hongos micorrizgenos arbusculares en prcticas de restauracin de 11

vegetacin semirida
Arcadio Monroy y Rosalva Garca Snchez
Efecto de hongos micorrizgenos arbusculares (HMA) sobre el desarrollo 24

de Agave salmiana y Opuntia streptacantha en condiciones de invernadero
Luis Alberto Luna Camacho y Arcadio Monroy Ata
Inoculacin de micorrizas arbusculares, Azospirillum brasilense y su 36

interaccin sobre Agave Salmiana bajo condiciones de invernadero
Jorge Eduardo Simancas Ortiz y Arcadio Monroy Ata
Hongos micorrizgenos arbusculares asociados al suelo rizosfrico de 46

diez cactceas globosas de cinco localidades del Valle del Mezquital,
Hidalgo, Mxico
Rosalva Garca Snchez y Csar Fernando Gonzlez Monterrubio
Obtencin de inculos de hongos micorrizgenos arbusculares (HMA) 60

nativos del Valle del Mezquital, Hidalgo, Mxico
Eduardo Chimal Snchez, Leonardo Lpez Medina y Rosalva Garca Snchez
Hongos micorrizgenos arbusculares asociados a Bouteloua curtipendula 80

en cuatro poblaciones del Valle del Mezquital, Hidalgo, Mxico
Mariano Garca Daz y Rosalva Garca Snchez
Conclusiones 95
Introduccin 7
Introduccin
La simbiosis micorrcica conecta el suelo con la atmsfera, a travs de la vegetacin para alcanzar
un equilibrio dinmico en el balance de carbono global. Asimismo, el mutualismo entre plantas
y hongos micorrcicos presenta propiedades o atributos emergentes a nivel de paisaje
(composicin de mosaicos de vegetacin, optimizacin del flujo evapotranspiracional al
maximizar el aprovechamiento del recurso hdrico en los perfiles edficos, estabilidad del suelo,
incremento del ciclaje de nutrientes), de comunidad bitica (sucesin ecolgica de plantas,
micorrizas, fauna y microorganismos, incremento en la fertilidad del suelo, maximizacin del uso
de nutrientes escasos, conformacin de una comunidad vegetal unitaria conectada a una misma
red hifal), de poblacin (jerarquas dentro de las poblaciones vegetales, uso de recursos
edficos a diferentes profundidades por races asociadas a distintas especies de micorrizas,
complementariedad ecolgica entre poblaciones vecinas para formar gremios o grupos
funcionales, transferencia de recursos edficos limitantes del crecimiento vegetal entre individuos
que componen el mismo gremio) y de individuos (adquisicin de recursos por plantas y hongos,
retroalimentacin entre fitobionte y micobionte para lograr un balance entre la biomasa del
vstago y de la raz o de la proporcin C/N en la planta, expresin ecolgica particular de la
plasticidad fenotpica vegetal, porcentaje de colonizacin micorrcica como respuesta a
determinantes ontogenticos y ambientales).
Lo anterior muestra la estructura fractal de la relacin entre plantas y hongos micorrcicos,

donde la geometra bsica es una Y, que transita las escalas espaciales desde niveles
microscpicos, del orden de las micras en la malla hifal, hasta los metros en la morfologa
vegetal de los rboles dominantes en los diferentes ecosistemas. La autosimilaridad de esta
dicotoma fundamental o repeticin de la misma forma de base en distintas escalas
geomtricas, permite la integracin vertical entre plantas y hongos, a travs del fenmeno
fsico de la resonancia. Por ello, el mundo vivo est ms integrado vertical y horizontalmente
de lo que hasta ahora se ha sospechado.
As, las micorrizas surgen como un sistema de conexin del tejido vegetal que cubre la corteza
terrestre, al conformar comunidades vegetales similares a super-organismos. Si queda claro que
la vegetacin est conectada a nivel del subsuelo, es ms fcil apreciar la vinculacin horizontal
de plantas y organismos hetertrofos sobre la superficie del suelo, particularmente mediante
procesos como la respiracin, herbivora, polinizacin, dispersin de semillas va fauna
(zoocoria), etc. Entonces las micorrizas forman parte del elemento cementante del suelo y del
mundo vegetal.
8 Introduccin
Una vez que se conoce el papel fundamental de las micorrizas en el desarrollo vegetal, resulta
inocente sembrar plantas sin inocularlas con las micorrizas adecuadas. En efecto, todo proyecto
de reforestacin, de recuperacin del capital natural (o de restauracin ecolgica), de agricultura
orgnica o de establecimiento de huertos familiares, de azoteas verdes, de jardines verticales o
de propagacin de plantas en macetas, deberan considerar el uso de micorrizas y de otros
microorganismos mutualistas que facilitan la nutricin vegetal, como las bacterias fijadoras de
nitrgeno.
Por lo que procede, es necesario continuar realizando investigaciones sobre este mutualismo casi
universal de las plantas terrestres, ya que de esta manera se podrn generar inculos adecuados
a los vegetales, suelo y clima de los distintos proyectos de cultivo de plantas a todos los niveles.
Incluso, la generacin de inculos micorrcicos altamente especializados sera una oportunidad
ecolgica para sustituir a los fertilizantes qumicos que se emplean en la agricultura y silvicultura
comerciales, en beneficio del medio ambiente.
Mxico es seguramente el cuarto pas a nivel mundial en cuanto a nmero de especies de plantas
vasculares que medran en un pas (despus de Brasil, Colombia y China) y el segundo en
endemismos vegetales (despus de Sudfrica). Parte de esta riqueza corresponde a zonas ridas
y semiridas donde se estima que existen unas 6 mil especies de plantas, adems de que un 60%
del territorio nacional corresponde a ambientes con algn grado de aridez. Por ello, es necesario
conocer los mecanismos, reglas, principios y leyes que gobiernan la simbiosis micorrcica en
ambientes secos, con fines de produccin, conservacin, restauracin, mitigacin del
calentamiento global, control de erosin, captacin de carbono, etc. La edicin de este libro se
dirige en esta direccin, al dar a conocer datos inditos sobre procesos ecofisiolgicos que se
presentan en la simbiosis mutualista entre algunas plantas de zonas semiridas y hongos
micorrizgenos arbusculares.
En este sentido, es digno de resaltar el esfuerzo que realizan los acadmicos agrupados en la
Unidad de Investigacin en Ecologa Vegetal de la Facultad de Estudios Superiores Zaragoza,
de la UNAM, para comprender la naturaleza de la simbiosis micorrcica en ambientes semiridos,
particularmente en el Valle del Mezquital en el Estado de Hidalgo. El grupo ha trabajado en esta
regin por ms de 20 aos (se iniciaron los proyectos de investigacin-docencia en el verano
de 1989), donde han estudiado las comunidades vegetales y sus procesos ecolgicos. Este libro
que ahora se edita, es el fruto de diferentes estudios encaminados a conocer las respuestas
individuales de un grupo de especies vegetales cuando estn asociadas a micorrizas arbusculares
provenientes de la microbiota edfica de los ecosistemas de la localidad y a analizar las
caractersticas de los consorcios de hongos micorrizgenos arbusculares nativos de los
matorrales xerfilos de la zona de estudio.
Introduccin 9
Los trabajos presentados corresponden a lneas de investigacin derivadas esencialmente de

estudios de tesis de licenciatura y de programas de servicio social, de alumnos de la Carrera de
Biologa, que optaron por la Salida Terminal de Ecologa Vegetal. Los captulos del libro son
producto de la asesora de los profesores que suscriben el libro, cuya revisin corri a cargo,
en la mayora de los casos, de colegas acadmicos que aportaron crticas a los manuscritos
originales, pero las omisiones son responsabilidad de los autores.
Finalmente, es necesario agradecer el financiamiento que otorg la UNAM, a travs de la

Direccin General de Asuntos del Personal Acadmico, mediante diferentes proyectos, para la
realizacin de las investigaciones aqu presentadas. Particularmente se agradecen los recursos
vertidos a travs del Programa de Apoyo a Proyectos de Investigacin e Innovacin Tecnolgica
(PAPIIT) y del Programa de Apoyo a Proyectos para la Innovacin y Mejoramiento de la
Enseanza (PAPIME), especialmente al que tiene la clave: PE-205109. Igualmente le agradece
a la Direccin de la FES Zaragoza por las facilidades brindadas para llevar a buen puerto la edicin
e impresin de este libro.
Es deseable que la aparicin de este libro estimule a las nuevas generaciones de estudiantes a
adentrarse en el mundo de la simbiosis micorrcica, pues mientras ms profundo se llegue en
la bsqueda de las races de los vegetales, ms alto se llegar en la comprensin de la armona
que subyace y que transmiten los mosaicos de vegetacin que sustentan a Gaia, la Tierra viva.
Arcadio Monroy Ata

Mxico, D.F., noviembre de 2009.
Hongos micorrizgenos arbusculares y restauracin ecolgica 11
Los hongos micorrizgenos arbusculares

en prcticas de restauracin
de vegetacin semirida
Arcadio Monroy Ata

Unidad de Investigacin en Ecologa Vegetal, Facultad de Estudios Superiores Zaragoza,
Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Apartado Postal 9-020 C.P. 15 000 Mxico, D.F.
E-mails: rosalvags@correo.unam.mx, arcadiom@servidor.unam.mx
Resumen
En este trabajo se determin la influencia de la aplicacin de un inculo, con hongos micorrizgenos arbusculares
(HMA), sobre el desarrollo de cuatro especies leosas, dominantes en matorrales xerfilos, en condiciones de
invernadero y de campo. Esto con la finalidad de evaluar tcnicas que incrementen la probabilidad de establecimiento
y supervivencia de especies vegetales de importancia ecolgica. Las especies analizadas fueron: Acacia schaffneri,
Mimosa biuncifera, Prosopis laevigata (Fabaceae) y Opuntia streptacantha (Cactaceae). La zona de estudio es
el Valle de Actopan, Hidalgo. La metodologa consisti en cultivar las cuatro especies en sustrato estril, en condiciones
de invernadero, bajo dos tratamientos: lotes de plantas micorrizadas y sus testigos. El experimento se llev a cabo
durante al menos cuatro meses para todas las especies; posteriormente se mantuvieron en un vivero hasta cumplir un
ao de edad y despus fueron transplantadas a un matorral xerfilo degradado, donde se evalu mensualmente su
desarrollo durante un ao.
Los resultados en condiciones de invernadero muestran que tres de las especies (excepto A. schaffneri) presentan
mayores tasas de crecimiento y una mayor eficiencia en el uso del agua, lo cual favorece su establecimiento en
condiciones hdricas limitantes; asimismo, la supervivencia fue significativamente mayor en las cuatro especies. Tambin
se mostr la eficiencia del inculo de HMA, al determinar el porcentaje de colonizacin micorrcica total. En el
experimento en condiciones de campo, la supervivencia de las plantas micorrizadas fue significativamente mayor en
las cuatro especies, debido a que, probablemente, la micorrizacin favorece el suministro hdrico durante la poca de
sequa (noviembre-mayo). Por lo anterior, se concluye que la micorrizacin de plantas que se desean reintroducir para
rehabilitar la cubierta vegetal de zonas semiridas, es un factor que incrementa sustancialmente el xito en el
establecimiento y supervivencia. Por ello, la inoculacin de plntulas con HMA nativos es una tcnica altamente
recomendable para la restauracin de matorrales xerfilos deteriorados.
Palabras clave: hongos micorrizgenos arbusculares, establecimiento vegetal, matorral xerfilo, Valle de Actopan
(Hidalgo).
12 Monroy Ata y Garca Snchez
Introduccin
La restauracin ecolgica es una disciplina que estudia los procesos ecolgicos que promueven
la reconstruccin de ecosistemas deteriorados y analiza tcnicas que favorecen la sucesin
ecolgica, la descontaminacin de suelo y agua, la reintroduccin de especies, la rehabilitacin
edfica, la captacin y retencin de humedad en el suelo y el establecimiento de una nueva cubierta
vegetal, entre otras herramientas. As, el repoblamiento vegetal normalmente es la primera etapa
en la restauracin de sitios degradados, donde an hay suelo que sustenta algunas poblaciones
vegetales, resultantes de alguna perturbacin (fuego, deforestacin, sobrepastoreo, sobre-
explotacin de especies).
En el caso particular de los ecosistemas ridos y semiridos, se ha reportado que el

establecimiento vegetal se incrementa cuando se utilizan plantas micorrizadas, las cuales tienen
mayor proteccin y tolerancia a las condiciones adversas del suelo y del clima (Caravaca et al.,
2003); de la misma manera, Cuenca y Lovera (1994) manifiestan que para la rehabilitacin
ecolgica de zonas degradadas, se pueden utilizar inculos micorrcicos nativos y semillas de
plantas tambin nativas. En el caso de los suelos ridos y semiridos, el establecimiento de rboles
y arbustos leosos es de importancia ecolgica y econmica, adems de ser una alternativa
productiva para contrarrestar el proceso erosivo (Montao y Monroy, 2000).
En zonas semiridas, con vegetacin del tipo de matorral xerfilo rosetfilo y crasicaulescente,
las especies leosas como mezquites, huizaches, nopales, magueyes y gatuos (Prosopis,
Acacia, Opuntia, Agave y Mimosa, respectivamente), son la base estructural de la comunidad
vegetal, adems de generar mltiples interacciones ecolgicas; estas especies son nucleadoras
de la vegetacin en estos ambientes y son determinantes en el desarrollo de la comunidad, as
como en la composicin y dinmica de la vegetacin y la fauna, ya que las leosas actan como
plantas nodrizas de la colonizacin vegetal; tambin, son refugio y fuente de alimento para la fauna
silvestre y conforman microclimas e islas de recursos (Camargo, 2001; Camargo et al., 2003).
En relacin al papel de las micorrizas en el funcionamiento y diversidad vegetal de los ecosistemas

terrestres, se ha reportado que los hongos micorrizgenos arbusculares (HMA) son la forma ms
importante de micotrofa, con distribucin global (Larcher, 2003), adems que son fundamentales
en la estructura y diversidad de la vegetacin (Hartnett y Wilson, 1999). Los HMA son tambin
determinantes de la cubierta vegetal en los ecosistemas ridos y semiridos, lo cual se refleja en
su ubicuidad en la biota edfica y en su participacin directa en procesos esenciales de la interfase
suelo-planta (Allen y Allen, 1992). Adems, por un lado, Miller y Allen (1992) y Molina et al.
(1992), consideran que cualquier cambio en la poblacin de hongos micorrcicos podra tener
consecuencias en la composicin de las comunidades de plantas (supervivencia, competencia,
diversidad florstica), causando cambios en la sucesin de los ecosistemas naturales; por otro
lado, Giovannetti y Gianinazzi-Pearson (1994) mencionan que la composicin de la comunidad

vegetal puede afectar a la comunidad de hongos micorrcicos, considerando que cualquier
cambio en la vegetacin provocara efectos negativos en la supervivencia y reproduccin del
consorcio de hongos micorrizgenos arbusculares (por ejemplo, las tasas de formacin de
esporas), operando como una fuerza selectiva en la composicin de la poblacin edfica.
Asimismo, diferentes factores de origen antrpico como contaminacin y deforestacin, que
aceleran los procesos erosivos y posteriormente la prdida de la capa frtil del suelo, generan
condiciones que limitan el establecimiento de las plantas dominantes, provocando modificaciones
en las comunidades de plantas nativas y, consecuentemente, modificando la distribucin,
abundancia y diversidad de los HMA en el ecosistema (Giovannetti y Gianinazzi-Pearson, 1994).
Por ello, el conocimiento de los factores que influyen tanto en la dinmica poblacional de la
vegetacin como en la sucesin de los hongos micorrizgenos, es esencial para inducir procesos
en la restauracin ecolgica de sitios deteriorados y para su uso en la conservacin de la
biodiversidad, en la biotecnologa o en la agricultura sustentable (Allen, 1991). Para tales fines,
es necesario tener informacin sobre qu gneros o especies de HMA estn asociados a especies
de plantas nativas de importancia ecolgica para el ecosistema, as como obtener informacin
sobre la diversidad de las micorrizas arbusculares en zonas donde el deterioro vegetal se
incrementa por las actividades humanas (Aug, 2001); esta informacin servir, seguramente,
para la elaboracin de medios de inoculacin que contengan propgulos (esporas, micelio o
races micorrizadas) altamente efectivos e infectivos, con una calidad sanitaria controlada y que
cumplan con las necesidades para las cuales se desea utilizar.
Sin embargo, la produccin del inculo micorrcico a gran escala se limita por la simbiosis
obligada por parte del hongo, lo que hace necesario implementar un sistema donde ambos
organismos se desarrollen en condiciones controladas. Afortunadamente, actualmente se cuenta
con varias tcnicas de cultivo, dependiendo de la gama de especies que se desee propagar. Por
ejemplo, el cultivo en recipientes con suelo como sustrato proporciona un ambiente favorable
para ms del 95% de especies vegetales y hongos formadores de la simbiosis. Conforme se ha
avanzado en el conocimiento de la simbiosis micorrcica arbuscular, se han logrado descubrir
tcnicas que permiten la produccin masiva de inculos de alta calidad; no obstante, los estudios
ecolgicos siguen siendo necesarios para la seleccin de cepas eficientes, destinadas a regiones
ambientales especficas (Mayumi et al., 2003) y para el establecimiento de especies de
importancia econmica (Manjarez et al., 2000) o para el re-establecimiento de especies de plantas
nativas.
Problemtica
La restauracin ecolgica de la vegetacin de los agostaderos (zonas con tipos de vegetacin
de matorral xerfilo, sujetas a pastoreo extensivo todo el ao) del Valle de Actopan, en el Estado
de Hidalgo, est directamente relacionada con la rehabilitacin del suelo y con el establecimiento
de plantas nativas, en cuya composicin hay especies de lento crecimiento y de alto valor
econmico y ecolgico (como mezquites, magueyes, nopales y acacias), que adems se asocian
de manera natural con los hongos micorrizgenos arbusculares. Por ello, si se favorece esta
interaccin y se emplean inculos micorrcicos nativos, se puede incrementar la tasa de
establecimiento y la supervivencia de los vegetales utilizados en la recolonizacin.
Por lo anterior, en este trabajo se desea responder a la siguiente pregunta: cmo influye la
inoculacin de hongos micorrizgenos arbusculares (HMA) sobre el desarrollo de especies
vegetales dominantes de agostaderos semiridos, en condiciones de invernadero y de campo?
El objetivo es determinar si los HMA favorecen el establecimiento y supervivencia de las plantas
que conforman la base estructural de la vegetacin, a fin de generar tcnicas que faciliten el
repoblamiento de la cubierta vegetal, en programas de restauracin ecolgica dirigidos a
ambientes ridos y semiridos.
Materiales y mtodos
Zona de estudio y especies
Las semillas utilizadas, el suelo y los propgulos de los hongos micorrizgenos arbusculares,
fueron colectados en el Valle de Actopan, es decir son materiales autctonos de los sitios que
se desea restaurar. El Valle de Actopan es la regin ms al sur del Valle del Mezquital; su clima
es BS1k(w)g, semirido templado, con lluvias en verano y temperaturas que oscilan entre 16
y 20 C; la precipitacin media anual es de 550 mm; los suelos son calizos y someros, con rocas
superficiales, pobres en materia orgnica, con pH alrededor de 8.0 y textura arcillosa.
Para la preparacin del inculo de hongos micorrcicos, se colect suelo de un sitio poco
perturbado y con races de gramneas (Bouteloua gracilis y B. curtipendula); este suelo fue
la fuente de propgulos (esporas y races) de HMA, los cuales fueron masificados despus de
un ciclo de cultivo de 4 meses, en macetas con sustrato estril y con pasto (Lollium multiflorum),
en condiciones de invernadero.
Para la propagacin de las plantas a reintroducir a los agostaderos deteriorados, se prepar y

utiliz un sustrato estril, compuesto de suelo-arena slica (1:1 v/v), que se mantuvo a capacidad
de campo cada semana, y en el que se cultivaron lotes de plantas de mezquite, huizache, gatuo
y nopal en condiciones de invernadero; asimismo, se puso un lote testigo, sin inculo de HMA,
de cada especie y se dio seguimiento al crecimiento de las plantas en condiciones de invernadero
durante ms de cuatro meses.
Las especies analizadas fueron: Prosopis laevigata (Humb. et Bonpl. ex Willd.) M.C. Johnst.,
Acacia schaffneri (Wats.) Hermann, Mimosa biuncifera Benth. [Fabaceae] y Opuntia
streptacantha Lem. [Cactaceae], cuyos nombres comunes son mezquite, huizache, gatuo y
nopal, respectivamente.
Tasa de crecimiento
La tasa relativa de crecimiento de las plantas, o RGR por sus siglas en ingls (Relative Growth
Rate), se calcul a partir de la altura mxima de las plantas al inicio y al final del periodo de cultivo
en condiciones de invernadero. Se utiliz el modelo de crecimiento exponencial, el cual describe
adecuadamente la fase inicial del desarrollo vegetal (Charles-Edwards et al., 1986). La frmula
empleada fue la siguiente:
RGR= [In (altura final en mm) - In (altura inicial en mm)] / [tiempo (das)]
por lo que las unidades de la tasa de crecimiento son: [(mm/mm)/d)] o [d-1].
Biomasa total y cociente R/S

