FACULTAD DE INGENIERA

ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE

INGENIERA AGRNOMA

MONOGRAFA
Metabolismo Nitrogenado

Autores:

Carrasco Villafuerte Patricia Celeste

Bayona Llontop Germn Cesar
Barrn Delgado Vladimir Jess
Dominguez Perea Wilfredo
Quito Jara Jorge Miguel

Asesor:

Mg. Blgo. Jess Ruiz Baca

Nuevo Chimbote, Per

2017
El presente trabajo va dedicado, a Dios, quien nos
ha dado la oportunidad de poder seguir nuestros
estudios en la que es ahora nuestra universidad, y
quien nos da la fortaleza para seguir adelante.
A nuestros padres, como agradecimiento a su
esfuerzo, amor y apoyo incondicional, durante
nuestra formacin tanto personal como
profesional.
A nuestros docentes, por brindarnos su gua y
sabidura en el desarrollo de este trabajo.

I
 Obra de tal modo que emplees la
humanidad, tanto en tu persona
como en la persona de cualquier
otro, siempre con un fin y nunca
meramente como un medio.
Immanuel Kant.

II
 NDICE
DEDICATORIA I
EPGRAFE II
NDICE III
INTRODUCCIN 1
1. CAPTULO I: Asimilacin del nitrgeno
1.1. Definicin 2
1.2. La absorcin del nitrato 2
1.3. La reduccin del nitrato a amonio 3
1.4. Antecedentes 3
1.5. Experimentos 5
2. CAPITULO II: SINTESIS DE AMINOACIDOS, AMIDAS Y PROTEINAS
2.1. Aminocidos 11
2.2. Amidas 12
2.3. Protenas 12
2.3.1. Ratones transgnicos 13
2.4.2. Cerdos, ovinos y caprinos transgnicos 14
2.4.3. Bovinos transgnicos 15
2.4.4. Peces transgnicos 15
2.4.4.1. Sumosalmn 15
2.4.4.2. Ms peces de consumo transgnicos 16
2.4.4.3. El Pez Cebra o GloFish 16
3. CAPITULO III: BIOSNTESIS DE METABOLITOS SECUNDARIOS 16
3.1. Terpenos 17
3.2. Fenoles 17
3.3. Alcaloides 18

III
 2.5.4. Fabricas transgnicas 18
2.5.5. Industria Agrcola 19
2.6. Controversia 19
2.6.1. Transmisin de enfermedades en xenotransplantes 19
2.6.2. Diseminacin 19
2.6.3. Reacciones a los productos transgnicos 19
CONCLUSIONES 21
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 22
ANEXOS 25

IV
 INTRODUCCIN

La manipulacin gentica consiste en las tcnicas dirigidas a modificar el caudal hereditario

de alguna especie; su importancia radica en sus fines variables, desde la superacin de
enfermedades de origen gentico (terapia gentica), la finalidad experimental (conseguir un
individuo con caractersticas no existentes hasta ese momento), el mejoramiento del ganado y la
produccin de medicamentos o alimentos.

En nuestro trabajo monogrfico hemos encontrado la revista de investigacin: Animales

modificados genticamente elaborado por la Dr. en Veterinaria, De Los ngeles Pearanda

(Hospital General Universitario Gregorio Maran de Madrid), publicada en 2008. El objetivo de la

publicacin es de dar a conocer los aspectos bsicos de la manipulacin gentica en animales y
ejemplos de esta, adems de las razones que respaldan su utilizacin. Se concluye que la
manipulacin gentica en animales es un proceso que cuenta con una gran variedad de
aplicaciones desde el enriquecimiento cientfico hasta la produccin de medicamentos y
alimentos.

El objetivo de nuestra monografa es recopilar y dar a conocer informacin terica sobre la

manipulacin gentica en animales. Para el logro de nuestro objetivo central, desarrollamos los
siguientes objetivos especficos: organizar y evidenciar aportes acerca de la clonacin en animales,
y sintetizar informacin referente al proceso de transgnesis animal.

En base a los objetivos especficos, en el captulo I trataremos la definicin, metodologa,

factores, antecedentes, experimentos, importancia y controversia acerca de la clonacin. El
captulo II se centra en conceptos bsicos, metodologa, proceso, experimentos, importancia y
controversia referente a la transgnesis de animales.

Esperamos que nuestro trabajo monogrfico sea de utilidad para futuros trabajos de
investigacin y el afn de dedicados lectores, ya que creemos que es un aporte para la
sistematizacin terica de los temas abordados en l.

1
 CAPTULO I

CLONACIN

2.1. Definicin:

Segn Castaeda (2004) La palabra clon proviene del griego klon y significa: brote, vstago
o retoo. Biolgicamente hablando se define como: Conjunto de clulas o poblacin de
individuos originados de una sola clula o individuo al que son genticamente idnticos.
(p.3)

Segn Gurdon y Byrne (como se cita en McLaren, 2003):

La clonacin es un trmino que bsicamente da a entender la produccin de copias
genticas. Ahora bien, esas copias genticas pueden ser hebras de ADN, clulas en cultivo
u organismos enteros. En este ltimo proceso citado puede referirse a la proliferacin
bacteriana, a la clonacin de plantas a partir de esquejes o la clonacin de animales. (p.41)

Iez (s.f.) tambin argumenta que:

Si nos referimos al mbito de la Ingeniera Gentica, clonar es aislar y multiplicar en tubo

de ensayo un determinado gen o, en general, un trozo de ADN. En el contexto a que nos
referimos, clonar significa obtener uno o varios individuos a partir de una clula somtica
o de un ncleo de otro individuo, de modo que los individuos clonados son idnticos o casi
idnticos al original. (prr.2)

La clonacin tambin es la biotecnologa que permite la produccin asexuada de un

individuo idntico al material nuclear con el que se gener. (Palma, 2008) (p.13)

2.2.Metodologa:

Segn Curtis y Barnes, 2000 concluyeron que:

La clonacin se basa en la transferencia de un ncleo de una clula (clula donante) en
cultivo a un ovocito no fecundado (clula receptora) al cual previamente se le extrajo el
material gentico. El ovocito enucleado (sin ncleo) es sometido a un pulso de corriente
que simula la estimulacin que proporciona el espermatozoide y se fusiona con la clula
dadora del ncleo. Algunos de los ovocitos fusionados comienzan a desarrollarse como un
embrin normal y son implantados en una madre sustituta. (p.476)

2
2.3. Factores para una clonacin:

Segn McLaren (2003) los factores que determinan el xito de los experimentos de
transferencia nuclear son muchos y muy diversos, incluidos, entre otros:
La calidad de la clula receptora.
La calidad de la clula donante.

