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I. INTRODUCCIN

La atmsfera no tiene una microbiota autctona pero es un medio para la

dispersin de muchos tipos de microorganismos (esporas, bacterias, virus y
hongos), procedentes de otros ambientes. Algunos han creado adaptaciones
especializadas que favorecen su supervivencia y permanencia. Los
microorganismos dispersados por el aire tienen una gran importancia biolgica y
econmica. Producen enfermedades en plantas, animales y humanos, causan
alteracin de alimentos y materiales orgnicos y contribuyen al deterioro y
corrosin de monumentos y metales. La Microbiologa del aire comienza en el
siglo XIX, con Pasteur y Miquel que disearon mtodos para estudiar los
microorganismos en el aire y descubrir la causa de algunas enfermedades.
Desde entonces numerosos investigadores han trabajado en este campo tanto
en el aire exterior como en recintos cerrados. Las enfermedades transmitidas por
el aire, producidas por bacterias, virus y hongos, son las respiratorias (neumona,
tosferina, tuberculosis, legionelosis, resfriado, gripe), sistmicas (meningitis,
sarampin, varicela, micosis) y alrgicas.

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II. OBJETIVOS

Determinar y evaluar la calidad del ambiente del laboratorio, si se

encuentra dentro del rango de lmites mximos permisibles, tomando
como referencia la norma R.M 461 - 2007 MINSA.

Observar la presencia de microorganismos en el aire mediante un mtodo

cualitativo (Agar Plate Count).

Realizar adecuadamente mediante el mtodo de cuenta en placa, el

nmero de aerobios mesfilos viables presentes en el aire.

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III. FUNDAMENTO TEORICO

1.- AEROBIOS MESFILOS

Definicin:

Bacterias mesoflicas son las Bacteria que descompone la materia orgnica a

temperaturas que oscilan entre 30 y 40 C.
Bacteria que descompone la materia orgnica a temperaturas que oscilan entre
30 y 40 C. El agua es utilizada como medio de eliminacin de excretas y otros
desechos; puede tambin contener microorganismos patgenos de asiento no
intestinales (flora de la piel por ejemplo); estos son los llamadas bacterias
mesoflicas.

BACTERIAS AEROBIAS MESFILOS:

Caractersticas

-Se multiplican en aerobiosis

-Temperatura de incubacin entre los 20 y los 37C
-Pueden ser patgenas o saprofitas
-Recuentos altos en alimentos estables a menudo indican materias primas
contaminadas o tratamientos no satisfactorios desde el punto de vista sanitario.
-En los productos perecederos pueden indicar tambin condiciones inadecuadas
de tiempo/temperatura durante su almacenamiento.
-La presencia de un nmero elevado de bacterias aerobias mesfilos que crecen
bien a temperatura corporal o prxima a ella, significa que puede haberse dado
condiciones favorables a la multiplicacin de los microorganismos patgenos de
origen humano o animal.
-Todas las Bacterias patgenas conocidas vehiculadas por los alimentos son
mesfilos y en algunos casos contribuyen con su presencia a los recuentos en
placa encontrados.

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DESARROLLO HISTRICO DE LA MICROBIOLOGA DEL AIRE

La existencia de una multitud de corpsculos en el aire fue observada desde la

antigedad. Lucretius (55 a.C.) observ las partculas de polvo brillando en un
rayo de sol en una habitacin oscura y concluy que su movimiento se deba al
bombardeo de innumerables e invisibles tomos en el aire, aunque fue necesario
esperar al descubrimiento del microscopio para ver que en el aire haba
microorganismos vivos. Las esporas de los hongos fueron vistas por un botnico
napolitano, Valerius Cordus, en el siglo XVI, pero fue Micheli (1679-1737) quien
primero las dibuj observando las esporas de los mohos que se transmitan por
el aire (Miquel y Cambert, 1901). Leeuwenhoek (1722) observa y describe por
primera vez las bacterias en distintos ambientes y supone que estos
animlculos pueden ser transportados por el viento mediante el polvo que flota
en el aire. Un siglo despus, Ehrenberg, en sus numerosas memorias
publicadas de 1822 a 1858, demostr que tanto las partculas atmosfricas del
interior de las casas y hospitales como las del aire exterior de elevadas montaas
estaban compuestas de esporas criptogmicas. En esta misma poca en
Francia, Gaultier de Claubry (1855), inaugura la investigacin cientfica
estudiando las partculas atmosfricas mediante un procedimiento que las
retiene haciendo borbotear el aire en agua destilada. Pero fue Pasteur el que
perfeccion los procedimientos empleados por este investigador y realiz los
primeros estudios precisos de las bacterias del aire, cuando demostr la no
existencia de la generacin espontnea. El mtodo utilizado consisti en hacer
pasar un volumen determinado de aire con ayuda de un aspirador por algodn-
plvora colocado en un tubo de vidrio, que posteriormente se disolva en alcohol-
ter.