La biomasa seca total de las plantas y el cociente: (biomasa radical)/(biomasa area) o raz/
vstago o proporcin R/S, por sus siglas en ingls (Root/Shoot), fue calculado despus de
cosechar las plantas al final del periodo de crecimiento en el invernadero. Para esto, las plantas
se extrajeron cuidadosamente de las macetas para no perder las raicillas, se lavaron con agua de
la llave, se cort la raz del brote y se pusieron a secar por separado en un horno a 70 oC durante
72 horas; posteriormente, se obtuvo el peso seco de ambas partes en una balanza analtica (marca
Ohaus, modelo IP15KS). Finalmente, se calcularon las medias de la biomasa seca total y del
cociente R/S para los tratamientos micorrizados y los no micorrizados.
Eficiencia en el uso del agua

La eficiencia en el uso del agua, o WUE por sus siglas en ingls (Water Use Efficiency), se
define como la proporcin entre la materia seca producida y el consumo de agua en un periodo
determinado (Salisbury y Ross, 1994); este cociente es importante en las plantas de zonas ridas
y semiridas, ya que muestra qu especies -o bajo qu condiciones- producen ms biomasa por
unidad de agua consumida, es decir qu plantas son ms eficientes para producir biomasa bajo
condiciones hdricas limitantes. Asimismo la WUE se puede estimar a partir del costo en
molculas de agua, de la captura de una molcula de CO2 en los estomas de la planta (Nobel,
1983, 1998). En este trabajo se defini la eficiencia en el uso del agua a partir del siguiente
ndice:
WUE = (g biomasa seca) / (kg agua irrigada)

por lo que las unidades son: [g biomasa/kg agua].
Supervivencia
La supervivencia de las plantas cultivadas se registr semanalmente desde el inicio del periodo
de desarrollo en el invernadero. Al trmino del experimento, se calcul el porcentaje de nmero
de plantas vivas respecto al nmero inicial de plantas.
Evaluacin de esporas
Se realiz una suspensin de 100 g de suelo en 2 L de agua. Se agit mecnicamente durante 5
minutos y se dej reposar 3 minutos con la finalidad de eliminar partculas grandes por
sedimentacin. Esta operacin se repiti tres veces; la suspensin obtenida en cada operacin
se pas a travs de una serie de tamices de 100 y 40 micras y se lav abundantemente con agua
de la llave. Una vez realizado esto, la fraccin obtenida en el tamiz de 40 micras, fue examinada
con la ayuda de un microscopio estereoscpico, para cuantificar las esporas presentes en las
muestras de suelo (Brundett et al., 1996).
Evaluacin de la colonizacin endomicorrcica

Preparaciones de races (Phillips y Hayman, 1970):
I) Clareo - Las races, libres de suelo, se colocan en cpsulas esterilizables en un vaso de

precipitados al que se le agrega suficiente KOH al 10% para cubrirlas. Se procede a calentar
(en un autoclave) por 10 minutos bajo 10 libras de presin. El KOH es retirado y las cpsulas
con las races se enjuagan con agua destilada.
II) Blanqueo - Se agrega H2O2 al 10% en suficiente cantidad para que cubra las races durante
3 minutos; pasado ese tiempo de procede a enjuagar con agua destilada.
III) Acidificacin - Las races se cubren con HCl al 10% por 3 minutos; se elimina el cido y
sin enjuagar se procede a la tincin.
IV) Tincin - Las cpsulas que contienen las races se cubren con la solucin colorante (azul
de tripano al 0.05% en lactoglicerol) y se calientan por 10 minutos a 10 libras de presin.
V) Decoloracin - El colorante se elimina y se decoloran las races con lactoglicerol limpio.
Se colocan races clareadas y teidas en cajas de Petri con suficiente lactoglicerol. En un

portaobjetos se colocan 20 segmentos de raz de aproximadamente 1 cm, paralelamente unos
a otros. Sobre las races se adicionan gotas de lactoglicerol, se colocan los cubreobjetos, se
eliminan las burbujas y cada laminilla se sella con esmalte. Para realizar la evaluacin se observa
el microscopio con los objetivos de 40 y 100X; se efectan tres pasajes equidistantes por
laminilla, de forma ortogonal a los segmentos. Al revisar el campo ptico donde se encuentre
un segmento que contiene hifas, vesculas y/o arbsculos, independientemente de la intensidad
de la micorrizacin, se da el valor de uno para la evaluacin total. El porcentaje de colonizacin

endomicorrcica total se obtiene mediante la siguiente frmula:
% de colonizacin total = (N de segmentos colonizados X 100)/(N de segmentos totales)
Trasplante a campo
En la poca de lluvias (agosto), se transplantaron lotes de plantas de cada especie a la zona de
estudio (un agostadero deteriorado); mensualmente se dio seguimiento a su supervivencia y
crecimiento. Las variables registradas fueron altura mxima y nmero de hojas durante un ao.
Resultados
Inculo micorrcico
La masificacin del inculo micorrcico result favorable y permiti disponer de HMA
suficientes para inocular los lotes de plantas que se cultivaron en un invernadero; los nmeros
de esporas obtenidos fueron de 1934 en 100 g de suelo seco en el caso de Acacia; de 1293 para
Mimosa y Prosopis y de 150 esporas para Opuntia.
Tabla 1. Parmetros indicadores del desarrollo vegetal de plntulas cultivadas en invernadero e

inoculadas con hongos micorrizgenos arbusculares (M+) y sus testigos (M -) durante un periodo de 4
a 6 meses.
Especie Tasa de Biomasa Cociente: Eficiencia en Supervivencia Colonizacin Referencia

crecimiento total biomasa el uso del (%) micorrcica
-1
(d ) (g) radical/ agua (g MS* total (%)
biomasa kg -1agua
area (R/V) consumida)
Acacia 0.0058 0.6901 a 1.4896 a - 97.5 a 35.2 (Gonzlez,

schaffneri 0.0056 0.6965 a 1.5232a - 80.0 b 8.5 2004)
Mimosa 0.020 a 1.920 a 1.00 a 0.0013 44.9 a 35 (Pea,

biuncifera 0.014 b 0.730 b 1.13 a 0.0005 28.9 b 5 2002)
Opuntia 0.0035 0.1896 a 0.3406 a 0.694 76.0 a 29 (Miranda,

streptacantha 0.0025 0.0778 b 0.1354 b 0.285 44.0 b 3 2003)
Prosopis 0.0069 0.619 a 1.1464 0.3555 75.0 a 24.6 (Torres,

laevigata 0.0058 0.519 a 1.1035 0.2964 55.0 b 0 2005)
Abreviaciones: - no determinado, M+ plantas micorrizadas, M- plantas no micorrizadas, R/V raz/vstago, MS materia
seca; letras minsculas distintas indican diferencias significativas entre tratamientos (p<0.05).
Cultivo en invernadero
En la tabla 1 se muestran los parmetros indicadores del desarrollo vegetal de las 4 especies
dominantes o codominantes- en matorrales xerfilos del Valle de Actopan, Hidalgo. Las 4
especies son plantas leosas de lento crecimiento (entre 0.2 y 2%), sin embargo, presentan
diferencias significativas en su desarrollo, mostrando una mayor tasa de desarrollo, crecimiento
y mayor biomasa que los testigos (excepto A. schaffneri). Respecto al cociente raz/vstago,
aunque cada especie muestra un patrn particular, la micorrizacin favorece el desarrollo radical
en el caso de O. streptacantha y de P. laevigata, lo cual es una estrategia eficiente para la
captacin de agua en el caso de la cactcea, ya que evade la sequa al acumular reservas hdricas
en sus tejidos; asimismo, el mezquite incrementa sus posibilidades de establecimiento y
supervivencia al favorecer el desarrollo radical, ya que es una especie freatofita. En relacin a
la eficiencia en el uso del agua, la produccin de biomasa por unidad de agua consumida resulta
sustancialmente incrementada por la micorrizacin; esto es particularmente importante en las
zonas secas donde el factor limitante del desarrollo vegetal es el recurso hdrico; esto muestra
que la micorrizacin de plantas es un factor determinante para su establecimiento.
La supervivencia de las 4 especies tambin fue notoriamente mayor en el caso de los tratamientos
micorrizados (Figura 1); este resultado es relevante, ya que la etapa de plntulas es la que presenta
los mayores porcentajes de mortalidad en el ciclo de vida de las especies leosas, las cuales tienen
importancia ecolgica en zonas semiridas por ser plantas nodrizas o nucleadoras de la
vegetacin.
Cultivo en campo
Durante el ciclo en campo se observ que las plantas transplantadas continuaron su crecimiento
siguiendo el patrn bsico para las leguminosas de zonas secas, es decir, las races crecieron
rpidamente buscando la profundidad del suelo y el vstago presenta un crecimiento ms lento;
sin embargo, no hubo crecimiento del vstago ya que las leguminosas fueron consumidas por
los herbvoros; en el caso de Prosopis el ramoneo fue tan intenso que el patrn de crecimiento
cambi: los tallos se ramificaron a partir de la base, las nuevas hojas fueron mucho ms pequeas
que las alcanzadas en condiciones de invernadero.
La supervivencia en campo vari a lo largo del tiempo entre especies (Tabla 2); al final del
ciclo se encontraron valores bajos para Acacia en los dos tratamientos -con y sin HMA- (43
y 36%) y del 83 al 91% en las especies restantes, en Prosopis no micorrizado la supervivencia
fue slo del 11.66% (que fue el valor ms bajo) y la diferencia entre plantas micorrizadas y
no micorrizadas fue del 77%, en Acacia esta diferencia fue del 7% y en Mimosa y Opuntia
de ca. 8%.
Figura 1. Plntulas de mezquite (Prosopis laevigata) de 7 meses de edad; a la izquierda lote de plntulas
micorrizadas y a la derecha lote de plntulas testigo.
Tabla 2. Supervivencia y crecimiento de las especies transplantadas a un matorral xerfilo del Valle de
Actopan, Hidalgo.
Especie Tratamiento Supervivencia Altura final Cociente: Referencia
(%) (cm) altura final/altura inicial
Acacia M+ 43.0 11.17 1.03 (Miranda, 2003)

schaffneri M- 36.0 10.88 0.97
Mimosa M+ 91.66 14.0 0.56 (Pea, 2002)

biuncifera M- 83.33 10.6 1.00
Opuntia M+ 91.6 5.60 0.91 (datos no

streptacantha M- 83.3 4.67 0.92 publicados)
Prosopis M+ 83.33 9.8 0.70

laevigata M- 11.66 2.3 0.70 (Barragn, 2002)
Abreviaciones: M+ plantas micorrizadas, M- plantas no micorrizadas.

Para evaluar el crecimiento, la variable fue el cociente entre la altura de la planta al final del
ciclo y la altura inicial, i. e. se aplic la tasa relativa de crecimiento: . En Prosopis se
obtuvieron tasas de 0.7 en ambos tratamientos, lo que indica una marcada disminucin en
la talla alcanzada por las plantas que sobrevivieron. En el nmero de hojas se obtuvo = 1.66
para plantas inoculadas y =1 para las no inoculadas. Estos resultados revelan que las plantas
inoculadas tuvieron ms hojas, mientras que las no inoculadas slo mantuvieron su nmero
de hojas.
En Acacia y Opuntia, tanto en las plantas micorrizadas, como en las no micorrizadas, la altura
se mantuvo o disminuy muy ligeramente, ya que las tasas de crecimiento () toman valores
cercanos a 1; en el caso de Opuntia, la diferencia entre tratamientos es prcticamente nula debido,
probablemente, al lento crecimiento de esta especie. En el caso de Mimosa, las plantas
micorrizadas fueron muy afectadas por la herbivora y la tasa relativa de crecimiento fue de 0.56,
mientras que las plantas no micorrizadas mantuvieron su altura. Estos resultados indican que a
nivel de plntula, se mantienen patrones de consumo por herbivora muy similares a los que se
presentan en las plantas adultas, es decir, que hay una marcada preferencia por leguminosas como
mezquites y mimosas respecto a otras leguminosas como Acacia, la cual tiene espinas ms
grandes (Figura 2).
Los resultados tambin indican que la restauracin con especies nativas, tanto de micobiontes
como de fitobiontes, es una forma acertada de asegurar la supervivencia de las plantas
introducidas a los matorrales. Por ello, la produccin masiva de plantas micorrizadas puede ser
una tarea laboriosa, pero se compensa con el aumento en la probabilidad de supervivencia. El
caso de Prosopis, que en un ao puede presentar una supervivencia de ms del 50% de diferencia
respecto a plantas no micorrizadas, es un ejemplo ilustrativo. Asimismo, queda probado que los
HMA de los suelos de la zona tienen la capacidad de producir su propio inculo de micorrizas
nativas, con alta potencialidad de formacin de la simbiosis mutualista entre los vegetales y los
hongos micorrizgenos arbusculares.
Recomendaciones y perspectivas
Es conveniente evaluar la inoculacin de otras especies silvestres y analizar sus respuestas.
Asimismo, hay especies (como Acacia y Opuntia) donde el beneficio de la asociacin
micorrcica no se refleja en parmetros de crecimiento, por lo que es necesario valorar otros
indicadores de la influencia de la simbiosis micorrcica sobre el desarrollo vegetal. Tambin, se
puede mencionar que hasta ahora, una limitante de estos trabajos ha sido el bajo porcentaje de
germinacin de las semillas colectadas in situ, lo cual puede superarse con una batera de
tratamientos pregerminativos, particularmente de escarificacin mecnica y qumica. Asimismo,
no se ha logrado el cultivo de cepas de HMA monospricas a fin de ubicar simbiosis no
Figura 2. Plntulas de ca. un ao de edad despus de un mes de haber sido transplantadas a un agostadero
semirido; a la izquierda Prosopis laevigata -la cual estuvo sujeta a herbivora- y a la derecha Acacia
schaffneri.
generalistas o de alta especificidad y para afinar las propuestas de recuperacin de la cubierta

vegetal en el Valle de Actopan, Hidalgo.
Finalmente, es conveniente sealar que este trabajo abre amplias perspectivas para la restauracin
de zonas semiridas parcialmente deterioradas (sobre-pastoreo, fuego, tala de rboles, sobre-
explotacin de especies dominantes), ya que el re-establecimiento de plantas nativas se ve
favorecido, de manera muy significativa, por la inoculacin de los vegetales con hongos
micorrizgenos arbusculares, especialmente de los que provienen de la microbiota edfica de
ecosistemas locales poco perturbados. Por lo anterior, es recomendable que los programas de
reforestacin o de rehabilitacin de la cibuerta vegetal empleen plantas micorrizadas. Esto
implicara tambin, la formacin de bancos de germoplasma de las plantas silvestres dominantes
y codominantes.
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24 Luna Camacho y Monroy Ata
Efecto de hongos micorrizgenos

arbusculares (HMA) sobre el
desarrollo de Agave salmiana
y Opuntia streptacantha
en condiciones de invernadero
Luis Alberto Luna Camacho

Arcadio Monroy Ata
Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Apartado Postal 9-020 C. P. 15 000 Mxico, D.F.
E-mails: bioloco79ek@hotmail.com, arcadiom@unam.mx
Resumen
En este trabajo se estudi la influencia de los hongos micorrizgenos arbusculares (HMA) en el desarrollo de plantas
de Opuntia streptacantha (Cactaceae) y Agave salmiana (Agavaceae), en condiciones de invernadero. Para el
experimento se conformaron dos lotes de 100 macetas por especie: 50 plantas inoculadas con HMA y 50 plantas
testigo, que se cultivaron durante 8 meses, con riego a capacidad de campo. Las variables de respuesta fueron: altura,
dimetro medio, evapotranspiracin y transpiracin de los individuos vegetales, los cuales se registraron semanalmente;
el potencial hdrico caulinar, el cociente raz/vstago, el uso eficiente del agua y la tasa relativa de crecimiento, se
evaluaron al final del periodo de cultivo.
Los resultados muestran que la inoculacin con HMA produjo, en ambas especies, un aumento de la tasa relativa de
crecimiento, biomasa de vstago y raz y uso eficiente del agua, a diferencia de las plantas sin micorriza. Tambin, se
observaron diferencias estadsticamente significativas (p < 0.05), en los tratamientos micorrizados, en la supervivencia
(80 y 90%), cociente raz/vstago (0.1054 y 0.0301) y el potencial hdrico caulinar (-0.8 y -0.38 MPa) de O.
streptacantha y A. salmiana respectivamente; sin embargo, no se observaron diferencias estadsticas en la
evapotranspiracin y transpiracin de las plantas de ambas especies. Por lo anterior, se concluye que la inoculacin
con HMA en el cultivo de las especies estudiadas, promueve un mayor crecimiento y una eficiencia del uso del agua
ms elevada, lo que facilitara su establecimiento en programas de restauracin ecolgica de zonas semiridas
deterioradas.
Palabras clave: hongos micorrizgenos arbusculares, Opuntia streptacantha, Agave salmiana, invernadero,
potencial hdrico, Valle del Mezquital (Hidalgo).
Efecto de micorrizas arbusculares sobre maguey y nopal 25
Introduccin
Uno de los principales problemas ecolgicos a nivel mundial, es la degradacin de los suelos,
debido a la disminucin de la fertilidad y al deterioro de las propiedades fsicas y biolgicas de
este sustrato; esto constituye un gran obstculo para la regeneracin de los ecosistemas. Mxico
es uno de los pases ms fuertemente afectados por la erosin del suelo (Oropeza, 1995), cuyo
grado depende de la cobertura de la vegetacin, la pendiente, litologa, orden de suelo y adems
el tipo del sistema erosivo. Las comunidades vegetales que integran a los ecosistemas ridos y
semiridos del territorio nacional, albergan una gran biodiversidad (ca. 6000 especies de plantas);
dentro de estos ecosistemas, los matorrales xerfitos son los ms extendidos de la regin centro-
norte del pas ocupando aproximadamente un 40% del territorio (Rzedowski, 1978). Las
actividades ms frecuentes y redituables en estos ecosistemas son: agricultura de temporal en
algunos microambientes, ganadera extensiva, tala inmoderada, las cuales aunadas a un intenso
calor y suelos poco desarrollados, han dado como resultado una cubierta vegetal dispersa,
perturbada, con baja capacidad de recuperacin natural y con prdida de fertilidad del suelo
(Allen, 1999).
En este sentido, la restauracin ecolgica puede detener el proceso de deterioro del suelo, por
medio del establecimiento de una nueva cubierta vegetal (Vzquez y Batis, 1996). Sin embargo,
una apropiada reintroduccin del mosaico de vegetacin debe tomar en cuenta la relacin con
simbiontes del suelo, adems de la seleccin de micrositios en suelos que favorezcan un rpido
crecimiento de las races y el establecimiento vegetal (Bainbridge, 1990). En estas simbiosis, los
hongos micorrizgenos arbusculares (HMA) desempean un papel determinante, cuya importancia
radica en incrementar la biomasa de la planta (Sieverding, 1991), modificar las interacciones
competitivas (Sylvia, 1990; Allen, 1991, 1994), acelerar el proceso sucesional (Evans y Miller,
1990; Fisher et al., 1994; Titus y Del Moral, 1998), incrementar la resistencia a la sequa (Roldn-
Fajardo, 1994), aumentar la funcionalidad en la adquisicin de nutrimentos, principalmente
fsforo (Gange et al., 1993), proporciona mayor proteccin contra patgenos, adems de
incrementar la resistencia contra diferentes tipos de estrs (Nakano et al., 2001; Guttenberger,
2000). Por su parte el fitobionte, que puede ser colonizado a los pocos das de emergencia de
la radcula (Robson et al., 1994), da a cambio compuestos de carbono (fotosintatos) y le
proporciona un nicho ecolgico protegido de los fenmenos del antagonismo microbiano en
la rizsfera (Azcn y Barea, 1980; Mukerji, 1996; Varma, 1998).
En la zona semirida del Valle del Mezquital, en el Estado de Hidalgo, hay dos especies que son
codominantes: Agave salmiana (Agavaceae) y Opuntia streptacantha (Cactaceae), siendo
ambas nativas de zonas semiridas, por lo que con este estudio se pretende aportar elementos
que permitan restablecer poblaciones de estas especies, con fines de restauracin de la
vegetacin en zonas semiridas degradadas.
Justificacin
La inoculacin con hongos micorrizgenos arbusculares puede ser una alternativa al realizar la
reintroduccin de plantas en las zonas ridas, ya que favorecen las relaciones hdricas, protegen
las races contra ataques de parsitos, reducen los efectos de alelopata producidos por plantas
vecinas, ayudan a resistir condiciones de estrs producidas por la sequa, la salinidad del suelo,
metales pesados, aumento en la temperatura del suelo, por inundaciones y aumentan las
probabilidades de establecimiento de las plntulas y supervivencia de las mismas, ya que tambin
proporcionan ventajas al hospedero frente a otras plantas competidoras por los mismos recursos
(Varma, 1998). Adems, la presencia de HMA influye sobre la actividad de microorganismos en
el suelo aumentando el nmero de especies bacterianas y actinomicetes en la rizsfera. Por esta
razn, los hongos micorrizgenos arbusculares son de vital importancia para garantizar el xito
cuando se lleva a cabo la restauracin ecolgica de la vegetacin de cualquier comunidad natural.
Adems, los estudios acerca de la influencia que tiene la simbiosis micorrcica en dos especies
nativas de zonas ridas y semiridas: Agave salmiana y Opuntia streptacantha han sido
limitados. Asimismo, poco se conoce acerca del efecto de los hongos micorrizgenos
arbusculares sobre la tasa relativa de crecimiento, produccin de biomasa, porcentaje de
micorrizacin y la eficiencia en el uso del agua (WUE). Tambin, es necesario conocer ms sobre
la biologa de agaves y opuntias, debido a que estas especies juegan un papel muy importante
en ecosistemas ridos y semiridos, ya que contribuyen a la conservacin de la biota edfica en
la poca de sequa y particularmente ayudan a mantener la red hifal de hongos micorrizgenos,
que es tan importante en los ecosistemas maduros.
Problemtica
An no se conoce completamente el efecto que tienen las micorrizas, por ello sigue siendo escasa
la informacin donde se describa la influencia de la micorrizacin sobre el desarrollo de Agave
salmiana y de Opuntia streptacantha. Con base en lo anterior en este estudio inicialmente se
plante responder a las siguientes preguntas:
a) La micorrizacin con HMA de Opuntia streptacantha (Cactaceae) y de Agave salmiana