Las fases del ciclo celular, que en lneas generales pueden dividirse en divisin celular
(meiosis) e interfase (parte importante del ciclo del celular, entre periodos de
divisin).
Si la clula donante es una clula diferenciada.
El grado de diferenciacin de la clula donante.
Los medios y sustancias qumicas utilizadas. (p.67)

2.4. Antecedentes:

La posibilidad de clonar se plante al descubrir el ADN y el conocimiento de cmo se

transmite y expresa en los seres vivos.

Iraburu (2013) manifiesta que:

Un determinado animal est compuesto por millones de clulas, que son como los ladrillos
que forman el edificio que es el ser vivo. Esas clulas tienen aspectos y funciones muy
diferentes. Sin embargo, todas ellas tienen algo en comn: en sus ncleos presentan unas
largas cadenas que contienen la informacin precisa de cmo es y cmo se organiza el
organismo: el ADN. (prr.5)

El autor anteriormente citado tambin argumenta que, todas las clulas de un individuo
derivan de una clula inicial, el embrin unicelular o zigoto. Esta clula se obtiene de forma
natural por la fusin de las clulas reproductoras, vulo y espermatozoide, cada una de las
cuales aporta la mitad del material gentico. En el zigoto tenemos ya la informacin de cmo
va a ser el nuevo organismo: su sexo, sus caractersticas fsicas, etc.

El comienzo de la clonacin no se da con mamferos, sino con otros animales tambin

vertebrados; los anfibios, por la facilidad que permiten de observar su desarrollo
embrionario.

En el estudio de Llus (2004) (como se cita en Elizalde, 2004) encontramos que, los
embrilogos de finales de siglo XIX y principios del XX quedaron prendados del desarrollo
embrionario que ocurra en el interior de los huevos fecundados de ranas y dems anfibios,

3
que conclua con su eclosin y la aparicin de renacuajos. De entre los primeros embrilogos
destaca uno, Hans Spemann (1869-1941).

Por aquel entonces, en 1892, Weismann especul que los genes se perdan en todas las
clulas salv en los gametos (McLaren, 2003). Llus (2004) (como se cita en Bernard, 2004)
manifiesta que:

Predominaba la idea de que la diferenciacin celular (proceso de una clula embrionaria a

una somtica) progresaba mediante la prdida de determinantes nucleares (genes). As, por
ejemplo, las clulas que dan lugar al tejido muscular perderan los genes necesarios para
formar cualquier otro tejido que no sea los msculos. (p.63)

En el estudio de Llus (2004) (como se cita en Bernard, 2004) tambin encontramos que, esta
teora no complaca a Spemann y propuso que la diferenciacin celular progresaba mediante
el uso de distintos genes. Es decir, unas clulas usaban unos genes y otras clulas otros
distintos, pero todas las clulas mantenan la capacidad de usar todos los genes. Y Spemann
propuso un experimento para demostrarlo. Dado que l consideraba que no haba prdida de
genes entonces, en teora, podra usarse el ncleo de una clula de un individuo adulto, de un
tejido somtico diferenciado, y usarlo para reconstruir un nuevo embrin (previa eliminacin
del material nuclear del embrin receptor) con el objeto de verificar si el ncleo, as
transferido, sera capaz de sustentar, de nuevo, todos los pasos y estadios del desarrollo
embrionario hasta generar un nuevo individuo adulto.

Esta fue la contribucin ms importante de Spemann en el tema de la transferencia nuclear

hecha en 1938, anticipndose casi 60 aos al futuro que vendra con Dolly.

En el estudio de Briggs y King (como se cita en McLaren, 2003), en 1952, se logr un primer
xito con el trasplante nuclear en animales, en especfico con la rana americana Rana pipiens.
Donde se inyect un ncleo protegido de una blstula en el citoplasma de un vulo enucleado
de la misma especie. Donde se descubri que un significativo nmero de esos vulos llegaron
a desarrollarse en embriones e incluso en renacuajos.

Este estudio fue la primera demostracin de que era posible trasplantar un ncleo vivo de
una clula somtica a un vulo enucleado y obtener un desarrollo posterior.

En el estudio de Fischberg, Gurdon y Elsdale (1958) (como se cita en McLaren, 2003) se

desarrollaron ms estudios de este carcter con la rana sudafricana Xenopus laevis en 1950;

4
 obtenindose mayores resultados y demostrndose que no se produca una prdida de genes
en las clulas somticas del organismo a medida que el ncleo se especializaba.

En conclusin, la diferenciacin celular de las clulas somticas no produce la prdida de

genes, sino una inactivacin reversible de ellos, ya que cuando los ncleos son expuestos al
citoplasma de un vulo y en condiciones apropiadas, se reactivan (reprogramarse). Todos
estos experimentos estuvieron orientados a resolver la duda sobre la diferenciacin celular,
pero tambin generaron los precedentes para un estudio de individuos clnicos; y por ende
sentaron las bases para la clonacin.

2.5. Experimentos

Llus (2004) (como se cita en Bernard, 2004) sostiene que, si se observa la evolucin de las
publicaciones cientficas con experimentos de clonacin animal, aparece de forma muy clara
la inflexin ocurrida en 1997, momento en el cual se da a conocer la oveja Dolly. En aos
posteriores la progresin ha sido exponencial, convirtindose en uno de los temas de trabajo
ms apetecibles y productivos de la biologa moderna. De las apenas dos o tres decenas de
publicaciones aparecidas en 1997, hemos pasado a centenares de publicaciones anuales
sobre clonacin animal.

2.5.1. Dolly:

Segn Castaeda (2004):

En el Instituto Roslin de Edimburgo, Escocia, el Dr. Ian Wilmut y sus colaboradores

hicieron 277 intentos de transferencia nuclear para clonar una oveja variedad Finn

Dorset cara blanca, slo 29 embriones se activaron los cuales fueron implantados
en 13 ovejas cara negra; slo se logr un clon: Dolly. (p.4)

Castaeda (2004) incluye que Dolly es importante porque fue el primer mamfero
clonado. Naci el 5 de Julio de 1996 pero se hizo pblico 7 meses despus en 1997.
Tuvo corderos de manera natural. El 14 de febrero del 2003 fue sacrificada por
inyeccin letal debido a que padeca artritis y cncer pulmonar. Se practic autopsia al
cadver para averiguar si el origen clnico de Dolly era la causa de sus enfermedades,
pero no se encontr nada ms por lo que se disec y actualmente est en exhibicin en
el Museo Nacional de Escocia.

