Alumno: Chaparro Dionisio Juan Carlos Clave: 56

Prctica No 7 Cromatografa En Columna

Introduccin.
Los mtodos de separacin de mezclas ms modernos y sofisticados que se utilizan
en la qumica orgnica estn involucrados con algn tipo de cromatografa. La
cromatografa est definida como la separacin de una mezcla de dos o ms
componentes diferentes (en algunos casos, iones) por distribucin en dos fases,
una la cual es la estacionaria y la otra la mvil. Varios tipos de cromatografa son
posibles, dependiendo de la naturaleza de las dos fases involucradas; en las que
se encuentran los mtodos slido- lquido (columna, capa fina, y papel), lquido-
lquido y gas-lquido. Bsicamente, los mtodos dependen de las diferentes
solubilidades (o absorciones) de las sustancias que sern separadas con respecto
a las dos fases entre las cuales deben ser particionadas.
En este tipo de cromatografa, la fase estacionaria utilizada, es decir, el absorbente,
se coloca en el interior de una columna de vidrio. La fase estacionaria se impregna
con el eluyente o fase mvil. Seguidamente la mezcla orgnica que nos interesa
separar la depositamos por la parte superior de la fase estacionaria, y as la fase
mvil podr ir atravesando el sistema. Los compuestos que se encuentran disueltos
en la fase mvil, poco a poco saldrn de la columna cromatogrfica, y se recogen
en fracciones. Las fracciones menos polares, que son por lo general las que se
retienen poco o nada en el absorbente, sern las primeras en salir de la columna.
En cambio, las sustancias ms polares, quedan retenidas por ms tiempo en el
absorbente, y a menudo es necesario el uso de diferentes disolventes con la
finalidad de incrementar su polaridad para que sean arrastradas por estos.
El tiempo que se necesita para hacer fluir un compuesto por la columna, se conoce
con el nombre de tiempo de retencin. Este tiempo vara, siendo caracterstico de
cada compuesto en una condicin cromatogrfica determinada, que varan segn
el absorbente usado, el disolvente, la presin, el dimetro que tenga la columna
utilizada, etc.
El absorbente mayormente utilizado para las cromatografas en columna, es el gel
de slice. A veces, en sustitucin del gel de slice, cuando ste es incompatible con
la mezcla a cromatografar, se utilizan la almina o el florisil (silicato magnsico). La
cromatografa en columna puede realizarse por gravedad o a media presin.
Cuando se realiza a media presin, se conecta la cabeza de la columna a un
compresor o a una lnea de aire comprimido.
A causa de la disminucin del tamao de las partculas del absorbente, se produce
una separacin ms eficaz. Generalmente la cromatografa a media presin,
produce mejores resultados que la cromatografa por gravedad y, adems, al ser
ms rpida, es la ms utilizada.
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Resultados y anlisis de resultados.

Se colectaron las fracciones de la cromatografa en 8 viales y a cada vial se le

realiz una prueba en cromatografa de capa fina para poder analizar los
componentes que se obtuvieron de la cromatografa en columna. Como se puede
observar en la fig.1 se lograron analizar 3 diferentes compuestos que, para
conocer la identidad de cada uno, se realiz una quinta cromatoplaca testigo,
donde se colocaron 2 aplicaciones en cada carril de cada uno de los compuestos
obtenidos.
En el carril 1. Se coloc la muestra de paracetamol

En el carril 2. Se coloc la muestra de cido acetil saliclico.

En el carril 3, se coloc la muestra de cafena.

