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Departamento de Ingeniera Qumica, Tecnologa de Alimentos y Tecnologa del Medio Ambiente. Facultad de Ciencias del Mar.
Universidad de Cdiz. Polgono Ro San Pedro s/n. 11510 Puerto Real.(Cdiz).
Artculo publicado en Ingeniera del Agua. Vol.5 Num.4 (diciembre 1998), pginas 13-20, recibido el 20 de enero de 1998 y aceptado para
su publicacin el 29 de julio de 1997. Pueden ser remitidas discusiones sobre el artculo hasta seis meses despus de la publicacin del
mismo. En el caso de ser aceptadas, las discusiones sern publicadas conjuntamente con la respuesta de los autores en el primer nmero de
la revista que aparezca una vez transcurrido el plazo indicado.
Colonias tipo A Colonias tipo B Colonias tipo C muestran prcticamente constantes durante el tiempo que
Colonias tipo D Colonias tipo E Colonias tipo F dura el ensayo. La disminucin de los SVS que se pro-
duce se corresponde con el descenso de los microorga-
Por ltimo, se procedi a su separacin y aislamiento, nismos superiores, el cual fue seguido por microscopa
para lo cual se realizaron siembras sucesivas hasta con- ptica, lo que permite confirmar que son estas especies
seguir cepas puras de las mismas, pasando a continua- las ms sensibles a la presencia del tensioactivo.
cin a la identificacin a nivel de especie, haciendo uso
de la tcnica API. Por lo que respecta a los valores de DQO del efluente,
stos experimentan un aumento en los primeros das
A partir de los resultados obtenidos por la tcnica API
debido a la eliminacin de parte de la microbiota, expe-
aplicada sobre las colonias aisladas se lograron identificar
rimentando posteriormente un descenso que coincide
las siguientes especies bacterianas:
con el de los slidos voltiles en suspensin. Esto
Pseudomonas fluorescens Pseudomonas aeruginosa implica una menor DQO en el efluente, y por tanto una
Proteus vulgaris Enterobacter cloacae mayor eliminacin de sta (Figura 4a.). Este
Serratia rubidaea Aerobacter hydrophila comportamiento es fcilmente explicable ya que la
disminucin de los microorganismos superiores ha
Escherichia coli Salmonella typhi
hecho que las bacterias, principales microorganismos
Moraxella spp. Flavobacterium indologenes responsables de la eliminacin de la materia orgnica, se
Vibrio parahaemolyticus Vibrio alginolyticus puedan desarrollar en mejores condiciones, originando
Influencia de diferentes concentraciones de LAS una poblacin ms numerosa y activa que puede mejorar
la calidad del efluente. Sin embargo, el funcionamiento
20 ppm de LAS de la planta no es el adecuado, ya que no se produce una
En la Figura 3a. se representa la evolucin de los slidos buena decantacin, por falta de los microorganismos
voltiles en suspensin del sistema para una concen- superiores, dando lugar a la prdida de biomasa por el
tracin de 20 ppm de LAS. Se observa como el nivel de efluente. Superado este perodo, la eficacia de la
stos experimenta una cierta disminucin en los prime- depuracin vuelve a valores normales, revelndose en
ros das de contacto, siendo a partir del tercer y cuarto este punto una cierta adaptacin de los microorganismos
da cuando se produce la adaptacin de la flora micro- presentes en el reactor a la presencia del tensioactivo.
biana. A partir de este momento, el valor de los SVS se
Figura 3. Evolucin de: a. Slidos en suspensin ; b. DQO del Figura 4. Evolucin de: a. Slidos en suspensin ; b. DQO del
efluente final; c. Tasa de respiracin especfica y efluente final; c. Tasa de respiracin especfica y activi-
actividad deshidrogenasa ante la presencia de 20 ppm dad deshidrogenasa ante la presencia de 50 ppm de
de LAS LAS
50 ppm de LAS
Al aumentar la concentracin de tensioactivo a 50 ppm se
observa una gran disminucin de la biomasa del sistema,
producindose una reduccin de los slidos voltiles en
suspensin del 75 % (Figura 3b.). Este descenso es
mucho ms acusado que el que se produce con 20 ppm de
LAS. Apartir de este mnimo, el sistema se recupera y en tan
slo 5 das los valores de slidos voltiles en suspensin
vuelven a ser normales (alrededor de 2.5 g/1).