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ORIGEN DE LOS MICROORGANISMOS

En el aire hay microorganismos, aunque no se puede asegurar que existe un

verdadero aeroplankton que viven, se alimentan y se reproducen
permanentemente en l. Muchos microorganismos que viven en la hidrosfera y
litosfera pueden encontrarse en el aire. Son microbios alctonos, procedentes
del suelo, agua y seres vivos que pueblan estos ambientes. Los movimientos del
aire y de los seres vivos son los que sitan a los microorganismos en la
atmsfera. Junto al suelo hay una capa laminar de aire que impide el fcil paso
de microorganismos del suelo al aire. Para que pasen se necesita una fuerte
corriente de aire que levante polvo del suelo o agua de sus depsitos (mares,
ros...). Tambin las plantas los lanzan en sus movimientos de dehiscencia y
diseminacin (polen, esporas...) y los animales en los actos respiratorios
normales y anormales (estornudos, gotas de Pflgge...). A menudo, tanto las
esporas como los microorganismos vegetativos entran en la atmsfera como
bioaerosoles, que pueden formarse por muchas causas: lluvia, movimiento del
agua en los ros y mar, tratamiento de aguas residuales, aspersores de riego,
aire acondicionado o secreciones respiratorias del hombre y de los animales.
sta ltima es muy importante en la dispersin de bacterias patgenas y virus
animales. Los microorganismos tambin pueden encontrarse en el aire sobre
partculas de polvo o en el suelo (Atlas y Bartha, 2002).

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TIPOS DE MICROORGANISMOS

El aire contiene en suspensin diferentes tipos de microorganismos,

especialmente bacterias y hongos. La presencia de uno u otro tipo depende del
origen, de la direccin e intensidad de las corrientes de aire y de la supervivencia
del microorganismo. Algunos microorganismos se encuentran en forma de
clulas vegetativas, pero lo ms frecuente son las formas esporuladas, ya que
las esporas son metablicamente menos activas y sobreviven mejor en la
atmsfera porque soportan la desecacin. Las producen hongos, algas,
lquenes, algunos protozoos y algunas bacterias. En el aire se aslan
frecuentemente bacterias esporuladas de los gneros Bacillus, Clostridium y
Actinomicetos (Underwood, 1992). Entre las bacterias tambin son muy
frecuentes los bacilos pleomrficos Gram positivos (Corynebacterium) y los
cocos Gram positivos (Micrococcus y Staphylococcus). Los bacilos Gram
negativos (Flavobacterium, Alcaligenes) se encuentran en menor proporcin y
disminuyen con la altura (Gregory, 1973; Pelczar et al., 1993). Cladosporium es
el hongo que predomina en el aire, tanto sobre la tierra como sobre el mar,
aunque tambin es frecuente encontrar otros mohos, como Aspergillus,
Penicillium, Alternaria y Mucor (Takahashi, 1997) y la levadura Rhodotorula
(Underwood, 1992). Los virus tambin pueden encontrarse en el aire y ser
transportados por l. Numerosos virus humanos (Orto y Paramixovirus, Poxvirus,
Picornavirus) se transmiten por va respiratoria, principalmente en ambientes
cerrados, y pueden formarse bioaerosoles de virus entricos en las plantas de
tratamiento de aguas residuales. Por otro lado, pueden encontrarse virus de
vegetales en aerosoles procedentes de plantas infectadas. Se han descrito
numerosos gneros de algas aisladas del aire procedentes del suelo y de lagos
eutrficos. As mismo, amebas de vida libre como Naegleria y Acanthamoeba
pueden ser aerolizadas de forma natural (lagos, manantiales termales) o artificial
(sistema de aire acondicionado o humidificadores) (Stetzenbach, 1997).

