FACULTAD DE INGENIERA

ESCUELA DE INGENIERIA AMBIENTAL

SEMINARIO N1

Nutricin y cultivo de microorganismos: Macronutrientes, micronutrientes,

factores de crecimiento. Medios de cultivo

INTEGRANTES

Aguilar Lozada, diana

Das Ruz, Abner
Escobal chaves, Flavio
Garro custodio, Keyla

DOCENTE: GELDRES VIGIL, MARIA ELENA

CICLO: IV

CURSO: MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

TRUJILLO PERU

TRUJILLO-PERU
NUTRICIN Y CULTIVO DE MICROORGANISMOS

Los microorganismos para crecer y desarrollar sus actividades, deben disponer en el

ambiente de los nutrientes que le provean energa y materiales para la biosntesis. Los
microorganismos presentan una gran diversidad fisiolgica especfica y por lo tanto
requerimientos nutricionales especficos. No es casual, que las clulas de todos los
seres vivos, independientemente de su grado de organizacin, presenten una
composicin qumica constante de aquellos materiales necesarios para la vida.

La nutricin es el proceso por el que los seres vivos toman del medio donde habitan
las sustancias qumicas que necesitan para crecer. Dichas sustancias se denominan
nutrientes, y se requieren para dos objetivos:

Fines energticos (reacciones de mantenimiento);

fines biosintticos (reacciones plsticas o anabolismo).

Es importante tener claro desde el principio una serie de conceptos y nomenclaturas

relacionados con los principales tipos de nutricin bacteriana. Puesto que la nutricin
presenta un aspecto de aprovisionamiento de energa y otro de suministro de
materiales para la sntesis celular.
1. Desde el punto de vista de los fines de aprovisionamiento de energa, las
bacterias se pueden dividir en:
a) litotrofas: son aquellas que slo requieren sustancias inorgnicas sencillas
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(SH2 S , NH3, NO2 , Fe, etc.)

b) organotrofas: requieren compuestos orgnicos (hidratos de carbono,

hidrocarburos, lpidos, protenas, alcoholes.
2. Desde el punto de vista biosinttico (o sea, para sus necesidades plsticas o
de crecimiento), las bacterias se pueden dividir en:
a) autotrofas: crecen sintetizando sus materiales a partir de sustancias
inorgnicas sencillas. Ahora bien, habitualmente el concepto de autotrofa se
limita a la capacidad de utilizar una fuente inorgnica de carbono, a saber, el
CO2.

b) heterotrofas: su fuente de carbono es orgnica (si bien otros elementos

distintos del C pueden ser captados en forma inorgnica).
3. Otros conceptos:
a. autotrofas estrictas son aquellas bacterias incapaces de crecer
usando materia orgnica como fuente de carbono.
b. Mixotrofas son aquellas bacterias con metabolismo energtico litotrofo
(obtienen energa de compuestos inorgnicos), pero requieren
sustancias orgnicas como nutrientes para su metabolismo biosinttico
Las clulas estn compuestas fundamentalmente de macromolculas y agua, y que las
macromolculas se componen de unidades ms pequeas denominados monmeros.
La nutricin microbiana consiste en suministrar a las clulas los ingredientes qumicos
que necesitan para hacer monmeros.

Estos compuestos qumicos son los nutrientes.

Diferentes organismos necesitan diferentes tipos de nutrientes y a menudo los

requerimientos son especficos.

Adems, no todos los nutrientes se requieren en las mismas cantidades; algunos

llamados, MACRONUTRIENTES, se necesitan en grandes cantidades; mientras que
otros llamados MICRONUTRIENTES se requieren en menores cantidades, y a veces
slo en cantidades trazas

CLASES DE NUTRIENTES.
1. MACRONUTRIENTES

o CARBONO Y NITROGENO:

Muchos procariontes necesitan algn tipo de compuesto orgnico como fuente

de carbono. Las bacterias pueden asimilar varios compuestos orgnicos
carbonatados y usarlos para hacer nuevo material celular. Los aminocidos, los
cidos grasos, los cidos orgnicos, los azcares, las bases nitrogenadas, los
compuestos aromticos y un sinfn de compuestos orgnicos de otro tipo
pueden ser usados por una u otra bacteria.