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Al comparar la cromatoplaca testigo con las placas de los viales se logr identificar
que el compuesto que eluy ms y que por ende tiene un Rf mayor en comparacin
a los otros dos, fue el cido acetil saliclico, la que ms se retuvo fue la cafena que
tiene el menor Rf y por ltimo la que tuvo un Rf intermedio fue el paracetamol.
Con esta informacin tambin se logr identificar el compuesto ms polar y el menos
polar: la cafena result ser el compuesto ms polar de los tres, seguido del
paracetamol para terminar con el cido acetil saliclico como el menos polar de los
tres, con respecto a las cromatoplacas. Adems de que ocurri lo que se esperaba,
las fracciones con el componente menos polar fueron las que primero fueron
saliendo y la fraccin con el componente ms polar fue el ltimo en obtenerse.
Conclusin.
La cromatografa en columna es un mtodo bastante til para poder separar o
purificar mezclas en grandes cantidades, adems de que es posible obtener los
compuestos por separado, pues en los primeros eluatos se obtiene el compuesto
menos polar y en los ltimos eluatos el componente ms polar. Que a su vez nos
puede dar informacin sobre si la mezcla es pura o no.
Tambin nos proporciona informacin cualitativa y hasta cuantitativa de la mezcla
separada. Va seguir el mismo principio de la cromatografa en capa fina que va ser
la separacin por medio de las interacciones entre la fase mvil y la estacionaria
que se basan principalmente en la polaridad de los componentes de la mezcla.
Cuestionario:
1. Indique algunas de las aplicaciones de la cromatografa de adsorcin. Se
utiliza tanto con fines analticos (identificacin de sustancias) como con fines
preparativos (aislamiento)
2. Diga cul es la diferencia entre una cromatografa en capa fina y la de
columna. En la de capa fina se analizan simultneamente la muestra y el patrn,
mientras que en la cromatografa en columna las muestras se analizan
individualmente. Adems, las muestras que son difciles de separar, se pueden
resolver utilizando dos disolventes diferentes por desarrollo de la placa en
direcciones perpendiculares.
Otra ventaja es que, si los componentes no se pierden en los vapores que rodean
la placa, todos estarn en algn lugar de la misma, mientras que en la
cromatografa en columna algunos componentes no eluyen y se pierden. Y a esto
se suma que la placa de cromatografa en capa fina se usa una sola vez, por lo
que se pueden utilizar condiciones severas de separacin.
3. Qu debe hacerse para encontrar el eluyente adecuado para un
compuesto que se purificara en cromatografa en columna? usualmente el
solvente menos polar en el que el material es fcilmente soluble, en general, los
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solventes son compuestos orgnicos. Ellos tambin pueden ser adsorbidos por el
empaque en la columna de cromatografa y competir con los componentes de la
muestra
4. Por qu es necesario realizar una cromatografa en capa fina a los
eluatos obtenidos de la columna cromatogrfica? Para conocer qu
compuesto fue el que eluy ms y cual menos, para poder as conocer la
polaridad que presenta cada uno con respecto a los dems
5. Escriba una lista de eluyentes utilizados en cromatografa en columna en
orden de polaridad creciente. Anote su bibliografa
1)Pentano 4)Dietil ter 7)Etanol
2)Ciclohexano 5)Acetato de etilo 8)Metanol
3)Cloruro de metilo 6)Acetona 9)agua
Mayo D., Dike R., Forbes D., Microscale Organic Laboratory: with Multistep and Multiscale
Syntheses, 5 ed., USA, Wiley, 2011. Pag: 140

Bibliografa:
Mayo D., Dike R., Forbes D., Microscale Organic Laboratory: with Multistep
and Multiscale Syntheses, 5 ed., USA, Wiley, 2011. Pags: 139-144
Pasto D. J., Johnson C. R., Miller M. J., Experiments and Techniques in
Organic Chemistry, Prentice Hall, 1992. Pags: 406-407
Fessenden R. J., Fessenden J. S., Organic Laboratory Techniques, 3 ed.,
Brooks and Cole, USA, 2001 pags: 105-108
Vogel A. I., Practical Organic Chemistry, 5 ed., Longman Scientific &
Technical, London, 1989. Pag:197-200
8. Pavia D. L., Lampam G. M., Kriz G. S. Engel R., A Small Scale Approach
to Organic Laboratory Techniques, 3 ed., Brooks and Cole, USA, 2011.
Pags 580-582
Consultados: 19, octubre, 2017