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NMERO Y DISTRIBUCIN DE MICROORGANISMOS

El nmero de microorganismos de la atmsfera cambia segn la altura (10-104

por m3), obtenindose el ms alto junto al suelo, sobre todo en los dos metros
inferiores, que constituyen el microclima del hombre, disminuyen hasta los 200
metros y luego se hacen ms escasos hasta los 5.000 metros, su presencia es
rara hasta el lmite de la troposfera y no se encuentran en la estratosfera. El
nmero de microorganismos del aire en las zonas pobladas depende de la
actividad en esa zona, tanto industrial o agrcola, como de los seres vivos y la
cantidad de polvo. El nmero de microorganismos es mayor en las zonas
pobladas y despus en el mar, cerca de las costas. En las zonas desrticas no
hay ms que lo que aportan los vientos de las zonas habitables prximas y en
los casquetes polares no hay nada. En las zonas con clima seco, el aire contiene
numerosos microorganismos y el nmero desciende despus de la lluvia debido
a que sta los arrastra por lavado del aire. Hay variaciones estacionales en el
nmero de microorganismos en la atmsfera. Los hongos son tpicamente ms
abundantes en verano que en el resto del ao, mientras que las bacterias son
ms abundantes en primavera y otoo debido a factores como la temperatura,
humedad relativa del aire, exposicin a la luz solar, etc... (Bovallius et al., 1978).

PERMANENCIA

El tiempo que permanecen los microorganismos en el aire depende de la forma,

tamao y peso del microorganismo y de la existencia y potencia de las corrientes
areas que los sostengan y los eleven. Son factores adversos los obstculos,

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que al oponerse a los vientos, disminuyen su velocidad y su potencia de arrastre,

y las precipitaciones, que arrastran al suelo las partculas suspendidas. La
sedimentacin de los microorganismos por gravedad slo es importante en el
aire en calma. Generalmente, hay demasiadas turbulencias para que esto
suceda, excepto en zonas de vegetacin densa, donde la velocidad del viento
disminuye, o en condiciones estables durante la noche, cuando la capa laminar
limitante alcanza varios metros de altura.

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IV. MARCO EXPERIMENTAL

1. MATERIALES Y EQUIPOS

MECHERO DE BUNSEN TERMMETRO

PICETA PLACA PETRI

MUESTRA LEJIA

MEDIO AMBIENTE DEL LABORATORIO

AGAR PLATE COUNT PROBETA

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2. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. Fundir el medio de cultivo Agar Plate Count. Colocamos el Agar Plate

Count en un vaso de precipitado con agua de 250ml y lo sometemos a
calor hasta fundirlo (temperatura de 50 C A 60C).

2. Colocar en la placa de 10-15 ml del medio de cultivo y dejar enfriar hasta

que este frio, evitar que se contamine durante el enfriamiento en todo
momento debe permanecer tapado.

3. Ubicar el lugar donde se realizar el plaqueo y de acuerdo al tipo de

bacteria a identificar colocar las placas y el tiempo necesario para
aerobios Mesfilos, mohos y levaduras. Dejar 15 minutos expuesta al
ambiente y luego cerrar. En nuestro caso, fue en el rea donde se
hallaban paltas en descomposicin.

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4. Identificar la placa y colocarlo en la incubadora para el crecimiento durante

24-72 horas a 37C.

5. Despus sacamos nuestra muestra de la incubadora y contamos colonias.

6. Una vez terminado el conteo, realizamos la asepsia de nuestra placa Petri,

metemos dicha placa en una bolsa ziplot y posteriormente en un bao
mara, aproximadamente 15 min a unos 80C, esto har que el contenido
de la placa se diluya, se deposite en la bolsa ziplot y podamos desecharlo.
Lavamos la placa Petri con leja.

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V. DISCUSIN DE RESULTADOS

En nuestro caso solo encontramos 105 colonias.

105 /15

El resultado obtenido en el conteo nos indic que el laboratorio de microbiologa,

al menos la parte en la cual se expuso las muestras (lugar donde se encuentran
las paltas) un rea no apta para realizar actividades.