(Agavaceae) favorece significativamente su crecimiento y desarrollo en condiciones de
invernadero?
Asimismo, despus de ocho meses de cultivo en invernadero:
b) Cul ser el efecto de los HMA sobre la proporcin de biomasa entre la raz y el vstago,
tasa de crecimiento, colonizacin micorrcica, potencial hdrico caulinar y eficiencia en el
uso del agua de Agave salmiana y de Opuntia streptacantha?
As, el objetivo de este trabajo fue el de determinar el efecto de la inoculacin del suelo con hongos
micorrizgenos arbusculares (HMA), sobre la tasa de crecimiento y la produccin de biomasa
en Opuntia streptacantha y Agave salmiana en condiciones de invernadero.
Marco terico
Existe una innumerable cantidad de relaciones simbiticas en los ecosistemas. Sin embargo, la
simbiosis existente entre las plantas y los hongos micorrizgenos arbusculares (HMA) es el tipo
ms comn en los ecosistemas terrestres (Mukerji y Chamola, 2000; Azcn y Barea, 1996;
Mukerji, 1996). El hecho de que, en la actualidad, ms de 95% de plantas terrestres formen
micorrizas en condiciones naturales (Trappe, 1987), da una idea del xito de la asociacin, de
la que ambos organismos se benefician.
La micorriza arbuscular se ha reportado como un factor bitico importante en el desarrollo de

especies vegetales, adquiriendo mayor importancia en el establecimiento y supervivencia de las
plntulas; asimismo, este mutualismo contribuye a la incorporacin de nutrimentos en el
hospedero (Marschener y Dell, 1994). Por ello, los HMA son considerados como determinantes
en la estructuracin de las comunidades vegetales (Camargo-Ricalde, 2002).
Material y mtodos
La fase experimental se realiz en un invernadero con orientacin norte-sur, en la zona oriente
de la Ciudad de Mxico. Se conformaron dos lotes de 100 macetas por especie, las cuales se
dividieron de acuerdo al siguiente diseo experimental: para O. Streptacantha se inocularon 50
macetas con hongos micorrizgenos arbusculares (M+): 1150 g de suelo-arena slica esterilizado
y 50 g de suelo con inculo y a 50 macetas se les adicionaron 1200 g de suelo-arena slica estril
(M-) y para A. salmiana se inocularon 50 macetas con hongos micorrizgenos arbusculares
(M+): 1350 g de suelo-arena slica esterilizado y 50 g de suelo con inculo y a 50 macetas se
les adicionaron 1400 g de suelo-arena slica estril (M-). As, se cultivaron 200 plantas durante
8 meses con riego a capacidad de campo, registrando semanalmente la altura y el dimetro de
las plntulas. A las 35 semanas se cosecharon al azar 5 plntulas de cada tratamiento, separando
la raz de la parte area para evaluar la tasa relativa de crecimiento (TCR = [ln altura final ln
altura inicial]/ tiempo -en das-), el potencial hdrico caulinar, biomasa, cociente raz-vstago,
porcentaje de colonizacin micorrcica de las races y eficiencia en el uso del agua (WUE =
[biomasa seca total producida -en g-]/kg de agua irrigada).
La zona de estudio de este trabajo son agostaderos semiridos del municipio de Santiago de
Anaya, en el Valle de Actopan, Estado de Hidalgo (Mxico), donde es comn observar plantas
xerfitas, de las cuales, las ms persistentes a condiciones severas de sequa son las suculentas,
como Opuntia streptacantha y Agave salmiana y leosas como el mezquite, acacias y gatuos
(Prosopis laevigata, Acacia schaffneri, A. farnesiana, Mimosa biuncifera, M. depauperata).

El Valle de Actopan pertenece al Valle del Mezquital y es en este ltimo valle donde se colectaron
las semillas para este estudio, las esporas para preparar el inculo micorrcico y el suelo empleado
en la preparacin del sustrato de las macetas.
Resultados y discusin
La supervivencia de Opuntia streptacantha y Agave salmiana para el tratamiento M+ fue de
80% y 90% y para el tratamiento M- fue de 44% y 78%, respectivamente. La diferencia entre
tratamientos es debido probablemente a la presencia de HMA, ya que stos funcionan como
control biolgico contra los patgenos del suelo, debido a que el hongo micorrcico y el patgeno
comparten y compiten por un nicho comn en las races del hospedero; adems, los HMA
incrementan la absorcin de agua, proporcionan resistencia a condiciones ambientales estresantes
como pH, temperaturas extremas (Harley y Smith, 1983) y mejoran la nutricin de las plantas.
La colonizacin micorrcica de Opuntia streptacantha, para el tratamiento M+, fue de 56% y
en el M- fue de 4.4%; Agave salmiana present 80% de colonizacin micorrcica en el
tratamiento M+ y 6.6%. en el M- (Figura 1 y 2).
Las plantas muestran dependencia hacia los HMA para su supervivencia, los cuales incrementan
la eficiencia de su sistema radical cuando se asocian simbiticamente, obteniendo ms
nutrimentos y agua, al tiempo que aumenta el volumen de exploracin del suelo. Con respecto
a la temperatura, se ha reportado que en suelos con temperaturas altas existe una reduccin en
la formacin de los HMA (Abbott y Robson, 1991). En el invernadero la temperatura a la que
se cultivaron ambas especies fue similar, sin embargo, el tratamiento M+ de Opuntia
streptacantha present un porcentaje de colonizacin menor al M+ de Agave salmiana, a pesar
80
100
70
90
60 80
% Colonizacin
% Colonizacin
50 70
60
40 50
30 40
30
20
20
10 10
0
0
M- M+ M- M+
Tratamientos
Tratamientos
Figuras 1 y 2. Porcentaje de colonizacin micorrcica de Opuntia streptacantha y Agave salmiana.

de que los dos tratamientos se les aplic la misma cantidad de inculo, con la misma densidad
de esporas. Al respecto, la morfologa de las races tambin pueden estar involucrada, ya que
difieren de manera considerable; adems, las races del tratamiento M+ de Opuntia streptacantha
presentaron menos biomasa que las del tratamiento M+ de Agave salmiana, por lo que el rea
de inoculacin es menor. Respecto a los tratamientos no micorrizados M- de ambas especies,
la colonizacin no fue significativa, por lo que no alter los resultados obtenidos.
Con base en los resultados de altura, dimetro y tasa relativa de crecimiento (TRC), se puede
decir que aunque no hubo diferencias significativas entre tratamientos, s se observ una
tendencia en el incremento del crecimiento de las plantas del tratamiento micorrizado (M+), la
cual es atribuida al efecto de los hongos micorrizgenos arbusculares, ya que promueven el
incremento en la longitud radical y aumentan la absorcin de minerales necesarios para el
crecimiento vegetal; ello debido a que los pelos radicales y la hifas extra-radicales multiplican
el rea de contacto con las partculas del suelo, favoreciendo la toma de nutrimentos y
transportndolos hasta el hospedero, por lo que se sugiere, con base en estos resultados, que
la simbiosis micorrcica permite a las plantas de Opuntia streptacantha y de Agave salmiana,
ser capaces de regular su crecimiento y suministrar los nutrimentos requeridos para el desarrollo
del vstago y del sistema radical, cuando el vegetal lo requiera, debido a su plasticidad ante las
diferentes variaciones ambientales (Figuras 3, 4 y 5, 6).
La asignacin de recursos en la planta hacia raz o tallo, evaluada por la proporcin raz/vstago,
present diferencias significativas entre tratamientos. Esto es debido, probablemente, a que los
Dimetro (cm)
Altura (cm)
Tiempo (semanas) Tiempo (semanas)
M- : No micorrizado M+ : Micorrizado M- : No micorrizado M+ : Micorrizado
Figuras 3 y 4. Altura y dimetro de Opuntia streptacantha obtenido a lo largo del experimento.

Representa diferencia significativa (p < 0.05).
Cobertura mayor (cm)

Altura (cm)
Tiempo (semanas)
Tiempo (semanas)
M- : No micorrizado M+ : Micorrizado M- : No micorrizado M+ : Micorrizado
Figura 5 y 6. Altura y cobertura mayor de Agave salmiana obtenido a lo largo del experimento.
Representa diferencia significativa (p < 0.05).
tratamientos micorrizados (M+), a diferencia de los tratamiento no micorrizados (M-), presentan

los valores ms altos a consecuencia del efecto de los HMA, ya que stos hacen ms eficiente
el suministro hdrico hacia el vegetal. Al respecto, Rundel y Nobel (1991) y Nobel, (1988) tambin
reportan que la razn raz/tallo en agaves (0.04 a 0.15) y cactus (0.08 a 0.14), es muy baja, debido
a que estas especies son excelentes para conservar agua y que sus tallos la pueden almacenar,
por lo que aparentemente no requieren de un sistema radical extenso para la captura de agua y
nutrimentos. Por tal motivo, se puede observar que el tratamiento micorrizado (M+) fue superior
en cuanto a la biomasa del vstago y raz: hmeda, seca y total y que la cantidad de biomasa de
la raz difiere en tamao y cantidad entre tratamientos y entre especies. En relacin a la cantidad
de raz producida en el tratamiento no micorrizado (M-), sta fue menor que en las plantas
inoculadas con HMA y el cociente tambin fue ms reducido que su contraparte experimental,
lo cual muestra la plasticidad de asignacin de recursos entre vstago y raz en ambas especies
(Figuras 7 y 8).
Los hongos micorrizgenos arbusculares son muy importantes en el uso eficiente del agua de
las plantas de Opuntia streptacantha y Agave salmiana, ya que permiten a la plntula regular
su transpiracin de manera eficiente y, adems, proporcionan un aumento en la absorcin de agua,
debido a los pelos radicales y a las hifas extra-radicales del hongo. Tambin, los HMA
incrementan eficientemente la conductancia estomtica, la toma de CO2 de la atmsfera y la
tasa fotosinttica, adems de proporcionar al hospedero minerales de difcil disponibilidad,
por lo que la influencia de estos micobiontes mutualistas permite un incremento en la cantidad
de biomasa producida por unidad de agua irrigada, es decir, aumentan la eficiencia del uso
del agua o los gramos de biomasa seca total producida por litro de agua irrigada (Figuras
9, 10 y 11, 12).
Raz-Vstago (R/S) Raz-Vstago (R/S)
Tratamientos Tratamientos
Figuras 7 y 8. Relacin del cociente raz/vstago de Opuntia streptacantha y Agave salmiana obtenida
al final del experimento.
WUE (g/kg)
WUE (g/kg)
Tratamientos Tratamientos
Figuras 9 y 10. Uso eficiente del agua (WUE) de Opuntia streptacantha y Agave salmiana al final del
experimento.
Estos resultados muestran que el grado de hidratacin del tratamiento con micorriza es mayor
al del tratamiento sin micorriza, debido probablemente a que la simbiosis micorrcica mejora la
conductividad hidrulica de la raz, para la toma y flujo de agua, aumentando las probabilidades
de supervivencia, lo cual es fundamental para su establecimiento y desarrollo en zonas ridas y
semiridas (Figuras 11 y 12). Estas grficas presentan los potenciales hdricos caulinares
obtenidos al final del experimento, los cuales muestran que las plantas inoculadas con HMA tienen
un mejor estado hdrico que sus testigos. Asimismo, al final del documento se presenta un cuadro
de sntesis de los resultados obtenidos al cultivar durante ocho meses a lotes de plantas de
O. Streptacantha y de A. salmiana, con y sin micorrizas arbusculares.
Conclusiones
El uso de cido sulfrico (H2SO4) concentrado durante 3 minutos, elimin la latencia de las
- -
-
-
-
Potencial hdrico (-Mpa)

Potencial hdrico (-Mpa)
- -
-
-
-
-
-
- -
-
-
Tratamientos
Tratamientos
Figuras 11 y 12. Potencial hdrico caulinar promedio de plantas de Opuntia streptacantha (izquierda)
y de Agave salmiana (derecha). Las lneas indican desviaciones estndar por arriba o por debajo de la
media. M+: tratamiento micorrizado; M-: tratamiento no micorrizado.
semillas de Opuntia streptacantha, en un periodo de tiempo ms corto, incrementando el

porcentaje de germinacin en un 40%, respecto al control y a las exposiciones de 1, 5 y 10 minutos
al cido.
La micorrizacin favorece el establecimiento y la supervivencia de Opuntia streptacantha y

Agave salmiana en condiciones de suelo a capacidad de campo; la micorrizacin permite hasta
un 80 y 90% respectivamente, en un periodo de 8 meses, abarcando los periodos estacionales
de invierno, primavera y verano en condiciones de invernadero.
El porcentaje de colonizacin por HMA aumenta en funcin de la longitud de la raz en Opuntia

streptacantha (56%) y Agave salmiana (80%), debido a que este agave tiene un sistema radical
ms grande que el del cactus estudiado.
La inoculacin con HMA hace ms eficiente la evapotranspiracin real (ETR) y la

transpiracin de Opuntia streptacantha y Agave salmiana en condiciones de invernadero,
durante un periodo de 35 semanas.
La simbiosis micorrcica arbuscular permite a las plantas de Opuntia streptacantha y Agave

salmiana, ser capaces de regular su crecimiento y suministrar los nutrimentos requeridos para
la altura, cobertura (media del dimetro mayor y menor) y raz, cuando la planta lo requiera,
Cuadro final de los resultados ms relevantes de Opuntia streptacantha y Agave salmiana.
Especie Opuntia streptacantha Agave salmiana Observaciones

Tratamiento M- M+ M- M+
Variable
% de germinacin 40 40 80 80 Op. st. Bajo porcentaje
Ag. sa. Alto porcentaje
% de supervivencia 44 80 78 90 La variabilidad de temperaturas afecto ms a la
supervivencia de Op. st. que a Ag. sa.
% de colonizacin 4.4 56 6.6 80 Op. st. Bajo porcentaje de colonizacin.
Ag. sa. Alto porcentaje de colonizacin.
Evapotranspiracin 372.56 369.56 384.1 388.4 La evapotranspiracin real acumulada entre
real acumulada (mm) tratamientos de cada especie fue muy similar.
Transpiracin 284.94 219.84 197.89 347.88 En el TM+ de Op. st. y Ag. sa. es ms eficiente
acumulada (mm) la transpiracin a diferencia de los TM-.
Crecimiento Ai = 8.4 Ai =8.4 Ai = 28.3 Ai =29.6 Op. st. p < 0.05 en las semanas 13 y 14.
Altura (mm) Af = 50.1 Af = 51.3 Af = 44.1 Af = 53.9 Ag. sa. p < 0.05 a partir de las semanas 5 hasta
11 y de la 30 hasta la 35.
Crecimiento Dimetro Di = 0.2 Di = 0.2 Cmi = 0.2 Cmi = 0.2 Op. st. p < 0.05 de la semana 4 hasta 18.
(mm) Df = 0.64 Df = 0.66 Cmf = 4.4 Cmf = 5.4 Ag. sa. p < 0.05 a partir de las semanas 13 y 31
hasta la 35.
Tasa relativa de 0.0072 0.0074 0.0021 0.0024 Los valores de la TCR de ambas especies en los
crecimiento (TCR) TM+ son mayores a diferencia de los TM-.
(das-1)
Biomasa Hmeda 0.746 0.930 1.251 3.609 Los valores ms altos de ambas especies
vstago (g) Seca 0.445 0.609 0.490 0.666 corresponden a los TM+.
raz (g) Seca 0.004 0.006 0.007 0.020 corresponden a los TM+. En cuanto a la
biomasa seca de la raz de Ag. sa. presenta un
valor significativamente menor p < 0.05.
total (g) Seca 0.4511 0.6163 0.484 0.686 corresponden a los TM+.
Coeficiente Raz/ 0.0100 0.1054 0.0146 0.0301 En los TM+ de ambas especies se desarrolla
Vstago (R/S) ms el sistema radical que el vstago por la
influencia de los HMA.
Uso eficiente del agua 0.1452 0.1982 0.1503 0.2083 Los TM+ de ambas especies incrementan el
(WUE) (g/Kg uso eficiente del agua.
de H2O irrigada)
Potencial hdrico -1.01 -0.8 -0.74 -0.38 Los TM+ de ambas especies incrementan
caulinar (MPa) significativamente el potencial hdrico caulinar.
Op. st. = Opuntia streptacantha, Ag. sa. = Agave salmiana, TM+ = Tratamiento micorrizado, TM- = Tratamiento
no micorrizado, Ai = Altura inicial, Af = Altura final, Di = Dimetro inicial, Df= Dimetro final, Cmi = Cobertura mayor
inicial, Cmf = Cobertura mayor final, MPa = Megapascales. Presenta diferencias significativas.
debido a que ambas especies presentan plasticidad ante las diferentes variaciones ambientales,
as como en presencia o no de micorrizacin.
Las plantas asociadas a hongos micorrizgenos arbusculares de Opuntia streptacantha y Agave

salmiana, presentan mayor crecimiento y tasa de crecimiento (TRC) comparado con los
vegetales sin micorriza.
Las plantas de los tratamientos micorrizados (M+) de Opuntia streptacantha y Agave salmiana
presentan ms biomasa del vstago y de la raz, tanto hmeda como seca, a diferencia de los
tratamientos no micorrizados (M-).
Las plntulas de Opuntia streptacantha y Agave salmiana que se encuentran asociadas a HMA,
aumentan el cociente raz/vstago, debido a la inhibicin del crecimiento del vstago en algunas
semanas y a que parte del carbono obtenido por la fotosntesis es almacenado en los tejidos de
la raz.
La micorrizacin en plntulas de Opuntia streptacantha y Agave salmiana aumentan, el uso

eficiente del agua (WUE) y el potencial hdrico caulinar (w), ya que los HMA proveen de agua
a las plantas. Por esta razn, es recomendable inocular plantas con HMA en programas de
repoblamiento vegetal, a fin de que aumente el establecimiento y supervivencia de ambas especies
en zonas semiridas.
Agradecimientos
Este trabajo cont con el financiamiento de CONACYT, mediante el proyecto con clave:
SEMARNAT-2002-C01-668 y de la UNAM, a travs de la Direccin General de Asuntos del
Personal Acadmico y su Programa de Apoyo a Proyectos de Investigacin e Innovacin
Tecnolgica (Clave: IN-235402).
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36 Simancas Ortiz y Monroy Ata
Inoculacin de micorrizas arbusculares,

Azospirillum brasilense y su
interaccin sobre Agave salmiana
bajo condiciones de invernadero
Jorge Eduardo Simancas Ortiz

