Una introduccin a los avances cientficos

en el campo de la Medicina Regenerativa.

Presentacin
Susana Rodriguez
Periodista.
Experta en temas de Educacin

Texto
Diego Martnez Caro
Profesor Emrito de Cardiologa.
Universidad de Navarra

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Autor: Diego Martnez Caro
Editor: Diego Martnez Caro
Depsito Legal: PM 2815-2008
ISBN: 978-84-612-8083-4

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 PRESENTACIN

El ser humano es curioso por naturaleza. Desde el principio de los

tiempos, cuando el primate evolucion hasta convertirse en un ser
pensante, comenz a investigar, a observar y a intentar explicar
las fuerzas de la naturaleza. Sin quererlo, el hombre primitivo
comenz a aplicar en su vida el mtodo cientfico.
Observaba la evolucin de las estaciones y, al mismo tiempo, se
daba cuenta de que su propio cuerpo cambiaba, desde que era un
beb hasta que la vejez o la propia naturaleza le vencan. Su
curiosidad innata le llev a intentar curar sus heridas con plantas
que estaban a su alcance. Quiso paliar el dolor con cortezas, races
y emplastos, y quiso, siempre ha querido, alargar su propia vida,
araar unos meses, quizs unos aos, a la certeza de la muerte.
La astronoma, las matemticas y la medicina avanzan a pasos
agigantados durante los florecientes aos del Antiguo Egipto. En
la Edad Media, los cientficos de la poca se lanzaron en la
bsqueda de respuestas para los enigmas del universo. Nacen las
primeras universidades en Bolonia (ao 1088), Pars (1150) y
Oxford (1167). En sus aulas se debaten y se rebaten las teoras de
los primeros cientficos, se completan estudios y se inician nuevas

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investigaciones. Los pensadores basan sus afirmaciones en la
experimentacin y, ya entonces, los avances tecnolgicos facilitan
su labor.
El tiempo pasa inexorable, pero va dejando una estela de
brillantes cientficos, personas curiosas que dedicaron su vida a
dar respuesta a las preguntas que todos nos hacemos.
En la actualidad, ciencia y tecnologa estn indisolublemente
unidas. No hay ciencia sin tecnologa, ni tecnologa sin ciencia.
Dos brazos de un mismo cuerpo. De hecho, la ciencia aparece en
la propia definicin de tecnologa: Conjunto de teoras y de
tcnicas que permiten el aprovechamiento prctico del
conocimiento cientfico. La tecnologa sirve para satisfacer
necesidades elementales y para hacer avanzar a la humanidad. Se
mire donde se mire, nada funciona sin tecnologa.
En los ltimos tiempos, los avances cientficos, especialmente los
que se refieren a la medicina, son tan rpidos e impresionantes
que apenas tenemos tiempo de asimilar uno cuando ya hay otro
descubrimiento en las portadas de todos los medios de
comunicacin. Porque la ciencia, adems, est ahora al alcance de
todo el mundo. Los cientficos han abandonado las aulas de las
universidades para explicar a pie de calle en qu consiste su
trabajo y para qu sirve eso a lo que llevan varios aos dedicados.
Los cientficos han conseguido desarrollar la tcnica para
recomponer miembros amputados, han logrado que cncer no
siempre sea sinnimo de muerte, han presentado impresionantes

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avances en prevencin y enfermedades que hasta hace pocos aos
tenan una mortalidad elevada, se han convertido ahora en
enfermedades crnicas que permiten a los pacientes hacer una
vida prcticamente normal.
Sin embargo, uno de los avances ms impresionantes de los
ltimos aos es, sin duda, el relacionado con la investigacin de
clulas madre. Estas clulas parecen guardar el secreto de la
salud, ser capaces de resolver situaciones tan graves como las
dolencias cardiacas, el Parkinson, el Alzheimer, el sndrome de
Down, la esclerosis lateral amiotrfica, y un largo etctera. Sin
duda, no son la panacea, pero suponen un paso de gigante en la
consecucin de terapias que, definitivamente, otorguen una mejor
calidad de vida a una poblacin que est consiguiendo vivir cada
vez ms aos.
En contra de lo que pueda parecer, la investigacin con clulas
madre se remonta a mediados del siglo XIX, cuando un grupo de
cientficos descubrieron que algunas clulas de la mdula sea
podan generar otro tipo de clulas de estirpe diferente a la suya.
Pero no fue hasta los primeros aos del siglo XX cuando se
descubrieron las primeras clulas madre reales, al descubrir que
algunas clulas podan generar clulas sanguneas.
Los estudios avanzaban tmidamente, porque los cientficos
todava no tenan muy claro cules podan ser las aplicaciones de
esas clulas. En 1963 los doctores Ernest A. McCulloch y James
E. Till describen por primera vez, de manera documentada, la

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actividad autoregenerativa de las clulas seas de un ratn
trasplantado. Ser entonces cuando comience la bsqueda de
clulas madre en animales y en seres humanos.
Los aos entre 1980 y 1990 fueron cruciales por la introduccin
de tcnicas que permitieron analizar y alterar el material gentico.
El descubrimiento de mtodos para reproducir clulas humanas en
el laboratorio abre las puertas a la bsqueda de clulas madre
humanas.
Desde entonces, cada ao se publican aproximadamente 2.000
artculos cientficos sobre clulas madre embrionarias y adultas.
Las primeras estn todava sometidas a ensayos experimentales,
pero las adultas ya se utilizan en tratamientos para un centenar de
enfermedades, como la leucemia, el sndrome de Hunter o
problemas cardiacos.
La historia no se detiene. Ahora, el objetivo es conseguir
desarrollar en el laboratorio, a partir de clulas madre, tejidos y
rganos que puedan reparar o sustituir a los daados o enfermos.
La leucemia fue la primera enfermedad que se intent curar con
clulas madre. En 1956, el doctor Edward Donnall Thomas
trasplant clulas madre adultas a un paciente con leucemia, que
se cur por completo. La leucemia se considera un cncer de la
sangre que se desarrolla en la mdula sea, donde se producen las
tres clulas principales de la sangre: Los glbulos blancos, que
luchan contra la infeccin, los glbulos rojos, que transportan el
oxgeno, y las plaquetas, que intervienen en la coagulacin de la

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sangre. Cuando un nio tiene leucemia, la mdula sea, por
razones que an se desconocen, comienza a fabricar glbulos
blancos que no maduran correctamente, pero que continan
reproducindose. Las clulas normales sanas nicamente se
reproducen cuando hay suficiente espacio para ellas. El cuerpo
puede regular la produccin de clulas al enviar seales para parar
dicha produccin. Cuando se sufre de leucemia, dichas clulas no
responden a las seales de cesar la reproduccin, aunque ya no
haya espacio para ellas.
Estas clulas anormales se reproducen muy rpidamente y no
funcionan como glbulos blancos sanos, cuya tarea es combatir
las infecciones. Cuando los glbulos blancos inmaduros, llamados
blastos, comienzan a desplazar a las clulas sanas de la mdula
sea, el nio experimenta los sntomas de la leucemia
(infecciones, anemia, sangrado). El doctor Donnall Thomas vea
cmo la enfermedad acababa con la vida de sus pacientes y, junto
con su equipo, comenz a investigar con la posibilidad de utilizar
las clulas madre para acabar con la leucemia. El objetivo del
tratamiento es lograr la remisin completa de la enfermedad,
erradicarla de la mdula sea mediante quimioterapia y, despus,
introducir nuevas clulas madre que restablezcan la funcin
normal de la mdula sea.
Sin embargo, el camino hasta el xito no fue corto ni sencillo.
Unos aos antes, a principios del siglo XX, varios mdicos
intentaron administrar va oral materia sea a pacientes con

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anemia o leucemia. La terapia no funcionaba. Comenzaron
entonces, en el laboratorio, los primeros ensayos con ratones a los
que se les administraba en sangre clulas de la mdula sea de
otros ratones. La tcnica no se experiment en seres humanos
hasta que un mdico francs hizo un importante descubrimiento
sobre el sistema inmunitario: En 1958, Jean Dausset, que aos
ms tarde consigui el Premio Nobel de Medicina, identific el
primero de muchos antgenos histocompatibles humanos. Esas
protenas, halladas en la superficie de ms clulas en el cuerpo, se
denominaron antgenos leucocitarios o antgenos HLA. Su
funcin es dar al sistema inmune la capacidad de determinar qu
protenas pertenecen a un organismo y cules no. Si el cuerpo no
reconoce las series de antgenos de las lneas de clulas, crea
anticuerpos para destruirlas.
La mdula sea trasplantada entre gemelos idnticos garantiza la
compatibilidad completa de HLA entre donante y receptor.
Precisamente estos trasplantes entre gemelos fueron los primeros
xitos en humanos.
En 1960 se hall por fin la forma de realizar trasplantes entre
gemelos no idnticos, y en 1973 se realiz el primer trasplante de
mdula sea entre personas no emparentadas. Fueron necesarios
siete trasplantes hasta conseguir el xito, pero hoy en da, si se
consigue un donante compatible, los trasplantes de mdula sea
prcticamente garantiza la curacin en enfermedades hasta ahora
mortales.

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En 1990, E. Donnall Thomas y Joseph E. Murray consiguieron el
Premio Nobel de Medicina por su contribucin al descubrimiento
de los mecanismos de compatibilidad en los trasplantes de
rganos.

En la historia de la investigacin con clulas madre hay, adems,

algunas fechas e hitos que conviene recordar:
En 1978 se descubre la presencia de clulas madre en el cordn
umbilical.
En 1981 se desarrolla in vitro la primera lnea de clulas madre de
ratn.
En 1988 se crea la primera lnea de clulas madre de un hmster.
En 1995 se crea la primera lnea de clulas madre embrionarias de
un primate.
En 1997 nace el primer cordero clonado a partir de clulas madre,
la Oveja Dolly.
En 1999 se descubre que, manipulando tejido de ratn adulto, se
pueden producir nervios, clulas cerebrales, cardiacas o de otro
tipo.

Los avances continan. Los investigadores van cada vez ms

lejos, traspasando una y otra vez los lmites de la ciencia. Sin una
meta fijada, sin una frontera trazada, porque cada paso que se da
en la investigacin con clulas madre supone cruzar un umbral
tras el cual se muestran numerosas puertas, todava cerradas.

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Las potenciales aplicaciones de terapias con clulas madre para
paliar determinadas enfermedades son muchas y muy
interesantes. Hay aplicaciones realmente esperanzadoras y
efectivas, como las destinadas a curar la leucemia o a reparar
rganos daados. En otras ocasiones, sin embargo, las terapias
con clulas madre no han conseguido los efectos esperados, e
incluso se han convertido en tumores. Sin embargo, preferimos
centrarnos ahora en algunas de las terapias ms interesantes, bien
porque se trata de enfermedades que afectan a un nmero
importante de personas, como la diabetes o el sndrome de Down,
o bien porque los ensayos se encuentran ya muy avanzados y los
resultados son extraordinarios.
En el caso de la diabetes infantil, por ejemplo, se estn realizando
ensayos que permitirn cultivar en el laboratorio clulas madre
que reparen las clulas pancreticas daadas que producen esta
enfermedad. La diabetes infantil es una enfermedad causada en la
mayor parte de los casos por un proceso autoinmune, es decir, las
clulas del sistema inmunitario atacan las mismas clulas que
deberan proteger; es decir, las clulas del propio cuerpo.
En cuanto a la regeneracin de tejidos, los avances en este campo
son muy importantes. Hasta el momento se ha conseguido
construir vlvulas cardiacas mediante su cultivo en el laboratorio,
en un armazn biodegradable. Ya se han implantado en animales
con xito, y parece prximo el momento de comenzar los ensayos
con humanos.

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La esclerosis lateral amiotrfica (ELA, en sus siglas en ingls) es
una grave enfermedad degenerativa de tipo neuromuscular por la
cual las neuronas motoras disminuyen gradualmente su
funcionamiento y mueren, provocando una parlisis muscular
progresiva de pronstico mortal, pues en sus etapas avanzadas los
pacientes sufren parlisis total. En la ELA, las funciones
cerebrales no relacionadas con la actividad motora, esto es, la
sensibilidad y la inteligencia, se mantienen inalteradas. La ELA se
conoce tambin con el nombre de Enfermedad de Lou Gehrig o
de Stephen Hawking. Ludwig Heinrich Gehrig fue un jugador de
bisbol estadounidense nacido el 19 de junio de 1903 en New
York y fallecido el 2 de junio de 1941 en esta misma ciudad. Es
conocido principalmente por el rcord de 2.130 juegos
consecutivos jugados, que se mantuvo durante 56 aos, y por su
trgico final debido a la ELA, enfermedad degenerativa que desde
entonces lleva su nombre. Desde que le fue diagnosticada la
enfermedad, en junio de 1938, hasta su fallecimiento en junio de
1941, se dedic a trabajar con chicos con problemas en New
York. Por su parte, Stephen William Hawking (Oxford, 8 de
enero de 1942) es un fsico, cosmlogo y divulgador cientfico del
Reino Unido. Es el actual titular de la Ctedra Lucasiana de
Matemticas (Lucasian Chair of Mathematics) de la Universidad
de Cambridge y es miembro de la Real Sociedad de Londres, de
la Academia Pontificia de las Ciencias y de la Academia Nacional
de Ciencias de Estados Unidos. Entre las numerosas distinciones

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que le han sido concedidas, Hawking ha sido honrado con doce
doctorados honoris causa y ha sido galardonado con la Orden del
Imperio Britnico (grado BCE) en 1982, con el Premio Prncipe
de Asturias de la Concordia en 1989 y con la Medalla Copley en
2006. Y todo ello a pesar de padecer ELA desde los 21 aos.
Entonces, los mdicos le pronosticaron que apenas vivira 2 3
aos. Sin embargo, ha conseguido sobrevivir hasta ahora, y
desarrollar una impresionante carrera cientfica. Pues bien, en esta
enfermedad, tan incapacitante se est intentando la reposicin de
las neuronas motoras afectadas por otras sanas, obtenidas a partir
de clulas madre pluripotentes.
La Enfermedad de Parkinson est siendo objeto de un gran
nmero de ensayos. Las clulas reprogramadas son la esperanza
para esta enfermedad. Ya se ha comprobado que esta tcnica
reduce los sntomas del Parkinson en ratas. En este caso, la terapia
se aplica con clulas obtenidas de tejido fetal y de la piel.
Por otra parte, en el caso de la reparacin de vas nerviosas, se
estn realizando investigaciones que intentan restaurar la mdula
espinal daada en lesiones traumticas mediante implantes de
oligodendrocitos fabricados a partir de clulas madre. Los
experimentos con ratas son muy esperanzadores. Ratas con la
columna vertebral seccionada, tratadas con clulas madre, han
conseguido, primero, mover sus patas traseras y, despus,
recuperar el movimiento, aunque con cierta cojera. Ahora son
muchas las personas y asociaciones, como la Christopher Reeves

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Foundation, que esperan impacientes las pruebas con seres
humanos. Sin embargo, es importante resaltar que, en los ensayos
con ratas, se ha comprobado que los animales slo vuelven a
caminar cuando se inicia el tratamiento menos de una semana
despus de producirse la herida, ya que las clulas madre no
tienen capacidad para reparar cicatrices. Cuando se esperan diez
meses para iniciar el tratamiento, las ratas no recuperan la
movilidad.
No podemos terminar sin citar el Sndrome de Down. Hace ya
ms de 70 aos que comenzaron los ensayos clnicos para tratar
enfermedades genticas como el Sndrome de Down, el retraso
mental, la parlisis cerebral, etc., mediante el trasplante de clulas
madre. El doctor F. Schmid ha tratado genticamente mediante el
trasplante de clulas madre a 3.000 nios y nias con Sndrome
de Down. Los trasplantes se realizaron en todos los casos a
edades muy tempranas, inmediatamente despus del diagnstico,
y en el propio tero. Adems, a edades tempranas no es necesario
implantar clulas madre directamente en el cerebro, ya que se ha
comprobado que, tras una aplicacin sistmica (intravenosa), el
cerebro atrae las clulas madre que le pertenecen. Los resultados
son alentadores: El 25% de los nios tratados consiguieron
superar sus estudios en colegios normalizados. El porcentaje de
nios con Down, de entre 3 y 5 aos, con un desarrollo mental de
unos 50 puntos, se increment un 17% antes del primer
tratamiento, el 58% despus del primer tratamiento y un 71% tras

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el segundo tratamiento. Por otra parte, el Cociente Intelectual de
nios de 4 a 9 aos, que tenan un CI situado entre 25 y 49
puntos, se situ de 50 a 69 puntos. Con los tratamientos con
clulas madre disminuye la hiperactividad, aumenta la
concentracin y mejora la pronunciacin.