Algunos procariotas son auttrofos, capaces de construir todas sus estructuras

orgnicas a partir del dixido de carbono (CO2) con la energa obtenida de la luz
o compuestos inorgnicos.

En peso seco, una clula tpica contiene un 50% de carbono; el carbono es el

principal elemento de todas las clases de macromolculas.

Despus del carbono el siguiente elemento ms abundante en la clula es el

nitrgeno. En una bacteria tpica alrededor del 12% de su peso seco es
nitrgeno, este elemento es importante en las protenas, en los cidos nucleicos y
en otros constituyentes celulares.

En la naturaleza, el nitrgeno se presenta en forma inorgnica y orgnica.

Sin embargo, la mayor parte del nitrgeno natural disponible est en forma
-
inorgnica, como amoniaco (NH ), nitratos (NO ) o N . La mayora de las
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bacterias son capaces de usar amoniaco como nica fuente de nitrgeno, y otras
muchas pueden usar nitratos. El nitrgeno gaseoso N puede ser usado como
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fuente de nitrgeno por algunas bacterias, las bacterias fijadoras de nitrgeno.
o EL FSFORO

Se presenta en la naturaleza en forma de fosfatos orgnicos e inorgnicos, y la

clula lo necesita fundamentalmente para la sntesis de cidos nucleicos y
fosfolpidos.

o EL AZUFRE

Se requiere porque es un componente estructural de los aminocidos cistena y

metionina y porque se presenta en ciertas vitaminas, como la tiamina, la biotina
y el cido lipoico, as como en la coenzima A.
El azufre sufre una serie de transformaciones qumicas en la naturaleza, muchas
de las cuales son llevadas a cabo exclusivamente por microorganismos y es
utilizado por ellos en varias formas qumicas. La mayora del azufre celular
procede de fuentes inorgnicas, ya sean sulfatos (SO4) o sulfuros (HS-).

o El POTASIO

Es necesario en todos los organismos. Una gran diversidad de enzimas lo

requieren especficamente como por ejemplo algunas implicadas en la sntesis
de protenas.

o El MAGNESIO

Funciona como estabilizador de los ribosomas, las membranas celulares y los

cidos nucleicos, y tambin se necesita para la actividad de muchas enzimas.

o El CALCIO

(Que no es un nutriente esencial para el crecimiento de muchos

microorganismos) ayuda a estabilizar la pared celular bacteriana y tiene una
funcin importante en el termo resistencia de las endosporas.

o El SODIO

Es requerido por algunos microorganismos, aunque no todos, y su necesidad

suele ser un reflejo del hbitat del microorganismo. Por ejemplo, el agua de mar
tiene un elevado contenido de sodio y los microorganismos marinos
normalmente lo requieren para su crecimiento; en cambio, otras especies muy
relacionadas, pero de agua dulce, crecen bien en ausencia de este elemento.

o El HIERRO

Es fundamental en la respiracin celular y es tambin un elemento clave para

los citocromos y para las protenas que contienen hierro y azufre implicados en
el transporte de electrones.
 En condiciones anaerbicas, el hierro se encuentra por lo general en el estado
de oxidacin +2 y es soluble, sin embargo, bajo condiciones aerbicas suele
estar en el estado de oxidacin +3 y forma varios minerales insolubles. Para
obtener hierro de tales minerales, las clulas las producen agentes quelantes de
hierro llamados siderforos que solubilizan el hierro y lo transportan dentro de
la clula. Un grupo importante de siderforos derivan del cido hidroxmico y
quelan el hierro frrico (Fe+3) fuertemente. Una vez que el complejo hierro-
hidroxamato pasa a la clula, el hierro se libera y el hidroximato puede salir y
ser reutilizado de nuevo en el transporte del hierro. Las bacterias como
Escherichia coli y Salmonella typhimurium, producen siderforos fenlicos,
estructuralmente complejos llamados enterobactinas. Estos siderforos derivan
del compuesto aromtico catecol y tienen una elevada afinidad de unin de
hierro. Sin tales agentes quelante de hierro muchas bacterias seran incapaces de
iniciar la infeccin debido a la limitacin del hierro.