Arcadio Monroy Ata
E-mails: gangidezca@hotmail.com, arcadiom@unam.mx
Resumen
Diversas actividades humanas han propiciado el deterioro de los ecosistemas, siendo necesario realizar proyectos de
restauracin ecolgica que lo reviertan. El uso de micorrizas arbusculares (MA) y de bacterias fijadoras de nitrgeno
y/o promotoras del crecimiento vegetal, pueden ayudar al establecimiento de las plantas. El objetivo de este trabajo
fue evaluar el efecto de la inoculacin de micorrizas arbusculares y de Azospirillum brasilense (Ab) a plntulas de
maguey (Agave salmiana), bajo condiciones de invernadero durante ocho meses. Se consider un testigo y tres
tratamientos (inoculacin con MA, Ab y MA+Ab). Se utiliz como sustrato una mezcla de suelo-arena slica en
proporcin 1:1 (v/v). Las semillas de maguey, el suelo y los MA se colectaron en el Valle de Actopan, Hidalgo. La
cepa bacteriana se obtuvo por donacin. Los parmetros edficos cuantificados fueron: pH, materia orgnica, textura,
densidad aparente y real, conductividad elctrica, capacidad de intercambio catinico y nitrgeno y fsforo asimilables,
antes de iniciar el cultivo y despus de la cosecha de las plantas. Semanalmente se registr la altura de las plantas,
cobertura mxima y mnima, nmero de hojas, evapotranspiracin y transpiracin acumuladas. Despus del periodo
de cultivo se determin el porcentaje de colonizacin micorrcica, nmero de unidades formadoras de clulas (UFC),
biomasa hmeda y seca, coeficiente raz/vstago, potencial hdrico foliar, eficiencia en el uso del agua y porcentaje de
nitrgeno y fsforo en tejido vegetal.
Los resultados obtenidos muestran que el tratamiento MA+Ab tuvo diferencias estadsticamente significativas, por
arriba de los otros tratamientos y el testigo, para los parmetros: nmero de hojas, porcentaje de colonizacin
micorrcica, nmero de UFC y potencial hdrico. As tambin, los tres tratamientos tuvieron diferencias significativas
sobre el testigo en la concentracin de fsforo en tejido radical. Se concluye que la doble inoculacin favorece
significativamente el establecimiento de Agave salmiana en condiciones de invernadero.
Palabras clave: restauracin ecolgica, establecimiento vegetal, Agave salmiana, hongos micorrizgenos arbusculares,
Azospirillum brasilense.
Inoculacin de micorrizas y Azospirillum brasilense sobre maguey 37
Introduccin
La micorriza es una asociacin mutualista establecida entre las races de la mayora de las plantas
vasculares (tanto cultivadas como silvestres) y ciertos hongos del suelo. Incrementan la
absorcin de nutrimentos minerales del suelo, que se traduce en un mayor crecimiento y
desarrollo de las plantas. La expansin del micelio externo del hongo por el suelo rizosfrico es
la causa principal de este efecto, permitiendo la captacin de nutrimentos ms all de la zona de
agotamiento que se crea alrededor de las races, por la propia absorcin de la planta (Sanders
y Tinker, 1973, citado por Varela, 1999).
El papel de la simbiosis es fundamental en la captacin de elementos minerales de lenta difusin

en los suelos, como los fosfatos solubles, el Zn y el Cu. La absorcin de nitrgeno tambin se
favorece con la micorrizacin (Barea y Azcn-Aguilar, 1984). Otros elementos como el K y el
Mg se encuentran a menudo en concentraciones ms altas en las plantas micorrizadas
(Sieverding, 1991, citado por Arroyo, 1998). La absorcin del Ca es estimulada tambin con la
simbiosis micorrcica arbuscular (MA) (Plenchette, 1983). Por lo que respecta a los
micronutrimentos Zn, Cu y Bo, stos son activamente absorbidos por las hifas del hongo y
transportados hasta el hospedero (Gianinazzi-Pearson y Gianinazzi, 1983).
Existen otros efectos producidos por la MA entre los que destacan un aumento de la resistencia
de la planta al estrs hdrico y a la salinidad, un aumento de la resistencia y/o tolerancia a
determinados patgenos del suelo, una elevacin del porcentaje de supervivencia al transplante
y un incremento de la fijacin del nitrgeno en leguminosas (Linderman, 1992).
Asimismo, en las plantas micorrizadas se produce un aumento del contenido de agua, debido
a un incremento de la conductividad hdrica de la planta o a una disminucin de la resistencia
al flujo de agua a travs de ella. Esto tambin puede ser debido a una mayor absorcin a travs
de la extensa red de hifas externas de los hongos micorrizgenos arbusculares (HMA),
extendidas ms all de la zona a la cual tiene acceso directo el sistema radical. As, la planta puede
desarrollarse y permanecer regularmente hidratada y es capaz de recuperarse ms rpidamente
en caso de estrs hdrico (Cooper, 1984).
Respecto a las bacterias del gnero Azospirillum (subclase- de protobacteria), stas son
conocidas como rizobacterias promotoras del crecimiento de la planta. Han sido descritas hasta
el momento cinco especies: Azospirillum lipoferum, Azospirillum brasilense, Azospirillum
amazonense, Azospirillum halopraeferens y Azospirillum irakense (Bashan y Levanony, 1990,
citado por Snchez Coln, 2000). La movilidad le ofrece a esta bacteria la ventaja de trasladarse
a regiones donde las condiciones nutrimentales le sean favorables. Azospirillum muestra tambin
una amplia versatilidad en la movilidad de elementos clave en el metabolismo de C y N, lo que
la hace altamente funcional en un ambiente competitivo en la rizosfera. El amonio, nitrito, nitrato,

aminocidos y nitrgeno molecular puede servirle como fuente de nitrgeno.
La asociacin mutualista entre la planta hospedera y Azospirillum incrementa considerablemente

el nmero y longitud de los pelos radicales, el ritmo de aparicin y nmero de races laterales,
el dimetro y longitud de races adventicias y laterales y el rea de superficie de la raz. La
intensidad de estos efectos en la morfologa de la raz depende de la especie de planta y de la
cantidad de inculo utilizado. Se han reportado incrementos en la masa seca y en el contenido
total de nitrgeno de plantas inoculadas con Azospirillum, como son: maz, trigo y sorgo, entre
otros. Tambin se han reportado otros ensayos de inoculacin con este microorganismo, con
escasos o nulos efectos (Paredes-Cardona et al., 1988).
La micorriza arbuscular y las bacterias promotoras del crecimiento vegetal pueden coexistir en
la misma planta y se sabe que cuando estos dos grupos se encuentran en condiciones favorables,
la interaccin entre estos dos grupos es sinrgica y se obtienen incrementos significativos en el
crecimiento y contenido de fsforo en la planta, adems de que la bacteria promueve la
colonizacin por la micorriza (Bashan et al., 1996). As tambin es sabido que la micorriza
arbuscular y las bacterias fijadoras de nitrgeno atmosfrico de vida libre son dos grupos que
participan en la descontaminacin de suelos.
Material y mtodos
Se determinaron los parmetros fsicos y qumicos del sustrato empleado como sigue: color
(tablas Munsell), densidad aparente -D.A.- (mtodo de la probeta), densidad real -D.R.- (mtodo
del picnmetro), porcentaje de espacio poroso (E.P.), textura (hidrmetro de Bouyoucos), pH
(potencimetro con suelo-agua 1:1 y pasta de saturacin), capacidad de intercambio catinico
-C.I.C.- (acetato de amonio), materia orgnica -M.O.- (Walkey y Black) y conductividad elctrica
-C.E.- (potencimetro).
Se colectaron semillas de Agave salmiana en el Municipio de Santiago de Anaya, Estado de

Hidalgo; se utilizaron semilleros para su germinacin y se transplantaron a macetas con un
sustrato de una mezcla de suelo-arena slica en proporcin 1:1 (v/v). El experimento se llev a
cabo en un invernadero ubicado al Oriente de la Cd. de Mxico, con una orientacin Norte-Sur
y con una duracin de 32 semanas. Se prepararon un total de 80 macetas como sigue: 20 macetas
con 1700 g de mezcla estril, 20 macetas con 1600 g de mezcla estril ms 100 g de inculo
micorrcico, 20 macetas con 1700 g de mezcla estril ms 1 mL de inculo con Azospirillum
brasilense, 20 macetas con 1600 g de mezcla estril ms 100 g de inculo micorrcico/1 mL
Azospirilum brasilense. El inculo bacteriano y micorrcico se agreg sobre la base de las
plntulas, en contacto con las races.
El diseo experimental consisti en un diseo completamente al azar con 3 tratamientos y un

testigo, con 20 repeticiones cada uno, los cuales fueron regados con agua destilada a capacidad
de campo. A los resultados se les aplicaron pruebas estadsticas de significancia, basadas en
una comparacin de medias de los diversos tratamientos y el testigo, utilizando la ANOVA de
un factor y la prueba de Kruskal-Wallis para datos no paramtricos, segn fuese el caso, utilizando
el programa estadstico SPSS en ingls, versin 13.0.
Semanalmente se determin el nmero de hojas, cobertura mxima y mnima. Al trmino de la

semana 32, se cosecharon cinco plantas al azar por cada tratamiento, se separ la raz de la parte
area y por medio de la introduccin de una hoja en la cmara de Schllander se midi el potencial
hdrico foliar; el sistema radical se lav con agua destilada para eliminar los residuos de suelo,
posteriormente, se pesaron tanto la parte area como radical. Se procedi a deshidratarlas en
una estufa durante 48 hrs a 80 C para obtener la biomasa seca, con lo que se determin el cociente
raz/vstago y la eficiencia en el uso del agua. La evapotranspiracin y transpiracin acumulada
se calcularon pesando a las macetas despus del riego y restando el peso de las mismas antes
del riego de la semana siguiente. Con la tcnica para fsforo extrable (Olsen) y nitrgeno total
(Kjeldhal) se obtuvieron los porcentajes de estos elementos en tejido vegetal. La presencia de
las MA se determin por medio de la tcnica de Phillips y Hayman sustituyendo el uso del
autoclave por el de microondas. El nmero de unidades formadoras de colonias (UFC) se obtuvo
por medio del mtodo de diluciones y placa vertida, el medio empleado fue el NFb con rojo de
Congo; cada dilucin se sembr por triplicado y se incub a 32 C durante 72 horas. La dilucin
que finalmente se tom en cuenta para realizar el conteo de las UFC fue la correspondiente a 103,
ya que fue donde mejor se podan apreciar el nmero de colonias.
El suelo presenta color grisceo en seco y color caf muy oscuro en hmedo, con una textura
franco-arenosa. El porcentaje de espacio poroso tuvo un ligero incremento, al final de los cultivos
en los tratamientos y en el testigo, ya que inicialmente el espacio poroso fue de 32.16%, mientras
que al concluir el experimento se alcanz un rango de 40.80 a 54.65%, lo cual fue debido a la
actividad de los microorganismos y a la presencia de la misma planta que propician que se formen
agregados de suelo. Se registr una densidad aparente entre 1.48-1.54 gcm-3 y una densidad real
entre 2.27 y 2.63 gcm-3. Este suelo es bajo en materia orgnica con un pH medianamente alcalino,
lo cual es de esperarse para suelos de zonas ridas. La conductividad elctrica muestra un suelo
moderadamente salino con valores que van de 2.08 a 3.8 dS.m-1, valor que se encuentra en el
rango de tolerancia a la salinidad de agaves y cactus. La capacidad de intercambio catinico fue
baja, siendo similar para todos los tratamientos y el testigo, lo cual indica que es un suelo con
poca fertilidad.
Se realiz la prueba estadstica de Kruskal-Wallis, obteniendo diferencias significativas solamente

para el parmetro de nmero de hojas entre HMA+Ab y el resto de los tratamientos y el testigo
con una p=0.024 (Cuadro 1). Las diferencias significativas encontradas en este parmetro, se
pueden atribuir con certeza a la influencias de los microorganismos empleados, lo cual coincide
con lo reportado por Vzquez (2000) en su estudio intitulado Interactions between arbuscular
mycorrhizal fungi and other microbial inoculants (Azospirillum, Pseudomonas, Trichoderma)
and their effects on microbial population and enzime activities in the rizhosphere of maize plants,
donde menciona que la doble inoculacin de Glomus deserticota y Azospirillum brasilense
increment el crecimiento de plantas de maz significativamente en comparacin con plantas
control no inoculadas o con alguno de los microorganismos utilizados por s solos. Respecto
a los resultados obtenidos con A. salmiana, es posible que los microorganismos aqu empleados
pudieron influenciar a las plantas para captar una mayor cantidad de nutrimentos y por ende la
manutencin de un mayor nmero de hojas, aunque esto tambin pudo ser una respuesta
atribuible a la plasticidad fenotpica de las plantas, debida al mayor suministro hdrico aportado
por las hifas de los hongos micorrizgenos arbusculares.
Cuadro 1. Promedios de altura, cobertura mxima, mnima y nmero de hojas al final de las mediciones
despus de 32 semanas de haber iniciado el experimento. HMA: hongos micorrizgenos arbusculares;
Ab: Azospirillum brasilense.
Parmetro\Tratamiento Testigo HMA Ab HMA+Ab
Altura (cm) 2.293 2.2275 2.2255 2.9831

Dimetro mximo (cm) 3.602 4.382 3.5015 4.0505
Dimetro mnimo (cm) 1.069 1.5115 1.04 1.7147
Nmero de hojas promedio 3.24 3.5 3.305 4.03
Evapotranspiracin real (ETR) y transpiracin acumulada

No se encontraron diferencias significativas para la evapotranspiracin real (ETR) y para la
transpiracin acumulada debido a que esta planta es de ciclo de vida largo, lo cual combinado
con los porcentajes de colonizacin micorrcica y nmero de UFC que fueron bajos, no fueron
suficientes como para presentar en el periodo de cultivo mayores diferencias entre los
tratamientos y el testigo. Sin embargo, en los Grficos 1 y 2 se pueden apreciar las tendencias
que indican que las plantas que fueron inoculadas con uno o ambos microorganismos
transpiraron ms que el testigo.
Evapotranspiracin (mm)
Testigo HMA Ab HMA+Ab

Tratamientos
Grfico 1. Promedios de evapotranspiracin acumulada total (en mm) para los tratamientos y el testigo
en Agave salmiana. HMA: hongos micorrizgenos arbusculares; Ab: Azospirillum brasilense.
Transpiracin (mm)
Testigo HMA Ab HMA+Ab

Tratamientos
Grfico 2. Promedios de transpiracin acumulada total (en mm) para los tratamientos y el testigo en
Agave salmiana. HMA: hongos micorrizgenos arbusculares; Ab: Azospirillum brasilense.
No se encontraron diferencias significativas para los parmetros de peso hmedo y seco de raz
y vstago, as como tampoco para el cociente raz/vstago. Hampp y Schaeffer (1999),
mencionan que las plantas colonizadas por MA manifiestan un crecimiento tanto del vstago
como del sistema radical, adquiriendo ste ltimo una gran cantidad de fotosintatos en
comparacin con las races de las plantas no micorrizadas y por tanto adquieren una alta relacin
R/V, sin embargo, Smith y Read (1997), mencionan que trabajos realizados con plantas
inoculadas con MA presentan un cociente R/V reducido. En el uso eficiente del agua (WUE) no
se encontraron diferencias significativas entre tratamientos. Lo cual confirma en parte los
resultados obtenidos por Luna Camacho (2005) en su trabajo intitulado: Influencia de hongos
micorrizgenos arbusculares (MA) en Agave salmiana y Opuntia streptacantha en condiciones
de invernadero (Cuadro 2).
Cuadro 2. Promedios de peso fresco y seco en gramos de las plntulas de Agave salmiana entre los
diferentes tratamientos, as como el cociente biomasa radical/biomasa del vstago y la eficiencia en el
uso del agua (WUE) correspondientes. HMA: hongos micorrizgenos arbusculares; Ab: Azospirillum
brasilense.
Tratamiento Peso hmedo (g) Peso hmedo (g) Cociente Agua WUE
Vstago Raz Vstago Raz Raz/ irrigada (g/kg H2O
(S) (R) (S) (R) Vstago (kg) irrigada)
Testigo 1.5249 0.41042 0.33604 0.0254 0.07558 4.506 0.08021

HMA 1.34342 0.41822 0.41148 0.0386 0.09380 4.506 0.09988
Ab 1.16296 0.32262 0.33638 0.02138 0.06355 4.506 0.07939
HMA+Ab 1.56712 0.42562 0.37852 0.03112 0.08221 4.506 0.09090
Para el anlisis de resultados respecto al potencial hdrico (w), se realiz un anlisis no

paramtrico con la prueba de Kruskal-Wallis obteniendo una p=0.047, por lo que hay diferencias
estadsticamente significativas entre MA+Ab y el resto de los tratamientos y el testigo (Grfico
3). Se sabe que la simbiosis micorrcica mejora la conductividad hidrulica de la raz para la toma
y transporte de agua, lo cual concuerda con lo reportado por Luna Camacho (2005), quien
menciona que la micorrizacin favoreci el w de plantas micorrizadas de Agave salmiana sobre
las no micorrizadas con -3 y -7.4 MPa respectivamente, Sin embargo, estos resultados muestran
que la doble inoculacin es ms efectiva al lograr hidratar aun ms a la planta (si se asume que
estos resultados son debidos a una sinergia de los tratamientos MA y Ab). As tambin, est
reportado (Sarig et al., 1988, citado por Bashan et al., 1990) que para plantas de sorgo
estresadas, Azospirillum brasilense mejor el potencial hdrico foliar.
Respecto a los nutrientes N y P, se encontraron diferencias significativas para fsforo en tejido

radical entre los tratamientos y el testigo con una p = 0.028. Esto es debido a la influencia que
Tratamientos
testigo
Testigo MA
HMA Ab
Ab MA+Ab
HMA+Ab
0
1
-0.5
Potencial hdrico (MPa)

-1 -1.4
-1.5
-2 -2.4
-2.7
-2.5
-3
-3.7
-3.5
-4
Grfico 3. Promedios de potencial hdrico (Mpa) para los tratamientos y el testigo. HMA: hongos
micorrizgenos arbusculares; Ab: Azospirillum brasilense.
tuvieron los microorganismos sobre la raz para su mayor desarrollo y captacin de nutrimentos,
en este caso el fsforo. En cuanto al porcentaje de nitrgeno en tejido vegetal y radical, se observa
que aunque no hubo diferencias significativas entre los tratamientos, el valor ms alto
correspondi para MA+Ab en ambos casos; as tambin, es digno de resaltar que en la
cuantificacin de este elemento en el tejido radical, los valores que fueron diferentes a cero
correspondieron solo a los tratamientos en los que Azospirillum brasilense estuvo presente
(Cuadro 3).
En relacin a los resultados de la inoculacin micorrcica y bacteriana (Cuadro 4), se obtuvieron

diferencias significativas entre los tratamientos micorrizados y los no inoculados con micorriza,
as como tambin entre los tratamientos con Azospirillum y los tratamientos donde no se inocul
Cuadro 3. Promedios de los valores obtenidos en la cuantificacin de nitrgeno y fsforo en tejido

vegetal de plntulas de Agave salmiana var. salmiana. HMA: hongos micorrizgenos arbusculares; Ab:
Azospirillum brasilense.
Tejido vegetal Testigo HMA Ab HMA+Ab
Nitrgeno (%) Areo 0.45 0.52 0.58 0.63

Raz 0 0 0.28 0.84
Fsforo (mg/kg) Areo 0.857 0.66 0.91 0.61
Raz 0.07 1.05 1.03 0.99
Cuadro 4. Porcentajes de colonizacin micorrcica y el nmero de unidades formadoras de clulas para

los diversos tratamientos. UFC: unidades formadoras de colonias. HMA: hongos micorrizgenos
arbusculares. Ab: Azospirillum brasilense.
Parmetro\Tratamiento % de colonizacin micorrcica Promedio de No. de UFC

en dilucin (103)
Testigo 0 0
HMA 16.2 0
Ab 0 26.6
HMA+Ab 28 42
esta bacteria. Las interacciones de micorrizas arbusculares y Azospirillum siguen una tendencia
similar a la descrita para Azotobacter (Barea, 1983, citado por Crdova, 1999), donde se ha
reportado que esta bacteria muestra interacciones positivas con las micorrizas, en el sentido de
mejorar la colonizacin micorrcica de la planta y de estimular su crecimiento (Ho, 1988, citado
por Crdova, 1999), lo cual se refleja en este estudio, al ser precisamente el tratamiento con doble
inoculacin (MA+Ab) el que presenta mayor porcentaje de colonizacin micorrcica. Sin
embargo, estos efectos sinrgicos parecen estar ms relacionados con la produccin de
hormonas por parte de la bacteria, que con su capacidad de fijar nitrgeno (Harari et al., 1988,
citado por Crdova, 1999).
Conclusiones
La colonizacin micorrcica de A. salmiana aumenta al tener presencia de Azospirillum
brasilense. Tambin, se obtiene un mayor nmero de unidades formadoras de colonias de
Azospirillum brasilense al encontrarse simultneamente en la misma planta con hongos
micorrizgenos arbusculares. Asimismo, los beneficios de Azospirillum brasilense, de los
hongos micorrizgenos arbusculares y de su sinergia, se reflejan en una captacin significativa
de fsforo en el tejido radical de A. salmiana.
Finalmente, se concluye que la doble inoculacin (micorrizas + bacterias fijadoras de nitrgeno)

de plntulas de A. salmiana es importante para favorecer su establecimiento vegetal, ya que
mejora significativamente la hidratacin de la planta y al registrarse valores ms elevados del
potencial hdrico foliar.
Referencias
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46 Gonzlez Monterrubio y Garca Snchez
Hongos micorrizgenos arbusculares

asociados al suelo rizosfrico de diez
cactceas globosas de cinco localidades
del Valle del Mezquital, Hidalgo, Mxico