El texto que sigue es un ensayo sobre las clulas madre, que tiene
como objetivo que personas sin conocimientos cientficos previos
descubran el mundo de las clulas madre, qu son, cmo se crean
y qu son capaces de hacer. Es un mundo asombroso, lleno de
puertas todava por abrir, que ha llevado a miles de cientficos de
todo el mundo a dedicar su vida a la investigacin. Y todo, con
una sola meta: mejorar el presente y el futuro del ser humano. Son
muchas las personas que tienen puestas sus esperanzas en las
investigaciones con clulas madre, enfermos que esperan mejorar
con tratamientos que hoy todava parecen de ciencia ficcin pero
que, gracias al tesn de mdicos y cientficos, son ya una realidad.
Este libro quiere tambin que los estudiantes de Secundaria y
Bachillerato se acerquen sin temor a la ciencia. Al explicar con
trminos accesibles los entresijos de la investigacin, pretende
abrir las puertas de los laboratorios a cientficos que todava no
han descubierto su vocacin y que, quien sabe, quizs la
encuentre en estas pginas.

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 LAS CLULAS MADRE

Hay en Biologa un principio que dice que todas las cosas vivas
son celulares o, como escribe Harold J. Morowitz1, la nica
vida que conocemos es celular. Lynn Margulis2 lo expresa de
otro modo afirmando que las unidades de vida son las clulas.
Al ser toda vida celular, como slo lo vivo transmite vida, toda
clula debe proceder siempre de otra clula viva. Desde el origen
de las primeras clulas vivas, todo ser vivo celular procede, pues,
de otro ser vivo por lo que la vida desde su origen es un continuo
que no se ha interrumpido y, hasta ahora, ha sido inmortal.

Qu son y de dnde proceden las clulas madre?

Cualquiera de los organismos vivos que conocemos est

constituido por clulas: un ser humano adulto, por trillones de
clulas que integran los tejidos de su organismo, las bacterias,
invisibles a nuestros ojos, por una sola clula. Las clulas, que en
el organismo humano pertenecen a alguno de los 200 tipos
diferentes, son en su inmensa mayora clulas diferenciadas, con
las caractersticas especficas de forma y funcin correspondientes
al tejido u rgano del que forman parte. Cada uno de estos tipos
de clulas, delimitadas por su propia membrana, contiene un
conjunto completo de instrucciones, que constituyen lo que
podramos llamar su sistema operativo, necesario para su
operacin y su reproduccin.

Todas estas clulas, y muchas ms que se van eliminando a lo

largo de la vida, proceden de una primera clula que es el
resultado de la fusin de un vulo y un espermatozoide el cigoto

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 que es la nica realidad unicelular totipotente, es decir, capaz de
originar cualquiera de los tipos de clulas presentes en el
organismo. Por ello se dice de ella que es una clula
completamente indiferenciada. El cigoto se divide
progresivamente, primero en dos clulas (que ya son desiguales
entre s y desiguales tambin respecto al cigoto del que proceden)
cada una de stas en otras dos y as sucesivamente.

La generacin de nuevas clulas hijas se produce habitualmente

por divisin de la clula en dos en el proceso llamado mitosis.
Este es el modo de reproduccin celular ms sencillo y, en los
sistemas vivos, el modo de crecimiento ms frecuente. El
desarrollo de cada nuevo organismo se hace a expensas de las
clulas iniciales, procedentes de las primeras divisiones del
cigoto, llamadas por eso clulas madre o troncales, que van
dividindose progresivamente y diferencindose en clulas ms
especficas que van a formar las tres capas germinales del
embrin. Estas tres capas, que constituyen la estructura primaria
del embrin, reciben, por su posicin relativa, el nombre de
mesodermo, endodermo y ectodermo.

De las clulas madre de cada una de las tres capas derivan los
tejidos que van a formar los diversos rganos. As, del
mesodermo derivan, entre otros, tejidos como el conjuntivo
(incluyendo hueso y cartlago), los msculos, el tejido cardaco y
vascular, el sistema urogenital, el tejido linftico, la mdula sea
y la sangre; del endodermo deriva el tiroides y las paratiroides, el
timo, la laringe, la trquea y los pulmones con su revestimiento
interno, el revestimiento intestinal, el hgado, el pncreas, la
vejiga, la vagina y la uretra; del ectodermo deriva la piel, el tejido
nervioso, la mdula suprarrenal, la hipfisis, los ojos y los odos.
Podemos afirmar, por tanto, que las clulas madre representan el
origen o la fuente normal de todo lo que constituye el ser vivo.

Pero, adems, en el organismo plenamente desarrollado, con sus

trillones de clulas diferenciadas, persiste an un buen nmero de
clulas madre que se caracterizan por que conservan, junto a su

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capacidad de reproducirse en otras, iguales a s mismas (son
autorenovables), un grado mayor o menor de indiferenciacin
que les permite originar varios tipos de clulas especializadas de
un tejido concreto (heptico, sanguneo, etc.), ya diferenciado.

El desarrollo y la diferenciacin de las clulas madre procedentes del

cigoto originan todos los tipos de clulas y tejidos del organismo.

Estas clulas madre son, pues, una reserva silenciosa del

organismo que forma o renueva tejidos cundo y dnde se van
necesitando. Entran en accin en el lugar y tiempo en los que es
necesaria la produccin de ms clulas madre o de otras clulas
especializadas. Generalmente, cuando una clula madre se divide
en dos, una de las dos clulas hijas queda como en reserva para
producir ms clulas madre cuando sean necesarias y la otra est
destinada a convertirse en una clula ms especializada, dando
17
origen a uno o varios tipos de clulas. Aunque solo las clulas
madre tienen esta versatilidad en su reproduccin, hay algunas
clulas que, an siendo plenamente especializadas, como es el
caso, por ejemplo, de las clulas hepticas (hepatocitos), tienen la
capacidad de dividirse para producir otras clulas iguales a ellas
mismas.

Propiedades de las clulas madre

Segn se deduce de lo expuesto, las clulas madre tienen tres

propiedades que las distinguen de los otros tipos de clulas, a
saber: son autorenovables, son capaces de permanecer
indiferenciadas y, al mismo tiempo, son multipotentes o
pluripotentes, es decir, tienen la capacidad de diferenciarse en
todos, o gran parte, de los tipos celulares que se derivan de las
tres capas germinales de los embriones.

Cuando hablamos de multipotencia o pluripotencia, esta potencia

de las clulas madre se atribuye a una propiedad llamada
plasticidad. Se puede definir la plasticidad de una clula como su
capacidad de adquirir las caractersticas de forma y de funcin
propias de un tejido diferente del que originariamente se deriva.
Hasta hace poco se admita que una clula madre especfica de un
tejido, por ejemplo, la piel, slo poda diferenciarse en las clulas
correspondientes a ese tejido originario. Estudios recientes han
demostrado que clulas madre, procedentes de un tejido o de una
capa germinal (por ejemplo, del mesodermo), pueden generar
tejidos de otro rgano o de otra capa (por ejemplo, del ectodermo
o endodermo). Esto quiere decir que a partir de la mdula sea, de
la piel o del cerebro, se pueden obtener clulas madre
pluripotentes capaces de originar tejidos de cualquiera de las tres
capas germinales3.

Este hecho, que ha revolucionado nuestras ideas sobre las clulas

madre, se ha evidenciado, entre otros rganos, en el cerebro, en el
msculo esqueltico, en el miocardio o en el hgado, lo que
demuestra un alto nivel de plasticidad de las clulas madre
18
procedentes de estos rganos. Por ejemplo, un tipo de clulas de
la mdula sea, las llamadas clulas progenitoras multipotentes
adultas (MAPCs), pueden diferenciarse en el laboratorio o al
implantarse en otros rganos, no solo como clulas de mesodermo
visceral, sino tambin como clulas del ectodermo y del
endodermo4. Estas clulas proliferan ampliamente sin
envejecimiento aparente ni prdida de plasticidad. Es el nicho, o
microambiente del rgano husped, el que influye en la
diferenciacin en lneas celulares distintas a las de su lugar de
origen.

Potencia de las clulas madre

En el contexto en el que nos estamos moviendo, denominamos

potencia de una clula indiferenciada a su capacidad de dar origen
a nuevas clulas ms diferenciadas. De acuerdo con su potencia
potencialidad o plasticidad las clulas madre pueden
clasificarse como:

totipotentes, capaces de originar tanto tejidos

embrionarios (de cualquiera de la tres capas
germinales) como extraembrionarios (p.e. placenta),
pluripotentes, capaces de diferenciarse en tejidos
derivados de cada una de las tres capas germinales, y
multipotentes, con una capacidad de diferenciacin
ms limitada.

Como ya se ha sealado, la clula madre primordial, origen de

cualquier tipo de clula presente en el organismo, es el vulo
fecundado, el cigoto. A lo largo del desarrollo embrionario, una
vez formado el blastocisto encontramos en l un pequeo nmero
de clulas madre iniciales que forman la masa celular interna a
partir de la cual se desarrollar el embrin.

19
El cultivo de algunas de estas clulas, obtenidas generalmente tras
la destruccin de embriones creados mediante fecundacin in
vitro, permite su desarrollo y multiplicacin en el laboratorio para
obtener de ellas casi cualquier tipo de clula del organismo, como
veremos ms adelante.

El recorrido del cigoto desde la fecundacin hasta la implantacin en el

tero

Las clulas madre embrionarias ms verstiles son las ms

precoces en el ciclo vital de un organismo y desaparecen en
menos de tres semanas tras la fertilizacin del vulo. Mientras
ms tardas, las clulas madre tienden a producir, cuando se
dividen, clulas ms diferenciadas. Por ello se dice de ellas que
estn dedicadas - o comprometidas - a destinos ms restringidos
dentro de uno de los tipos de tejidos correspondientes a las tres
capas germinales. Si continuamos considerando el desarrollo
embrionario, vemos cmo las clulas se van especializando ms y
ms para formar tejidos como el muscular, el cardaco, la sangre,
20
etc., y solo algunas de las clulas madre primitivas persisten en la
vida adulta para realizar papeles de renovacin y reparacin de
esos tejidos.

Origen de las clulas madre

Segn sea su origen o procedencia, las clulas madre se pueden

clasificar en dos categoras muy amplias: clulas madre
embrionarias y clulas madre no embrionarias. Por una parte, las
clulas embrionarias, obtenidas en un estadio muy temprano del
desarrollo, tienen una gran capacidad de autorenovacin, de
permanecer pluripotentes o de mantenerse indiferenciadas. Hasta
hace bien poco se pensaba que las clulas madre no embrionarias,
no poseen estas capacidades o, en todo caso, las tienen en mucho
menor grado que las embrionarias. Esta visin puede decirse que
ha experimentado un notable cambio, como veremos ms adelante

Las clulas madre embrionarias se obtienen a partir de embriones

muy precoces, en el estadio conocido como blastocisto, y se
cultivan en placas de laboratorio. Segn ha anunciado
recientemente el NIH (National Institutes of Health) de Estados
Unidos, el trmino embrionario aplicado a estas clulas resulta
artificioso y va a ser suprimido del Registro Americano de
Clulas Madre Embrionarias que pasar a llamarse Registro de
Clulas Madre Humanas Pluripotentes. Por otra parte, segn
Glyn Stacey, director del Banco ingls de Clulas madre en
Hertfordshire, que trabaja tanto con lneas celulares creadas a
partir de embriones como con otras derivadas de tejidos fetales y
de adultos, el trmino pluripotente es notablemente impreciso, si
consideramos que, en rigor, ni siquiera las clulas embrionarias
humanas pueden ser consideradas como pluripotentes ya que est
an por demostrar su capacidad de originar todos los tipos
celulares humanos.

Las clulas que constituyen el embrin en sus comienzos se

agrupan para formar primero una lmina o placa inicial que

21
progresivamente se pliega, se torsiona y crece dando lugar a una
estructura formada por las tres capas germinales, con una cabeza
reconocible y una cavidad central, que formar el intestino. La
capa ms interna es el endodermo del que derivar el
recubrimiento del intestino y los rganos asociados, como el
pncreas y el hgado. Las clulas de la capa media, el mesodermo,
formarn casi todos los rganos (msculos, huesos, corazn,
riones) y todo el tejido conjuntivo que los sustenta y los rodea.
Las clulas de la capa ms externa, el ectodermo, formarn la piel
y el cerebro.

Estas clulas madre que encontramos en las tres capas germinales

del embrin en sus momentos iniciales, reciben el nombre
genrico de clulas madre embrionarias. De ellas se dice que son
pluripotentes porque tienen la capacidad de formar cualquier
clula diferenciada del organismo. Si se las separa de su ambiente
embrionario normal y se las cultiva apropiadamente, proliferan y
se renuevan de forma indefinida. Por definicin, mientras
permanecen en este estado indiferenciado mantienen el potencial
de formar tejidos que corresponden a las tres capas germinales5.

Las clulas madre no embrionarias son aquellas que forman

parte del organismo post-natal y tienen como misin reponer en l
las clulas que se van perdiendo en los tejidos en los que residen,
bien por la propia fisiologa del rgano o por su normal
envejecimiento, bien por lesiones de diverso tipo. Se han descrito
decenas de tipos de clulas madre de adultos y an quedan
bastantes por descubrir. Son clulas llamadas especficas de
tejidos ya que generalmente renuevan solo un tejido concreto.
Estas clulas madre no embrionarias se denominan por algunos
clulas madre adultas aunque el trmino puede prestarse a
confusin ya que estas clulas no son solo propias de los
individuos adultos sino que estn tambin presentes en tejidos
fetales, en el cordn umbilical, en la placenta o en los nios6. Por
ello se han propuesto otros nombres, como clulas madre
especficas tisulares, clulas madre somticas o clulas madre
postnatales.