En las agua marinas, el hierro es prcticamente indetectable (las aguas

ocenicas superficiales contienen tpicamente slo unos cuanto picogramos de
hierro por mililitro) y se han encontrado bacterias marinas que producen
siderforos estructuralmente complejos capaces de secuestrar el hierro en
concentraciones muy bajas. Estos siderforos poseen una regin peptdica unida
al Fe+3 y una regin lipdica que se asocia con la membrana celular.
Compuestos como la aquachelina unen hierro, se agregan en micelas y luego
transportan el hierro a la clula.
Algunos procariotas pueden crecer en ausencia total de hierro.
Por ejemplo, las bacterias Lactobacillus plantarum y Borrelia burgdorferii, no
contienen hierro. El manganeso sustituye en estas bacterias al hierro como
componente metlico de las enzimas que normalmente contienen Fe2+.
2. MICRONUTRIENTES

Aunque los micronutrientes se requieren en muy pequeas cantidades son tan

importantes para el funcionamiento celular como los macronutrientes. Los
micronutrientes son metales, muchos de los cuales tienen una funcin estructural
en varias enzimas (los catalizadores de las clulas).
Debido a que la necesidad de estos elementos traza es muy pequea en cuanto a
su concentracin, con frecuencia no es necesario aadirlos a los medios de
cultivo para cultivar microorganismos en el laboratorio.
No obstante, si un medio de cultivo contiene compuestos muy puros, disuelto en
agua destilada de elevada pureza, puede darse una deficiencia en algn elemento
traza. En tales casos, se aade al medio una pequea cantidad de una solucin de
metales traza a fin de suministrar los metales necesarios.
Se considera micronutrientes a los elementos esenciales cuya concentracin en
planta es menor a 0.1% en peso seco. Actualmente se consideran micronutrientes
a los siguientes elementos: Hierro, Manganeso, Zinc, Cobre, Boro, Molibdeno,
Cloro, Nquel.

Los micronutrientes presentan dos caractersticas generales que les diferencian de

los macronutrientes:

El orden de magnitud de las concentraciones de micronutrientes en los tejidos

vegetales es significativamente inferior a los de los macronutrientes.

Los micronutrientes no participan en procesos que dependen de concentracin,

como los osmticos, pH, antagonismo catinico. Una excepcin es el cloro que
puede tener un papel osmtico. Tampoco suelen desempear funciones
estructurales, a excepcin del boro en la pared celular.

Los micronutrientes metlicos (Fe, Mn, Zn, Cu, Mo, Ni) tienen algunas
caractersticas en comn:
o Son metales de transicin, con el orbital 3d sin completar y en el caso del
molibdeno, el 4d, que pueden participar en la formacin del enlace
metlico, y tienden a dar cationes en condiciones ambientales.
o Son menos electropositivos que alcalinos y alcalinotrreos aunque se
comportan tambin como cidos de Lewis (aceptan pares de electrones).
Por tanto, pueden formar complejos con Bases de Lewis o ligandos.

Las funciones de los micronutrientes metlicos en planta son ms bien

metablicas, participando en la regulacin enzimtica, formando parte
constitutiva de la enzima o actuando como coenzima, o en funciones redox.
FACTORES DE CRECIMIENTO

Los factores de crecimiento son compuestos orgnicos que, como los micronutrientes,
se necesitan en muy pequeas cantidades y slo por algunas clulas. Los factores de
crecimiento son vitaminas, aminocidos, purinas, pirimidinas.