Csar Fernando Gonzlez Monterrubio
E-mails: rosalvags@correo.unam.mx, cfgm@oikos.unam.mx
Resumen
Una de las familias botnicas caractersticas del Valle del Mezquital, Estado de Hidalgo, es la Cactaceae, la cual se
presenta en diversas formas biolgicas; las especies globosas son muy atractivas y muchas de ellas son endmicas, por
lo que sus poblaciones sufren saqueo, adems de que muchas de ellas crecen en condiciones extremas. Por ello, la
simbiosis de estas plantas con micorrizas favorece su establecimiento, crecimiento y supervivencia, sin embargo, se
desconocen los niveles de micorrizacin en la mayor parte de las cactceas y se desconoce la diversidad de hongos
micorrizgenos arbusculares (HMA) asociados a la rizsfera de las mismas. As, el objetivo de este trabajo fue conocer
el porcentaje de micorrizacin en diez especies de cactceas globosas frecuentes en los diferentes matorrales del Valle
del Mezquital. Los resultados mostraron que los HMA forman micorrizas con todas las cactceas globosas revisadas,
aunque no existe un patrn definido en cuanto al nmero de esporas y el porcentaje de colonizacin. Asimismo, no se
detect alguna afinidad particular de HMA con las especies de cactceas con la que se establece la simbiosis, ni
tampoco una correlacin por localidad. En cultivos trampa no se encontr un patrn entre los porcentajes de
colonizacin en raz y la cantidad y tipo de esporas del suelo rizosfrico de las cactceas, que fue usado como inculo.
Finalmente, la diversidad de morfoespecies de los HMA fue variable en las especies de cactceas y constante en los
cultivos trampa, aunque no sobrepasaron los 6 morfotipos. Las especies de HMA determinadas fueron: Scutellospora
scutata, Glomus geosporum, Acaulospora sp., Acaulospora delicata, Acaulospora mellea y Scutellospora
gregaria.
Palabras clave: hongos micorrizgenos arbusculares, cactceas, Valle del Mezquital (Hidalgo), plantas trampa.
Micorrizas asociadas a diez cacatceas globosas de Hidalgo 47
Introduccin
El estudio del efecto de los microorganismos del suelo en los ecosistemas ridos, as como su
influencia en el desarrollo de las cactceas ha sido poco estudiado. La presencia de una amplia
diversidad de microorganismos benficos en la rizosfera permite vislumbrar su importante
funcin en los procesos fisiolgicos involucrados en el desarrollo de las plantas (Cui y Nobel,
1992). En la rizosfera, existe un flujo de compuestos exudados por la raz, proporcionando
condiciones ideales para el desarrollo de una gran variedad de microorganismos, mismos que
a travs de su actividad fisiolgica, hacen posible la liberacin y asimilacin de nutrimentos, para
mejorar el crecimiento y desarrollo de las plantas (Allen et al., 1995; Ferrera-Cerrato y Alarcn,
2007). Por lo ello, es importante su estudio en ambientes tan extremos como las zonas con clima
rido y semirido.
En los matorrales xerfilos, la mayor parte de las plantas forman micorrizas de tipo arbuscular
(Carrillo-Garca et al., 1999); las plantas viven bajo condiciones de estrs ambiental, producido
por altas temperaturas y limitada disponibilidad de agua, por lo que en estos ecosistemas ridos
y semiridos, el establecimiento de la micorriza arbuscular (MA) es fundamental en la nutricin
y tolerancia al estrs hdrico de los vegetales (Ferrera-Cerrato, 1983, 1995).
Las cactceas son un grupo numeroso de plantas, especialmente adaptadas para vivir en
condiciones desrticas. Estas se distribuyen en las zonas ridas y semiridas de Amrica. Entre
stas se encuentra un gran nmero de especies endmicas, sin embargo, una gran cantidad se
encuentran en peligro de desaparecer debido al cambio de la cubierta vegetal original por campos
de cultivo y a la colecta llevada a cabo con fines comerciales u ornamentales.
En el Valle del Mezquital, Estado de Hidalgo, la familia de las cactceas es una de las mejor
representadas; en esta familia se encuentra una gran diversidad de formas y gneros, por ejemplo:
Opuntia: arborescentes, rastreras, etc., Cephalocereus (columnares), Myrtillocactus
(candelabriformes) y Mammillaria, Echinocactus, Coryphantha, Telocactus, etc., que son
especies de forma globosa. En este grupo, el Valle del Mezquital es diverso y rico en endemismos,
adems de que hay muchas especies protegidas o en peligro de extincin; as, los procesos que
puedan promover la supervivencia, el crecimiento y vigor de los individuos de la poblacin
pueden ser clave para mantener y promover la permanencia de las poblaciones. Por ello, este
trabajo tuvo como finalidad el conocer la presencia de la micorriza en diferentes especies de
cactceas globosas en cinco diferentes localidades del Valle del Mezquital.
En esta simbiosis el micobionte (hongo) proporciona a la planta agua y nutrimentos minerales

de difcil disponibilidad en el suelo, mientras que el fitobionte le proporciona al hongo
compuestos de carbono producto de la fotosntesis y un nicho ecolgico protegido.
A lo largo del tiempo la asociacin micorrcica ha jugado un papel clave en el desarrollo de las
comunidades vegetales. En los ecosistemas actuales, la actividad de los hongos micorrizgenos
arbusculares (HMA) contribuye a la dinmica de su hbitat (Corkidi y Rincn, 1997; Klironomos
et al., 2000) y juega un papel muy importante durante todas las etapas de la sucesin ecolgica
(Corkidi y Rincn, 1997).
La clasificacin de estos hongos est en continuo cambio: anteriormente se les clasificaba como
parte del phylum Zygomycota, pero con base en estudios recientes, de biologa molecular, ahora
se han agrupado en un nuevo phylum: Glomeromycota. Actualmente, slo se han descrito cerca
de 200 especies de HMA. La clasificacin ms reciente se presenta en la Figura 1 (Sieverding
y Oehl, 2006).
Figura 1. Clasificacin actual de los HMA: 9 familias y 11 gneros, Geosiphon no forma micorriza y
recientemente se incorpor el gnero Kuklospora.
Mtodos
Colonizacin micorrcica total (modificado de Phillips y Hayman (1970))
1. Lavar las races de cada planta con agua corriente y ya limpias cortar slo las races finas
y colocarlas en un matraz Erlenmeyer de 125 ml.
2. Adicionar a las races hidrxido de potasio al 10% hasta cubrirlas y calentarlas a bao Mara
hasta que estn blandas y casi transparentes, lo cual puede tomar entre 15 y 30 minutos. Si
la solucin se obscurece, es recomendable cambiarla las veces que sea necesario.
3. Cuando las races estn blandas y transparentes sacarlas del bao Mara y enjuagarlas
perfectamente con agua corriente.
4. Para acabar de aclarar las races o en races lignificadas se recomienda adicionarles una
solucin de perxido de hidrgeno al 10% alcalinizado, caliente, por 3 a 5 minutos.
Transcurrido este tiempo las races se enjuagan muy bien con agua corriente.
5. Adicionar a las races una solucin de cido clorhdrico al 10%, por 10 minutos.
6. Escurrir el cido y, sin lavar, se aade la solucin de azul de tripano. Calentar a bao Mara
por 30 a 40 minutos o hasta que las races hayan absorbido por completo el colorante.
7. A las races ya teidas se les escurre el colorante con ayuda de un tamiz, ya que ste puede
ser reutilizado una vez ms. Guardar las races en una solucin de cido lctico: glicerina:
agua (1:2:1, v:v:v) hasta su revisin.
8. Revisar las races con el microscopio estereoscpico, colocando muestras en una caja Petri
con agua. A este nivel podr observar las siguientes estructuras: micelio extra e intrarradical,
vesculas y esporas.
9. Tomar secciones de raz de 2 cm de largo y colocarlas en un portaobjetos con agua, cubrirlas

con un cubreobjetos y observarlas al microscopio con el objetivo seco fuerte (40X) y el de
inmersin (100X). As, podr observar mejor la morfologa de las estructuras fngicas y
arbsculos.
10. Estimar el porcentaje de colonizacin micorrcica aplicando la siguiente frmula:
Porcentaje total de colonizacin = (Nmero de campos colonizados/nmero total de

campos observados) (100)
Propagacin de esporas en macetas

1. Lavar y desinfectar con hipoclorito de sodio al 10% una maceta de plstico de 2 kg de
capacidad. Se deja secar completamente y se cubren los orificios con algodn.
2. Esterilizar la arena o vermiculita colocndola dentro de una bolsa de polipapel o un recipiente

de metal, en un autoclave, a vapor por 1 hora. Sacarla y dejar airear por 24 horas. Repetir
y dejar airear por un mnimo de 48 horas antes de su utilizacin.
3. Desinfectar superficialmente las semillas seleccionadas y/o los cormos, colocndolos en una
solucin de hipoclorito de sodio al 5% por 5 minutos. Transcurrido este tiempo lavar tres
veces, cinco minutos por vez, con agua destilada estril.
4. Preparar una mezcla de 500 ml de arena pasteurizada y 500 ml de suelo de la zona de estudio
(1:1, v:v); este ltimo sin esterilizar y tamizado con malla de 2 mm. Colocar la mezcla en la
maceta desinfectada. Regar a capacidad de campo y colocar una gran cantidad de semillas
de la especie de planta trampa (Gramineae Lolium perenne). Estas macetas se mantienen
en condiciones de invernadero por cuatro meses, durante los cuales se riegan a capacidad
de campo cada vez que sea necesario.
5. Suspender el riego aproximadamente a las 14 semanas, para que las plantas trampa se sequen
y cuando esto suceda se podan a nivel del suelo.
6. El suelo de las macetas se extrae junto con las races, se coloca en una bolsa de polietileno
etiquetada y se guarda a 4 C hasta su revisin.
Las especies de cactceas globosas colectadas en cada localidad (Mapa 1; Fotos 1 y 2) se
presentan en la Tabla 1; de cada especie se colectaron 5 individuos, los cuales fueron
transplantados a macetas segn su tamao y al final del estudio, los individuos fueron
incorporados a la coleccin viva de suculentas que se mantiene en el Invernadero de la
Facultad de Estudios Superiores Zaragoza. La colecta se hizo considerando slo las especies
ms abundantes (ms de 50 individuos visibles) en cada sitio y se cuid que los individuos
estuvieran aislados a fin de no daar a otros individuos y que la poblacin no se viese
afectada. Los datos muestran que Xitzo es la localidad con ms especies de cactceas (8),
mientras que en Ixmiquilpan slo se encontr una especie. Tambin se observa que el gnero
Mammillaria fue el mejor representado con 5 especies. En algunas especies no se encontr
colonizacin micorrcica.
Mapa 1. Sitios de colecta (crculos negros y rea sombreada) en el Valle del Mezquital, Estado de
Hidalgo.
Foto 1. Vista de sitios de colecta (cortesa de Christian R. Cervantes).
Los resultados muestran que los porcentajes de colonizacin son muy variables entre especies
y entre localidades, los valores promedio van de 5 a 50%. La colonizacin por especie vara de
5 a 90 %, incluso entre individuos de la misma especie, esto puede deberse a la variacin en la
Foto 2. Especies de cactceas colectadas.
Tabla 1. Especies encontradas por localidad.
Especie % de colonizacin total
Localidad: Santiago de Anaya

1 Ferocactus latispinus 20
2 Telocactus sp.1 0
Localidad: Xitzo
1 Ferocactus latispinus 10
2 Telocactus sp. 1 20
3 Telocactus sp. 2 10
4 Mammillaria elongata 50
5 Echinocactus platyacanthus 10
6 Mammillaria uncinata 10
8 Neolloydea conoidea 50
Localidad: Julin Villagrn
2 Mammillaria sempervivi 20
3 Mammillaria elongata 10
4 Mammilaria magnimamma 2
Localidad: Patria Nueva
1 Coryphantha radians 80
Localidad: Ixmiquilpan
1 Mammillaria compresa 25
presencia de races vivas, debido a que estas plantas tienen como estrategia eliminar las races
que ya no son funcionales, de manera similar a lo propuesto por Fitter et al. (2004). Aunque en
general stos son porcentajes bajos de colonizacin (Figura 2), son similares a los porcentajes
encontrados en especies de otras localidades del Valle del Mezquital (Garca-Snchez et al.,
2008).
Colonizacin total por especie

% colonizacin
M. compresa
C. radians
Telocactus sp.
M. uncinata
M. elongata
M. sempervivi
F. latispinus
M. magnimamma
N. conoidea
E. platyacanthus
Especie
Figura 2. Colonizacin total por especie.
Las races de las cactceas tienen muclago y muchos pelos radicales, haciendo difcil la
evaluacin de la colonizacin micorrcica, pues las estructuras: hifas, arbsculos y vesculas son
difcilmente reconocibles; en este caso se utiliz KOH al 5% a fin de lograr observar la
colonizacin (Figura 3).
La densidad de esporas en el suelo rizosfrico en general fue bajo y muy variable; en especies
como Mammillaria magnimamma se encontraron 10 esporas en 100 g de suelo; en otra especie
(Mammillaria compresa) se encontraron 80 esporas en 100 g de suelo (Figura 4). Esto puede
estar relacionado con el tamao de la especie y el efecto que pueden tener sobre su entorno, ya
que aunque todas son cactceas globosas, el tamao de Mammillaria compresa, que tiene un
dimetro promedio de poco ms de 10 cm y que adems crece formando colonias, no es
comparable con el de Mammillaria elongata, que es de apenas unos dos a cuatro centmetros.
Las morfoespecies presentes en el suelo rizosfrico de las diferentes especies vari entre 3 y 6
en las diferentes especies de cactceas, sin embargo, cuando se propagan mediante la planta
Foto 3. Macetas de propagacin de los HMA de la rizosfera de las cactceas, con Lolium perenne.
La localidad ms rica en especies de cactceas fue Xitzo con 8 especies, sin embargo, en
morfoespecies de HMA ocupa el 2 lugar. Ixmiquilpan es la que present mayor nmero de
morfoespecies de HMA, aunque las esporas fueron pocas, pero respondi bien a la masificacin
con planta trampa (Figura 7).
Patria Nueva es una localidad con mayor porcentaje de colonizacin; el nmero de morfoespecies
es alto, as como el mayor nmero de esporas promedio en 100 g de suelo rizosfrico, todo ello
asociado a slo 2 especies de cactceas.
Morfoespecies de HMA en plantas trampa

morfoespecies presentes
Nmero de
M. compresa
C. radians
Telocactus sp.
M. uncinata
M. elongata
F. latispinus
M. magnimamma
N. conoidea
M. sempervivi
E. platyacanthus
Especie
Figura 7. Nmero de morfoespecies encontradas despus de la masificacin en plantas trampa.

60 Chimal Snchez, Lpez Medina y Garca Snchez
Obtencin de inculos de hongos

micorrizgenos arbusculares (HMA)
nativos del Valle del Mezquital, Hidalgo
Eduardo Chimal Snchez

Leonardo Lpez Medina
E-mails: chimalse31@gmail.com, biologic_leo@msn.com, rosalvags@correo.unam.mx
Resumen
Los hongos micorrizgenos arbusculares (HMA) que se asocian a la vegetacin de los matorrales
semiridos del Valle del Mezquital, Hidalgo, son organismos de importancia ecolgica que
pueden ser utilizados como herramienta biolgica para la recuperacin de sitios perturbados;
la necesidad de contar con inculos de estos endfitos autctonos requiere realizar ensayos de
propagacin para determinar las especies que mejor funcionan bajo condiciones de invernadero.
As, se logr propagar algunos HMA de manera monoespecfica y multiespecfica, siendo estos
ltimos los que generaron plantas de mezquite (Prosopis laevigata) con las mejores caractersticas,
observndose diferencias estadsticamente significativas con respecto al testigo. Los HMA no
respondieron cuando se les propag de manera monosprica.
Palabras clave: inculos micorrcicos, cultivos fngicos mono y multiespecficos, Valle del Mezquital
(Hidalgo), Prosopis laevigata.
Obtencin de inculos micorrcicos nativos del Valle del Mezquital 61
Introduccin
El trmino micorriza, el cual literalmente significa "raz-hongo", fue utilizado por primera vez en
1885 para describir las asociaciones mutualistas que ocurren entre las races de las plantas y
hongos. Las asociaciones micorrcicas constituyen diferentes tipos, dependiendo de los hongos
involucrados, dentro de las cuales la micorriza arbuscular es la simbiosis ms comn en los
ecosistemas, puesto que estos hongos han coevolucionado con las plantas desde hace al menos
400 millones de aos, asistindolas en su transicin para colonizar el medio terrestre (Harrison,
1997; Bonfante y Genre, 2008).
Las especies de hongos que pertenecen a los gneros Glomus, Acaulospora, Kuklospora,
Gigaspora, Scutellospora, Paraglomus, Archaeospora, Intraspora, Entrophopora,
Diversispora, Otospora, Ambispora y Pacispora, son ampliamente conocidos como hongos
micorrizgenos arbusculares (HMA), agrupados en el phylum Glomeromycota (Schuler et al.,
2001); ellos forman una simbiosis mutualista obligada con las races de ms del 80% de las plantas
terrestres. La micorriza arbuscular es considerada una de las asociaciones simbiticas ms
importantes por desempear un papel crucial en la nutricin de su hospedero, son componentes
constantes en los suelos de la mayora de los ecosistemas terrestres y son ecolgicamente
importantes porque contribuyen en la estabilidad del suelo, as como en la diversidad y
productividad vegetal (Gianinazzi-Pearson et al., 1995; Van Der Heijden et al., 1998, Varma,
1999; Jansa et al., 2007; Blaszkowski, 2008).
Los HMA colonizan las clulas corticales de la raz y el micelio fngico se extiende ampliamente,
forma estructuras altamente especializadas denominadas arbsculos y su presencia indica el
establecimiento exitoso y funcional de la simbiosis micorrcica arbuscular, porque son el sitio
principal de intercambio de nutrimentos entre la planta y el hongo. As, la planta destina productos
carbonados derivados de la fotosntesis hacia el hongo, mientras que el micobionte, a travs del
micelio externo, aporta a la planta nutrimentos minerales para su crecimiento, principalmente
fsforo (P), aunque tambin intervienen en la absorcin de nitrgeno (N), potasio (K), calcio
(Ca), hierro (Fe), magnesio (Mg), cobre (Cu), zinc (Zn) y agua, como consecuencia de su mayor
accesibilidad a recursos distantes del sistema radical; tambin se ha observado que proporciona
a su hospedero mayor resistencia y tolerancia a elementos fitotxicos como el aluminio (Al) y
manganeso (Mn) en suelos cidos (Marschner y Dell, 1994; Bago et al., 2000; Borie et al., 2000;
Rufyukiri et al., 2000).
Actualmente, el manejo inadecuado de los recursos naturales como tala excesiva, sobrepastoreo
y prcticas agrcolas con un uso excesivo de agroqumicos y pesticidas son factores que
provocan perturbaciones, llevando a la prdida progresiva de la cubierta vegetal, de la capa frtil
del suelo y de microorganismos simbiticos de importancia para el ecosistema, entre las cuales
se encuentran especies vegetales y los hongos micorrizgenos arbusculares de gran importancia

ecolgica. Sin embargo, como lo mencionan Giovannetti y Gianinazzi (1994), el papel de las
micorrizas en el funcionamiento y biodiversidad de los ecosistemas terrestres ha recibido poca
atencin a pesar de que son un componente importante en la biomasa de la microbiota del suelo
y de su participacin directa en procesos esenciales de la interfase suelo-planta.
Mxico es un pas con alta biodiversidad y con amplio conocimiento en plantas, animales y otros
organismos; sin embargo, en el caso de los HMA se han realizado pocos estudios; slo se han
registrado 44 de alrededor de 200 especies formalmente descritas, las cuales provienen
principalmente de 11 entidades federativas y la mayora de zonas agrcolas, siendo mnimos los
reportes que existen para comunidades naturales. Tal panormica ofrece una visin del gran
desconocimiento que existe de la riqueza de especies de hongos micorrizgenos arbusculares
y de aqu su importancia por intensificar los estudios ecolgicos y taxonmicos de estos
organismos (Varela y Trejo, 2001; Guadarrama-Chvez et al., 2007).
Por su ubicacin geogrfica y diversidad vegetal, el Valle del Mezquital, Estado de Hidalgo, es
una regin importante para realizar estudios sobre las interacciones HMA-vegetacin, puesto que
son escasos los reportes en la zona sobre la biodiversidad de estos organismos fngicos;
adems, otro factor importante de la regin es que sus pobladores dependen de los recursos
vegetales para su sustento, lo que ha provocado que los matorrales xerfilos estn sobre-
explotados y fragmentados, por el cambio de uso del suelo para fines agrcolas, que a su vez
se deterioran an ms por el uso de aguas residuales para el riego de los cultivos. Una propuesta
para la conservacin y recuperacin de estos ecosistemas es la restauracin ecolgica, la cual
se vale de diversas ecotecnologas, entre ellas se encuentran las que estimulan el establecimiento
de las interacciones biolgicas positivas como la simbiosis micorrcica arbuscular, que puede
ser un elemento clave en la produccin y reintroduccin de las especies vegetales de importancia
ecolgica. Sin embargo, para llevarlo a la prctica es necesario contar con inculos que
contengan la cantidad y diversidad de los HMA autctonos adaptados a las condiciones
edafoclimticas del sitio a restaurar. Para esto, es necesario contar con informacin sobre su
biologa bsica y aplicar las tcnicas adecuadas de propagacin de manera controlada, con el
fin de obtener a los organismos ms eficientes.
Produccin de los inculos micorrcicos