Para Audesirk, T.; Audesirk, G.; y Bruce (2003) en la clonacin se sigui el siguiente
procedimiento:

5
 Se cultiv clulas de la ubre de una oveja Finn Dorset en un medio con bajos
niveles de nutrientes. Las clulas famlicas dejan de dividirse y entran en la
fase G0 del ciclo celular. Entretanto, enuclea un vulo tomado de una oveja
carinegra escocesa.

El vulo enucleado y la clula de la ubre inactiva se colocaron una al lado de la

otra en una caja de cultivo. Un impulso elctrico estimula la fusin de las
clulas e inicia la divisin celular mittica. Se dej el embrin en cultivo
durante seis das. Despus se implant en el tero de una segunda oveja
carinegra. La oveja da a luz una corderita Finn Dorset (Dolly) que es
genticamente idntica a la otra oveja Finn Dorset original. (p.193) (Ver anexo,
figura 1)

2.5.2. Conejo

Para Sengewald (como se cita en Palma y Brem, 1993):

Bromhall inform en el ao 1975 por primera vez sobre los ensayos de transferencia
nuclear llevados a cabo en embriones de conejo. El genoma de los ovocitos
receptores no fue extrado, produciendo embriones triploides. Los embriones
donantes fueron mrulas. Slo el 2,6% de los embriones producidos continuaron su
desarrollo hasta el estadio de mrula. Stice y Robl (1988) informaron el nacimiento de
6 conejos a partir de la transferencia de ncleos de embriones de 8 clulas a 164
ovocitos receptores enucleados. La tasa de sobrevivencia de los embriones logrados
fue de 3,7%. Los 6 animales fueron gestados en 6 diferentes hembras. Heymann y col.
(1990) informaron el nacimiento de 6 clones, en ese ensayo la tasa de sobrevivencia
fue de 3,9%, comparable con los resultados de Stice y Robl (1988). Un ao despus
Collas y Robl lograron producir un clon sxtuplo con una tasa de sobrevivencia de los
embriones de 7,2%. (p.140)

2.5.3. Carbon Copy (Cc)

El 22 de diciembre de 2002 naci en la Texas A&M University (TAMU) un gatito

denominado Cc (Carbon copy), clonacin de otro que disponan en el laboratorio y que
llevaba por nombre Rainbow. El proyecto estuvo a cargo de Westhusin y Shin.
(Vallverd, s.f.)

6
 Vallverd (s.f.) argumenta que

Los investigadores Recurrieron a clulas, obtenidas a travs del cultivo primario de

una gata adulta, Rainbow. En el mismo experimento, tres embriones clonados fueron
insertados en la misma madre receptora, Allie, que pari por cesrea a los 66 das de
la transferencia. Los anlisis de ADN demostraron que la hija era genticamente
exacta a su madre. (p.51)

Las contrariedades surgieron, al descubrirse que Cc no era idntica a Rainbow, el

pblico tom a la clonacin como un fracaso, pero lo cierto es que la clonacin no
asegura que los clones sean iguales, solo que sean copias genticas exactas.

2.5.4. Idaho Gem y Prometea:

Woods y col. (como se cita en Bernard, 2004), en el ao 2003, dieron a conocer la

clonacin de dos especies de quidos, con mtodos especficamente adaptados a las
caractersticas reproductivas de estos animales. En primer lugar, la clonacin de una
mula (Idaho Gem), conseguida por un equipo americano.

Llus (2004) (como se cita en Bernard, 2004) sostiene que las mulas son animales
hbridos y estriles producto del cruce entre burros y yeguas. El cruce recproco da
lugar al burdgano. Estos son apreciados por su resistencia o velocidad y precisamente,
el equipo de investigadores y veterinarios que consigui la clonacin de Idaho Gem us
un ovocito de yegua y el ncleo de una clula de la piel de otra mula.

En segundo lugar, la clonacin de una yegua, Prometea, conseguida por un equipo

italiano. Galli y col. (2003) (como se cita en Bernard, 2004) argumentan que:

En este experimento se dio la curiosa circunstancia de que la misma yegua que gesto
el embrin, tambin aport el ADN (a partir de clulas de su piel) para la clonacin.
Se obtuvieron los ovarios de yeguas procedentes de mataderos. (p.58)

2.5.5. Ratas clonadas

Zhou y col. (como se cita en Bernard, 2004) dan a conocer que, en 2003, se conoci la
clonacin exitosa de otro mamfero largamente esperado, por su utilidad en farmacologa y
biomedicina, la rata, por parte del equipo de investigadores franceses del INRA, en Jouy, a las
afueras de Paris, liderados por Jean Paul Renard.

7
 No ser fcil predecir que especies sern clonadas ms adelante ya que es una tarea ardua,
pero eso no quiere decir que no se pueda realizar en un futuro la clonacin de diversos tipos
de animales tales como pollos, perros, hmsteres, conejillos de indias, etc.

2.6. Importancia

Segn Llus (2004) (como se cita en Bernard, 2004) la aplicacin ms importa de la clonacin
en mamferos es la de constituirse en una alternativa ms eficiente y ms rpida para la
generacin de los animales transgnicos. Esta es la principal aplicacin de la clonacin en
animales, especial en animales de granja, para los cuales los protocolos actuales de
transgnesis resultan ineficaces, lentos y caros. Este fue el objetivo que impulso a Wilmut y a
sus colaboradores a establecer los protocolos de transferencia nuclear en ovejas. Si
observamos, comparativamente, los parmetros habituales para la produccin de animales
transgnicos constataremos que la eficiencia del proceso oscila entre un 2 - 5%, en el caso del
ratn, hasta un 0.5 - 1% en el caso de conejos, cerdos, ovejas y vacas. Dado que el tiempo de
gestacin, y de madurez sexual, es muy diferente entre las especies mencionadas, las
posibilidades de obtener un grupo de animales transgnicos exigen apenas 6 meses, en el
caso del ratn, pero hasta ms de 4 aos, en el caso de la vaca.