22
De estas clulas madre no embrionarias, las ms conocidas son
las hematopoyticas, que se encuentran en la mdula sea y
fabrican de manera fisiolgica las clulas de la sangre (clulas
rojas o hemates y clulas de la serie blanca o leucocitos), las
clulas madre epidermales, que renuevan o reparan la capa
externa de la piel, las clulas madre epiteliales que renuevan
continuamente el recubrimiento intestinal y aquellas que permiten
el crecimiento de los msculos esquelticos. Las clulas madre
neurales son capaces de originar nuevas neuronas y clulas de
sostn del tejido nervioso. Recientemente se han descubierto en
los pulmones de adultos normales, clulas madre
broncoalveolares que renuevan el recubrimiento de algunas
partes del pulmn.

Mientras que todos admiten que las clulas embrionarias son

pluripotentes, se ha discutido la pluripotencia de las no
embrionarias. Durante mucho tiempo se pensaba que las clulas
madre no embrionarias seran, en todo caso, multipotentes pero
no pluripotentes. Segn esta concepcin, las clulas madre
hematopoyticas daran origen solo a los diferentes tipos de
clulas sanguneas, las clulas madre neurales solo originaran
neuronas y otras clulas del tejido nervioso como son los
astrocitos y los oligodendrocitos, y as el resto de ellas. Esta
visin ha cambiado recientemente7 y hoy da se admite, aunque no
sin discusin, que clulas madre de cualquier sistema de nuestro
organismo, por ejemplo, el hematopoytico, pueden desarrollar
clulas diferenciadas de otro sistema, por ejemplo del hgado,
cerebro o rin. Como consecuencia de mltiple estudios, se ha
acabado admitiendo que las clulas madre no embrionarias
podran ser tan maleables como las embrionarias8.

Dada la gran variedad de tipos y propiedades de las clulas madre

es lgico pensar que su fisiologa ha de ser necesariamente
compleja. Un punto clave de esta fisiologa es lo que se llama el
nicho de las clulas madre. El nicho sera como una especie de
ecosistema del que forman parte, junto a las clulas madre, las

23
clulas circundantes que les envan mensajes o los reciben de
ellas. En este ecosistema influyen factores diversos, como pueden
ser la temperatura ambiente, el hecho de que estn adheridas a
algo o floten libremente, etc. Todo ello ayuda a las clulas madre
a mantener sus propiedades de autorenovacin, mediante
divisiones controladas, las dirige hacia donde es necesario que
estn presentes o las gua en su diferenciacin en clulas
especializadas tanto en el embrin en desarrollo como en el
individuo adulto. Las lesiones de diversos tipos que se pueden
producir localmente en los tejidos, influyen en las condiciones del
ecosistema y son uno de los principales estmulos que ponen en
marcha la diferenciacin de las clulas madre presentes en los
tejidos para convertirse en otras ms especializadas. Hasta llegar a
la plena diferenciacin, las clulas madre necesitan recorrer un
camino en el que se producen varias divisiones intermedias. En
algn punto de este recorrido estos grupos de clulas pierden la
capacidad de seguir manteniendo junto a ellas a un cierto nmero
de clulas indiferenciadas de reserva y se convierten entonces
en las llamadas clulas progenitoras.

24
Cules son las aplicaciones cientficas de las Clulas madre?

Las clulas madre pueden

contribuir al avance de la
Ciencia de varias maneras:

Por una parte, son un buen

instrumento para el
estudio y para lograr una
mejor comprensin del
proceso del desarrollo
humano en cada una de
sus fases.

Por otra, ofrecen la

posibilidad de utilizarlas
probar nuevos frmacos
en clulas de origen
humano sin necesidad de
ensayarlos en hombres o
animales.

En la actualidad, el empleo ms difundido se basa en la

posibilidad que ofrecen de reparar tejidos daados y de crear
nuevas vas en el tratamiento de enfermedades en lo que se
conoce como Medicina Regenerativa.

La Medicina Regenerativa.

Desde hace mucho tiempo, los bilogos se interesaron en la

observacin del curioso fenmeno de la reparacin-restauracin
de determinadas partes de la anatoma, daadas o destruidas como
25
consecuencia de lesiones traumticas, en casi todas las plantas y
en algunos animales (por ejemplo, en el tritn o salamandra
acutica y en otros anfibios). En esta ltima especie se ha podido
demostrar el proceso de regeneracin en mltiples rganos
(cerebro, retina y cristalino, intestino, corazn, o extremidades).
Las clulas de los bordes de la lesin o amputacin son capaces
de reconstruir una rplica exacta de la porcin daada mediante
procesos de desdiferenciacin y transdiferenciacin9.

Ejemplares de salamandra y tritn

Etapas en la regeneracin de un miembro amputado en un tritn o

salamandra acutica.

26
Mucho ms reciente es el inters que ha despertado en el campo
mdico la posibilidad de utilizar el potencial de las clulas madre
para conseguir la reparacin de la estructura y/o funcin de
tejidos u rganos del cuerpo humano, afectados por lesiones o por
enfermedades. Las aplicaciones mdicas de este potencial
reparador constituye el ncleo fundamental de la Medicina
Regenerativa10. El fundamento de la Medicina Regenerativa
radica, por una parte, en el reconocimiento de que muchos tejidos
del organismo van perdiendo, con el transcurso del tiempo, parte
de su masa celular necesaria para el desarrollo de su funcin,
siguiendo generalmente un proceso conocido como apoptosis o
muerte programada. En otros casos, determinadas agresiones
externas producen a travs de mltiples mecanismos, la
destruccin celular mediante necrosis. En ambas situaciones, el
organismo intenta reponer, total o parcialmente, las clulas
perdidas.

Ya en el siglo XIX Cohnheim (1867) sugiri que la reparacin de

cualquier tejido se haca a travs de la circulacin sangunea
mediante clulas provenientes de la mdula sea. Esta hiptesis
fue sustituda posteriormente por otra que sostena que las clulas
reparadoras residan en los propios tejidos, ya que en ellos se
encuentran clulas con considerable plasticidad. Observaciones
ms recientes han vuelto a validar parcialmente la hiptesis de
Cohnheim indicando que las clulas reparadoras que se han
encontrado en la mayora de tejidos estn continuamente siendo
repuestas por clulas madre no hematopoyticas presentes en la
mdula sea. El organismo contara as con un depsito de
clulas madre (o troncales), en distinto grado de diferenciacin,
que se reproducen de forma continua y tienen por misin reponer
las clulas perdidas. En mltiples ocasiones esta reposicin
natural no es suficiente y ello genera un dficit funcional que
puede ser significativo.

Hasta tiempos bastante recientes, se admita sin discusin que las

posibilidades de diferenciacin de las clulas de los diferentes

27
tejidos del organismo se van circunscribiendo progresivamente
dentro de lmites cada vez ms estrechos hasta llegar a definir el
tipo de clula especfica de cada tejido del organismo.
Histricamente slo se reconoca la presencia en el ser humano
adulto de unos pocos tipos de clulas madre o troncales, con un
repertorio de diferenciacin muy limitado, cuya misin se reduca
prcticamente a la reposicin de clulas de sus tejidos de origen.
Este sera el caso de las clulas madre hematopoyticas,
productoras de las clulas sanguneas, el de las clulas madre
gastrointestinales que mantienen la regeneracin de la mucosa
intestinal, el de las responsables de la regeneracin de la capa
drmica de la piel o el de las precursoras de las clulas germinales
(espermatogonias y ovogonias).

El descubrimiento en algunos tejidos de clulas madre con

capacidad de sobrepasar las fronteras de una lnea celular
determinada, ha puesto en tela de juicio el paradigma clsico. A
partir de los conocimientos adquiridos en el laboratorio
experimental y en la clnica de los trasplantes de rganos, se est
intentando en la actualidad utilizar las tcnicas de trasplante
celular para regenerar, total o parcialmente, los tejidos en los que
se produce una excesiva destruccin celular como consecuencia
de ciertas enfermedades o lesiones. Los mltiples procedimientos
utilizados, basados en el empleo de clulas madre, se designan
genricamente con el nombre de terapia celular11.

La regeneracin tisular mediante terapia celular con clulas madre

se basa en el principio que asume que es el propio tejido receptor
el que dirige y regula la diferenciacin de estas clulas para
formar un determinado tipo de tejido12,13.

Lo que se propone la regeneracin tisular no es simplemente la

recuperacin de un tipo celular concreto, sino ms bien la
reconstruccin de todos los componentes principales del rgano
afectado cuya compleja integracin es un requisito bsico para el
restablecimiento o mejora de su funcin. Por ejemplo, en la
regeneracin miocrdica, el objetivo de la terapia celular, adems
de procurar la recuperacin de clulas cardacas con las
28
caractersticas elctricas y la capacidad contrctil apropiadas,
necesita una reconstruccin microvascular que sea suficiente para
aportar sangre que asegure la adecuada nutricin y oxigenacin de
las clulas miocrdicas trasplantadas.

Como ya se ha sealado, tanto las clulas madre embrionarias

como las no embrionarias tienen la capacidad de diferenciarse
como clulas especficas derivadas de cualquiera de las tres capas
germinales. Por tanto, al menos desde un punto de vista terico,
ambos tipos de clulas madre pueden utilizarse para el trasplante
en los diversos procedimientos de regeneracin tisular, aunque las
caractersticas y los problemas que presentan uno y otro tipo de
clulas madre son bien diferentes.

David L. Stocum, en su libro Regenerative Biology and

Medicine14, seala tres posibles mecanismos de regeneracin
tisular:

- la hiperplasia compensadora, que sera una respuesta

proliferativa de las clulas implantadas para producir nuevas
clulas adicionales en nmero suficiente para sustituir a las
perdidas por una lesin;

- la activacin de clulas madre residentes en muchos tejidos

adultos, que actan como un depsito o almacn regenerador para
reemplazar a las clulas especficas de esos tejidos que se van
perdiendo por el desgaste natural;

- la desdiferenciacin celular que permite la creacin de clulas

madre, a partir de clulas diferenciadas, mediante un mecanismo
anlogo al que ocurre en los miembros y cola de ciertos anfibios,
donde hay clulas maduras diferenciadas que se desdiferencian
para convertirse en clulas madre y, tras proliferar, vuelven
posteriormente a rediferenciarse. La desdiferenciacin sera como
una especie de reprogramacin de clulas adultas que las hara
retornar hacia un estado embrionario o de pluripotencia a partir
del cual se producira una nueva diferenciacin como clulas
especficas del tejido en cuestin.
29
Las estrategias que propone Stocum para aplicar en los pacientes
alguno de estos mecanismos de regeneracin son el trasplante
celular, la produccin artificial de tejidos y la induccin de la
regeneracin in situ. Entre los retos prcticos que se presentan al
aplicar estas estrategias encontramos los relativos a la fuente de
las clulas a utilizar, a las tcnicas de cultivo para obtener la
expansin de las clulas adecuadas y alcanzar dosis eficaces, a los
modos de induccin de la vascularizacin en los tejidos
artificiales, etc.

De lo dicho hasta aqu resulta obvio que antes de que ciertos tipos
de clulas madre se puedan usar para el tratamiento de pacientes,
se deber conseguir de ellas que:

- se dividan y proliferen en el laboratorio de manera suficiente

para conseguir la cantidad de tejido necesaria;

- se diferencien en el tipo celular adecuado para obtener la

regeneracin requerida;

- sobrevivan, se multipliquen y se integren en el tejido

circundante tras el trasplante;

- funcionen de manera apropiada durante un amplio periodo

de tiempo;

- una vez diferenciadas, permanezcan en ese estado para

evitar el riesgo de que se dividan sin control y formen
tumores15.

30
Ensayos de Medicina Regenerativa en el ser humano

Con clulas embrionarias

La pluripotencialidad de las clulas embrionarias ofrece a este

tipo de clulas una gran versatilidad que ha llevado a pensar en la
posibilidad de su empleo en un considerable nmero de
enfermedades. Por otra parte, el precoz estado de desarrollo de
estas clulas dificulta notablemente su diferenciacin hacia tipos
celulares concretos. Se han realizado algunos progresos dirigidos
a la aplicacin clnica en la diabetes o el fallo cardiaco y se est
preparando un ensayo clnico con clulas neurales de origen
embrionario o fetal para el tratamiento de lesiones de la medula
espinal. Sin embargo, parece ser que, por el momento, las
dificultades tcnicas, aadidas a los problemas ticos y de
regulacin jurdica, ponen en entredicho la posible aplicacin
clnica de este tipo de clulas en un futuro prximo16.

Con clulas no embrionarias

La prctica totalidad de los ensayos clnicos, realizados o en

marcha, utilizan clulas madre de origen no embrionario. Un buen
nmero de aplicaciones utilizan clulas sanguneas o de la mdula
sea, las llamadas clulas madre hematopoyticas. Estas clulas,
las primeras utilizadas en Medicina Regenerativa, ms que clulas
madre puras, son en realidad una mezcla de clulas (hemates,
linfocitos B y T, clulas natural killer, neutrfilos, plaquetas,
etc.). Los trasplantes de mdula sea que las contienen se
emplean ya de manera rutinaria en tratamientos de enfermedades
hematolgicas, como las leucemias o las inmunodeficiencias, en
las que se emplean clulas del propio receptor o de donantes
compatibles.

31
Las clulas mesenquimales (llamadas tambin estromales) se
encuentran tambin en la mdula sea, procedentes del
mesodermo embrionario. Aadiendo a los cultivos determinadas
hormonas y otros ingredientes, las clulas mesenquimales se han
podido diferenciar como clulas neurales, drmicas, musculares,
seas, cartilaginosas o adiposas. Algunos de estos tipos celulares
se estn ensayando en estudios clnicos de pacientes con
enfermedades hepticas o cardacas, intestinales como la
enfermedad de Crohn, entre otras. A partir de las clulas
mesenquimales procedentes de la mdula sea se pueden obtener
tambin, con condiciones apropiadas de cultivo, clulas
musculares con las propiedades y funciones de los msculos
esquelticos.

La mdula sea es una fuente de mltiples tipos celulares

32
Otra fuente para la obtencin de clulas madre no embrionarias es
el cordn umbilical. La mayora de las clulas que se pueden
obtener del cordn umbilical tras el parto son del tipo de las
clulas hematopoyticas, anlogas a las de la mdula sea, y se
usan para tratamiento de leucemias. Como proceden de recin
nacidos que tienen un sistema inmunitario inmaduro, son menos
propensas al rechazo por parte del receptor. Junto a esta ventaja
presentan el inconveniente de que no son muy numerosas,
problema que podr ser resuelto si se consigue su multiplicacin
en cultivos previos a su empleo.