Actualmente, existen varias tcnicas de cultivo, dependiendo de las especies de HMA que se
deseen reproducir; se han realizado varios intentos para establecerlos en cultivos axnicos, en
una variedad de medios, pero ninguno ha sido del todo exitoso. Mtodos sofisticados, como
el cultivo in vitro con uso de races transformadas son muy eficientes, pero requieren del equipo
adecuado para mantener condiciones de asepsia, adems son costosos para realizarlos en
cualquier laboratorio (INVAM, 2009). No obstante, su propagacin en macetas con suelo

esterilizado como sustrato proporciona un ambiente favorable para ms del 95% de las especies
vegetales y hongos formadores de la micorriza. Conforme se avanza en el conocimiento de la
simbiosis micorrcica arbuscular, se logran establecer tcnicas que permiten la produccin
masiva de inculos de alta calidad. Sin embargo, los estudios ecolgicos son necesarios para
la seleccin de cepas eficientes en regiones ambientales especficas y para las especies de inters
(Manjarez et al., 2000).
La produccin de un inculo micorrcico arbuscular (MA), de manera general consta de tres

etapas: 1) seleccin y caracterizacin de las cepas, 2) propagacin y 3) control de calidad
(Manjarez et al., 2000).
1. Seleccin y caracterizacin. La primera consideracin al producir un inculo MA, es la

eleccin de los hongos, ya sea aislados o en consorcios apropiados a las necesidades del
ecosistema. Una segunda consideracin es la permanencia de los organismos en el campo, sin
embargo, es necesario preguntarse si son lo suficientemente competitivos en relacin con la
poblacin nativa y si son funcionales bajo las condiciones del sitio como para permanecer los
aos subsecuentes en cantidades significativas (Douds et al., 2000). Actualmente, para
comprobar la persistencia de los hongos a travs del tiempo se utilizan mtodos moleculares.
Las evidencias muestran que los hongos introducidos no persisten por largo tiempo. Es por ello
que la induccin micorrcica debe ser especfica para cada rea y el uso de organismos nativos
del suelo es muy importante para aumentar las probabilidades del xito en la restauracin, ya que
existe una compleja interaccin de factores responsables de la presencia y distribucin de la
microbiota en cada sitio, cuyos patrones varan con el clima, los factores edficos y el uso del
suelo (Gibson y Hetrick, 1988).
2. Propagacin. El mayor obstculo para la propagacin de los HMA es su biotrofa obligada,

pues slo pueden crecer y generar propgulos cuando colonizan las races de sus plantas
hospederas (Pelez-Garca et al., 2000). Existen diferentes mtodos para propagar estos
hongos, algunos ya disponibles y otros en desarrollo, que consisten en un cultivo dual con una
planta hospedera o en un cultivo con raz transformada (cultivos monoxnicos), ya sean en
laboratorio o en invernadero. La tcnica ms usada de propagacin es el cultivo de hongos MA
sobre plantas llamadas trampa (hospederos altamente micotrficos), en suelo desinfectado,
usando esporas seleccionadas, races colonizadas, micelio o suelo que contenga todos estos
propgulos para iniciar el inoculante (Ferguson y Woodhead, 1992; Jarstfer y Sylvia, 1996). La
mxima produccin de inculo se obtendr con un crecimiento vigoroso de la planta y con una
colonizacin mayor al 50% (Bolan, 1991; Jarstfer y Sylvia, 1996; Manjarez et al., 2000). Otra
consideracin biolgica en la propagacin de los HMA es la planta hospedera, en la cual crecer
el hongo, ya que la esporulacin puede variar dependiendo de la especie vegetal, as que debe
seleccionarse a los mejores hospederos para que la colonizacin MA y la produccin de esporas
sea mxima y as puedan ser usadas como propgulos infectivos en el nuevo inculo (Douds
et al., 2000).
3. Control de calidad. Esto se inicia a partir de la determinacin de la presencia y viabilidad

de los HMA dentro del inoculante, debido a que su presencia o ausencia puede ser un factor que
determine el xito de la produccin de plantas con las caractersticas de inters; para esto se
realizan pruebas para evaluar la infectividad y efectividad en los organismos vegetales para el cual
se produjo, de manera que es necesario valorar a los hongos MA en las races y ver la respuesta
del hospedero en variables como el crecimiento, tolerancia a condiciones de estrs u otro factor.
Para ello, el inculo debe ser concentrado, libre de patgenos y con una vida media que permita
el procesamiento, distribucin y uso sin prdidas significativas en el nmero de propgulos o
potencial inoculativo (Feldmann y Idczak, 1992; Jarstfer y Sylvia, 1996; Amora y Varela, 2009).
Es importante considerar que algunos HMA son ampliamente efectivos (Sylvia et al., 1993),
mientras que otros, a pesar de que presenten colonizacin en muchas especies de plantas
hospederas, slo promueven el crecimiento de algunas pocas, esto es, algunos resultan ser ms
infectivos y/o efectivos que otros (Hung et al., 1990; Monzn y Azcn, 1996); sin embargo, esta
caracterstica no indica que no sean importantes ecolgicamente. Es por esto la necesidad de
realizar ensayos de propagacin con el fin de valorarlos en diferentes hospederos, permitiendo
la seleccin de los organismos ms eficientes y mejor adaptados a las condiciones controladas
de produccin.
El presente trabajo busca contribuir en el conocimiento de los HMA asociados a la vegetacin

de los matorrales xerfilos del Valle del Mezquital, Estado de Hidalgo, realizando ensayos para
la produccin de inculos con especies autctonas con el fin de observar la riqueza de especies
y su posible utilizacin como herramienta biolgica para la restauracin de sitios perturbados
en la regin.
Material y mtodos
Para realizar los ensayos de propagacin de los HMA del Valle del Mezquital se aplic la
metodologa que se muestra en la Figura 1.
Inculo multiespecfico a partir de suelo. Estos cultivos se iniciaron a partir de la colecta

de muestras de suelo provenientes de los matorrales semiridos de las localidades de Xitzo
y Santiago de Anaya del Valle del Mezquital, Hidalgo. Los inculos a propagar son de 1 y
5 ciclo de cultivo multiespecfico a partir de suelo y mantenidos en el invernadero de la
Facultad de Estudios Superiores Zaragoza. Las caractersticas de los materiales se muestran

en el Cuadro 1.
Los cultivos se establecieron en macetas de 2 kg con substrato esterilizado y humedecido a

capacidad de campo con Phaseolus vulgaris (frijol) como planta propagadora y con 500 g de
suelo del sitio. Se utilizaron 10 unidades experimentales (macetas) para cada uno de los inculos,
adems de 10 unidades testigo, dando un total de 60 unidades experimentales. El cultivo se
mantuvo durante 3 meses; el diseo experimental fue el siguiente:
1 especie x 6 tratamientos x 10 repeticiones = 60 unidades experimentales (UE)
Inculo multiespecfico a partir de esporas. Consisti en el aislamiento y seleccin de esporas

de diferentes especies de HMA de las muestras masificadas; alrededor de 600 esporas fueron
Figura 1. Ensayos para la obtencin de hongos micorrizgenos arbusculares (HMA) del Valle del
Mezquital, Estado de Hidalgo. U. E.: unidades experimentales.
Cuadro 1. Origen y masificaciones previas de los HMA que dan origen a los inculos.
Cultivo Inculo Caractersticas
5 ROS Cultivo inicial de suelo de un matorral de Santiago de Anaya, colectado

en el ao 2000 y cultivos posteriores con la gramnea Lolium multiflorum
5 FAB Cultivo inicial de suelo de un matorral de Xitzo, colectado en el ao 2000

y cultivos posteriores con Lolium multiflorum
5 MEZ Mezcla de FAB y ROS a partir de 1 cultivo y cultivos posteriores con

Lolium multiflorum
1er Xitzo Suelo colectado en un matorral crasicaulescente ubicado en Xitzo en

febrero de 2004
1er Santiago de Anaya Suelo colectado en un matorral espinoso ubicado en Santiago de Anaya
en febrero de 2004
seleccionadas, las cuales estuvieron constituidas en un 85% por el gnero Glomus spp. y el resto
(15%) por los gneros Gigaspora sp. y Scutellospora sp. Se inocularon, con la ayuda de una
pipeta Pasteur, lo ms cercano al sistema radical en plantas de maz y albahaca, a una profundidad
de 10 cm; la concentracin inicial fue de 30 esporas por cada 100 g de suelo en cada UE (2 kg).
Las macetas se desarrollaron en el invernadero durante 3 meses con riegos peridicos; al finalizar
la experimentacin se tom una muestra de raz para evaluar la colonizacin micorrcica
arbuscular mediante el mtodo de tincin con azul de tripano (Phillips y Hayman, 1970). Despus
de someter a las plantas trampa a 15 das de marchitamiento para estimular la esporulacin, se
tom una muestra de 100 g de substrato para realizar la extraccin y conteo de esporas de HMA
y se colect el inculo generado, almacenndose a 4 C en una bolsa de plstico, para
posteriormente evaluar su efectividad e inefectividad en Prosopis laevigata.
Inculo monoespecfico. Para generar este inculo se establecieron macetas de 2 kg con

substrato esterilizado, con humedad a capacidad de campo, sembrando plantas de pasto
(Lolium perenne) o maz (Zea mays) e inoculndolas con esporas de HMA de un slo morfotipo.
Para esto las esporas se extrajeron mediante la tcnica de tamizado y decantacin, seguida de
una centrifugacin con una solucin de sacarosa al 50%; se agruparon de acuerdo a sus
caractersticas morfolgicas y se separaron con ayuda de una pipeta Pasteur, colocndolas en
una caja Petri de 5 cm de dimetro con agua destilada y se almacenaron durante 24 h a 4 C. Al
siguiente da se realiz una segunda seleccin, eliminando aqullas que presentaron algn signo
de deterioro, contenido de lpidos no uniforme o signos de parasitismo y se cambi el agua

destilada en dos ocasiones ms para eliminar restos de micelio que pudiera estar suspendido.
Se establecieron tres ensayos de la siguiente manera:
El primer ensayo consisti de tres unidades experimentales con plantas de pasto; cada
maceta se inocul con 40 esporas de Scutellospora scutata Walker et Diederichs, a una
profundidad de 10 cm y lo ms cercano a la raz.
El segundo ensayo consisti de 3 unidades experimentales con plantas de maz; cada

maceta se inocul con 40 esporas de Scutellospora aff. pellucida Nicolson et Schenck,
colocndolas cerca de la raz a una profundidad de 10 cm.
El tercer ensayo consisti de una unidad experimental con plantas de pasto; se inocul la
maceta con 70 esporas de Glomus tortuosum Schenck et Smith.
Los ensayos se establecieron durante tres meses en el Invernadero de la FES Zaragoza; al trmino
se tom una muestra de raz para evaluar la colonizacin micorrcica arbuscular. Despus, se
sometieron a 15 das de sequa para favorecer la esporulacin y entonces se evalu la densidad
de esporas. Los inculos generados se almacenaron en bolsas de plstico y en refrigeracin a
4 C para ser evaluados posteriormente en Prosopis laevigata.
Inculo monosprico. En este ensayo se emplearon cajas Petri para establecer microcosmos
como unidades experimentales; a las cajas se les realiz una perforacin en un costado para que
al colocarlas de canto, la parte area de la planta quede fuera, el interior de la caja se llen con
substrato esterilizado y se humedeci a capacidad de campo con agua destilada.
En lo que se preparaban los microcosmos, se colocaron cajas Petri con papel filtro (Whatman
No. 8) como sustrato y 20 semillas de pasto (Lolium perenne) o sorgo (Sorghum vulgare) para
germinarlas y obtener plntulas con un sistema radical de aproximadamente 5 cm de longitud.
Con las cajas Petri con su substrato y las plntulas de pasto y sorgo listas, se realiz el aislamiento
y seleccin de esporas de HMA de igual forma que para los ensayos monoespecficos.
La inoculacin monsporica se realiz con la ayuda de un microscopio de diseccin; a cada

microcosmos se le coloc una plntula de pasto o de sorgo con la raz en el substrato y la parte
area fuera de la caja, a continuacin se le adicion una espora de HMA sobre el sistema radical
con la ayuda de una pipeta Pasteur, de manera que la raz y la espora se encontraran en estrecho
contacto para favorecer el establecimiento de la colonizacin. Cada unidad experimental
preparada de la manera anteriormente descrita se pes y se cubri con papel aluminio para
estimular el crecimiento radical y el establecimiento de la simbiosis micorrcica arbuscular. Se
establecieron 200 microcosmos por un periodo de tres meses en el invernadero de la FES
Zaragoza.
Despus de la propagacin de los HMA por cualquiera de los mtodos, se evalu la infectividad
y la efectividad de cada inculo con plantas de Prosopis laevigata (Figura 2). El ensayo consisti
en establecer unidades experimentales con inculo multiespecfico y con inculo monoespecfico
constituido por el HMA Scutellospora aff. pellucida Nicholson et Schenck.
El experimento se estableci en el invernadero de la FES Zaragoza de la siguiente manera: se

utilizaron como macetas tubos de cloruro de polivinilo (PVC) de 25 cm de longitud y 3 pulgadas
de dimetro; un extremo de ste fue cubierto con cinta adhesiva con el objetivo de retener el
substrato, posteriormente se coloc en el interior una bolsa de plstico; el tubo se llen con
substrato esterilizado cubriendo una longitud de 10 cm, luego se agregaron 200 g de inculo
Figura 2. Evaluacin de los inculos de hongos micorrizgenos arbusculares (HMA) en Prosopis

laevigata. sp: especie; No: nmero.
multiespecfico o de inculo monoespecfico o de suelo esterilizado (sin micorriza) a cada

unidad experimental. Se prepararon un total de siete unidades experimentales por tratamiento;
enseguida se rellen el tubo con ms substrato esterilizado hasta alcanzar los 20 cm de longitud,
se adicionaron 100 ml de agua destilada a cada UE necesaria para hidratar el suelo a capacidad
de campo, se dej reposar durante 1 hora y despus se colocaron dos semillas de mezquite en
cada unidad y se cubrieron con el substrato necesario para que quedaran a una profundidad de
siembra de 3 cm. El diseo experimental qued de la siguiente manera:
1 especie vegetal X 3 tratamientos X 7 repeticiones = 21 unidades experimentales
A las plantas de Prosopis laevigata, se las dej crecer durante 3 meses y medio, registrando
semanalmente a cada planta las variables: altura total y el nmero de hojas; al finalizar el
experimento, se determin la biomasa hmeda y seca, tanto de la raz como del vstago, rea
foliar, contenido de clorofila, tasa de crecimiento, potencial hdrico caulinar, longitud del vstago
y de la raz, as como el porcentaje de colonizacin MA mediante la tincin con azul de tripano
(Phillips y Hayman, 1970).
Los datos obtenidos fueron concentrados en una tabla de Microsoft Excel y transferidos hacia
el programa estadstico STATGRAPHICS CENTURION XV Versin 15.2.06 para aplicarles
un anlisis de varianza (ANDEVA) y una prueba de Tukey (DSH), para determinar la significancia
de las diferencias entre los tratamientos.
Inoculo multiespecfico a partir de suelo
La elaboracin del inculo implica un aumento en el nmero de propgulos infectivos, por ello
y a manera de control fue evaluada la densidad de esporas antes y despus de la masificacin.
Los resultados muestran que FAB es el inculo que logr un mayor nmero de esporas con 434
incrementando en un 289 % el nmero inicial (150 esporas por 100 g de suelo seco), seguido
por Xitzo con 326 (incremento de 171%), ROS con 310 esporas (incremento 161%), SA con
298 esporas (222% mayor); el inculo que prcticamente no increment su nmero de esporas
fue MEZ, ya que pas de 160 esporas a 173 (incremento de 7.51%); ver Cuadro 2.
Se observ una disminucin del nmero de morfoespecies de un ciclo de propagacin a otro,

tambin se ha observado que la diversidad de morfoespecies en la muestra de suelo inicial
disminuye conforme se somete a masificaciones continuas con pasto (Lolium perenne), mientras
que para la primera masificacin hay un incremento o se conserva el nmero de morfoespecies
(Figura 3). Oehl et al. (2003), en condiciones naturales, describen un comportamiento similar,
pues encuentran que entre ms tiempo un sitio est bajo presin de uso intensivo de la tierra en
Cuadro 2. Nmero de esporas de HMA en sustratos masificados en invernadero.
Tratamiento Nmero de esporas antes Nmero de esporas despus

de la masificacin * de la masificacin *
ROS 192 310

FAB 150 434
MEZ 160 173
SA 134 298
Xitzo 190 326
*esporas en 100 g de suelo seco
8
Nmero de morfoespecies
7
6
5
4
3
2
1
0
Localidad
Figura 3. Nmero de morfoespecies en los inculos antes y despus de la masificacin.
monocultivo, ste tiende a disminuir el nmero de especies de HMA, as como la dominancia

de ciertas especies del gnero Glomus; estos resultados sugieren que si una muestra se somete
al mismo esquema de propagacin durante varios ciclos con Lolium perenne tender a perder
su diversidad genrica (gneros) y especfica (especies), por lo que se recomienda mantener y
propagar el inculo utilizando diferentes estrategias y varias especies vegetales a fin de conservar
la biodiversidad de los HMA.
Asimismo, la masificacin permiti tener esporas de HMA de nueva generacin y realizar

preparaciones permanentes para su determinacin taxonmica; as, en funcin de sus caractersticas
morfolgicas y con la ayuda de la especialista M. en C. Laura Hernndez-Cuevas, las especies
de HMA determinadas y que se encuentran asociadas a los cultivos de masificacin en el
invernadero y, por lo tanto, a la produccin de inculos autctonos del Valle del Mezquital son:
Glomus sinuosum (R.T. Almeida & N.C. Schenck), Scutellospora gregaria* (Schenck et
Nicolson) Gigaspora ramisporophora* (Spain, Sieverd & N.C. Schenck ), Ambispora
appendicula* (C. Walker), Glomus tortuosum* (N.C. Schenck & G.S. Smith) Glomus
microagregatum (Koske, Gemma & P.D. Olexia), Glomus intraradices (N.C. Schenck & G.S.
Smith) y Scutellospora aff. pellucida* (Nicholson et Schenck); ver Figura 4.
La perspectiva de utilizar a los HMA como biofertilizantes o como herramienta biolgica implica
la produccin de inoculantes que sean efectivos (produccin de plantas con las caractersticas
de inters) e infectivos (que establezcan una simbiosis rpida con el hospedero) y, adems, que
las especies fngicas sean funcionales en las condiciones ambientales a las cuales se dirigirn.
En el caso de los hongos MA provenientes del Valle del Mezquital, se ha visto que son susceptibles
de propagarse en invernadero cuando el suelo contiene a toda la microbiota edfica, sin embargo,
en ensayos donde se propagaron mediante el aislamiento y seleccin de sus esporas, los
Figura 4. Microfotografas de HMA del Valle del Mezquital, Hidalgo, encontradas en las muestras de
masificacin. a) Ambispora appendicula*, b) Gigaspora ramisporophora*, c) Glomus sp1, d) Glomus
tortuosum*, e) Glomus sp2, f) Scutellospora gregaria*.
* Especies de HMA determinadas por la M. en C. Laura Hernndez-Cuevas, especialista en micorrizas
arbusculares.
resultados son variables; por ejemplo, los HMA responden cuando la propagacin se realiza de
manera multiespecfica de manera que se logr obtener un inculo con albahaca como planta
hospedera. En el caso de los ensayos para obtener inculo de forma monoespecfica, las
probabilidades de xito disminuyeron drsticamente, pues de 7 ensayos realizados con tres
especies diferentes de HMA slo un ensayo tuvo xito; mientras que en los ensayos
monospricos donde se coloc una sola espora de HMA en la raz de cada unidad experimental
no se encontr establecimiento de la simbiosis; la determinacin de la colonizacin MA en raz
con azul de tripano no revel puntos de entrada ni micelio intrarradical; el Cuadro 3 concentra
los resultados de los ensayos para generar inculo de HMA a partir de esporas.
Cuadro 3. Ensayos para la generacin de inculos de micorrizas arbusculares.
Mtodo de Planta Esporas HMA % Esporas

propagacin trampa al inicio inoculados colonizacin al final
Multiespecfico Albahaca 30 Glomus spp. 40 70