Aunque la mayora de los microorganismos son capaces de sintetizar estos compuestos,

en algunos casos es necesario suministrarlos en el medio de cultivo.

Las vitaminas son los factores de crecimiento que se necesitan con mayor frecuencia.
Muchas vitaminas funcionan formando parte de coenzimas. La mayor parte de los
microorganismos son capaces de sintetizar todos los componentes de sus coenzimas,
pero algunos no lo son y necesitan que se les suministren ciertas partes de estas
coenzimas en forma de vitaminas.

Las bacterias lcticas, tales como los gneros Streptococcus, Lactobacillus, Leuconostoc
y otros, destacan por sus requerimientos vitamnicos complejos, mucho ms amplios
que los humanos. Las principales vitaminas requeridas por los microorganismos son
tiamina, biotina y piridoxina

MEDIOS DE CULTIVO

Un medio de cultivo consta de un gel o una solucin que cuenta con los nutrientes necesarios
para permitir, en condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento
de virus, microorganismos, clulas, tejidos vegetales o incluso pequeas plantas. Segn lo que
se quiera hacer crecer. Un microorganismo necesita para crecer nutrientes que le aporten
energa y elementos qumicos para la sntesis de sus constituyentes celulares.
Dependiendo de la fuente de carbono que utilizan, los microorganismos se pueden
clasificar en auttrofos si es el CO2 atmosfrico (microorganismos que foto sintetizan)
y hetertrofos si utilizan carbono orgnico.
 CLASIFICACION

a) SU CONSISTENCIA

1) Medios lquidos: Son los que se presentan en este estado, denominndose

por esta razn caldos. El medio lquido ms utilizado es el llamado caldo
nutritivo, compuesto principalmente de extracto de carne, peptona y agua. Se
utiliza fundamentalmente cuando se pretende la obtencin de una suspensin
bacteriana de una determinada concentracin.

2) Medios slidos: Se preparan a partir de los medios lquidos, agregndoles

un agente gelificante. Los ms utilizados son la gelatina y el agar. Gelatina: Es
una protena animal obtenida de los huesos. Tiene el inconveniente de que es
hidrolizada por muchas bacterias, y adems su uso est muy limitado porque
su punto de fusin es bajo (lica a temperatura ambiente) razn por la que no
puede utilizarse para cultivos a 37C, que es la tempera ptima de crecimiento
para muchos microorganismos. Agar-agar: Es un polmero de azcares
obtenido de algas marinas. Se trata de una molcula insoluble enagua pero
soluble en agua caliente; una solucin al 1,5% p/v forma un gel firme entre 32
y 39C y no se funde por debajo de 85C. Funde a 90C y solidifica una vez
fundido alrededor de los 45C. Tiene el inconveniente de que introduce
compuestos orgnicos indefinidos que pueden falsear los resultados de las
necesidades nutritivas de un microorganismo. Aunque el agar es una mezcla
de polisacridos, Araki, en 1937, los dividi en dos grupos:

- agarosa, con poco sulfato, libre de cido pirvico, y- agaropectina, con

mucho sulfato y gran cantidad de cenizas. La proporcin de agarosa a
agaropectina en el agar vara segn el alga de origen. El agar puede utilizarse
para diferentes fines, aunque los ms importantes son: agar comercial para la
industria alimenticia, agar bacteriolgico, agares purificados y agarosa,
utilizada para electroforesis en gel. Aproximadamente la mitad de todo el agar
que se produce, se utiliza en trabajo microbiolgico, por lo que es importante
la ausencia de metales txicos.

3) Medios semislidos: Se preparan a partir de los medios lquidos,

agregando a stos un agente solidificante en una proporcin menor que para
preparar medios slidos. Uno de sus usos es la investigacin de la movilidad
de las bacterias

B) SU UTILIZACIN

1) Medios comunes: Son aquellos que poseen los componentes mnimos para
que pueda producirse el crecimiento de bacterias que no necesiten
requerimientos especiales. El medio ms conocido de este grupo es el agar
nutritivo o agar comn, que resulta de la adicin de agar al caldo nutritivo.
Otros representantes de este grupo son el agar tripticase de soja, el agar
Columbia, etc.