Schnieke y col. (1997) (como se cita en Bernard, 2004) argumentan que una de las primeras
metas de los investigadores, interesados en desarrollar las tcnicas de transferencia nuclear,
fue el obtener animales clnicos y transgnicos, a partir de ncleos de clulas genticamente
modificadas. Las primeras ovejas de estas caractersticas nacieron en Escocia en 1997, y eran
transgnicas para el factor IX humano de coagulacin sangunea, puesto que se haban
generado a partir de ncleos de clulas fetales modificados genticamente con un transgn
que permita producir el citado factor IX a partir de la leche. Estas ovejas Polly y Molly, fueron
los primeros animales generados como clnicos y transgnicos.

Posteriormente, otras especies, como la vaca, fueron clonadas y modificadas genticamente

al mismo tiempo, usando clulas transgnicas.

Para Llus (2004) (como se cita en Bernard, 2004) existen otras aplicaciones para clonacin en
mamferos; es la recuperacin de razas o especies en peligro de extincin y, ligado a ello, la
conservacin de la biodiversidad gentica. Aunque posible, y a pesar de que hay algn intento
ya publicado, debe hacerse notar que para ello deben cumplirse varias premisas:

8
 Conocer el ciclo reproductivo y la biologa de la reproduccin de la especie a clonar
rescatar

La existencia individuos suficientes para permitir la gestacin de los embriones

clonados o, en su defecto, que existan especies parecidas, muy prximas, que
puedan usarse como donantes de citoplasma de ovocitos enucleados y para la
gestacin de los embriones clonados.

Loi y col. (2001) (como se cita en Bernard, 2004) manifiestan que:

Frecuentemente se desconoce prcticamente todo el ciclo reproductivo y caractersticas

intrnsecas del sistema reproductor de algunas especies de mamfero, ms all de
generalidades comunes, lo cual puede suponer un gran bloqueo de esta aplicacin.
Adicionalmente, no siempre se dispone de especies parecidas a las que acudir para la
gestacin y obtencin de ovocitos. A pesar de todo ello, se ha conseguido, por ejemplo, el
rescate de una hembra de mufln, de una especie parecida a la oveja, pero salvaje,
encontrada muerta reciente en el campo y que sirvi, a partir de las clulas del ovario, para
reconstruir ovocitos previamente enucleados de la oveja, que posteriormente fueron
gestados en ovejas dando lugar al rescate efectivo del individuo, ya fallecido, en cuestin.
(p.72)

Cuando se dispone de un individuo de una especie a clonar, obviamente como resultado se

obtendr individuos del mimo sexo, y esto imposibilita el mantenimiento de la especie, esto
fomentara la creacin de hbridos interespecficos que al mezclarse el material gentico en
generaciones posteriores se obtendrn especies o puras.

Tudge (2003) (como se cita en McLaren, 2003) afirma que:

La clonacin en s abre ante nosotros dos tipos de posibilidades: clonar individuos enteros y
desarrollar distintas modalidades de tecnologa de las <<clulas madre>> (o clulas
troncales). La primera de ellas se ha planteado en dos contextos: obtener replicas genticas
de individuos favorecidos (ganado, mascotas, especies en peligro de extincin). La segunda
amplia posibilidad la tecnologa de las clulas madre o troncales- encierra con toda
posibilidad el potencial de transformar disciplinas enteras de la medicina. (p.20)

2.7.Controversia

En la reproduccin sexual normal, el vulo y el espermatozoide contribuyen por igual al ADN

nuclear, pero el vulo contiene numerosos factores esenciales para el desarrollo. En concreto,
el vulo contiene ADN extra cromosmico localizado en la mitocondria, orgnulos

9
intracelulares que se heredan principalmente a travs de la lnea materna. Por tanto, McLaren
(2003) sostiene que los animales criados por transferencia nuclear no son <<clones>>, en el
sentido de la palabra, ya que los vulos utilizados en el proceso se obtienen de hembras
diferentes y, por consiguiente, los factores heredados de la madre (es decir, las mitocondrias)
sern diferentes entre las cras resultantes. Aunque las cras son generadas por medios
asexuales, no se ha producido duplicacin o divisin celular alguna, por lo que sera ms
acertado referirnos a ellas como <<copias genmicas>>.

En el estudio de Lester y Hefley (2000) encontramos que:

El doctor Lederberg, de la Universidad de Standford, expreso que la reproduccin clnica al

por mayor podra conducir a un callejn sin salida evolutivo sin oportunidad de
mejoramiento gentico. Hace un cuarto de siglo l propuso la clonacin moderada que
permita tanto la clonacin como la reproduccin sexual. En ese momento pensaba que la
clonacin seleccionada podra mejorar una raza al agregar individuos mejores. Esto
requerira una agencia regulatoria gubernamental con dos responsabilidades principales:

Seleccionar a los candidatos para la clonacin

Mantener a los individuos clonados lejos de formar pareja (p.57)

10
 CAPITULO II

TRANSGNESIS

2.7.Conceptos bsicos:

Segn EIBE (1998) la transgnesis es una tecnologa radicalmente nueva que altera las
caractersticas de los animales al cambiar directamente el material gentico. (p.6)

En el estudio de Brem, (como se cita en Phler, 1995) encontramos que:

El trmino transgnico fue usado en primer lugar por Gordon y Ruddle en 1982, para describir
aquellos animales que portan nuevos genes dentro de su genoma, este trmino es
actualmente aplicado de una forma general a especies cuyo genoma ha sido alterado por la
transferencia de genes. (p.109)

Segn Castro (como se cita en Palma, 2001):

La transgnesis animal se basa en la introduccin de ADN forneo en embriones animales, con

la consecuente implantacin del embrin en una hembra receptora. El gen forneo se
expresar de forma funcional en los individuos genticamente modificados, adems el
carcter as introducido ser transmitido a las generaciones filiales subsiguiente. La
transgnesis no solo incluye la integracin de un nuevo gen a un animal, sino tambin su
expresin y transmisin correctas. (p.396)

Asimismo, Lpez (2004) expresa que en algunos casos, en lugar de introducir un gen nuevo,
podra interesar anular, mutar o eliminar un gen presente en un cromosoma. Aqu, la
modificacin se suele hacer en las denominadas clulas embrionarias que sern
reintroducidas en una blstula.