-INFORME DE ENSAYO

Anlisis : Plaqueo ambiental

Lugar : Laboratorio de microbiologa (FIQ - UNAC)
Fecha de Muestreo : 09/10/2017
Fecha de Ejecucin : 09/10/2017

-RESULTADOS OBTENIDOS

Microorganismo Crecimiento Color Resultado(UFC/min)

Aerobios Satisfactorio Crema 105 UFC/15min

mesfilos

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RESULTADOS EN EL LABORATORIO

ENSAYO/ LABORATORIO LIMITE FORMA DE LA

MANIPULADOR DE COLONIA
MAXIMO
MICROBIOLOGIA
PERMISIBLE

Aerobios Colonias filamentosas

Mesofilos
105 UFC/15min 15UFC/15min Colonias circulares

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VI. CONCLUSIONES

El nmero de colonias de Aerobios Mesofilos, Mohos y Levaduras en

la placa petri fue 105 ufc/15min.
Comparando los resultados con el LMP que es de 15UFC/15min se
puede decir que nuestra muestra: Laboratorio de microbiologa. Es un
rea no apta para realizar prcticas y actividades, ya que el resultado
no est dentro del LMP.

VII. RECOMENDACIONES

Controlar correctamente el tiempo de exposicin de la placa al ambiente

(15minutos), ya que este es un factor influyente en los resultados.

Mantener una limpieza adecuada tanto en las superficies de trabajo como

en los utensilios que hay que emplear.

No sacarnos en ningn momento ningn implemento personal porque

podramos contaminar la muestra a tratar.

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VIII. ANEXO

CUESTIONARIO

1. Cules son los microorganismos patgenos que se encuentran en

ambientes donde se preparan alimentos?

Las bacterias son los patgenos ms habituales en los alimentos, aunque no son
los nicos. Virus, mohos y levaduras tambin suelen frecuentar los alimentos.
Las bacterias pueden causar al consumidor infeccin e intoxicacin, son dos
consecuencias diferentes. La infeccin se produce por la ingesta de alimentos
contaminados con bacterias vivas que entran en el husped y provocan la
enfermedad. La intoxicacin, en cambio, aparece cuando se ingieren alimentos
que antes se han contaminado con bacterias que producen toxinas, y estas
ltimas son las que causan la enfermedad. Sin embargo, el denominador comn
de todas ellas son los sntomas gastrointestinales que producen: dolor
abdominal, nauseas, vmitos, diarreas, calambres, fiebre, etc.

Entre las ms habituales son las siguientes:

-Salmonella

-E. coli

-Listeria monocytogenes

-Campylobacter jejuni

-Staphylococcus aureus

-Shigella

-Yersinia enterocoltica

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2. Cules son los LMP de los microorganismos que se encuentran

presentes en ambiente de trabajo en EEUU y la Comunidad Europea?

Diferentes organizaciones internacionales como la OMS y el CIBC (International

Council of Building Research), privadas como la ASHRAE (American Society of
Heating Refrigerating and Air Conditioning Engineers), y algunos pases como
Suecia (The Swedish Council of Building Research), Estados Unidos, Canad y
Australia han desarrollado guas y estandards de exposicin. Referencias de la
necesidad de renovar el aire de ambientes cerrados con aire fresco se conocen
ya desde mediados del siglo XVIII recomendndose aportaciones de aire fresco
mnimas, por ocupante, para diluir las concentraciones de bioefluentes humanos
y evitar las molestias debidas a malos olores. En los aos 70, ASHRAE publica
diversos trabajos recomendando una aportacin de aire fresco mnima de 34
m3/h por persona para evitar los malos olores y un mnimo absoluto de 8.5 m3/h
por persona para mantener la concentracin de dixido de carbono por debajo
de 2500 ppm, que es la mitad del lmite de exposicin promedio permisible en un
ambiente laboral. En el ms reciente ASHRAE Standard 62-1989 se recomienda
un mnimo de 25.5 m3/h por persona para aulas de clase, 34 m3/h para oficinas
y 42.5 m3/h para hospitales (zona de enfermos). Este estndar recomienda
tambin aumentar dichos volmenes cuando hay problemas de mezcla del aire
en la zona de respiracin o fuentes inhabituales de contaminacin. Por otro lado,
no hay que olvidar que la finalidad primaria de un sistema de aire acondicionado
en un edificio de oficinas es proporcionar un buen nivel de confort trmico. Segn
ASHRAE 55-1981, la temperatura interior debe mantenerse entre 20 y 24 C en
invierno y entre 23 y 26 C en verano. Este estndar no especifica la humedad
relativa, que se considera que debe estar entre el 20 y el 60% (preferiblemente
del 30 al 50%). En la Tabla 3 se presentan los valores indicados en la Ordenanza
General de Seguridad e Higiene en el Trabajo.

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