Adems de las fuentes citadas, el cerebro tiene su propia

provision de clulas madre, capaces de emigrar dentro del cerebro
y mdula espinal y de integrarse con las neuronas presentes. Si se
aislan convenientemente y se cultivan, estas clulas pueden
reproducirse durante meses y aos permitiendo la generacin de
lneas de clulas madre con propiedades funcionales estables y
constantes, capaces de generar diversos tipos de clulas neurales
diferenciadas (neuronas, astrocitos y oligodendrocitos). Las
clulas madre neurales que tienen funciones de reposicin en el
individuo normal (por ejemplo, las que aseguran la renovacin de
las clulas especficas del bulbo olfatorio) pueden utilizarse como
herramienta teraputica para determinadas enfermedades del
sistema nervioso central17.

El tratamiento de las enfermedades neurodegenerativas (p.e. la

enfermedad de Parkinson, la esclerosis mltiple, e incluso el ictus
cerebral) con clulas madre ha acaparado un lgico inters, por su
frecuencia y consecuencias invalidantes. Los experimentos que se
han desarrollado en animales, y algunas aplicaciones aisladas en
el ser humano, ofrecen datos alentadores aunque todava necesitan
una mayor definicin y ms tiempo de seguimiento. Esto, unido a
la complejidad propia de los tejidos cerebrales, lleva a los
especialistas a advertir que todava est lejana la traslacin de
estos ensayos a los seres humanos.

33
Regeneracin cardaca
La regeneracin cardiaca es uno de las reas de la Medicina en la
que se han realizado mayor nmero de ensayos. La experiencia
acumulada, adems de constatar su seguridad, ha demostrado que
aumenta el riego miocrdico y el rendimiento contrctil en
pacientes con infarto agudo de miocardio, enfermedad coronaria
avanzada y fallo cardaco crnico. Esta eficacia justifica su
empleo, la multiplicacin de los esfuerzos para mejorar estos
resultados y la realizacin de estudios ms controlados y amplios.

Las distintas vas para el trasplante de clulas madre en el corazn

El trasplante de clulas madre y progenitoras por diversas vas

(transmiocrdica, transendocrdica, intracoronaria, intravenosa,
etc.) puede tener un impacto favorable en la perfusin miocrdica
y la contractilidad cardaca al promover la vascularizacin y la
formacin de miocitos, efectos todos que estn influenciados por
la edad y sexo del paciente, por los factores de riesgo
cardiovascular y por la situacin patolgica presente en cada caso.
34
Para los estudios de regeneracin miocrdica se han utilizado
diversos tipos de clulas:
Clulas miognicas inmortalizadas, llamadas clulas
satlites o mioblastos esquelticos,
Clulas madre embrionarias,
Clulas madre hematopoyticas,
Progenitores endoteliales,
Clulas madre mesenquimales,
Cardiomiocitos fetales,
Cardiomiocitos adultos inducidos a replicarse

Las clulas sobre las que existe mayor experiencia son las clulas
satlites o mioblastos esquelticos y las clulas madre derivadas
de la mdula sea.

Regeneracin de la crnea y la retina

Puede llevarse a cabo injertando tejido viable del limbo corneal,

cuyas clulas troncales pueden restaurar la superficie de la crnea,
o cultivando en el laboratorio clulas obtenidas mediante biopsia
limbal y trasplantando posteriormente esas clulas18. Estas
tcnicas han sido ya aplicadas con xito en pacientes con cegueras
por opacificacin corneal.
Tambin se ha conseguido aislar en el laboratorio clulas madre
progenitoras de la retina, a partir del epitelio ciliar o limbal, y
trasplantarlas experimentalmente en la retina de ratas con
lesiones retinianas19,20. Sin embargo, a diferencia de los que
ocurre con la crnea, la teraputica de las lesiones retinianas est
an en fase de estudio previo a su aplicacin en el ser humano.

Regeneracion pancretica. Diabetes

A partir de clulas troncales embrionarias se consigui la

produccin de clulas productoras de insulina agrupadas en

35
racimos, semejantes a los islotes pancreticos, por lo que se
sugiri la posibilidad de regenerar de esta forma el pncreas
endocrino, afectado en la diabetes21. Sin embargo, trabajos
posteriores han mostrado que estas clulas embrionarias, ms que
producir insulina lo que hacan era tomar y concentrar la insulina
presente en el medio de cultivo y cederla posteriormente al animal
en el que haban sido trasplantadas. Adems, el modelo animal de
diabetes que se haba utilizado tampoco era el ms adecuado para
extrapolar los resultados a la diabetes humana22.

El ratn diabtico no-obeso (NOD) es un modelo adecuado en el

que se destruyen las clulas pancreticas por un proceso
autoinmunitario que produce una diabetes anloga a la humana de
tipo 1. Se ha comprobado que el tratamiento de estos animales en
estados avanzados o finales de la enfermedad, mediante
inyeccin de clulas del bazo (esplenocitos) de un donante macho
en un ratn hembra, elimina la autoinmunidad existente y vuelven
a aparecer clulas y clulas epiteliales ductales, probablemente
a partir de clulas madre residentes, con lo que se normalizan las
cifras de glucosa sangunea23.

36
Cmo se obtienen las clulas para su utilizacin en la
Medicina Regenerativa?

Como hemos sealado, hay dos tipos fundamentales de clulas

madre, las embrionarias y las no embrionarias. Ambos tipos
pueden ser utilizados, en principio, con fines teraputicos aunque
obviamente difieren los mtodos de obtencin de un tipo u otro.

Mtodos para la obtencin de clulas embrionarias

A pesar del gran nmero de tcnicas propuestas, en la actualidad

se utilizan generalmente dos posibles vas para la obtencin de
clulas embrionarias:

Mtodos para obtener clulas embrionarias. 1 Cultivo de clulas

blastocitarias. 2. Transferencia nuclear

37
1 - Obtencin de clulas embrionarias a partir del cultivo de
clulas de la masa celular interna extrada tras la destruccin de
embriones, en fase de blastocistos, obtenidos por procedimientos
de fecundacin in vitro.

Este es el procedimiento que podemos llamar clsico, realizado

por primera vez en el hombre en 1998, en la Universidad de
Wisconsin, por James A. Thomson24, precisamente uno de los
cientficos que, casi 10 aos despus, han revolucionado el
mundo de las clulas embrionarias, logrado convertir fibroblastos
de la piel en clulas pluripotentes.

2 - Obtencin de las clulas por el procedimiento de clonacin,

que permite la produccin de blastocistos mediante la llamada
transferencia nuclear. Estos blastocistos, pueden ser implantados
en teros de acogida, dando lugar a individuos clnicos, o bien
pueden ser destruidos para obtener las clulas de su masa celular
interna.

La clonacin por transferencia nuclear fue realizada por primera

vez, utilizando ncleos de embriones de rana, en 1952. En 1989 y
1990 se realizaron clonaciones en mamferos (conejos, ovejas y
vacas) a partir de ncleos de clulas de embriones muy precoces.
Posteriormente, en 1995, se transfirieron ncleos de clulas en
cultivo a vulos de ovejas y en 1997 se consigui la clonacin de
la oveja Dolly mediante transferencia nuclear, utilizando el ncleo
de una clula somtica de la glndula mamaria de una oveja
adulta (Wilmut y cols. 1997 25). Con procedimientos anlogos,
entre los aos 1998 y 2000 se clonaron ratones, vacas, cerdos,
cabras y monos utilizando clulas adultas.

En Noviembre de 2007, un equipo dirigido por Shoukhrat

Mitalipov, de la Universidad de Oregon, ha publicado26 la
obtencin de embriones clnicos de primates y la produccin, por
primera vez, de clulas embrionarias a partir de estos embriones
de monos. La tcnica empleada no est, sin embargo, exenta de

38
problemas que, naturalmente, exigen su resolucin antes de que se
pueda realizar su aplicacin en el ser humano.

Semos es el mono donante de las clulas empleadas por el equipo de

Mitalipov para sus experimentos de clonacin.

Para hacerse una idea de la ndole de estos problemas baste

considerar que, en el caso de la clonacin de embriones de
primates, el equipo de Mitalipov necesit emplear en el proceso
unos 15.000 vulos y, slo para producir dos lneas de clulas
embrionarias, usaron 304 vulos. Por otra parte, los 77 intentos de
implantar estos embriones, creados mediante transferencia
nuclear, en 12 teros de acogida, fracasaron todos. Para John
Gearhart, director del programa de Clulas Madre del Johns
Hopkins Medicine en Baltimore, los datos citados resultan
preocupantes a la hora de plantearse su empleo en Medicina
Regenerativa. La razn es que un correcto desarrollo de esta
aplicacin exige el estricto cumplimiento de varios requisitos:

El primero se refiere a la especificidad. Para utilizar clulas

madre embrionarias humanas es necesario demostrar su capacidad
de diferenciarse en el tipo particular de clulas que nos interesan.
A partir de ah, hay que purificar, de entre toda la poblacin
embrionaria, la lnea celular identificada como precursora de
dichas clulas. Esta purificacin es compleja ya que resulta
prcticamente imposible conseguir el aislamiento de un solo tipo
celular; de hecho, las lneas pluripotentes humanas que se han

39
logrado aislar retienen la expresin gentica correspondiente a
varias lneas celulares, a pesar de haberse empleado factores de
crecimiento especficos.

En segundo lugar resulta imprescindible demostrar que las clulas

embrionarias obtenidas son funcionalmente normales (por
ejemplo, las clulas pancreticas han de ser capaces de liberar
insulina tras la estimulacin especfica). Como los tejidos
embrionarios son an funcionalmente inmaduros, no puede
asumirse, sin ms, que las clulas madre obtenidas de ellos
presenten ya un funcionalismo normal27.

El tercer requisito deber consistir en la demostracin de la

eficacia del tratamiento con estas clulas en los diferentes
modelos de enfermedad tanto en pequeos animales (por ejemplo,
roedores) como en grandes animales (por ejemplo, primates no
humanos).

El cuarto aspecto es el de la seguridad. Una vez asegurada la

ausencia de infeccin transmisible, existe una significativa
posibilidad de que el trasplante de clulas embrionarias humanas
en receptores humanos origine tumores de estirpe embrionaria.
Ello exige contar con un mtodo seguro para impedir el desarrollo
de estos tumores.

Una quinta consideracin, y no la menos importante, es la

necesidad de prevenir el rechazo inmunolgico de las clulas
trasplantadas. Como ocurre en los trasplantes de rganos, tambin
la regeneracin tisular se puede realizar bien mediante clulas
autlogas (del mismo individuo), bien mediante clulas
alognicas (de la misma especie). Salvo en determinadas
situaciones (por ejemplo, trastornos hereditarios de las clulas
madre) en los que habr que emplear material alognico, el
abordaje preferido es el uso de clulas autlogas ya que, al
proceder del propio paciente, no existir rechazo inmunolgico28.
Si esto no es posible y resulta necesario el empleo de clulas
procedentes de otro individuo, para evitar el rechazo es obligada

40
la terapia previa con frmacos inmunosupresores que no est
exenta de complicaciones. Para obviar o, al menos, disminuir la
inmunosupresin, existe la posibilidad de atenuar la
inmunogenicidad de las propias clulas madre.

Otro mtodo, ms preciso, para prevenir el rechazo inmunolgico

podra ser el de la clonacin, que ya hemos mencionado. Consiste
en generar un embrin clnico mediante la introduccin, en un
vulo enucleado, del ncleo de una clula de un donante adulto.
Las clulas madre embrionarias obtenidas a partir de este embrin
clnico seran genticamente idnticas a las del donante y, al
menos en teora, potencialmente tiles para aplicaciones
teraputicas en dicho donante. Por esto se ha llamado a este
proceso clonacin teraputica29 para diferenciarlo de la
clonacin reproductiva.

Las diferencias entre la clonacin reproductiva y la teraputica

se pueden resumir considerando que en la clonacin reproductiva
el ncleo de una clula de donante adulto se introduce en un
vulo previamente enucleado que, tras activacin artificial, se
divide varias veces hasta formar un blastocisto que es utilizado
para desarrollar un nuevo individuo clnico mediante
transferencia a un tero de acogida. A pesar de la sencillez de
este enunciado, tras mltiples transferencias, slo algunos de los
blastocistos llegan a desarrollarse y a dar origen a animales
clnicos. En cambio, la llamada clonacin teraputica utiliza los
blastocistos clnicos, obtenidos por el mtodo de transferencia
nuclear, para cultivar las clulas de su masa celular interna y
obtener clulas madre embrionarias que se cultivan con tcnicas
especficas para lograr su diferenciacin en diversos tipos de
clulas, utilizables con fines teraputicos. Aunque esta somera
descripcin parece simple, la utilizacin de estos tipos de
clonacin origina tal nmero de problemas que no parece que
pueda ser una solucin aceptable en el futuro.

Siguiendo estas lneas de trabajo, se han postulado nuevos

mtodos para generar clulas madre. Hay experiencia reciente que

41
indica que cultivando en determinadas condiciones clulas madre
embrionarias de ratn se pueden conseguir unas clulas similares
a vulos. Estos vulos podran recibir, tras ser enucleados, la
transferencia de ncleos de clulas procedentes de un potencial
receptor30. Esto permitira, adems de reducir la necesidad de
donaciones de vulos, generar clulas madre especficas del
mismo paciente que no seran rechazadas por su sistema
inmunolgico.

De todas formas, an queda por saber si, a semejanza de lo que

ocurre en el ratn, se pueden obtener en el ser humano vulos a
partir de clulas madre humanas y si esos vulos son susceptibles
de transferencia nuclear. Con tcnicas similares se ha descrito la
produccin, de forma an imperfecta, de espermatozoides a partir
de clulas madre embrionarias31,32.

Pero el problema fundamental de la utilizacin de clulas

embrionarias radica en las profundas implicaciones ticas que
presenta su obtencin en el ser humano. Hemos subrayado el
hecho de que, ya desde la primera divisin del cigoto, cada una de
las dos clulas resultantes de esa divisin tiene su mensaje y su
misin en la formacin del nuevo ser. Como consecuencia, no es
aceptable decir que las clulas que forman el blastocisto antes de
su implantacin son solo un acmulo de clulas indiferenciadas,
un pre-embrin, como tan impropiamente lo designan algunos.
La identidad y el destino como individuo de este embrin, aunque
posea una, dos o algunas pocas clulas, estaran ya marcados,
como ha sealado Zernicka-Goetz, desde el da uno 33, lo
mismo que si se tratara de un embrin ya implantado, de un feto o
de un individuo adulto.

Por ello, como opinan eminentes juristas y especialistas en

Biotica, los embriones, sea cual fuere su edad, deben tener
derecho a la misma consideracin que la que corresponde a un
feto maduro o a un individuo adulto. Esta es la razn por la que
no les parece justificable la recoleccin y utilizacin de clulas
42
madre procedentes del sacrificio y manipulacin de embriones
humanos34. Precisamente, este debate tico, planteado en los
centros de investigacin de los pases de nuestro entorno y
cultura, ha conducido a la mayora de los legisladores de esos
pases, y tambin del nuestro, a regular de forma ms o menos
estricta la experimentacin y el uso teraputico de estas clulas.
Hay que decir que los resultados legislativos son an incompletos
y difieren, adems, de unos pases a otros.