2) Medios de enriquecimiento: Son aquellos que, adems de las sustancias

nutritivas normales, incorporan una serie de factores indispensables para el
crecimiento de microorganismos exigentes. Este enriquecimiento se hace por
adicin de sangre u otros productos biolgicos (sangre, suero, leche, huevo,
bilis, etc.) que aportan dichos factores. En ocasiones es posible aadir
suplementos artificiales a los medios para producir un enriquecimiento del
mismo (p. ej. Polivitex, Isovitalex, etc) El gonococo, por ejemplo, necesita
cistina y cistena para su crecimiento. Estas sustancias son aportadas por la
sangre calentada adicionada al medio de cultivo (agar chocolate).

3) Medios selectivos: Son medios utilizados para favorecer el crecimiento de

ciertas bacterias contenidas en una poblacin polimicrobiana. El fundamento
de estos medios consiste en facilitar nutricionalmente el crecimiento de una
poblacin microbiana especfica. Un ejemplo de medio selectivo es el caldo
selenito, que se utiliza para favorecer el crecimiento de salmonellas y frenar
el del resto de enterobacterias.

4) Medios inhibidores: Cuando las sustancias aadidas a un medio selectivo

impiden totalmente el crecimiento de una poblacin microbiana, se denomina
inhibidor. Los medios inhibidores podran considerarse como una variante
ms restrictiva de los medios selectivos. Los medios inhibidores se consiguen
habitualmente por adicin de sustancias antimicrobianas o de cualquier otra
que inhiba completamente el desarrollo de una poblacin determinada. Un
medio inhibidor es el MacConkey que permite el crecimiento de los grmenes
Gram negativos e impide el crecimiento de los Gram positivos.

5) Medios diferenciales: Se utilizan para poner en evidencia caractersticas

bioqumicas que ayuden a diferenciar gneros o especies. La adicin de un
azcar fermentable o un sustrato metabolizable se utilizan para este fin. El
medio MacConkey es un medio diferencial porque permite distinguir los
grmenes que fermentan la lactosa de aquellos que no lo hacen. Tambin lo
son el C.L.E.D. (lactosa +/lactosa -), el agar sangre (tipo de hemlisis), el SS
(que es doblemente diferencial), etc.

6) Medios de identificacin: Son los destinados a comprobar alguna

cualidad especfica que puede servirnos para reconocer la identidad de un
microorganismo. Estos medios han de poseer los elementos necesarios para
asegurar el crecimiento de los microorganismos, el sustrato especfico que
vaya a ser metabolizado y el indicador que nos muestre el resultado. El agar
Kligler, el medio de Simmons y en general, cualquier medio al que se le haya
aadido un elemento diferencial de un microorganismo, son medios utilizados
en identificacin. Actualmente estn apareciendo en el mercado una gran
cantidad de medios especficos de identificacin para ciertos
microorganismos, con lo cual se consigue simultneamente abaratar el costo y
reducir el tiempo de identificacin. Son ejemplos de esto ltimos los medios
CPS ID3 o Uriline ID (Biomerieux), utilizados para identificar los grmenes
urinarios ms importantes a partir de la placa de cultivo gracias a la
utilizacin de sustratos cromognicos especficos.

7) Medios de multiplicacin: Sirven para obtener una gran cantidad de

clulas a partir de un microorganismo ya aislado. Se emplean en la obtencin
de vacunas, en la investigacin y en la industria. Los medios ms adecuados
 para la multiplicacin suelen ser lquidos. El caldo-infusin cerebro-corazn
(BHI), es un ejemplo tpico de estos medios.