EIBE (1998) plantea tambin que, para realizar una transgnesis animal, se necesita de un
transgn, que contenga el gen que interesa transferir y el ADN adicional que controle
correctamente el funcionamiento del gen en el nuevo animal.

Segn Curtis y Barnes (2000):

Durante la dcada de 1980, se convirti en realidad la idea de introducir genes de animales.

Un animal que incorpora informacin gentica nueva, por agregado de DNA extrao se
denomina transgnico y el gen incorporado se denomina transgn. Por medio de la tcnica
de microinyeccin, se introdujeron genes extraos en vulos fecundados. Esos genes
extraos introducidos se han expresado en los organismos que se desarrollaron a partir de
esos vulos. (p. 474)

11
 Consecuentemente, en los ltimos aos se ha experimentado un gran auge de esta tcnica y
se ha provisto de nuevas herramientas capaces de manipular y modificar el material gentico
de los organismos ms complejos desde el punto de vista evolutivo, los mamferos.

2.8.Metodologa

En la actualidad existen cinco mtodos mediante los cuales se ha logrado de forma eficiente
(o al menos repetible) la modificacin gentica de mamferos. Segn Renneberg (2012), estos
son:

Disparos genticos (gene guns): mediante este mtodo se dispara ADN absorbido en bolitas
y se introduce en las clulas.

Transgnesis mediada por retrovirus: los embriones de la fase de ocho clulas se infectan,
antes de la implantacin, con retrovirus defectuosos que sirven de vector para los genes
ajenos.

Microinyeccin de proncleo: cuando se unen espermatozoides y vulos en un zigoto, el

ADN ajeno se inyectar directamente en el proncleo del espermatozoide o del ovulo. Por
tanto, no se necesita vector.

Mtodo de las clulas madre embrionarias: se extraen clulas madre embrionarias de la

masa celular interna de los blastocitos y se mezclan con ADN ajeno. Algunas de estas clulas
absorben el ADN ajeno y, de este nada se transforman. Seguidamente, estas clulas se
inyectan en la masa celular interna de un blastocito. De momento, este mtodo es el ms
importante. No obstante, los animales jvenes son quimeras, es decir, solo una parte de las
clulas son portadoras de genes ajenos. En la segunda generacin ya se obtienen animales
transgnicos que contienen el material gentico ajeno en todas las clulas. Si se siguen
realizando cruces, se podrn establecer finalmente lneas transgnicas homocigticas (de
pura raza).

Transferencia mediada por esperma: utiliza protenas de enlace para unirse el ADN a las
clulas de los espermatozoides y transportarlos al ovulo como caballo de Troya. (p.207)

2.9.Proceso:
Castro (como se cita en Palma, 2001) sostiene que:

Se requieren al menos de 3 pasos esenciales independientemente de la metodologa que se

use para generar animales transgnicos:

Disponer de embriones y ovocitos de la especie en cuestin.

Introducir la informacin gentica fornea, mediante uno de los 5 mtodos, a dichos

gametos.
Transferir los embriones a las madres receptoras.

12
 Estos 3 componentes engloban la gran mayora de las manipulaciones embrionarias
requeridas para crear animales transgnicos. Un cuarto elemento, relacionado con la
ingeniera gentica implica por su puesto el disponer en forma adecuada del gen que se
pretende introducir. (p.396)

En comparacin Lpez (2004) argumenta que:

En cuanto a la tcnica de transgnesis en animales podemos establecer las siguientes

etapas:

Determinacin, caracterizar y purificar el material gentico que vamos a introducir.

Superovulacin de la hembra, mediante hormonas.
Transferencia gentica.
Transferencia de los embriones manipulados a una hembra pseudopreada.
Caracterizacin de la posible progenie transgentica obtenida. (p.22)

2.10. Experimentos

Desde la antigedad se han domesticado y producido animales con nuevas combinaciones

gnicas, utilizando mtodos tradicionales como la cruza selectiva. Pero, la cantidad de
combinaciones de genes es limitada, ya que solo se pueden cruzar animales de la misma
especie o especies muy parecidas. Es as como surge la idea de la manipulacin gentica y la
transgnesis. Se han creado muchos animales transgnicos, algunos de ellos son:

2.10.1. Ratones transgnicos

En el estudio de Curtis & Barnes (2000) encontramos que:

El 8 de septiembre de 1981, Jon W. Gordon y Frank H. Ruddle, de la Universidad de

Yale, EE.UU., fueron los primeros en insertar con xito el gen de globina beta de
conejos en vulos de ratn, mediante el mtodo de la microinyeccin. Los ratones
desarrollados a partir de estos vulos fecundados haban incorporado el gen extrao
a su genoma y este gen tambin fue transmitido a las generaciones siguientes.
Contenan en sus glbulos rojos la globina beta del conejo. El hecho de que el gen se
expresara solo en los glbulos rojos y no en otros tejidos de ratn indicaba que haba
sido incorporado en el lugar correcto. (p.474)

Renneberg (2012) argumenta que, usando el mtodo anterior, en 1982, Richard

Palmiter, de la Universidad de Washington, y Ralph Brinster, de la Universidad de

Pensilvania, crearon un ratn gigante, producto de la introduccin del gen de la

hormona de crecimiento de la rata en vulos fecundados de ratn. Gracias al gen la

13
 cra del ratn gigante transgnico creci el doble de rpido. De dos ratones de diez
semanas de edad, uno pesaba 44 gramos y el otro, 29 gramos. Sus descendientes
tambin crecen ms rpidamente y se hacen ms grandes. Por consiguiente, el gen de
la rata es estable en el material hereditario del ratn. (Ver anexo, Figura 2)

El citado autor tambin sostiene que:

En 1987, unos ratones produjeron por primera vez activador del plasmingeno tisular
(t-PA) humano y lo excretaban en su leche en concentraciones elevadas. Adems, el t-
PA humano slo se form en el tejido de la glndula mamaria de los ratones
transgnicos y se produjo de forma activa con la leche. Por el contrario, en la sangre
de los ratones no se encontr t-PA humano. El t-PA es un principio activo importante
que disuelve trombos (cogulos de sangre) en el infarto de miocardio. (p.209) (Ver
anexo, Figura 2)

Complementando la informacin anterior, Izquierdo (2014) afirma que una de las

aplicaciones en los ratones, es la posibilidad de eliminar la funcin de un gen (Knock
Out, KO), para observar el efecto de la falta de funcin en el organismo completo, un
ejemplo es el ratn desnudo, sin pelo, utilizado para pruebas de tolerancia de la piel,
otro es el ratn SCID (sndrome de inmunodeficiencia combinada severa) que ha
sufrido la mutacin de un gen, y los oncorratones (ratones con cncer).