Sin embargo, con el transcurso del tiempo y el trabajo de los

investigadores, este panorama est aclararndose. Si, como parece
demostrado, las clulas madre no embrionarias son tan maleables
como las embrionarias, el horizonte de la terapia celular con este
tipo de clulas, utilizables sin restricciones en Medicina
regenerativa, aparece prometedor. Las clulas no embrionarias
cuentan, entre otras ventajas, con la posibilidad de poderse utilizar
sin problemas de rechazo, ya que proceden del propio paciente,
son clulas autlogas.

En la introduccin a un informe sobre fuentes alternativas de

clulas humanas pluripotentes que realiz en 2005 el Consejo
Asesor de Biotica del Presidente de los Estados Unidos, Leon R.
Kass sealaba que gran parte de la controversia tica sobre las
clulas madre deriva del hecho de que, hasta ahora, la nica
manera de obtener clulas pluripotentes ha consistido en
obtenerlas de embriones humanos vivos por medio de un proceso
que necesariamente destruye los embriones. Si se lograra
encontrar un medio de obtener dichas lneas celulares sin tener
que crear y destruir esos embriones humanos, gran parte de esta
controversia tica desaparecera. Solo tres aos despus, estas
palabras revisten un tinte proftico. Los recientes
descubrimientos que han permitido obtener clulas madre
pluripotentes a partir de clulas somticas del propio paciente, al
eliminar la necesidad de emplear las clulas embrionarias
suponen, como veremos ms adelante, la superacin de todo el
debate.

43
Mtodos alternativos para la obtencin de clulas humanas
pluripotentes

De lo dicho hasta aqu aparece clara la relevancia que tienen los

intentos de encontrar mtodos alternativos para producir clulas
madre humanas pluripotentes, con propiedades virtualmente
idnticas a las de las clulas derivadas de embriones, sin
necesidad de crear y luego destruir esos embriones. Como seala
Grompe, "todo el mundo en el campo de las clulas madre est
interesado en esto". "Para unos es el nico camino tico. Para
otros es el nico camino prctico.

Para Jouve de la Barreda, la oposicin a la investigacin con

clulas madre embrionarias no significa oposicin a la
investigacin, ni siquiera oposicin a la investigacin con clulas
madre, sino oposicin a la utilizacin de los embriones, que
naturalmente son destruidos sin remisin, al extraer sus escasas
clulas. Es por eso por lo que en la gran mayora de los centros
de investigacin en los que se desea obtener una fuente de clulas
pluripotentes para curar enfermedades degenerativas, lo que se
est haciendo es buscar alternativas.

Los requisitos de esos mtodos alternativos se resumen en la

capacidad de proporcionar clulas con las mismas propiedades de
las clulas madre embrionarias, portadoras de una pluripotencia
estable lo que quiere decir que han de ser capaces de convertirse
en cualquiera de los cerca de 200 tipos celulares que existen en un
organismo humano.

Cules son las posibles fuentes alternativas de clulas

pluripotentes? Existen varios planteamientos que podran
permitir la obtencin de estas clulas, adecuadas para una
eventual aplicacin teraputica, que pueden sintetizarse en cinco
lneas fundamentales:

44
1. Potenciacin de clulas madre autctonas
Clulas hematopoyticas de la mdula sea
Clulas progenitoras cardiacas
Clulas progenitoras endoteliales, miocrdicas o de msculo
liso
Clulas epicrdicas adultas
Clulas madre hepticas, clulas ovales hepticas

2. Obtencin de clulas multipotentes mediante cultivos

especficos
Clulas de la sangre del cordn umbilical.
Clulas aisladas del lquido amnitico.
Cultivo de clulas madre germinales multipotentes.
Clulas mesenquimales de la mdula sea, MAPC, MIAMI,
etc.

3. Obtencin de clulas embrionarias sin destruccin de

embriones
Clulas de embriones muertos
Clulas embrionarias humanas cultivadas a partir de un
nico blastmero, obtenido por biopsia del embrin, sin
destruirlo

4. Obtencin de clulas pluripotentes a partir de sistemas

celulares creados artificialmente (artefactos biolgicos)
Mediante partenognesis artificial.
Mediante transferencia nuclear alterada (ANT).
Mediante ANT asociada a reprogramacin del vulo (ANT-
OAR).

5. Creacin de clulas pluripotentes por reprogramacin celular

Fusin celular
Induccin de clulas iPS mediante factores de transcripcin.

Veamos con algo ms de detalle estas lneas fundamentales.

45
1. Potenciacin de clulas madre autctonas

Es sabido que, en los organismos superiores, entre ellos el

humano, hay una serie de rganos y tejidos que estn en continua
renovacin, como, por ejemplo, la mdula sea, la piel, el
intestino o el cerebro, entre otros. Esta renovacin se efecta a
expensas de clulas progenitoras tejido-especficas que residen en
los rganos correspondientes o estructuras relacionadas, controlan
su renovacin y, en una cierta medida, restauran zonas lesionadas.

En el caso de la sangre, es bien conocido el hecho de su constante

renovacin por parte de clulas multipotentes presentes en los
rganos hematopoyticos que garantizan la regeneracin
sangunea en caso de dao o enfermedades de la sangre. Existen
factores, como es el caso del factor estimulante de colonias (G-
CSF), que inducen la movilizacin de clulas desde la mdula
sea o de otros lugares del organismo hacia el torrente
circulatorio.

En otros casos, como el del corazn, exista un paradigma,

establecido hacia 1970, que consideraba al miocardio como un
rgano incapaz de auto-regenerarse porque sus clulas haban
alcanzado un estadio final de diferenciacin que implicaba la
incapacidad de proliferar y renovarse mediante nuevas mitosis.
Posteriormente se ha demostrado que no puede seguirse
manteniendo este paradigma35-39. En varios laboratorios de
investigacin bsica se han identificado en el corazn acmulos
de clulas cardacas primitivas capaces de proliferar y
diferenciarse. Mediante el empleo de un marcador especfico, se
ha podido demostrar que estas clulas son clonognicas y
multipotentes.

46
 Clulas progenitoras tejido-especficas movilizadas hacia el torrente
circulatorio

Por lo que se refiere al corazn, las clulas progenitoras

cardiacas tienen propiedades fundamentales de las clulas madre
y son, tanto in vitro como in vivo, multipotentes y capaces de
originar cardiomiocitos y vasos coronarios.

Renovacin de tejidos y vasos cardacos por clulas progenitoras

especficas.

47
Segn estos datos, parece que en el corazn adulto se mantiene un
reservorio de clulas no diferenciadas que cuando, por diversas
causas, se produce una sobrecarga del miocardio o ste se daa,
permiten una cierta renovacin del miocardio y la sustitucin de
porciones daadas por tejido funcionalmente competente. La
demostracin experimental de este hecho, abre oportunidades
para la posible utilizacin teraputica de estas clulas para
regenerar el miocardio daado.

Se han desarrollado mtodos para recolectar y cultivar estas

clulas autctonas, paso importante para afrontar este tipo de
aplicacin teraputica. Para esta aplicacin existen, segn Piero
Anversa, dos posibilidades: una de ellas es la de aislarlas y
multiplicarlas en el laboratorio, para volverlas a colocar, en forma
de trasplante autlogo, en las zonas daadas; la otra consiste en
identificar el sistema receptor de factores de crecimiento de estas
clulas, lo que permitira su activacin en el propio corazn. Dada
las caractersticas de este rgano que al realizar una actividad
continua necesita de un aporte metablico (oxgeno y nutrientes)
importante y constante, sus clulas madre deben ser capaces de
regenerar tanto clulas del miocardio (cardiomiocitos) como las
que forman los pequeos vasos coronarios que permiten dicho
aporte (clulas endoteliales y de msculo liso).

La divisin asimtrica de una clula madre cardaca originados

clulas diferentes: otra clula madre cardaca y una clula hija
progenitora que a su vez puede dar origen a clulas progenitoras
miocrdicas, endoteliales o de msculo liso. Cada tipo de clulas
progenitoras originan clulas precursoras que, una vez
transformadas en las llamadas clulas amplificadoras
transitorias, se diferencian, por una parte, en cardiomiocitos
maduros y, por otra, en clulas endoteliales o en clulas
musculares lisas capaces de originar vasos sanguneos.

48
 A partir de clulas madre autctonas se pueden originar clulas
miocrdiacas y vasculares

Como se aprecia en la figura, las clulas progenitoras expresan

antgenos celulares y factores de transcripcin pero no tienen
protenas citoplasmticas especficas. Estas ltimas aparecen en
las clulas precursoras que poseen antgenos celulares de clulas
madre, factores de transcripcin y protenas citoplasmticas
tpicas de cada estirpe celular diferenciada. Como se ha indicado,
el aislamiento y la multiplicacin de las clulas progenitoras se
puede realizar mediante cultivos a partir de una biopsia
miocrdica40.

Uno de los mtodos de cultivo consiste en permitir que las clulas

proliferen en un medio libre de suero que contiene unas protenas,
los factores de crecimiento EGF y FGF, que facilitan la
proliferacin y la formacin de las llamadas cardioesferas, que
son unas estructuras tridimensionales en cuyo centro se va
49
produciendo la divisin de las clulas y su diferenciacin en los
tres linajes: cardiomiocitos, clulas endoteliales y clulas
musculares lisas.

Formacin de cardioesferas, en cuyo centro se dividen las clulas y se

diferencian en clulas endoteliales, musculares lisas y cardiomiocitos

Junto al mtodo de los cultivos en placas de laboratorio, existe la

posibilidad de activacin in situ de estas clulas progenitoras
cardacas, sin separarlas del lugar en el que se encuentran, por
medio de factores de crecimiento especficos. Sin embargo, an
no se ha conseguido encontrar el mtodo idneo para localizarlas
en los puntos de inters y multiplicarlas.

Recientemente se ha observado que ciertas molculas que regulan

la formacin de los vasos coronarios durante el desarrollo
embrionario, tambin regulan en el corazn isqumico la
aparicin de flujo colateral mediante el desarrollo de nuevos
vasos. Una de estas molculas, la timosina 4 (T4), adems de
ser esencial para el desarrollo vascular en el ratn, estimula la
vuelta a la pluripotencia de las clulas epicrdicas adultas. Estas
clulas de la membrana que envuelve el miocardio se convierten
en una fuente viable de progenitores vasculares (endoteliales y de
msculo liso) que promueven o facilitan la formacin de nuevos

50
vasos tras la produccin de lesiones cardacas41. Segn se ha
demostrado recientemente, el epicardio postnatal contiene una
poblacin de clulas madre que retienen la capacidad de generar
precursores miocrdicos y vasculares 42.

Activacin in situ de las clulas progenitoras cardacas

Por otra parte, desde hace tiempo se conoce que la estimulacin

medular con el factor de crecimiento G-CSF, produce una
movilizacin significativa de clulas de la mdula sea. Por ello
se ha pensado que esta movilizacin favorecera la fijacin de
estas clulas en tejidos daados en los que se producen molculas
de atraccin. Sin embargo, los resultados de algunos estudios
aleatorizados, controlados con un grupo placebo, no han mostrado
claramente los efectos que se perseguan. Por ejemplo, la
movilizacin de clulas de la mdula sea mediante el factor de
crecimiento G-CSF, tras un ataque cardaco, no produjo

51
diferencias en el tamao del infarto, los volmenes ventriculares y
la fraccin de eyeccin 43.

Otro rgano, cuyos mecanismo de regeneracin estn recibiendo

nueva luz, gracias a los conocimientos adquiridos en los ltimos
aos, es el hgado. Durante mucho tiempo se asuma que la
regeneracin heptica se realiza fundamentalmente a expensas
de la divisin y proliferacin de los hepatocitos maduros que
forman el parnquima heptico.

La regeneracin heptica se realiza a expensas de la divisin y

proliferacin de varios tipos celulares

Hoy se sabe que, si el dao heptico es demasiado extenso, junto

a la regeneracin a partir de los hepatocitos, se produce la
activacin de clulas madre ubicadas en los canales de Hering
(porciones intrahepticas de las vas biliares), que originan las
52
llamadas clulas ovales, ya descritas en roedores y en el hombre,
que son identificables mediante marcadores antignicos
especficos. Estas clulas ovales contribuyen significativamente al
proceso regenerativo. A su lado, se ha observado tambin la
presencia de clulas hematopoyticas.

No est plenamente aclarado el mecanismo mediante el cual estas

diferentes poblaciones celulares interactan unas con otras y con
la poblacin de hepatocitos maduros para alcanzar un equilibrio
homeosttico en el rgano enfermo o en fase de regeneracin. Sin
embargo, la importante potencialidad de las clulas madre
hepticas puede traducirse en la viabilidad de su trasplante con
fines teraputicos. Otra posibilidad de regeneracin heptica
teraputica es la que se puede realizar mediante trasplante de
clulas progenitoras de mdula sea.

2. Obtencin de clulas multipotentes mediante cultivos

especficos.

En determinadas condiciones es posible obtener en pequeo

nmero, y multiplicar luego en cultivo, clulas con elevada
multipotencia, e incluso pluripotentes, sin necesidad de acudir a
ingeniera gentica o a una biologa celular extica o complicada,
y sin problemas ticos de ningn tipo. Algunas posibles opciones
son:

Clulas de la sangre del cordn umbilical

La sangre remanente en el cordn umbilical tras su ligadura

contiene clulas con caractersticas embrionarias o
hematopoyticas que proporcionan buenas posibilidades de
cultivo y aplicacin, y estn libres de las implicaciones ticas que
afectan a las clulas embrionarias44.

53
Estas clulas madre pueden multiplicarse en su estado
indiferenciado para, posteriormente, ser dirigidas a la formacin
de una amplia variedad de tejidos representativos de las tres capas
germinales (clulas nerviosas, precursoras de hgado y pncreas,
de msculo esqueltico, adiposas, seas o vasculares). Su
aplicacin en el propio sujeto del que proviene el cordn,
representa un autotrasplante, exento de cualquier problema de
incompatibilidad inmunolgica. Con las medidas pertinentes,
anlogas a las utilizadas en los trasplantes de rganos, pueden ser
utilizadas tambin en otros sujetos distintos del donante. Las
caractersticas favorables de este tipo de clulas ha propiciado el
establecimiento en muchos pases de bancos de sangre de cordn
umbilical.

Clulas aisladas del lquido amnitico

En el lquido amnitico, y tambin en la placenta en el momento

del parto, se puede encontrar un tipo de clulas multipotentes que
se prestan fcilmente a su posterior cultivo y aplicacin
teraputica. A pesar de que en el momento de su obtencin se
consigue recolectar un pequeo nmero, su gran capacidad
proliferativa hace que su nmero se duplique cada 36 horas, por
lo que pronto se llega a disponer de elevadas cantidades de clulas
que tienen, adems, una vida significativamente ms larga que la
de las clulas madre adultas en cultivo. Por otra parte, al ser ms
maduras que las embrionarias, estas clulas no parecen presentar
el riesgo de desarrollar tumores.