8) Medios de conservacin: Se utilizan para conservar una cepa que, por

diversas razones nos interese mantener. Fundamentalmente se utilizan como
controles de calidad de las pruebas y reactivos utilizados en el Laboratorio de
Microbiologa. En el laboratorio se pueden conservar las cepas de tres
formas:

a) haciendo pases peridicos de placa a placa,

b) mediante liofilizacin de una suspensin bacteriana, y

c) congelando las cepas en leche descremada estril al 0,1%.

9) Medios de transporte: Se usan para el transporte de muestras clnicas que

no pueden sembrarse inmediatamente. Su utilizacin debe hacerse
introduciendo la torunda con la que se obtuvo la muestra en el interior del
medio (generalmente en un tubo). Son ejemplos tpicos de este grupo los
medios de Stuart-Amies, Cary-Blair, etc.

C) SU COMPOSICIN

o definidos se preparan aadiendo cantidades precisas de compuestos orgnicos o

inorgnicos purificados a un volumen en agua destilada. Por tanto se sabe la
composicin qumica exacta (se conoce totalmente) de un medio definido.

o complejos cuando no es el caso porque estn compuestos por mezclas de

extractos de materiales complejos (extracto de levadura, extracto de carne, etc.).
Los medios complejos pueden ser entonces adecuados o incluso ventajosos por
varias razones. A menudo, los medios complejo se emplean hidrolizados de
casena, carne, soya, levaduras u otras sustancias muy nutritivas (pero sin
embargo, no definidas qumicamente). Tales hidrolizados se estn disponibles
comercialmente en forma de polvo y pueden ser pesados con facilidad y
disueltos en agua destilada para preparar un medio.
No obstante una limitacin importante al usar un medio complejo es que no se
puede controlar su composicin nutritiva exacta.
Por otra parte, los medios de cultivo pueden ser lquidos o slidos si se aade
algn agente solidificante que no sea consumible por los microorganismos
(normalmente agar). En funcin de los microorganismos que pueden crecer en
ellos, los medios pueden ser generales, selectivos cuando favorecen el
crecimiento de ciertos microorganismos mientras suprimen el de otros (por
ejemplo, el medio SPS para clostridios), diferenciales cuando alguno de sus
componentes permite identificar las colonias de un tipo de microorganismos (por
ejemplo medios con hemates para identificar colonias de microorganismos
hemolticos), selectivo-diferenciales cuando combinan las dos caractersticas
anteriores (por ejemplo, el agar de MacConkey para identificar Escherichia coli),
 y medios de enriquecimiento que permiten aislar un tipo determinado de
microorganismo a partir de una mezcla una poblacin mixta de gran tamao.

D) SU ORIGEN

a) NATURALES: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen

animal o vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composicin
qumica no se conoce exactamente.

b) SINTTICOS: son los medios que contienen una composicin qumica definida
cualitativa y cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles.

c) SEMISINTTICOS son los sintticos a los que se les aaden factores de

crecimiento bajo una forma de un extracto orgnico complejo, como por ejemplo
extracto de levadura.

MEDIOS DE CULTIVO COMUNES.

Agar nutritivo: Este medio es bastante bueno para el cultivo de grmenes que no
presentan exigencias particulares. No es diferencial.

Agar sangre: Es un medio enriquecido que se utiliza adems para la investigacin

de los diversos tipos de hemlisis (, gamma). Se utiliza para el crecimiento de
estreptococos.

Agar chocolate: El agar chocolate se obtiene calentando la sangre antes de

adicionarla al medio base. Por esta razn el agar chocolate contiene hemoglobina

Agar MacConkey: Es un medio utilizado para el aislamiento e identificacin de

enterobacterias. Es un medio inhibidor de los grmenes Gram positivos por su
contenido en cristal violeta y selectivo para enterobacterias por su contenido en
sales biliares.

Agar C.L.E.D.: El medio C.L.E.D. (Cistina Lactosa Electrlito Deficiente) est

recomendado para el recuento e identificacin presuntiva de los microorganismos
de las vas urinarias.