(MM) Scutellospora sp.
Gigaspora sp.
Monoespecfico Maz 40 Scutellospora 30 0

(MS) aff. pellucida*
Monosprico Pasto o sorgo 1 Glomus sp. o 0 0

Scutellospora scutata*
1
=densidad de esporas en 100 g de suelo seco. *Especies de HMA determinadas por la M. en C. Laura
Hernndez-Cuevas, especialista en micorrizas arbusculares.
Los bajos porcentajes de xito en estos primeros ensayos, para la generacin de inculos
monoespecficos y monospricos, son frecuentes en los HMA de esta regin, pues tal vez
requieran periodos ms prolongados de interaccin bajo las condiciones ambientales de cultivo
en el invernadero y ensayar otros hospederos para propagarse. Si se hace una comparacin de
los cultivos monoxnicos con el uso de races transformadas, es claro que stas ltimas requieren
cultivar a estos hongos en condiciones de asepsia y en medio artificial por periodos largos para
su adaptacin al medio e incluso por varios ciclos para establecerlos; sin embargo, normalmente
estos cultivos desarrollan pocas o nada de esporas en el medio (Cano et al., 2008); quizs algo
similar sucedi en el inculo monoespecfico de Scutellospora aff. pellucida, donde a pesar de
tener 30% de colonizacin micorrcica arbuscular y micelio externo, no se generaron esporas.
Los resultados de los ensayos multiespecficos y monoespecficos indican que las esporas de
HMA de reciente formacin, que se aislaron de las muestras masificadas en invernadero, tienen
la capacidad de germinar y establecer la simbiosis micorrcica sin que hayan pasado por un
proceso de desinfeccin superficial, sin embargo, tal procedimiento provoc que las probabilidades
de xito disminuyeran en los ensayos monospricos y monoespecficos; Cano et al. (2008)
comentan que la desinfeccin superficial de las esporas con cloramina T y una mezcla de
antibiticos (gentimicina, estreptomicina) permite incrementar la germinacin y, por consiguiente,
el xito de colonizacin micorrcica arbuscular en la raz de un hospedero apropiado; sin
embargo, para las especies de HMA del Valle del Mezquital, Morales (2005) aplic la desinfeccin
superficial de las esporas con los qumicos antes sealados para establecer inculos monospricos
y en sus resultados se observa que no es un factor decisivo para que las esporas germinen, ya
que cuando realiza la inoculacin en diferentes plantas hospederas utilizando macetas (250 g)
para su cultivo, obtiene 0% de colonizacin; sus probabilidades de xito se incrementaron
cuando cambi las macetas por cajas Petri, indicando que existen otros parmetros que pueden
estar involucrados en la germinacin de las esporas y el posterior establecimiento de la simbiosis.
Existen otros parmetros que pudieron afectar o inhibir la germinacin de las esporas de HMA
y, por consiguiente, obtener bajos porcentajes de xito en la generacin de un inculo de estos
hongos; tales factores pueden ser desde el tipo de substrato utilizado, ya sea pasteurizado en
autoclave o irradiado, contenido de fsforo en el suelo, la temperatura, el nivel de pH, la humedad,
aireacin, condiciones de luz, actividad microbiana, exudados radicales, tipo de hospedero; lo
ms recomendable es mantener y propagar a los HMA del Valle del Mezquital bajo las mismas
condiciones edafoclimticas; de esta manera deben ser variables a consideracin en futuros
ensayos a nivel invernadero (Maia y Yano-Melo, 2001; Manjarrez et al., 2000; Giovannetti y
Gianinazzi, 1994).
Evaluacin de la efectividad e infectividad de los inculos de HMA utilizando

a Prosopis laevigata
Los mtodo empleados para estudiar la respuesta de la planta a la presencia de los HMA en
condiciones de invernadero son la infectividad y la efectividad. La primera es una medida de la
capacidad que tiene una especie fngica en particular para colonizar las races de una planta
hospedera, mientras que la efectividad o eficiencia es la capacidad que tienen los HMA para influir
favorablemente en la adecuacin de una especie vegetal con la que estn asociados, en
comparacin con otra que crece en ausencia de ellos (Guadarrama-Chvez et al., 2008).
El estudio de la asociacin de las plantas con los hongos micorrcicos arbusculares (HMA) puede
ser abordado desde diferentes puntos de vista, dependiendo del objeto de estudio: la planta, el
hongo o la interaccin. En este caso, el estudio se ha enfocado a conocer los beneficios que la
planta recibe de los hongos contenidos en los inculos evaluados, los cuales se pueden medir
a travs de la supervivencia, variables de crecimiento (biomasa seca total, tasa relativa de
crecimiento, rea foliar entre otros), nmero de hojas, resistencia a herbvoros, porcentaje de
raz colonizada, nmero de esporas en la rizosfera, micelio extraradical, etc. (Guadarrama-
Chvez et al., 2008). En este trabajo se utiliz a Prosopis laevigata como planta silvestre, puesto
que en otros trabajos ha mostrado respuestas sensibles a la micorrizacin (Barragn, 2003; Lpez
2007).
Los diferentes inculos masificados a partir de una muestra de suelo, generaron colonizacin
micorrcica arbuscular, presentando variabilidad en parmetros como altura, donde FAB y ROS
fueron los que generaron mayores alturas en las plantas en comparacin al testigo (Figura 5),
seguido de Xitzo y Santiago de Anaya, donde no hubo diferencias estadsticamente significativas
(ANDEVA =0.05) entre ellos, pero s con respecto al testigo y al inculo MEZ; este ltimo no
mostr efectos benficos tan marcados como los dems, quizs debido a que fue una mezcla
de suelos de diferentes matorrales lo que ocasion este fenmeno, posiblemente incompatibilidad
microbiana u otro factor.
Haciendo una comparacin entre los inculos antes mencionados con el multiespecfico que se
gener a partir de la seleccin de esporas, no se observ una diferencia estadsticamente
significativa en la variable altura (Cuadro 4) indicando que ambas formas de propagacin de los
HMA generan medios adecuados para inocularlos en la especie vegetal, proporcionando efectos
positivos sobre las plantas de mezquite; la nica ventaja es que en el cultivo multiespecfico se
conocen las proporciones de gneros fngicos que componen el inculo.
40
35
30
Altura (cm)
25
20
15
10
5
0
Semanas
Figura 5. Crecimiento de Prosopis laevigata asociados a los diferentes inculos de HMA.

Cuadro 4. Pruebas de Rango Mltiple. Los tratamientos que comparten una misma letra minscula en
la columna de la derecha no presentan diferencias significativas (=0.05).
Variable: altura (cm) Casos Media Grupos Homogneos
Testigo 7 16.1714 b
MEZ 7 20.8714 b
Santiago de Anaya 7 31.3714 a
MM 7 31.8714 a
Xitzo 7 32.4857 a
ROS 7 34.4571 a
FAB 7 34.9286 a
En cuanto a las variables medidas en Prosopis laevigata para la determinacin de la efectividad

de dos inculos propagados de HMA autctonos, que provienen de un matorral semirido, en
el Cuadro 5 se presentan los promedios obtenidos de las variables registradas. Como puede
observarse, el inculo monoespecfico de Scutellospora aff. pellucida (Nicholson et Schenck),
no desarroll la simbiosis en el mezquite, quizs debido a que estaba constituido slo por raz
colonizada (30%) y micelio externo como propgulos infectivos, puesto que no gener esporas
despus de un periodo de tres meses de propagacin en invernadero (ver Cuadro 3); el resultado
est acorde con lo reportado en la literatura, donde se menciona que an no se ha demostrado
que las hifas dentro de la raz y los arbsculos pertenecientes a los gneros Gigaspora y
Scutellospora tengan la capacidad de colonizacin y propagacin, por lo que es recomendable
que en el inculo estn presentes las esporas para que inicien la simbiosis micorrzica arbuscular
(Amora y Varela, 2009). Esta desventaja ecolgica de las especies que componen a estos gneros
tal vez est compensada por la capacidad de tienen sus esporas para germinar varias veces a
diferencia de las pertenecientes al gnero Glomus o Acaulospora que no presentan esta aptitud.
Por un lado, el inculo monoespecfico, al no colonizar al mezquite, tuvo un desarrollo similar

al tratamiento testigo, como se observa en el Cuadro 5, no presentando diferencias estadsticamente
significativas con respecto al testigo. Por otro lado, el inculo multiespecfico fue el que gener
mayor colonizacin micorrcica arbuscular en las races de Prosopis laevigata y, por
consiguiente, esto se reflej en mayor altura, tasa de crecimiento, rea foliar, nmero de hojas,
biomasa seca total, entre otros, que muestran que hay una diferencia estadsticamente
significativa con respecto al testigo y al inculo monoespecfico. El efecto benfico sobre estas
variables es debido a que los HMA pueden aportar mayores cantidades de nutrimentos a la planta
porque exploran de manera ms eficiente el substrato que las mismas races (Bago et al., 2000),
lo cual se puede constatar en la razn raz/vstago: tanto las plantas testigo como las del
tratamiento monoespecfico tienden a formar mayor cantidad de raz para compensar la ausencia
de los HMA y as captar la mayor cantidad posible de nutrimentos, de manera que es evidente
que la simbiosis micorrcica arbuscular representa una ventaja ecolgica tanto para el hongo
como para la planta para sobrevivir bajo condiciones limitadas de nutrimentos o bajo condiciones
estresantes como la aridez.
Cuadro 5. Variables medidas en Prosopis laevigata bajo dos tratamientos micorrizacin.
Tratamiento Testigo Inculo Inculo

monoespecfico multiespecfico
Variable (Scutellospora aff.
pellucida)
Colonizacin MA (%) 0 0 73.33

Altura (cm) 15.77 b 14.3 b 35.2 a
Tasa de crecimiento (cm/da) 0.1763 b 0.1592 b 0.4137 a
Foliolos (#) 357 b 395 b 1067 a
rea foliar (cm) 16.78 b 20.67 b 91.94 a
Longitud raz (cm) 35.42 b 38.35 b 25.57 a
Biomasa fresca vstago (g) 0.659 b 0.718 b 3.016 a
Biomasa fresca raz (g) 1.58 b 2.08 b 2.66 a
Biomasa seca vstago (g) 0.206 b 0.228 b 1.258 a
Biomasa seca raz (g) 0.694 b 0.997 b 1.596 a
Biomasa seca total (g) 0.90 b 1.225 b 2.854 a
Razn raz/vstago 3.72 b 4.62 b 1.29 a
Contenido de clorofilas 7.32 a 9.38 a 9.9 a
Potencial hdrico caulinar (MPa) - 2.61 a -2.94 a -2.46 a
Letras iguales en la misma fila significa que no hay diferencia significativa entre tratamientos (Tukey P<0.05).
Conclusiones
La masificacin de inculos fue positiva en todos los casos, sin embargo, FAB fue el que
present mayor densidad de esporas de HMA (434 esporas en 100 g de suelo seco), adems
gener el mayor porcentaje de colonizacin total en Prosopis laevigata con 65.83 %.
Hay prdida de morfoespecies en el proceso de masificacin debido al uso continuo de

una sola especie vegetal, lo cual indica que si se desea conservar la biodiversidad de los HMA
en las muestras, se deben utilizar varias plantas para tal propsito.
La propagacin de inculos multiespecficos a partir de esporas logra ser infectivo y efectivo

para Prosopis laevigata, generando an una mayor colonizacin micorrcica arbuscular
73.33% en comparacin al inculo FAB.
Un inculo monoespecfico se logr establecer a partir de esporas de Scutellospora aff.

pellucida, pero no fue infectivo en Prosopis laevigata.
Los cultivos monospricos no tuvieron xito en su propagacin.
Fue posible la determinacin de 8 especies de hongos micorrcicos arbusculares.
Agradecimientos
Se agradece a la M. en C. Laura Hernndez Cuevas por el tiempo y apoyo otorgado en la
determinacin de los hongos micorrcicos arbusculares del Valle del Mezquital, pues esta
informacin enriqueci el presente manuscrito. Tambin se agradece a Christian Rafael
Cervantes Salcedo y a Jessica Miguel de la Cruz por el apoyo en el procesamiento de muestras
en laboratorio.
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80 Garca Daz y Garca Snchez
Hongos micorrizgenos arbusculares

asociados a Bouteloua curtipendula en
cuatro poblaciones del Valle del
Mezquital, Estado de Hidalgo
Mariano Garca Daz

E-mails: mariano_garcia_d@yahoo.com.mx, rosalvags@correo.unam.mx
Resumen
Mxico es un pas con gran diversidad biolgica, misma que es necesario conocer, mediante estudios ecolgicos y
taxonmicos de las especies importantes para el ambiente, como es el caso de los hongos micorrizgenos arbusculares
(HMA), que son simbiontes obligados de alrededor del 90% de las plantas vasculares, incluyendo a las gramneas. En
este trabajo se realiz un estudio taxonmico de los hongos micorrizgenos arbusculares que se encuentran asociados
a la gramnea: Bouteloua curtipendula (zacate banderita) en cuatro localidades del Valle del Mezquital, Hidalgo. Para
realizar el estudio fue necesario caracterizar las poblaciones de B. curtipendula en cuatro sitios, adems de analizar
las esporas de HMA presentes en las muestras de suelo al momento de la colecta y despus de su masificacin en
condiciones de invernadero. La masificacin de los HMA se realiz mediante su cultivo con dos plantas trampa,
empleando pasto y jitomate (Lolium multiflorum y Lycopersicum esculentum, respectivamente). Las esporas
obtenidas en la cosecha fueron determinadas taxonmicamente utilizando el manual de Shenck y Prez y la informacin
de la pgina electrnica del INVAM. Las esporas determinadas fueron: Acaulospora denticulata, Acaulospora
melea, Acaulospora rehmii, Entrophospora infrequens, Gigaspora decipiens, Glomus geosporum, Glomus
mosseae, Glomus rubiformis, Scutellospora calospora, Scutellospora fulgida, Scutellospora scutata y
Scutellospora sp. Asimismo, se encontr que las poblaciones estudiadas no presentan diferencias estadsticas en
tamao o densidad. La mayora de las especies de HMA determinadas estn reportadas para la Mxico pero no para
el Estado de Hidalgo.
Palabras clave: hongos micorrizgenos arbusculares, Bouteloua curtipendula, Valle del Mezquital (Hidalgo),
masificacin de esporas fngicas.
Introduccin
Mxico est conformado en un 60% de su territorio por zonas donde la lluvia es escasa y poco
predecible; en estos sitios se encuentra una importante parte de la diversidad biolgica de Mxico,
as como un gran nmero de endemismos y es de esperarse que suceda lo mismo con la
diversidad de los hongos micorrizgenos arbusculares (HMA), los cuales no han sido evaluados
de manera precisa, a pesar de que estos organismos se encuentran asociados con alrededor del
90% de plantas vasculares (Ortega-Larrocea, 2001; Garca-Snchez et al., 2008).
Los hongos micorrizgenos arbusculares han formado una asociacin importante, que ha
podido perdurar a travs del tiempo, beneficiando a los hospederos en el soporte de condiciones
cambiantes del ambiente, el aumento del rea rizosfrica, interaccin con otros organismos y
solubilizacin de nutrientes; la colonizacin de la raz de la planta se da cuando est en contacto
con el suelo y produce exudados que la comunican con las esporas o hifas en el suelo rizosfrico
(Estrada-Torres, 1998; Varma, 1999; Xoconostle, 2002). Asimismo, las gramneas desempean
un papel ecolgico importante, su sistema radical y los tallos subterrneos las hacen excelentes
retenedoras y formadoras de suelo, son nicho ecolgico de otras especies vegetales y animales,
adems se les encuentran en zonas semiridas y son micfilas (Montao, 2008). As, el objetivo
del presente trabajo fue evaluar la micorrizacin del pasto Bouteloua curtipendula en cuatro
localidades del Valle del Mezquital, Estado de Hidalgo; tambin, se plante el masificar las
esporas de los HMA del suelo rizosfrico en dos plantas trampa (Lolium multiflorum y
Lycopersicum esculentum) a fin de identificarlas taxonmicamente.
Caractersticas de los principales gneros de hongos micorrizgenos

arbusculares
Glomus
Las esporas se producen en el pice de las hifas o intercaladas en el micelio (Figura 1). Las esporas
maduras conservan restos del micelio que les dio origen, en forma de una hifa de sostn que en
Figura 1. Ontogenia de Glomus.

el punto de unin con la espora adquiere una forma cnica, recta o curveada; tambin pueden
formar esporocarpos, que es una agrupacin de esporas ms o menos compactas, con las hifas
en el centro (plexo) y con una cubierta denominada peridio, normalmente presente. Las esporas
poseen una pared estructural y paredes internas o slo pared estructural; asimismo, algunas de
las capas de la pared pueden cambiar de color al adicionar reactivo de Melzer, ya que contiene
yodo y puede producirse una reaccin dextrinoide (cambio de color a rosa, rojo, magenta o
prpura) caracterstica de algunas especies particulares. La germinacin en este gnero se da por
la emergencia de una o varias hifas que atraviesan las paredes de la espora o bien por el lumen
de la hifa de sostn (Morton, 1990; Morton, 1999; Franco, 2002).
Entrophospora
Las esporas se producen intercaladamente a la hifa de sostn (Figura 2), que en uno de sus pices
se ensancha o se hincha a manera de globo formando lo que se conoce como sculo. Las esporas
maduras pierden los restos de la hifa que les dio origen quedndoles dos cicatrices una opuesta
a la otra. Las esporas pueden poseer capas estructurales e internas o slo estructurales. Algunos
de los estratos de tales paredes cambian de color con el reactivo de Melzer. La germinacin se
da a partir de una estructura conocida como orbe de germinacin. Para Mxico se conocen pocas
especies de este gnero.
Figura 2. Ontogenia de Entrophospora.
Acaulospora
Las esporas se producen de manera lateral en la hifa de sostn, la cual se encuentra ensanchada
en su pice (sculo). En las esporas maduras se pierde la totalidad de la hifa de sostn, quedando
en la pared una cicatriz. Las esporas poseen paredes estructurales e internas o slo paredes
estructurales; algunos de sus estratos pueden cambiar de color con el reactivo de Melzer;
presentan una estructura conocida como orbe de germinacin (Figura 3).
Figura 3. Ontogenia Acaulospora.
Gigaspora
Las esporas de este gnero se producen apicalmente a partir de una hifa de sostn ligeramente
ensanchada en su pice, a manera de bulbo (Figura 4). Las esporas poseen slo pared estructural,
la cual generalmente incluye de dos a tres estratos, algunos de los cuales cambia de color con
el reactivo de Melzer. Previamente a la germinacin se produce un estrato germinal.
Figura 4. Ontogenia de Gigaspora.
Scutellospora
Las esporas se producen apicalmente a partir de una hifa de sostn en forma de bulbo. La
diferencia que existe con Gigaspora, es que las esporas siempre poseen paredes estructurales
e internas y algunos de los estratos cambian de color con el reactivo de Melzer. La germinacin
se da a partir de una estructura especializada denominada escudo de germinacin, que le da el
nombre al gnero (Figura 5).
Figura 5. Ontogenia de Scutellospora.
Paraglomus
Las esporas formadas por este gnero no pueden distinguirse morfolgicamente de las formadas
por Glomus (Figura 6). La nica diferencia morfolgica son las caractersticas de la colonizacin,
ya que en Paraglomus no se ha observado la formacin de vesculas y la tincin de las estructuras
intraradicales es dbil.
Figura 6. Ontogenia de Paraglomus.
Archaeosporaceae
Las esporas son monomrficas o dimrficas y solamente se forman esporas acaulosporoides.
Cuando son dimrficas, se forman tanto esporas acaulosporoides como glomoides en el mismo
talo. Las esporas acaulosporoides formadas por Archaeosopora se distinguen de las formadas
por el gnero Acaulospora por la presencia de una capa parental interna gruesa flexible y la
ausencia tanto de la pared interna delgada flexible como de la placa de germinacin caractersticas
de Acaulospora. La germinacin de las esporas se lleva a cabo de la misma manera que en el
gnero Glomus (Figura 7). Esta revisin se apoy en Walker y Schler (2004) y en la pgina
web: http://invam.caf.wvu.edu/ consultada en enero de 2009.
Figura 7. Ontogenia de Archaeospora.
Mxico posee gran diversidad de especies que es necesario conocer, entre ellas los hongos
micorrizgenos arbusculares, simbiontes del 90% de plantas. El presente estudio tuvo como
objetivo determinar los HMA asociados a Bouteloua curtipendula en cuatro poblaciones del
Valle del Mezquital, Hidalgo.
Ubicacin de la zona de estudio

El Valle del Mezquital, Estado Hidalgo, se ubica en la porcin sudoccidental del Estado de
Hidalgo, en la cuenca del ro Tula (ms adelante llamado Moctezuma). La altitud vara entre 1700
y 2100 msnm.
9900' N
2025'
Figura 8. Las localidades de las poblaciones y sitios de colecta de suelo de Bouteloua curtipendula
estn indicadas con crculos grises. El mapa corresponde al Valle de Actopan (uno de los Valles que
constituyen al Valle del Mezquital, Hidalgo).
Material y mtodos
El muestreo se realiz colectando 5 individuos de cada una de las 4 localidades: Patria Nueva,
Gonzlez Gonzlez, Julin Villagrn y Xitzo (ver Figura 8). En el laboratorio se evalu el
porcentaje de colonizacin total de la raz, tiendo con azul de tripano; se realiz el recuento de
esporas por gradiente hmedo y se puso a masificar parte de la muestra con jitomate
(Lycopersicum esculentum) y con pasto (Lolium multiflorum) como plantas trampa.
El experimento se realiz en tres fases, como se muestra en el diagrama de flujo de la Figura 9.
Figura 9. Diagrama de flujo de la metodologa empleada.