2.10.2. Cerdos, ovinos y caprinos transgnicos

Durante los aos 1998 y 1989, se obtuvieron cerdos transgnicos que producen grandes
cantidades de eritropoyetina humana en la leche. Esta hormona incrementa la produccin
de glbulos rojos, por lo que utiliza para tratar la anemia. Tambin permite una mayor
resistencia durante el ejercicio fsico. (Izquierdo, 2014) (Ver anexo, Figura 3)

En 1990 naci Tracey, que ms adelante produca el inhibidor de la , protena humana

en su leche y fue creada mediante la tcnica de microinyeccin. (EIBE, 1998)

Pearanda, D. y Asensio, F. (2008) manifiestan que:

Se ha utilizado otro enfoque con las cabras transgnicas. Se ha conseguido producir la

fibra con las que las araas tejen sus telas en la leche de cabras transgnicas. Son
innumerables las aplicaciones potenciales de estas fibras: dispositivos mdicos,
suturas quirrgicas, chalecos antibalas, industria aeronutica y automovilstica,
industria textil, etc. Renneberg (2012) incluye que en la leche de cabra se ha
producido, tambin, con xito un factor para la coagulacin de la sangre. Un rebao

14
 de cien cabras puede suministrar anualmente productos por valor de 200 millones de
dlares. (p.73)

2.10.3. Bovinos transgnicos

A finales de los aos 1980, la empresa holandesa Gene Pharming empez a manipular
embriones de vaca, con el fin de que produjese en su leche la protena humana
lactoferrina. Se manipularon genticamente 2400 embriones, y el animal que vino al
mundo en 1900 no era una hembra. Al ternero se le bautiz con el nombre de
Hermann. A finales de 1993 nacieron sus descendientes. Cinco vacas transgnicas
alcanzaron la madurez sexual y fueron inseminadas artificialmente. Las hijas de
Hermann trajeron terneros al mundo y empezaron a producir leche con lactoferrina
idntica a la que contiene la leche materna humana. (Renneberg, 2012)

2.10.4. Peces transgnicos

La transgnesis en los peces es ms sencilla que en los mamferos. La fecundacin de

los huevos es extra-corporal y el desarrollo de los embriones no se produce dentro de
la madre. All se pueden recoger los huevos con facilidad, y despus de introducir
nuevos genes. Adems, se dispone de muchos ms huevos que en otras especies de
animales.

2.10.4.1. Sumosalmn

Segn EIBE (1998) en 1994, los genetistas canadienses de Vancouver

Fisheries and Ocean Department, en colaboracin con dos investigadores de

EE.UU. y Singapur crearon salmones transgnicos que podan alcanzar en un
ao un tamao once veces mayor al habitual. En un caso incluido se alcanz
una tasa de crecimiento treinta veces mayor a la normal. Estos fueron los
famosos sumosalmones. El transgn que codifica la hormona del crecimiento
se inyecto en 3.000 huevos fecundados, por microinyeccin en el blastocito.
Esta modificacin gentica tambin acelero la maduracin sexual de estos
peces que fueron capaces de reproducirse y transmitir sus capacidades de
crecimiento a su descendencia. Sin embargo, esta tcnica todava no est
controlada por completo: algunos embriones no sobreviven la modificacin.

15
 2.10.4.2. Ms peces de consumo transgnicos

Segn Renneberg (2012):

En la actualidad se cran unos 40 millones de toneladas de pescado anuales en

piscicultura. A las truchas arco iris jvenes se les inyecto hormona del
crecimiento. Los peces crecieron el doble. Sin embargo, es difcil y caro pescar
miles de truchas e inyectarles la hormona. Entonces se produjo truchas
transgnicas. Asimismo, ya se han modificado genticamente peces como el
bacalao, el rodaballo y el halibut. (p.212)

2.10.4.3. El Pez Cebra o GloFish

En Singapur se han diseado variantes transgnicas del pez cebra con

elementos de respuesta a contaminantes del agua que inducen la expresin
de luciferasa y generan luz. Estos peces, emiten luz nicamente cuando se
encuentran en un medio con altos ndices de contaminacin, por metales
pesados o por otros residuos de origen industrial. (Pearanda y Asensio,
2008)

Estos peces cebras han seguido siendo manipulados, y una nueva variante

es fluorescente bajo la luz ultravioleta, se llama GloFish y es el primer animal

domstico transgnico, por solo cinco dlares se puede compra en Japn y en
Estados Unidos. Porta el gen fluorescente de la medusa luminosa (Aequorea
victoria). (Renneberg, 2012)

2.11. Importancia

En cuanto a la importancia de las aplicaciones de la transgnesis en animales segn Lpez

(2004) encontramos:

El estudio de bases genticas de enfermedades.

Modelos para investigacin de infecciones y terapia gentica
Diseos biotecnolgicos en industrias agropecuarias.
Modelos de animales para analizar los efectos de la expresin gentica.
Elaboracin de nuevos alimentos. (p.22)

Por otro lado, Pearanda y Asensio (2008) sostienen que hay mltiples razones que respaldan
la necesidad de criar y producir animales transgnicos, entre ellas podemos destacar:

16
 Avanzar en el conocimiento y descifrar el cdigo gentico.
Estudiar el control gentico de los procesos fisiolgicos.
Construir modelos genticos de enfermedades.

Mejorar la produccin animal, enriqueciendo sus rasgos y consiguiendo nuevos

productos

EIBE (1998) argumenta la importancia de la transgnesis animal porque permite estudiar:

Modelos de enfermedad

Es posible introducir genes mutantes de humanos en ratones, provocando as que padezcan

las enfermedades humanas, con el fin de encontrar tratamientos sin tener que experimentar
con seres humanos.
Mejorar del ganado

Los animales de cra se pueden modificar de forma que tengan un crecimiento ms rpido,
desarrollen menos grasa transformen ms eficazmente los alimentos y resistan a las
enfermedades
Producir medicamentos

Los animales de cra se utilizan para producir medicamentos. Las ovejas, cabras y vacas
transgnicas funcionan como biorreactores para producir protenas humanas importantes
en la leche. (p.8)

2.11.1. Estudio de genes

En el estudio de Pearanda y Asensio (2008) encontramos que:

La produccin de organismos transgnicos ha supuesto un gran avance en el
estudio de la Biologa ya que permite disear animales modificados
genticamente para estudiar genes concretos. El estudio de los efectos biolgicos
derivados de estas manipulaciones genticas, permite obtener informacin sobre
el papel biolgico del gen en el organismo.
Con la introduccin de un nuevo gen, creando un transgnico.
Con la eliminacin de un gen, creando un Knock out.