Agar S.S.: El agar SS es un medio selectivo empleado para el aislamiento de

Salmonella y Shigella a partir demuestras fecales.
CULTIVO DE MICROORGANISMOS EN EL LABORATORIO

Una vez que ha sido preparado un medio de cultivo, puede ser inoculado (es decir se le
aaden microorganismos) y a continuacin incubados en condiciones que favorezcan el
crecimiento microbiano. En general, se tratar del crecimiento de un cultivo axnico o
puro, esto es, de un cultivo que contiene slo un nico tipo de microorganismo.

Para obtener y mantener un cultivo axnico o puro es esencial evitar la entrada en l de

otros microorganismos. Los microorganismos no deseados llamados contaminantes, son
muy ubicuos, por lo que se han diseado tcnicas microbiolgicas para evitarlos.

Un mtodo importante para obtener cultivos axnicos o puros y para asegurar la pureza
de un cultivo es el uso de medios slidos en placas petri.

Los medios de cultivo se preparan con frecuencia en forma semislida o slida

mediante la adicin al medio lquido de un agente solidificante. Los medios slidos
inmovilizan a las clulas, permitindoles crecer y formar masas aisladas visibles
llamadas colonias.

Las colonias bacterianas pueden ser de forma y tamao variable dependiendo del
organismo, las condiciones de cultivo, el suministro de nutrientes (como la cantidad de
oxgeno presente) y otros parmetros fisiolgicos. Algunas bacterias producen
pigmentos que dan color a las colonias.

Independientemente, de su posible pigmentacin, las colonias permiten reconocer la

pureza del cultivo; las placas que contengan ms de un tipo de colonia no fueron
sembradas de un cultivo axnico o puro. Los medios slidos se preparan igual que los
lquidos salvo que, antes de esterilizar los medios, se les aade agar como agente
gelificante, normalmente 1,5%. El agar se funde durante el proceso de esterilizacin y el
medio fundido se vierte sobre las placas petri y se deja que solidifique antes de usarse.

TCNICA ASPTICA

Dado que los microorganismos son ubicuos, los medios de cultivo deben ser
esterilizados antes de usarse. Para la mayora de los medios de cultivo esto se realiza por
calor, habitualmente mediante calor hmedo en un gran recipiente a presin llamado
autoclave.

Una vez preparado un medio de cultivo estril, puede recibir un inculo de un cultivo
puro y cultivarlo nuevamente. Esto requiere el uso de la tcnica asptica. La tcnica
asptica consiste en una serie de procedimientos que evitan la contaminacin durante la
manipulacin de los cultivos y los medios de cultivo estriles.

El problema ms comn es la contaminacin ambiental a travs del aire; ya que ste

siempre contiene polvo en suspensin que generalmente lleva una comunidad de
microorganismos. Cuando las placas o tubos se abren deben manejarse de tal modo que
los contaminantes del aire no penetren. La transferencia asptica de un cultivo desde un
tubo con medio a otro, se realiza habitualmente con el asa bacteriolgica previamente
esterilizada a la llama del mechero.

Los cultivos en los que ha habido crecimiento se pueden transferir luego a la superficie
de placas con agar, donde se desarrollarn colonias como resultado del crecimiento y
divisin de las clulas aisladas que han sido sembrados.

La siembra y resiembra por extensin de una colonia aislada es un mtodo idneo para
obtener cultivos axnicos o puros a partir de mezclas complejas que contienen muchos
organismos diferentes.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

Madigan, M.; J. Martinko; J. Parker. 2003. Biologa de los Microorganismos.

10maedicin. Editorial Pearson Educacin, S.A. Espaa.
Cap. 1 de la 8 edicin de Brock: Biologa de los microorganismos
Dr. Pedro, F. Mateos Departamento de Microbiologa y Gentica. Facultad de
Farmacia. Universidad de Salamanca (en lnea)
http://webcd.usal.es/web/educativo/micro2/tema05.html
https://www.uam.es/docencia/museovir/web/Museovirtual/fundamentos/nutricio
n%20mineral/micronutrientes.htm