Cultivo de espermatogonias

Las espermatogonias de los testculos se mantienen proliferando

hasta la muerte del individuo. La funcin de estas
espermatogonias progenitoras, es la produccin de
espermatozoides mediante el proceso llamado espermatognesis.
Al cultivarlas en las condiciones estndar establecidas para el
mantenimiento de clulas madre embrionarias, se han podido
producir, aunque con una eficiencia pequea, colonias de clulas

54
clulas pluripotentes identificables mediante los marcadores de
las clulas madre. Estas clulas, denominadas clulas madre
germinales multipotentes o clulas mGS, son similares a las
clulas madre embrionarias tanto en su morfologa como en la
capacidad de proliferacin. La principal dificultad tcnica que
presenta su manejo es la baja eficiencia de su obtencin, ya que
para conseguir una nica lnea celular los autores de un estudio
necesitaron utilizar testculos de 30 animales. Las experiencias
iniciales han sido complementadas ms recientemente por Guam
y cols., quienes han sido capaces de obtener clulas madre
pluripotentes similares a las embrionarias a partir de testculos de
ratones adultos. Manipulando el medio de cultivo han conseguido
inducir el desarrollo de espermatozoides45,46. Es evidente que el
potencial empleo de estas clulas para terapia regenerativa slo
sera posible en pacientes del sexo masculino. No obstante,
tambin se han identificado clulas madre en ovarios de ratonas y
de mujeres.

Cultivo especfico de clulas estromales de la mdula sea

Si partimos de la idea de que las clulas madre embrionarias no

existen fisiolgicamente sino que son transformadas y
reprogramadas durante el curso de un cultivo prolongado de la
masa celular interna del blastocisto, resulta verosmil la
posibilidad de obtencin de clulas pluripotentes cultivando otro
tipo de clulas.

Diversos laboratorios han trabajado en la obtencin, a partir de

tejido adulto, de una poblacin celular que presente las
caractersticas de clulas madres pluripotentes. El grupo de
Catherine Verfaillie, primero en Minnepolis y posteriormente en
Lovaina, ha identificado en la mdula sea humana un grupo de
clulas mesenquimales (llamadas MAPC, mesenchymal adult
progenitor cells) que son capaces de diferenciarse no solo en la
estirpe mesenquimal, sino tambin en clulas endoteliales y otras
de estirpe endodrmica. Uno de los aspectos fundamentales de las

55
MAPC es precisamente su capacidad diferenciadora. Al sustituir
en los cultivos el medio de expansin por medio de diferenciacin
se puede inducir en estas clulas su diferenciacin hacia tejidos de
las tres capas embrionarias. Cuando se inyectan las clulas MAPC
en un blastocisto temprano, se pueden diferenciar en tipos
celulares especficos en respuesta a seales proporcionadas por
diferentes rganos.

La mdula sea es una fuente importante de clulas madre

(hematopoyticas o estromales)

No est an aclarado cmo las clulas MAPC se asemejan a las

clulas embrionarias, que son el patrn de referencia de la
pluripotencia, por el hecho de que son capaces de generar todos
los diversos tipos celulares del organismo adulto. Entre varios
marcadores de pluripotencia conocidos estn, como veremos ms
adelante, los factores Oct4, Nanog y Sox2. Otro test bsico de
pluripotencia es la formacin de teratomas cuando las clulas en
estudio se inyectan en un blastocisto de ratn. Pues bien, las
clulas MAPC solo tienen el factor Oct4 y no los otros dos, y
56
tampoco son capaces de formar teratomas. Por ello, Verfaillie
seala que describi a estas clulas como multipotentes porque
no renen todas las caractersticas de las clulas pluripotentes
47,48
.

Un grupo de la Universidad de Miami, ha obtenido, tambin de la

mdula sea, una poblacin de clulas pluripotentes, conocidas
como MIAMI ( Marrow-Isolated Adult Multilineage Inducible
cells 49), de las que se pueden derivar mltiples linajes celulares.
Estas clulas expresan los dos marcadores, Nanog y Sox2, de los
que carecen las clulas MAPC.

3. Obtencin de clulas embrionarias sin destruccin de

embriones.

En lneas generales, existen dos posibilidades para obtener las

clulas embrionarias sin que, para ello, sea necesario producir la
muerte del embrin: utilizar embriones que ya estn muertos o
utilizar embriones vivos sin daarlos.

Obtencin de clulas de embriones muertos 50,51. En este caso, se

utilizan embriones, obtenidos por fecundacin in vitro, de hasta
dos das tras la concepcin, formados por 4 a 8 clulas o
blastmeros, que, por alguna razn, mueren espontneamente
detenindose su desarrollo y cesando de forma irreversible el
proceso de divisin celular, aunque los blastmeros parecen
normales y sanos. Un analisis de dichos blastmeros ha
demostrado que expresan genes marcadores de pluripotencia (p.e.
Oct4, Nanog y Rex1) y que las clulas embrionarias derivadas del
cultivo de estos blastmeros poseen cromosomas normales.

La otra posibilidad consiste en la realizacin de biopsias no

destructivas de embriones vivos. Despus que el embrin de dos
das se ha dividido en ocho clulas, se extrae uno de dichos
blastmeros sin daar al resto del embrin 52. A partir de una
nica clula, obtenida con la tcnica empleada en algunas clnicas

57
de fertilizacin in vitro para lo que se conoce como diagnstico
gentico preimplantatorio, se podran realizar cultivos de clulas
embrionarias pluripotentes.

Kathy Hudson, directora del Centro de Gentica de la Johns

Hopkins University, dice que hay pocos datos para documentar
la seguridad y eficacia del procedimiento de diagnstico
preimplantatorio, tcnica que somete al embrin humano a un
peligro innecesario ya que la posible utlidad para el propio
embrin es ciertamente remota.
En agosto de 2007 se public en la revista Nature un artculo de
Robert Lanza, director cientfico de la compaa Advanced Cell
Technology que recoga una serie de 10 experimentos que
demostraban la posibilidad de derivar clulas embrionarias
humanas a partir de un nico blastmero. Sin embargo, aunque no
se mencionaba en la publicacin inicial, la revista hubo de aclarar
con posterioridad en un Addendum, que todos los embriones
utilizados para obtener el nico blastmero haban sido destruidos
53
.

4. Obtencin de clulas pluripotentes a partir de sistemas

celulares creados artificialmente (artefactos biolgicos)

Los llamados artefactos biolgicos, aunque no son propiamente

embriones con capacidad de llegar a constituir organismos
humanos, se asemejan a los embriones porque poseen capacidades
de desarrollo propias de la embriognesis natural. De las clulas
de estos sistemas celulares pueden derivarse lineas de clulas
pluripotentes.

Entre los mtodos que permiten crear estos sistemas celulares o

artefactos biolgicos, se pueden mencionar la partenognesis, y
la tcnica llamada de transferencia nuclear alterada (ANT).

58
La partenognesis es el procedimiento mediante el cual un vulo
puede dar lugar a un embrin en ausencia de un espermatozoide
54
.

Partenognesis artificial mediante estmulos elctricos

Un partenote es, pues, una estructura, desarrollada a partir de un

vulo que conserva dos conjuntos de cromosomas y que se
desarrolla sin una fertilizacin previa. Esta estructura es similar a
la de un embrin pero usualmente termina en un desarrollo
anormal e incompleto. Existe una partenognesis natural que se
ha observado en muchos animales inferiores, sobre todo, insectos.
En muchos insectos de tipo social, como abejas u hormigas, los
vulos no fertilizados originan los znganos (machos) mientras
que los fertilizados dan origen a las reinas y obreras.

La partenognesis artificial fue realizada por primera vez en

1900 por Jacques Loeb estimulando vulos de rana. En varios
mamferos, por ejemplo en ratones e incluso monos, se ha podido
realizar una partenognesis artificial mediante estmulos
elctricos o qumicos. Dado que el desarrollo embriolgico de los
mamferos exige la expresin de los genes paternos, estos
embriones partenogenticos resultaron inviables y moran en
estadios precoces, a los pocos das tras su implantacin. Esta
circunstancia ha sido esgrimida como un medio para obtener
clulas embrionarias que no planteara, segn los proponentes de
la tcnica, problemas ticos si se realiza en el hombre, ya que los

59
embriones producidos nunca sern viables y no existran
inconvenientes para su destruccin con el fin de obtener las
clulas55. De hecho, David Wininger, de la empresa
biotecnolgica Stemron de Maryland, ha llegado a producir
embriones humanos partenogenticos hasta el estadio de
blastocisto, de los que obtuvo clulas embrionarias que llegaron a
sobrevivir unos pocos das.

La transferencia nuclear alterada (ANT) utiliza una

combinacin de transferencia nuclear y una modificacin gentica
del citoplasma, o del mismo ncleo, con vistas a generar clulas
con las caractersticas, moleculares y de desarrollo, de clulas
pluripotentes sin llegar a producir embriones, debido a la
supresin de una organizacin integrada que es siempre necesaria
para el desarrollo e implantacin del cigoto generado56.

Transferencia nuclear alterada por modificacin del ncleo de clula

somtica insertado en un vulo enucleado.

Una variante de la transferencia nuclear alterada vendra a ser lo

que se conoce como transferencia nuclear alterada asociada a
reprogramacin del vulo (ANT-OAR). En este procedimiento
ANT-OAR, se eliminan del ncleo de una clula somtica ciertos
factores de transcripcin (por ejemplo, el Cdx2)57 y se
sobreexpresan otros (por ejemplo, el Nanog, o el Oct3/4).

60
As, pues, primero se altera el genoma nuclear y despus se
transfiere este ncleo a un vulo enucleado, creando un autntico
artefacto no embrionario, cuyo citoplasma reprograma el vulo a
un estado pluripontente. (De ah la denominacin ANT-OAR:
altered nuclear transfer-oocyte associated reprograming). La idea
en este caso no es la de crear un artefacto biolgico del que
obtener clulas embrionarias, sino la de producir directamente, sin
intermediarios y desde el inicio, clulas embrionarias
(pluripotentes). Los blastocistos producidos mediante esta
transferencia nuclear anormal, presentan una modificacin
epigentica que afecta al patrn de expresin gentica desde su
inicio, carecen de la unidad y del potencial de desarrollo de un
embrin, carecen de trofoblasto y, por ello, son incapaces de
implantarse en el tero mientras que s son capaces de generar
clulas pluripotentes.

Comparacin de la fecundacin natural con la transferencia nuclear,

simple o alterada.

61
5. Creacin de clulas pluripotentes mediante reprogramacin

Desde hace algn tiempo se investiga para descubrir qu factor (o

factores) proporcionan a una clula madre su carcter y
propiedades de troncalidad, con objeto de utilizar este
conocimiento para volver atrs el reloj de las clulas adultas y,
tras su reprogramacin, conseguir que vuelvan a manifestar
las propiedades de pluripotencia y autorenovacin de las clulas
madre que les dieron origen.

Una modalidad de reprogramacin es la fusin. La fusin celular

es la combinacin de dos o ms clulas en una, que se convierte
en clula hbrida pluripotente (llamada heterokaryon), que
puede autoreproducirse a lo largo de varias generaciones. La
fusin celular viene a ser una manera de asignar genes especficos
a cromosomas especficos. Con la fusin, Cuando una clula
indiferenciada se fusiona con otra diferenciada, la clula
indiferenciada borra en cierto modo la programacin existente en
el ncleo de la clula diferenciada imponindole la suya propia y
convirtindola en pluripotente, aunque la clula resultante puede
retener las caractersticas externas de la clula diferenciada. De
esta manera, clulas somticas, humanas y de ratones, pueden ser
reprogramadas por fusin y convertidas en clulas hbridas
pluripotentes. Se supone que en las clulas indiferenciadas deben
existir algunas molculas mediadoras de esta conversin, una de
las cuales parece ser la protena Nanog que propiciara la
multiplicacin de estas clulas indiferenciadas.

Siguiendo esta lnea, un equipo de investigadores del Harvard

Stem Cell Institute ha logrado combinar fibroblastos humanos con
clulas embrionarias humanas en presencia de una sustancia de
tipo detergente, polietilen-glicol, que facilit su fusin66. Las
clulas fusionadas mostraron la presencia de marcadores
genticos correspondientes a fibroblastos somticos y a clulas
embrionarias. Estas clulas hbridas tenan propiedades de clulas

62
pluripotentes: se diferenciaron en los cultivos como cuerpos
embrioides, formaron teratomas en ratones con inmunidad
comprometida e incluso llegaron a formar manchas de cabello en
animales normalmente calvos.

Esta experiencia es solo un paso adelante que presenta an

problemas significativos, ya que las clulas fusionadas son
tetraploides (contienen el doble del nmero normal de
cromosomas). Para resolverlos se deber eliminar en la clula
hbrida el ncleo de la clula embrionaria con lo que la clula
resultante sera diploide (tendra el nmero normal de
cromosomas). La investigacin del equipo de Harvard se mueve
tambin hacia el objetivo de producir lneas celulares
pluripotentes sin necesidad del empleo de vulos ni de crear
embriones 67. Kevin Eggan, uno de los miembros del equipo,
predice que "en 10 a 15 aos, induciremos la transformacin
directamente y no necesitaremos embriones ni vulos.

Sin embargo, el mtodo ms prometedor para inducir clulas

pluripotentes mediante reprogramacin gentica es el que altera
la expresin gentica de cualquier clula somtica por
introduccin en su ADN nuclear de varios factores que modifican
su programa gentico. En 2007, se publicaron una serie de
trabajos en los que se mostraba que clulas somticas de ratones,
y humanas, podan convertirse en clulas que se comportan como
clulas pluripotentes, anlogas a las embrionarias. Estas clulas,
denominadas clulas pluripotentes inducidas (iPS), pueden ser
de gran utilidad para estudiar enfermedades y eventualmente para
la terapia celular propia de la Medicina Regenerativa. Creadas a
partir de clulas adultas por medio de un simple truco gentico
parecen haber conseguido el estado de pluripotencia que les
permite convertirse en cualquier tipo de clula del organismo.

Las nuevas clulas son muy particulares: requieren unas

condiciones de cultivo muy concretas, anlogas a las que se
emplean para trabajar con las clulas embrionarias, que tienden a
detener su diferenciacin hacia tejidos ms especializados.

63
Dos maneras de obtener clulas madre. A la izquierda, mediante
transferencia nuclear alterada por reprogramacin del ncleo donante. A
la derecha, mediante reprogramacin directa de clulas somticas.

Thomson, que fue el primero en obtener lneas celulares

embrionarias humanas en 1998, ha visto que las clulas iPS no
solo expresan genes similares a los de las clulas embrionarias,
sino que los expresan con mayor robustez. Esto significa que su
diferenciacin posterior sera ms predecible que la de las clulas
embrionarias. Para Thomson si no se puede demostrar la
diferencia entre las clulas iPS y las clulas madre embrionarias,
stas llegarn a convertirse en una anomala histrica.