Con la regulacin de ese gen, ya sea aumentando su expresin o

disminuyndola.

2.11.2. Xenotransplantes

Muchos pacientes mueren antes de tener acceso a un trasplante. Por ello, la

posibilidad de recurrir a especies animales como donantes de rganos se plante
hace ya muchos aos. De hecho, entre los aos 1964 y 1995, se realizaron 32

17
 xenotransplantes de rin, corazn, hgado y mdula sea procedentes
mayoritariamente de chimpanc y mandril, con un resultado negativo en todos los
casos. (Pearanda y Asensio, 2008)

Segn Castro (como se cita en Palma, 2001) actualmente, diversos estudios

demostraron que el cerdo es el animal considerado la mejor opcin como donante
de rganos para los humanos; seremos sin dudas, dentro de algunos aos testigos
de xenotransplantes de rganos entre cerdos transgnicos y seres humanos.

2.11.3. Estudio de enfermedades

Para Pearanda y Asensio (2008), gran parte de las enfermedades humanas tienen
una base hereditaria y estn causadas por mutaciones de genes. Por otra parte,
existe una gran concordancia entre el genoma de los mamferos por lo que, los
modelos de animales transgnicos, son de gran ayuda para comprender el papel de
los genes en el desarrollo de una enfermedad o para reproducir enfermedades
humanas en animales, con el fin de investigar nuevos tratamientos.

Son innumerables las lneas de investigacin que utilizan animales transgnicos

como modelos con resultados iniciales prometedores. El estudio del envejecimiento,
la ateroesclerosis, la diabetes, el Sndrome de Parkinson o las enfermedades
cardiovasculares. (Pearanda y Asensio, 2008)

2.11.4. Fabricas transgnicas

Los animales transgnicos tambin se han manipulado genticamente para ser

productores de una gran cantidad de una sustancia biolgica que se emplea en
medicina y aparece con escasa frecuencia de forma natural. Por ejemplo, se puede
insertar un transgn que codifica una protena humana especfica, como una
hormona o un factor de coagulacin de la sangre, en el genoma de un mamfero de
granja, de manera tal que el producto del transgn se secrete a travs de la leche
del animal, luego puede ser purificado y administrado a personas que lo necesiten.
(EIBE, 1998)

Castro (como se cita en Palma, 2001) argumenta que, la composicin de la leche

ser alterada de modo que nuestros hijos bebern leche modificada de forma tal
que su frmula este enriquecida en protenas deficitarias y de la cual se hayan
eliminado sustancias alergnicas o no bien toleradas.

18
 2.11.5. Industria Agrcola

Duque (2010) sostiene que las aplicaciones en la cra animal alcanzan hasta los
insectos ya que es factible desarrollar, por ejemplo, variantes de insectos
modificados genticamente para controlar plagas, lo cual tendra una repercusin
enorme en algunos cultivos como la vid, frutales, etc. (p.52)

2.12. Controversia

2.12.1. Transmisin de enfermedades en xenotransplantes

Izquierdo (2014) manifiesta que:
Un problema derivado de los xenotransplantes es el riesgo de transmisin de virus
porcinos. Se calcula que el genoma del cerdo posee 50 virus defectivos integrados
establemente y que se transmite de forma mendeliana. Existe el riesgo real que un
paciente de que un paciente-receptor pueda ser infectado. El virus resultante podra
extenderse por la poblacin humana por un periodo de tiempo indefinido. Esta
posibilidad parece remota ya que ha habido 160 personas que en distintos ensayos
clnicos han tenido contacto repetido con clulas vivas de cerdo y ninguna se ha
infectado. Sin embargo, la cautela est justificada, ya que el propio virus del SIDA
probablemente haya llegado al hombre a travs del chimpanc en nico suceso inter-
especies y han bastado 20 aos para una amplia propagacin en la especie humana.
El seguimiento mdico de los pacientes xenotransplantados puede ser el nico
mtodo preventivo aceptable. As, los xenotransplantes basados en cerdos
transgnicos nos ofrece en la actualidad ciertas promesas a costa de inciertos riesgos
que no se pueden desestimar. (p.264)
2.12.2. Diseminacin

En el estudio de Renneberg (2012) encontramos que un transgn podra transmitirse a

la poblacin silvestre a travs de la reproduccin normal. La mayor preocupacin de los
ecologistas recae respecto a los peces transgnicos: no se puede garantizar que no se
escapen de las piscifactoras y se extiendan de forma incontrolada. Trabajos recientes
estn ocupando de la cra de los peces transgnicos que sean estriles y, por lo tanto,
no puedan propagar sus genes.

2.12.3. Reacciones a los productos transgnicos

Las protenas humanas producidas por los animales de granja pueden diferir en ciertos
sentidos de las protenas humanas naturales correspondientes. Por tanto, esas
protenas deben evaluarse con cuidado para garantizar que no produzcan reacciones

19
 alrgicas u otros efectos adversos en los pacientes que las reciben. Adems, la salud y
el bienestar de los animales de granja portadores de genes de seres humanos y de
otras especies son temas importantes que se deben analizar; la escasa fertilidad o el
aumento de la susceptibilidad a las enfermedades son frecuentes. (EIBE, 1998)

Brem, (como se cita en Phler, 1995) en su estudio se refiere a que, un gran problema en la
transgnesis, parece ser la opinin frecuentemente intensa y adversa del pblico y de los
medios hacia la transgnesis. Una razn puede ser que este campo combina dos aspectos
muy sensibles hacia los que el pblico reacciona con discrepancia o aversin: la manipulacin
gentica y los experimentos con animales. Esta combinacin es muy apropiada para
incrementar una ansiedad oculta, as como aversiones ideolgicas.