Resultados y Discusin
Caracterizacin de las cuatro poblaciones de Bouteloua curtipendula
Las poblaciones de Bouteloua curtipendula se caracterizaron tomando en cuenta la altura, rea
basal y densidad de las plantas. Los resultados del anlisis de ANDEVA seguido de la prueba
de Tukey mostraron que la poblacin de Gonzlez Gonzlez tuvo individuos ms cortos y fueron
estadsticamente diferentes a los de Xitzo, que fueron los ms altos (P<0.05); los individuos de
las poblaciones de Julin Villagrn y Patria Nueva tienen alturas intermedias. El anlisis del rea
basal, que fue la otra variable considerada para el tamao de los individuos, mostr que las plantas
de Gonzlez Gonzlez son estadsticamente ms pequeas que cualquiera de los individuos, las
poblaciones restantes. En cuanto a densidad de individuos, la poblacin de Xitzo present menor
densidad y Julin Villagrn fue la poblacin ms densa (Cuadro 1).
Cuadro 1. Caractersticas de las poblaciones de Bouteloua curtipendula.
Localidad Altura (cm) rea basal (cm) Densidad (nmero de individuos/m2 )
Gonzlez Gonzlez 30.72 50.35 0.51

Julin Villagrn 58.06 136.57 1.00
Patria Nueva 52.37 180.27 0.86
Xitzo 66.53 205.75 0.38
Anlisis micorrcico
La colonizacin micorrcica en Bouteloua curtipendula muestra valores cercanos al 20% en tres
poblaciones, mientras que en Julin Villagrn se present el 70% de colonizacin. Los valores
bajos se deben, en gran parte, a que la evaluacin se realiz cuando las plantas presentaron
floracin en las cuatro poblaciones, momento en el cual la planta requiere sus recursos para que
la produccin de semillas sea exitosa, por lo que quedan pocos recursos para sostener la
simbiosis micorrcica activa (en la cual se espera mayor presencia de arbsculos). En la etapa
reproductiva de la planta, el hongo inicia la formacin de estructuras de resistencia disminuyendo
la colonizacin radical, por lo mismo no se encontraron arbsculos. Los valores altos de la
colonizacin total micorrcica arbuscular en Julin Villagrn se deben que a pesar de ser sitios
cercanos, la sincrona de floracin no es la misma; en este sitio la floracin era inicial, esto lo
demuestra la mayor presencia de vesculas que son estructuras de reserva y preparan al hongo
para su esporulacin (Cuadro 2), como lo ha sealado Walker (2002).
Cuadro 2. Colonizacin micorrcica promedio en Bouteloua curtipendula.
Sitio Total Vesculas
Gonzlez Gonzlez 20.67 3.00

Julin Villagrn 70.67 8.00
Patria Nueva 19.00 1.33
Xitzo 20.33 2.33
El nmero de esporas de los hongos micorrcicos arbusculares presentan valores promedio

bajos: de 36 a 60 esporas en 100 gramos de suelo rizosfrico. Aparentemente no hay relacin
entre el tamao de las plantas de Bouteloua curtipendula y el nmero de esporas asociado a
su rizosfera, ya que los individuos encontrados en Xitzo y los ms pequeos, ubicados en
Gonzlez-Gonzlez, presentaron 56 esporas promedio en 100 g de suelo (Cuadro 3). Dado que
los HMA no se encuentran aislados en el suelo rizosfrico, es probable que haya influencia de
los microorganismos asociados a las races vegetales como lo plantea Ferrera-Cerrato (2004).
Despus de la masificacin con Lycopersicum esculentum, el rango de densidad de esporas se
ubic entre 58 y 150 esporas por 100 g de suelo y con Lolium multiflorum, la densidad oscil
entre 66 y 94 esporas; el suelo proveniente de Patria Nueva fue el que ms esporas present en
condiciones de campo, es decir, antes de su masificacin (Cuadro 3). Las localidades de Patria
Nueva y Xitzo presentaron los valores ms bajos en las muestras de invernadero, al propagarse
con el pasto italiano.
Las esporas obtenidas por cultivo con plantas trampa fueron revisadas para su determinacin
taxonmica; la mayora de las esporas se agruparon por tamao, color, presencia y forma de
la hifa, as como las capas en las que se separaba la pared. Con estos criterios se determinaron
Cuadro 3. Densidad promedio de esporas (nmero de esporas/100 g de suelo) antes (condiciones de

campo) y despus de su propagacin con dos plantas trampa (condiciones de invernadero).
Localidad Muestras de suelo Lycopersicum Lolium multiflorum

(condiciones de campo) esculentum
Gonzlez Gonzlez 56 116 94

Julin Villagrn 36 58 86
Patria Nueva 60 150 66
Xitzo 56 80 74
dos especies de Glomus: G. geosporum y G. mosseae, y una especie afn a Glomus aff.
pachycauli. Para el gnero Acaulospora se reconocieron tres formas que fueron determinadas
a especie: Acaulospora denticulata, Acaulospora laevis y Acaulospora rehmii. Las esporas del
gnero Entrophospora encontradas se caracterizaron y ubicaron como Entrophospora infrequens;
esta especie no se encuentra reportada para el Estado de Hidalgo (Trejo y Varela, 2001). El gnero
Gigaspora se encontr representado por Gigaspora descipiens. Del gnero Scutellospora se
determinaron las especies Scutellospora scutata y Scutellospora fulgida, adems de otra
morfoespecie no determinada. Las especies determinadas, el sitio y el origen se encuentran
listadas en el Cuadro 4. Adems se presentan algunas microfotografas (Figura 10) de las
caractersticas de las especies descritas con apoyo de la informacin contenida en las pginas
electrnicas: http://invam.caf.wvu.edu/ y http://www.lrz-muenchen.de/~schuessler/amphylo.
Cuadro 4. Especies de hongos micorrizgenos arbusculares (HMA) determinadas en los cultivos con
plantas trampa (Lycopersicum esculentum y Lolium multiflorum) y en el suelo colectado en cada una
de las localidades (indicado como: natural).
Localidad\ Gonzlez Gonzlez Julin Villagrn Patria Nueva Xitzo

Especie de HMA
Acaulospora L. esculentum L. esculentum

denticulata
Acaulospora L. esculentum L. multiflorum
mellea
Acaulospora L. multiflorum
rehmii
Entrophospora L. esculentum
infrequens
Gigaspora L. esculentum natural L. esculentum
decipiens
Glomus L. multiflorum
geosporum
Glomus mosseae L. esculentum L. multiflorum
Glomus aff. L. esculentum
pachycauli
Scutellospora aff. L. esculentum
calospora
Scutellospora L. esculentum natural
fugida y natural
Scutellospora L. esculentum L. esculentum
scutata
A) B) C)
Acaulospora denticulada. Gw = Capa germinal. A) Aspecto general de la espora. B) Espora rota mostrando capas
germinales as como la divisin de stas. C) Espora rota mostrando la separacin de capas L1 y L2.
A) B) C)
Acaulospora mellea. A) Aspecto general de la espora. B) Porcin de la espora mostrando las capas L1, L2 y L3.
C) Porcin de la espora mostrando capas germinales Gw y sus subcapas L1 Gw1, L2 Gw1, L1 Gw2 y L2 Gw2.
A) B) C)
Acaulospora rehmii. A) Aspecto general de la espora. B) Porcin de la espora mostrando la capa L1. C) Porcin
de la espora mostrando capa germinal Gw y sus subcapas L1 Gw1, L2 Gw1.
Figura 10. Microfotografas de algunas caractersticas de las especies descritas.

A) B) C)
Entrophospora infrequens. A) Porcin de la espora mostrando la capa L1 y restos del sculo esporfero. B) Porcin
de la espora mostrando la ornamentacin. C) Porcin de la espora mostrando las capas L1 Gw1, L2 y L3.
A) B) C)
Gigaspora decipiens. A) Aspecto general de la espora. B) Porcin de la espora mostrando la hifa de sostn. C)
Porcin de la espora mostrando la capa L1, L2 y L3.
A) B) C)
Scutellospora calospora. A) Aspecto general de la espora. B) Porcin de la espora mostrando la capa L1 y L2.
C) Porcin de la espora mostrando el escudo de germinacin.
Figura 10. Continuacin.

A) B) C)
Scutellospora fulgida. A) Aspecto general de la espora. B) Porcin de la espora mostrando la capa L1 y L2. C)
Porcin de la espora donde se muestra el escudo de germinacin.
A) B) C)
Scutellospora scutata. A) Aspecto general de la espora mostrando la capa L1 y L2. B) Porcin de la espora
mostrando la hifa de sostn. C) Porcin de la espora mostrando el escudo de germinacin.
A) B) C)
Glomus geosporum. A) Porcin de la espora mostrando la capa L1, L2 y L3. B) Porcin de la espora mostrando
la hifa de sostn y sealando el septo caracterstico de la especie. C) Porcin de la espora mostrando la medida de
la hifa de sostn.
Figura 10. Continuacin.
A) B) C)
Glomus mosseae. A) Aspecto general de la espora. B) Porcin de la espora mostrando la capa L1, L2 y L3. C)
Porcin de la espora mostrando la capa hifa de sostn y las capas en las que se divide.
A) B)
Glomus aff. pachycauli. A) Aspecto general de la espora. B) Porcin del esporocarpo.
Figura 10. Continuacin y conclusin.
Conclusiones
El porcentaje de colonizacin radical en Bouteloua curtipendula fue bajo excepto para los
individuos del matorral de Julin Villagrn. En ninguno de los casos se encontraron
arbsculos.
La densidad de esporas en suelo natural asociado a B. curtipendula fue bajo; con la

masificacin se duplic el nmero de esporas para todos los sitios.
Se identificaron 11 especies en total de los gneros: Acaulospora (3), Entrophospora (1),

Gigaspora (1), Glomus (3) y Scutellospora (3).
En la poblacin de Gonzlez Gonzlez se identificaron siete especies de hongos

micorrizgenos arbusculares y en Julin Villagrn slo dos especies.
Referencias
Estrada-Torres, A. 1998. Hacia el estudio de la diversidad y la conservacin de germoplasma de los hongos
micorrizgenos de Mxico. En: Zulueta, R.R. Avances de la investigacin micorrzica en Mxico.
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Xoconostle, C.B. 2002. Impacto de la biotecnologa agrcola en cultivos: el caso de las micorrizas. Avance y
Perspectiva 21:263-266.
Conclusiones 95
Conclusiones
La simbiosis micorrcica arbuscular es fundamental en el desarrollo de los individuos,
poblaciones, gremios, comunidades y paisajes en ambientes ridos y semiridos, debido
a que la malla hifal de estos hongos explora un perfil edfico ms profundo que el alcanzado
por las races de las plantas, para suministrar nutrientes y agua, y este ltimo es el recurso
ms limitante del crecimiento vegetal en este tipo de zonas.
La micorrizas arbusculares mejoran la hidratacin (medida como potencial hdrico vegetal)

y la transpiracin de las plantas en los ambientes con sequa estacional, ya que aportan
recursos hdricos de volmenes de suelo mucho mayores que aquellos que pueden
aprovechar las raicillas vegetales.
La eficiencia del uso del agua en las especies vegetales, medida en gramos de biomasa
seca producida por litro de agua irrigada, se incrementa significativamente en plantas
micorrizadas, ya que stas optimizan el uso del recurso hdrico del suelo, gracias a que la
red hifal de los hongos micorrizgenos arbusculares explora ms intensamente el sustrato
y capta ms agua, que lo que pueden hacer las races sin la simbiosis micorrcica.
Las tasas de crecimiento relativo de la mayora de las plantas inoculadas con hongos
micorrizgenos arbusculares reportadas en varios de los trabajos aqu presentados, fue
significativamente mayor a la de sus testigos no micorrizados, seguramente por el mayor
aporte de agua y nutrientes suministrados por los micobiontes.
Las micorrizas arbusculares ajustan el balance de biomasa entre el vstago y la raz de las
plantas, para alcanzar un nuevo equilibrio funcional en el cociente C/N de los individuos,
pues la micorrizacin cambia el valor de la proporcin biomasa radical/biomasa del
vstago, en funcin de la plasticidad fenotpica de las especies vegetales.
Las micorrizas arbusculares son un elemento aglutinante del suelo y de las plantas que se
asocian en un gremio vegetal, como los manchones o mosaicos de vegetacin que nuclean
las plantas nodrizas, lo cual contribuye a la conformacin de islas de recursos en las zonas
ridas y semiridas. Asimismo, las esporas provenientes de estas asociaciones vegetales son
seguramente las mejores fuentes de propgulos micorrcicos para masificarlos y generar
inculos con fines de rehabilitacin ecolgica de la vegetacin o para comercializarlos como
biofertilizantes de cultivos en ambientes secos o en suelos salinizados.
96 Conclusiones
Las micorrizas arbusculares son parte importante del balance global del carbono al
constituirse en reservorios de este elemento en el suelo (principalmente mediante la glomalina
que recubre las hifas que exploran el perfil edfico y conectan a las plantas en varios niveles
de organizacin bitica: poblaciones, gremios, comunidades y paisajes) y al favorecer el
proceso de fotosntesis en los fitobiontes. As, las micorrizas promueven la fijacin de
dixido de carbono atmosfrico y lo almacenan en reservorios edficos.
Las micorrizas tienen una estructura fractal, con geometra autosimilar que transita desde
el paisaje hacia las ramificaciones microscpicas radicales y de la malla hifal (y a la inversa),
participando activamente en la composicin de la atmsfera (dixido de carbono, oxgeno,
agua y vapor de agua) y en el equilibrio global del tejido vegetal que cubre la corteza terrestre
de Gaia, la Tierra viva.
Arcadio Monroy Ata naci en la Cd. de Mxico el 16 de febrero de 1958; es Bilogo (1983)
egresado de la entonces ENEP Zaragoza de la UNAM. Tiene un Diplomado en Estudios a
Profundidad (DEA) en Ecologa (1985) y un doctorado en Biologa de los Organismos y las
Poblaciones (1989), ambos por la Universidad de Ciencias y Tcnicas de Languedoc
(Montpellier II), de Francia. Desde 1989 realiza
estudios en ecofisiologa de la simbiosis
micorrcica en el Valle del Mezquital, Estado
de Hidalgo, es el responsable de la Unidad de
Investigacin en Ecologa Vegetal y profesor
titular A de la FES Zaragoza, UNAM,
adscrito a la Licenciatura en Biologa. Tambin
es profesor de asignatura en la Carrera de
Biologa y en la Maestra en Ciencias
Ambientales de la Universidad Simn Bolvar
desde 1999. Sus pasatiempos favoritos son la
divulgacin de la ciencia y la educacin
ambiental.
Rosalva Garca Snchez naci en el Estado de Puebla, Mxico, el 17 de febrero de 1958.

Es Biloga egresada del plantel Zaragoza, Maestra en Ciencias especialista en Botnica por el
Colegio de Postgraduados y actualmente es
candidata a doctora por la misma institucin,
campus Montecillo. Su rea de trabajo es la
edafologa y la ecologa vegetal de zonas
semiridas, particularmente enfocadas a la
simbiosis micorrcica arbuscular. Es
profesora titular A de la Facultad de Estudios
Superiores Zaragoza de la UNAM de la
Carrera de Biologa y est adscrita a la Unidad
de Investigacin en Ecologa Vegetal. Entre
sus pasatiempos favoritos est el cine, la
lectura y el yoga.

Microbiologia Industrial

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Universidad Nacional Autnoma de Mxico

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Arcadio Monroy Ata

Arcadio Monroy Ata

Unidad de Investigacin en Ecologa Vegetal

Mxico, D.F. noviembre de 2009

Universidad Nacional Autnoma de Mxico

Diseo de portada: Maribel Flores Estrada

Impreso y hecho en Mxico

Lo de arriba es igual a lo de abajo

Los hongos micorrizgenos arbusculares en prcticas de restauracin de 11

Efecto de hongos micorrizgenos arbusculares (HMA) sobre el desarrollo 24

Inoculacin de micorrizas arbusculares, Azospirillum brasilense y su 36

Hongos micorrizgenos arbusculares asociados al suelo rizosfrico de 46

Obtencin de inculos de hongos micorrizgenos arbusculares (HMA) 60

Hongos micorrizgenos arbusculares asociados a Bouteloua curtipendula 80

Lo anterior muestra la estructura fractal de la relacin entre plantas y hongos micorrcicos,

Los trabajos presentados corresponden a lneas de investigacin derivadas esencialmente de

Finalmente, es necesario agradecer el financiamiento que otorg la UNAM, a travs de la

Arcadio Monroy Ata

Los hongos micorrizgenos arbusculares

Arcadio Monroy Ata

En el caso particular de los ecosistemas ridos y semiridos, se ha reportado que el

En relacin al papel de las micorrizas en el funcionamiento y diversidad vegetal de los ecosistemas

lado, Giovannetti y Gianinazzi-Pearson (1994) mencionan que la composicin de la comunidad

Para la propagacin de las plantas a reintroducir a los agostaderos deteriorados, se prepar y

por lo que las unidades de la tasa de crecimiento son: [(mm/mm)/d)] o [d-1].

Biomasa total y cociente R/S

Eficiencia en el uso del agua

WUE = (g biomasa seca) / (kg agua irrigada)

por lo que las unidades son: [g biomasa/kg agua].

Evaluacin de la colonizacin endomicorrcica

I) Clareo - Las races, libres de suelo, se colocan en cpsulas esterilizables en un vaso de

Se colocan races clareadas y teidas en cajas de Petri con suficiente lactoglicerol. En un

de la micorrizacin, se da el valor de uno para la evaluacin total. El porcentaje de colonizacin

% de colonizacin total = (N de segmentos colonizados X 100)/(N de segmentos totales)

Tabla 1. Parmetros indicadores del desarrollo vegetal de plntulas cultivadas en invernadero e

Especie Tasa de Biomasa Cociente: Eficiencia en Supervivencia Colonizacin Referencia

Acacia 0.0058 0.6901 a 1.4896 a - 97.5 a 35.2 (Gonzlez,

Mimosa 0.020 a 1.920 a 1.00 a 0.0013 44.9 a 35 (Pea,

Opuntia 0.0035 0.1896 a 0.3406 a 0.694 76.0 a 29 (Miranda,

Prosopis 0.0069 0.619 a 1.1464 0.3555 75.0 a 24.6 (Torres,

Acacia M+ 43.0 11.17 1.03 (Miranda, 2003)

Mimosa M+ 91.66 14.0 0.56 (Pea, 2002)

Opuntia M+ 91.6 5.60 0.91 (datos no

Prosopis M+ 83.33 9.8 0.70

Abreviaciones: M+ plantas micorrizadas, M- plantas no micorrizadas.

generalistas o de alta especificidad y para afinar las propuestas de recuperacin de la cubierta

Efecto de hongos micorrizgenos

Luis Alberto Luna Camacho

a) La micorrizacin con HMA de Opuntia streptacantha (Cactaceae) y de Agave salmiana

Asimismo, despus de ocho meses de cultivo en invernadero:

La micorriza arbuscular se ha reportado como un factor bitico importante en el desarrollo de

(Prosopis laevigata, Acacia schaffneri, A. farnesiana, Mimosa biuncifera, M. depauperata).

Figuras 1 y 2. Porcentaje de colonizacin micorrcica de Opuntia streptacantha y Agave salmiana.

Tiempo (semanas) Tiempo (semanas)

M- : No micorrizado M+ : Micorrizado M- : No micorrizado M+ : Micorrizado

Figuras 3 y 4. Altura y dimetro de Opuntia streptacantha obtenido a lo largo del experimento.

Cobertura mayor (cm)

tratamientos micorrizados (M+), a diferencia de los tratamiento no micorrizados (M-), presentan

Raz-Vstago (R/S) Raz-Vstago (R/S)

Potencial hdrico (-Mpa)

semillas de Opuntia streptacantha, en un periodo de tiempo ms corto, incrementando el

La micorrizacin favorece el establecimiento y la supervivencia de Opuntia streptacantha y