No parece, pues, arriesgado afirmar que esta alternativa de la

reprogramacin de clulas somticas adultas abre un panorama
muy prometedor en el campo de la Terapia celular. Se trata de
clulas somticas diferenciadas, de diversos tejidos que,
sometidas a un proceso de desdiferenciacin retroceden hasta
64
la fase de pluripotencia, y desde este estado inducido pueden
diferenciarse de nuevo en clulas de tipo distinto del de las
originales.

El proceso de desdiferenciacin puede seguirse de una nueva

rediferenciacin

Adems de conocerse cmo la informacin gentica puede

expresarse de formas distintas segn sea el programa epigentico
de las clulas, se ha comprobado que ciertas protenas, llamadas
factores de transcripcin, son responsables de regular la
activacin o no de ciertos genes y establecer el grado de esta
activacin, originando una cascada de expresin gentica. Este
conocimiento es el que ha permitido reprogramar las clulas a
estados previos ms plsticos. Dicha reprogramacin conduce a la
reversin global del epigenoma de las clulas somticas a un
estado de pluripotencia similar al embrionario, de acuerdo a unos
criterios establecidos: adems de dividirse para producir clulas
semejantes a ellas mismas (autorenovacin), expresan ciertos
genes de la manera que lo hacen las clulas embrionarias y
pueden ser dirigidas a una diferenciacin en clulas de las tres
capas embrionarias. Se ha podido comprobar que la potencia
biolgica y el estado epigentico de las clulas reprogramadas in
vitro es indistinguible del que poseen las clulas embrionarias.
Las lneas celulares obtenidas en los estudios ms recientes,
65
llamadas clulas iPS (induced Pluripotent Stem cells), no solo se
parecen ms an a las embrionarias en sus perfiles
transcripcionales y de modificacin cromatnica, sino que han
sido capaces de generar ratones quimricos adultos con presencia
de la lnea germinal, hecho que representa el test ms riguroso de
pluripotencia.

Ha sido el cientfico Shinya Yamanaka, de Kyoto (Japn), que ha

acaparado recientemente la atencin del mundo cientfico y de la
prensa internacional, el que consigui la expresin en el
laboratorio de los cuatro factores de transcripcin designados
como Oct4 (tambin llamado Oct3/4 o Pou5f1), Sox2, c-Myc y
Klf4.

El grupo investigador introdujo, por medio de retrovirus, estos

cuatro factores en clulas de la piel de ratones, convirtindolas en
clulas pluripotentes idnticas a las embrionarias. Estas clulas
eran capaces, por ejemplo, de generar neuronas y clulas de
msculo cardaco las cuales, tras 12 das de diferenciacin,
comenzaron a latir espontneamente 58-61.

Introduccin mediante retrovirus de cuatro factores de transcripcin en

fibroblastos de la piel que se convierten en clulas pluripotentes.

66
Segn Yamanaka, el papel de los cuatro factores de transcripcin
en la induccin de las clulas iPS se puede esquematizar
tentativamente de la siguiente manera: la expresin del gen c-Myc
induce en las clulas un cambio en la estructura de la cromatina
que tiene un doble efecto: la tendencia a la inmortalidad y la
posibilidad de conversin de las clulas en tumorales.

Papel de los factores de transcripcin Oct4, Sox2, c-Myc y Klf4 en la

induccin de las clulas iPS

Al mismo tiempo el c-Myc induce tambin apoptosis y

senescencia, efectos estos que son probablemente suprimidos por
el factor Klf4. El factor Oct-3/4 probablemente cambia el destino
de las clulas, convirtindolas de clulas potencialmente
tumorales en pluripotentes, caracterstica que tambin requiere la
accin del factor Sox2, ya que se ha visto que la introduccin de
los tres primeros factores, excluyendo el Sox2, produce clulas
morfolgicamente similares a las embrionarias pero que carecen
de pluripotencia.

Simultneamente a los trabajos de Yamanaka, otros dos grupos

americanos (Thomson en Madison y Jaenisch en Boston), han
realizado una experiencia anloga. Con una tcnica similar,
obtuvieron clulas pluripotentes empleando dos de los factores de
Yamanaka (el Oct4 y el Sox2) y otros dos diferentes (el Nanog y
el Lin28) introducidos, con la ayuda de lentivirus, en clulas
adultas de la piel de fetos y de recin nacidos.

67
Antes de los trabajos de Yamanaka, tres de los factores, Oct4,
Sox2 y c-Myc, ya eran conocidos como importantes para la
pluripotencia. En la actualidad estn apareciendo nuevos factores
de pluripotencia y su lista se sigue ampliando. Sin embargo, para
Thompson, resulta sorprendente que un nmero relativamente
pequeo de factores puedan producir un cambio tan dramtico.

Conviene sealar que las clulas iPS no estn exentas de

inconvenientes. La manipulacin gentica por medio de vectores
virales (retrovirus o lentivirus) es una tcnica que tiene sus
problemas aadidos y no encontrara fcil aprobacin por las
agencias estatales de control. Adems, el gen c-Myc origin
tumores en el 20% de los ratones utilizados por Yamanaka. Esta
es la razn por la que este oncogen no ha sido empleado por los
grupos americanos. Muy recientemente, el equipo de Yamanaka
ha descrito un protocolo modificado para generar clulas iPS que
elimina el c-Myc y utiliza los otros tres factores. Las clulas
generadas con el nuevo protocolo eran de buena calidad y los
ratones derivados no desarrollaron tumores durante todo el tiempo
del estudio 63.

Es muy posible que se descubran otros factores que, adems de

aportar una mayor eficiencia, podran lograr la manipulacin
gentica de las clulas sin necesidad de emplear vectores virales
para modificar el genoma celular.

Segn John Gearhart, director del programa de Clulas Madre de

la Johns Hopkins en Baltimore, una vez resueltos estos y otros
problemas, si la estrategia de las clulas iPS se prueba efectiva
y segura con clulas humanas, lo que parece suceder en breve,
disminuir el papel de la transferencia nuclear en la obtencin de
clulas pluripotentes especficas para cada paciente. Este es el
camino a seguir dice el Premio Nbel Martin Evans - es lo
que todos esperbamos.

En Agosto de 2008, en una entrevista a la revista Nature, James

Thomson deca entre otras cosas: Las clulas iPS abren un
amplio campo de posibilidades. Si es arduo y arriesgado obtener

68
embriones, resulta especialmente fcil obtener fibroblastos Seis
meses despus de obtenerse las primeras clulas embrionarias
humanas exista tan solo una docena de laboratorios trabajando
con ellas, mientras que medio ao despus de obtenerse las
clulas iPS, hay miles de laboratorios que las trabajan y obtienen
cada uno multiples lneas celulares. As como existen tan solo
algunos cientos de lneas de clulas embrionarias, se han
obtenido ya grandes cantidades de lneas celulares iPS Estas
clulas pueden llegar a cambiar la Medicina humana porque
cambian la va de acceso al cuerpo humano ahora se pueden
estudiar por primera vez, algunos tipos de clulas y tejidos que
antes eran difciles de obtener y ahora se consiguen en
cantidades ilimitadas

Ian Wilmut, creador de la oveja Dolly con James Thomson uno de los
padres de la reprogramacin

El mtodo de reprogramacin celular, desarrollado a partir de las

investigaciones de Yamanaka, ha supuesto la apertura de un
nuevo y extenso campo de investigacin que, adems de facilitar
el estudio de las enfermedades degenerativas, sostiene una
69
esperanza bien fundada de tratamientos eficaces para ellas. En la
prestigiosa revista New England Journal of Medicine, Douglas R.
Higgs, del Weatherall Institute of Molecular Medicine de Oxford,
considera que la reprogramacin de clulas somticas
diferenciadas anuncia un nuevo amanecer en la Medicina
Regenerativa.

Ya en 2007 estas clulas mostraron su capacidad de tratar con

xito la enfermedad hematolgica conocida como anemia de
clulas falciformes (sickle cell disease). En Abril de 2008 Marius
Wernig, del laboratorio de Rudolf Jaenisch en el MIT de Boston,
comunic la mejora significativa obtenida en ratas con un
trastorno motor anlogo al de la enfermedad de Parkinson tras la
implantacin de clulas iPS generadas mediante la adicin de
cuatro genes a clulas de la cola de dichos animales64.

En Agosto de 2008, otro equipo de Harvard ha anunciado65 la

generacin de lneas celulares pluripotentes, especficas para otras
9 enfermedades genticas: la inmunodeficiencia severa de
adenosina-deaminasa, el sndrome de Shwachman-Bodian-
Diamond, la enfermedad de Gaucher, dos tipos de distrofia
muscular, la diabetes tipo 1, la enfermedad de Parkinson, el
sndrome de Lesch-Nyhan, la enfermedad de Huntington, y el
sndrome de Down 66.

Para el investigador de Harvard Douglas Melton, experto en

diabetes, esta es slo la primera oleada de enfermedades, ya
que el Harvard Stem Cell Institute pretende crear un ncleo
central de produccin de clulas iPS que producir entre 50 y 200
lneas celulares al ao, facilitndolas a un coste nominal a otros
centros de investigacin de todo el mundo67.

En Noviembre de 2008, un grupo del Harvard Stem Cell

Institute68, ha logrado producir clulas iPS utilizando otro tipo de
vector vrico, los adenovirus, que al no integrarse en el genoma
celular no son mutagnicos y, por tanto, aumentan notablemente
la seguridad del procedimiento.

70
Un grupo investigador ingls (Cambridge) ha conseguido
demostrar que los requerimientos para la deprogramacin y
reprogramacin son menores en clulas somticas manipuladas
mediante sustancias inhibidoras, presentes en sangre leucmica69,
con lo que mejoran notablemente la eficiencia.

El propio Yamanaka70, ha comunicado en Octubre de 2008 que en

lugar de emplear retrovirus o lentivirus, que se integran en el
genoma de la clula, se puede utilizar, para transportar los cuatro
genes al interior del ncleo de la clula, un plsmido (pequea
molcula estable de ADN) que no se integra en el genoma, lo que
garantiza la seguridad del procedimiento. Los plsmidos son
seguros y baratos y pueden producirse en grandes cantidades y
conservarlos congelados. Si se consigue obtener clulas iPS
humanas, como ya se ha hecho en el ratn, esto supondr un
notable avance hacia la aplicacin en Medicina Regenerativa.

El investigador espaol J.C. Ispiza, que trabaja en La Jolla

(California) y Barcelona, ha logrado obtener clulas nerviosas y
cardacas a partir de clulas somticas del cabello o de la piel, con
un modelo ms eficiente que los descritos hasta el presente71.

71
72
 GLOSARIO

Amnios. Es la membrana que rodea al embrin, formando un saco

repleto de lquido amnitico en el cual queda suspendido el
embrin al que proporciona libertad de movimiento, al tiempo
que lo protege, evitando su desecacin, proporcionndole adems
equilibrio osmtico y temperatura constante.

Anticuerpo. Protena producida por un tipo de leucocito (B) en

respuesta a un antgeno al cual se une especficamente.

Antgeno. Sustancia (generalmente una protena) que induce la

formacin de un anticuerpo.

Apoptosis. Muerte celular genticamente programada.

Artefacto biolgico. Conjunto de tejidos que, aunque no son

propiamente embriones se asemejan a los embriones porque
poseen capacidades de desarrollo propias del desarrollo
embrionario natural, aunque no tienen capacidad de llegar a
constituir organismos humanos,

Autoinmunitario. Condicin que comporta un ataque a las clulas

o tejidos de un individuo, generalmente por medio de anticuerpos,
en respuesta a determinados antgenos que el mismo individuo
que los ha producido no reconoce como propios.

Autorenovacin. Propiedad por la que una clula o un conjunto

de clulas indiferenciadas se renueva mediante numerosos ciclos
de divisin manteniendo el estado indiferenciado.

Autotrasplante. Tambin llamado autoinjerto, es el trasplante de

un tejido de una parte del cuerpo a otra en el mismo individuo.

Biotica. Estudio de la conducta humana a la luz de los valores y

principios morales, en el mbito de las ciencias de la vida y de la
salud.

73
Biopsia. Procedimiento diagnstico que consiste en la extraccin
de una muestra de tejido para examinarla al microscopio o por
mtodos bioqumicos.

Blastocisto. Embrin de entre 30 y 150 clulas, procedentes de las

sucesivas divisiones del cigoto. Consiste en una esfera limitada
exteriormente por una capa de clulas (trofoectodermo), con un
grupo de clulas en su interior (masa celular interna) y una
cavidad llena de lquido (blastocele).

Blastmero. Una de las clulas indiferenciadas procedentes de las

primeras divisiones del cigoto.

Canal de Hering. Porcin intraheptica de las vas biliares.

Capas germinales. Estructuras embrionarias procedentes de una

lmina o placa inicial que progresivamente se pliega, se torsiona y
crece formando tres capas llamadas Ectodermo, Mesodermo y
Endodermo.

Cardioesferas. Estructuras tridimensionales formadas por grupos

de clulas en cuyo centro se va produciendo la divisin y
diferenciacin de las clulas.

Cardiomiocitos. Clulas musculares cardacas.

Cariotipo. Conjunto completo de los cromosomas de una clula.

Clula somtica. Cualquier clula de un animal o planta, a

excepcin de las clulas germinales y sus precursoras.

Clulas alognicas. Clulas provenientes de un donante de la

misma especie, genticamente similar, pero no idntico al
receptor.

Clulas autlogas. Clulas provenientes del mismo individuo.

74
Clulas diferenciadas. Clulas que poseen las caractersticas
especficas de forma y funcin correspondientes al tejido u rgano
del que forman parte.

Clulas diploides. Clulas con doble conjunto de cromosomas.

Clulas epiteliales ductales. Clulas que forman el recubrimiento

de los conductos de salida de diferentes glndulas secretoras:
pncreas, glndula mamaria, partidas, etc.

Clulas estromales. Ver clulas mesenquimales.

Clulas haploides. Clulas con un nico conjunto de

cromosomas.

Clulas hematopoyticas. Clulas que se encuentran en la mdula

sea y fabrican de manera fisiolgica las clulas de la sangre
(clulas rojas o hemates y clulas de la serie blanca o leucocitos).
Clulas indiferenciadas. Clulas que aparecen en las primeras
etapas de desarrollo del embrin y no han cambiado an para
convertirse en algn tipo especializado de clulas.

Clulas iPS. Son clulas pluripotentes inducidas mediante

reprogramacin de cualquier clula somtica, por medio de
factores de transcripcin.

Clulas madre. Llamadas tambin clulas troncales son clulas

procedentes de las primeras divisiones del cigoto que conservan
un grado mayor o menor de indiferenciacin, junto a su
capacidad de dividirse indefinidamente para generar otras iguales
a s mismas (autorenovacin), o para originar distinos tipos de
clulas somticas.

Clulas madre adultas. Son clulas indiferenciadas residentes en

tejidos adultos. Con mayor propiedad deberan ser llamadas
clulas madre de tejidos adultos.