20
 CONCLUSIONES

La clonacin es un proceso por el cual obtenemos individuos que son copias genticas

exactas, pero no necesariamente asegura que sean fenotpicamente iguales. La clonacin

ha llevado a avances mdicos y cientficos excepcionales, pero viene acompaada de

dilemas ticos y sociales.

La transgnesis animal es la introduccin de un gen forneo en embriones de otra especie,

o, la anulacin o eliminacin un gen presente, estos individuos transgnicos expresarn

estos nuevos genes o la deficiencia de ellos; permitiendo el estudio y el aprovechamiento

de sus aplicaciones.

21
 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

Audesirk, T; Audesirk, G. & Bruce, E. B. (2003). Biologa. La vida en la Tierra. Mxico: Editorial

Impresora Apolo, S.A.

Brem, G. (1995). Animales Transgnicos. En A. Phler (1995). Ingeniera gentica de animales

(pp.107-199). Zaragoza.: Editorial Acribia, S.A.

Castaeda Partida, M. (2004). Clonacin. Revista Digital Universitaria, 5(2), 1-12. Recuperado de

http://www.revista.unam.mx/vol.5/num2/art7/ene_art7.pdf

Castro, F. (2001). Modificacin gentica de animales de granja. En Palma, G. (2001). Biotecnologa

de la reproduccin (pp. 395-411). Buenos Aires, Argentina: Ediciones Instituto Nacional

de Tecnologa Agropecuaria. Recuperado de https://books.google.com.pe/books?id=zm

Hbayu_hfIC&pg=PA396&dq=transg%C3%A9nesis&hl=es419&sa=X&ved=0ahUKEwi5q7zj

69XNAhXE6CY KHXKVCDgQ6AEIJTAC#v=onepage&q=transg%C3% A9nesis&f=false

Curtis, H. & Barnes, S. (2000). Biologa. Buenos Aires, Argentina: Editorial Panamericana Medica.

Duque, J. (2010). Biotecnologa. Panormica de un sector. La Corua, Espaa: Netbiblo.

Recuperado de https://books.google.com.pe/books?id=77eWLHLyMNcC&pg=PA46&dq=

biotecnologia+animal&hl=es&sa=X&redir_esc=y#v=onepage&q=biotecnologia%20anima

l&f=false

Hickman, C. P.; Roberts, L. S. & Larson, A. (2001). Zoologa. Principios integrales. Madrid, Espaa:

Interamericana.

Iez Pareja, E. (s.f.). Clonacin: aspectos cientficos. Recuperado de

http://www.ugr.es/~eianez/Biotecnologia/Clonacion.html

Iniciativa Europea para la Enseanza de Biotecnologa (EIBE) (1998). Animales transgnicos.

Recuperado de http://archiv.ipn.uni-kiel.de/eibe/Unit11ES.pdf

22
Iraburu, M. (2013). Clonacin. Grupo de Investigacin. Ciencia, Razn y Fe. Pamplona, Espaa:

Editorial de la Universidad de Navarra. Recuperado de

http://www.unav.edu/web/ciencia-razon-y-fe/sobre-la-clonacion

Izquierdo, M. (2014). Curso de Gentica molecular e ingeniera gentica. Madrid, Espaa:

Ediciones Pirmide, Grupo Amaya, S.A.

Lester, L. & Hefley, J. (2000). Clonacin Humana. Michigan, EE.UU.: Editorial Portavoz. Recuperado

de https://books.google.com.pe/books?id=00IIDaWxSlAC&pg=PA51&dq=clonacion&hl=e

s&sa=X&redir_esc=y#v=onepage&q=clonacion&f=false

Llus Montoliu, J. (2004). Clonacin en mamferos: aspectos cientficos e implicaciones

teraputicas. En Bernard Miana, A. (2004). ltimas Investigaciones en Biologa: Clulas

Madre y Clulas Embrionarias. Madrid, Espaa: Aulas de Verano. Ministerio de

Educacin y Ciencia de Espaa. Recuperado de https://books.google.com.pe/books?

id=Xgq-

kjkRcG4C&pg=PA5&dq=ultimas+investigaciones+en+biologia+celulas+madre+y+celulas+

embrionarias&hl=es-419&sa=X&redir_esc=y#v=onepage&q=ultimas%20investigaciones

% 20en%20biologia%20celulas%20madre%20y%20celulas%20embrionarias&f=false

Lpez Guerrero, J. (2004). La Tesis de Rebeca. Los Apuntes de una joven investigadora. Madrid,

Espaa: Editorial Hlice. Recuperado de https://books.google.com.pe/books?id

=S4gFDilvH9kC&pg=PA21&dq=transgenesis+espa%C3%B1ol&hl=es419&sa=X&ved=0ahU

KEwjU_5e75tXNAhWBRyYKHc5_AwoQ6AEILjAD#v=onepage&q=transgenesis%20espa%C

3%B1ol&f=false

McLaren, A. (2003). Clonacin. Madrid, Espaa: Editorial Complutense.

23
Palma, G. (2008). Biotecnologa de la reproduccin. Santiago de Estero, Buenos Aires: Ediciones

Reprobiotec. Recuperado de http://www.reprobiotec.com/libro_verde/cap_01.pdf

Palma, G. & Brem, G. (1993). Transferencia de embriones y biotecnologa de la reproduccin en la

especie bovina. Santiago de Estero, Buenos Aires. Recuperado de

http://www.reprobiotec.com/libro_rojo/capitulo_12.pdf

Pearanda, D. & Asensio, F. (2008). Animales Modificados Genticamente (II) Aplicaciones.

Biotecnologa, 64-73. Recuperado de http://www.cicv.cl/sites/default/files/

aplicaciones_de_animales_transgenicos.pdf

Renneberg, R. (2012). Biotecnologa para principiantes. Barcelona, Espaa: Editorial Revert, S.A.

Vallverd, J. (2007). Clones? La percepcin cientfica y el primer gato clonado. Revista Laguna, 20,

49-67. Recuperado de http://publica.webs.ull.es/upload/REV%20LAGUNA/20%20-

%202007/04%20(Jordi%20Vallverd%C3%BA).pdf

24
ANEXOS
25
 Figura 1 La historia de Dolly

(Audesirk, T; Audesirk, G. y Bruce,

2003, p. pgina)

Figura 2 Ratn gigante y ratn segregador de t-PA humano

(Renneberg, 2012, p. 210)

26
Figura 3 Cerdo transgnico

(Izquierdo, 2014, p. 253)

27