75
Clulas madre autctonas. Clulas progenitoras especficas de un
tejido.

Clulas madre bronco-alveolares. Clulas que renuevan el

recubrimiento de algunas partes del pulmn.

Clulas madre embrionarias. Son clulas indiferenciadas que se

obtienen a partir de embriones muy precoces, en el estadio
conocido como blastocisto, que tienen la potencialidad de
convertirse en una amplia variedad de clulas especializadas de
tejidos.

Clulas madre epidermales. Son las que renuevan o reparan la

capa externa de la piel.

Clulas madre epiteliales. Son las que renuevan continuamente el

recubrimiento intestinal.

Clulas madre germinales. Clulas presentes en los rganos

reproductores de los animales que se convierten en gametos
(vulos y espermatozoides).

Clulas madre neurales. Son clulas capaces de generar diversos

tipos de clulas diferenciadas de tejido nervioso (neuronas,
astrocitos y oligodendrocitos).

Clulas madre no embrionarias. Son aquellas que forman parte

del organismo post-natal y tienen como misin reponer en l las
clulas que se van perdiendo en los tejidos en los que residen.
Estas clulas reciben otros nombres como clulas madre adultas,
clulas madre especficas tisulares, clulas madre somticas o
clulas madre postnatales.

Clulas MAPC. Tipo de clulas progenitoras mesenquimales

adultas presentes en la mdula sea.

76
Clulas mesenquimales. Clulas procedentes del mesodermo
embrionario que se encuentran en la mdula sea y en otros
tejidos. Se llaman tambin clulas estromales.

Clulas multipotentes. Son clulas indiferenciadas que poseen

una capacidad de diferenciacin limitada.

Clulas pluripotentes. Clulas indiferenciadas que tienen la

capacidad de diferenciarse en todos, o gran parte, de los tipos
celulares que se derivan de las tres capas germinales de los
embriones (endodermo, ectodermo y mesodermo).

Clulas precursoras. Clulas parcialmente indiferenciadas

presentes en tejidos fetales o del adulto, originadas a partir de
clulas progenitoras, con capacidad de originar clulas
diferenciadas.

Clulas progenitoras. Ocupan un lugar intermedio entre las

clulas madre indiferenciadas y las clulas plenamente
diferenciadas. Tienen la capacidad de diferenciarse solo en un
tipo especfico de clulas, pero no poseen la capacidad de
autorenovarse a s mismas.

Clulas tetraploides. Son clulas que poseen un cudruple

conjunto de cromosomas, resultado de la fusin de dos clulas
diploides.

Clulas totipotentes. Clulas indiferenciadas presentes en el

embrin muy temprano, con capacidad de diferenciacin
ilimitada, por lo que pueden diferenciarse tanto en clulas de las
membranas y tejidos extraembrionarios (por ejemplo, la placenta),
como en las pertenecientes a los tejidos y rganos de cualquiera
de la tres capas germinales del embrin.

Clulas . Son clulas productoras de insulina que se suelen

agrupar en racimos, como ocurre en los islotes pancreticos.

77
Cigoto. Primera clula resultante de la fusin de un vulo y un
espermatozoide durante la fertilizacin.

Clonacin reproductiva. Mtodo de clonacin en el que el ncleo

de una clula de donante adulto se introduce en un vulo
previamente enucleado que, tras activacin artificial, se divide
varias veces hasta formar un blastocisto que es utilizado para
desarrollar un nuevo individuo clnico mediante transferencia a
un tero de acogida.

Clonacin teraputica. Mtodo de obtencin de clulas madre

embrionarias a partir de blastocistos clnicos, obtenidos por el
mtodo de transferencia nuclear. De la masa celular interna de
estos blastocistos se obtienen clulas que se cultivan con tcnicas
especficas para lograr su diferenciacin en diversos tipos de
clulas, utilizables con fines teraputicos

Clonacin. Proceso por el que un organismo origina, por medios

asexuales, una o ms copias genticamente idnticas de s mismo.

Condrocitos. Clulas del cartlago.

Cordn umbilical. Estructura formada por los vasos umbilicales

que unen el feto con la placenta que contiene dos arteria
umbilicales y una vena que transportan sangre con oxgeno,
nutrientes y productos de desecho, entre la madre y el feto. El
cordn se liga y secciona tras el parto.

Cromosomas. Estructuras situadas en el ncleo de las clulas que

contienen los genes, unidades fundamentales de la herencia. Estn
formados fundamentalmente por secuencias del cido nucleico
ADN, que es el portador de la informacin hereditaria.

Cuerpos embrioides. Agrupaciones de estructuras celulares que

se forman cuando se cultivan las clulas madre embrionarias.

78
Desdiferenciacin celular. Proceso por el que se hace retroceder
a las clulas diferenciadas hasta la fase de pluripotencia (ver
clulas pluripotentes).

Diagnstico gentico preimplantatorio. Es un mtodo que se

emplea para seleccionar embriones obtenidos mediante
fecundacin artificial, antes de su implantacin en el tero. La
seleccin se basa en el estudio del ADN del embrin, para
analizar la posible presencia de alteraciones cromosmicas y
genticas.

Diferenciacin. Proceso mediante el cual una clula embrionaria

no especializada (indiferenciada) adquiere las caractersticas de
una clula especializada (diferenciada).

Ectodermo. Es la ms externa de las tres capas germinales

derivadas del blastocisto. De ella deriva la piel, el cristalino y el
sistema nervioso.

Embrin. En el ser humano se llama embrin al organismo en

desarrollo desde el momento de la fertilizacin hasta el final de la
octava semana de gestacin, momento en el que pasa a
denominarse feto.

Endodermo es la ms interna de las tres capas germinales que se

forman en el blastocisto. De ella deriva el recubrimiento del
intestino y sus rganos asociados, como el pncreas y el hgado,
adems de otros rganos como los pulmones.

Endotelio. Tejido formado por clulas endoteliales, que recubre

el interior de todos los vasos sanguneos.

Epicardio. Membrana que cubre la superficie externa del corazn.

Epitelio ciliar. Es el tejido que se encuentra en el cuerpo ciliar,

estructura en la que se inserta la raz del iris; est constituido por
clulas epiteliales especiales con dos capas, una pigmentada, que

79
da color a las pupilas, y otra no pigmentada. Ambas contribuyen
de diversa manera a la formacin del humor vtreo y del humor
acuoso de los globos oculares.

Epitelio. Es la capa de clulas que forman la epidermis de la piel.

Espermatogonias. Son clulas precursoras de las clulas

germinales masculinas o espermatozoides.

Esplenocitos. Clulas del bazo.

Factor estimulante de colonias (G-CSF). Sustancia de tipo

proteico que induce la movilizacin de clulas desde la mdula
sea, o de otros lugares del organismo, hacia el torrente
circulatorio.

Factores de crecimiento. Sustancias que inducen la proliferacin

de uno o varios tipos especficos de clulas.

Factores de transcripcin. Sustancias que facilitan la expresin

de los genes (cuya primera etapa es la transcripcin), mediante la
formacin de una molcula de ARN que es copia de una
secuencia de una molcula de ADN (un gen). Reciben nombres
muy variados, compuestos de letras y nmeros, como Oct4
(tambin llamado Oct3/4 o Pou5f1), Sox2, c-Myc y Klf4, Nanog
Lin28.

Fertilizacin in vitro. Procedimiento mediante el cual se ponen

en contacto, en una placa de cristal de laboratorio, un vulo y un
espermatozoide. El vulo, una vez fertilizado por el
espermatozoide, recibe el nombre de cigoto, y comienza a
dividirse pudiendo dar lugar a un embarazo si se implanta en el
tero de una mujer.

Fertilizacin. Es el proceso de unin de los gametos femenino y

masculino: vulo y espermatozoide.

80
Fibroblastos. Clulas que forman el tejido conjuntivo.

Fusin celular. Es la combinacin de dos o ms clulas en una

sola clula (llamada heterokaryon). Se emplea como medio de
asignar genes especficos a cromosomas especficos.

Gen. Es un segmento o secuencia de ADN situado en un lugar

especfico de un cromosoma. Representa la unidad funcional de la
herencia.

Genoma. Es el conjunto de todo el material gentico de un

organismo.

Hematopoyesis. Generacin de las clulas sanguneas que tiene

lugar principalmente en la mdula sea.

Hepatocito. Clula del hgado

Hiperplasia. Es la proliferacin de clulas en un rgano o tejido,

por encima de lo normal.

In vitro. Literalmente en cristal. En una placa o tubo de

laboratorio, o en un ambiente artificial.

In vivo. En el sujeto vivo, en un ambiente natural.

Inmunogenicidad. Capacidad de inducir una respuesta

inmunitaria.

Inmunosupresin. Supresin en un sujeto de la respuesta

inmunitaria evocada por un antgeno.

Limbo corneal. Es un tejido dispuesto en forma de circunferencia

entre la crnea y la conjuntiva, cuyas clulas se dividen y se
especializan en un epitelio transparente, que corresponde a la
crnea.

81
Lnea celular. Una lnea celular de clulas madre es una familia,
procedente de un nico grupo de clulas, que se mantiene
indefinidamente en cultivos en los que se multiplica
constantemente.

Linfocito. Clula de estirpe leucocitaria presente en la sangre y en

el tejido linftico.

Masa celular interna. Es un conjunto celular situado en el

interior del blastocisto, formado por clulas madre iniciales, a
partir de las cuales se desarrolla, primero el disco embrionario,
posteriormente el embrin y finalmente el feto.

Medicina Regenerativa. Intervenciones mdicas que intentan la

reparacin de rganos daados por enfermedades o lesiones,
mediante la sustitucin de los tejidos afectados por clulas madre.

Mdula sea. Es el tejido, formado por clulas hematopoyticas,

que rellena la mayor parte de las cavidades seas. De ella derivan
las clulas rojas y blancas de la sangre. Tambin contiene clulas
mesenquimales.

Mesodermo. Capa media de las tres capas gerninales. De ella

derivan gran parte de los rganos (msculos, huesos, corazn,
riones) y todo el tejido conjuntivo que los rodea y sustenta.

Mioblastos esquelticos. Clulas parcialmente indiferenciadas,

presentes en los msculos esquelticos, capaces de originar
clulas musculares diferenciadas. Se llaman tambin clulas
satlites.

Miocito. Clula del tejido muscular.

Mitosis. Proceso de divisin de una clula en dos.

Necrosis. Es la muerte patolgica de un conjunto de clulas o de

cualquier tejido del organismo.

82
Neurona. Clula del tejido nervioso.

Nicho. En Biologa se emplea para designar el microambiente

en el que se encuentra situada una clula o conjunto de ellas. En
un rgano husped que recibe un trasplante, el nicho sera como
una especie de ecosistema del que forman parte, junto a las
clulas madre, las clulas circundantes que les envan mensajes o
los reciben de ellas.

Ovogonias. Son clulas precursoras de las clulas germinales

femeninas u vulos.

Parnquima. Porcin noble del tejido de un rgano en el que se

realizan las funciones principales de ese rgano.

Partenognesis. Es el mecanismo mediante el cual un vulo

puede dar lugar a un embrin en ausencia de un espermatozoide.
La estructura desarrollada a partir de ese vulo recibe el nombre
de partenote.

Placenta. Estructura esponjosa situada en el tero gestante, de la

que el feto obtiene la nutricin y el oxgeno que necesita y a la
que devuelve sus productos de desecho.

Plasticidad. Es la capacidad de una clula de adquirir las

caractersticas de forma y de funcin propias de un tejido
diferente del que procede originariamente.

Pre-embrin. Trmino, utilizado a partir de 1984 (Informe

Warnock), para designar al embrin humano menor de 14 das.
Dada la arbitrariedad de esta denominacin, la mayora de
expertos en la materia sostienen que se debe evitar su empleo.

Programa epigentico. Aunque toda clula posee en su genoma

un primer nivel de informacin gentica, que le confiere su
identidad biolgica, necesita un segundo nivel de informacin,

83
que es lo que constituye su programa epigentico, responsable de
su desarrollo como un organismo vivo que comienza, se
desarrolla y vive, y habr de terminar muriendo. Ese programa es
lo que asegura que dicho organismo pertenece a una especie y es
miembro de una poblacin.

Quimera. Es un organismo compuesto de clulas derivadas de

dos cigotos genticamente diferentes. En la quimera conviven, en
el mismo ADN, genes que normalmente deberan corresponder a
dos sujetos diferentes.

Rechazo inmunolgico. Ataque a las clulas o tejidos de un

individuo, generalmente por medio de anticuerpos, en respuesta a
determinados antgenos, procedentes del tejido rechazado, que el
organismo receptor no reconoce como propios.

Reprogramacin gentica. Es la que altera la expresin gentica

de cualquier clula somtica.

Reprogramacin. Mtodo utilizado en Biologa para conseguir el

retorno de clulas adultas diferenciadas hasta un estado
embrionario o de pluripotencia a partir del cual se podra producir
una nueva diferenciacin como clulas especficas de un tejido.

Retrovirus. Es un tipo de virus, cuyo genoma est formado por

una cadena simple de ARN, que es capaz de replicarse de manera
inusual a travs de una forma intermedia de ADN de cadena
doble.

Telomerasa. Es un enzima situado en los extremos de los

cromosomas, capaz de sintetizar ADN y conferir a las clulas una
capacidad indefinida de replicacin. Es responsable de la
estabilidad de los genes y tiene tambin un papel en el
envejecimiento y en el desarrollo de los tumores.

Terapia celular. Procedimientos teraputicos basados en el

empleo de clulas madre.

84
Teratoma. Tumor formado por tejidos de las tres capas
germinales de los embriones. Se encuentra habitualmente en los
ovarios y testculos. Se puede producir experimentalmente
inyectando a animales clulas pluripotentes.

Transcripcin. Es la primera etapa de la expresin de un gen.

Transdiferenciacin. Proceso por el cual una clula o tejido se

diferencia en un tipo celular caracterstico de otro tejido u rgano.
Por ejemplo, una clula sangunea se transforma en una clula
cardiaca.

Transferencia nuclear. Introduccin en un vulo al que se ha

eliminado el ncleo, del ncleo de una clula somtica procedente
de un donante adulto.

Trasplante alognico. Trasplante en un sujeto de un tejido

derivado de otro sujeto, genticamente distinto, aunque miembro
de la misma especie.

Trasplante autlogo. Trasplante en un sujeto de un tejido

derivado del propio receptor. Este tipo de trasplante no induce
respuesta inmune y, por tanto, no es rechazado por el receptor.

Trasplante heterlogo. Trasplante en un sujeto de un tejido

derivado de otro sujeto de distinta especie.

Troncalidad. Conjunto de caractersticas comunes, tpicas de las

clulas madre o troncales. Estas caractersticas comunes parecen
compartir un programa gentico comn que podra ser importante
para la troncalidad. Se han descrito genes que proporcionan
informacin bsica sobre la naturaleza de las clulas troncales, lo
que puede facilitar la induccin de clulas troncales.

85
86
 REFERENCIAS

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