En lo que se refiere a la eficacia de la depuracin, es
decir, a los valores de DQO, se observa en la Figura 4b.
que no existe descenso importante de la misma, ya que los
valores de DQO a la salida del efluente, aunque un poco
mayores que antes de la adicin de LAS, no son
excesivamente altos. Esto puede ser debido a que se ha
producido una adaptacin al compuesto por parte de los
microorganismos debido a la exposicin a 20 ppm que ha
tenido lugar anteriormente, por los que los valores de esta
variable no parece que se encuentran afectados por el
aumento de la concentracin del tensioactivo.
Respecto a la actividad microbiana, se observa en la Fi-
gura 5b. que sta tambin aumenta ante el primer con-
tacto con la mayor concentracin de tensioactivo,
producindose un descenso alrededor del da octavo.
100 ppm de LAS
Aunque estas concentraciones de LAS no se alcanzan en
ninguna unidad de lodos activos, estas experiencias se
han realizado para poner de manifiesto si altas con-
centraciones de tensioactivos (100 ppm) son letales para la
microbiota del sistema.
As, en la Figura 3c. se observa como la biomasa presente
Figura 5. Evolucin de: a. Slidos en suspensin ; b. DQO del en la unidad en los primeros das de contacto con el
efluente final; c. Tasa de respiracin especfica y acti- compuesto, experimenta un descenso considerable,
vidad deshidrogenasa ante la presencia de 100 ppm de pasando de valores de 2 g/l a 0.6 g/l, en tan slo 7 das. Los
LAS
valores que se registran de slidos son mucho menores
que los alcanzados en los ensayos anteriores, adems de
En la Figura 5a. se representan las tendencias de la ac- ser ms largo el tiempo en el cual la flora se encuentra
tividad deshidrogenasa y la tasa de respiracin especfica inhibida. Los efectos sobre la microbiota son mayores,
ante las condiciones anteriormente descritas. En los sobretodo en los microrganismos superiores que
primeros das de la exposicin de la flora al txico, y hasta desaparecen tal y como se pudo observar por microscopa
el tercer da, aumenta la actividad microbiana de manera ptica. Esta desaparicin produce una prdida de los
considerable. Este efecto ha sido ya descrito por otros niveles de floculacin lo que se traduce en prdida de la
autores (Edwards & Sherrard, 1982) y posteriormente se biomasa por el efluente (las concentraciones de slidos en
produce un descenso del valor de la actividad debida a la suspensin en el efluente llegan a ser en ocasiones de
inhibicin que se produce como consecuencia de la hasta 250 mg/l). Despus de este largo periodo de
exposicin de la microbiota al presunto compuesto txico. inhibicin la flora comienza a recuperarse lentamente,
A partir del octavo da de estar suministrando el com- alcanzndose entre los das 18-20 valores normales de
puesto es cuando la actividad microbiana parece acusar el slidos en suspensin (2.5-3 g/l). Esta evolucin favorable
efecto de ste, producindose un descenso en la misma llega incluso a superar los valores de biomasa de los que
provocado por la disminucin de toda la poblacin de los se partieron.
microorganismos que existen en el reactor (coincide con el La inhibicin que se produce por el aumento de la con-
segundo mnimo de los valores de SVS). A medida que centracin del LAS tiene efecto sobre la eficacia de de-
pasa el tiempo, parece que la flora microbiana se adapta al puracin, como se puede ver en la Figura 4c. Se observa
tensioactivo vuelven a alcanzarse los valores de actividad como el mximo en la DQO en el efluente se produce ms
que tena el sistema antes de la llegada de ste. tarde que en los ensayos a 50 ppm (aproximadamente
Si se comparan las Figuras 3a. y 4a. se observan cmo los entre el da 13 y el da 20 debido probablemente a la
mnimos que en ellas producen los das 9 y 15, coinciden adaptacin al txico). Estos valores de la DQO del
con el inicio y fin de la fase menos activa de la microbiota. efluente son los ms altos registrados en todas las expe-
riencias, lo que es lgico dada la mayor concentracin de Tras esta situacin de inhibicin se produce una recupe-
tensioactivo utilizado que parece afectar tambin a la racin y restablecimiento de la microbiota, lo cual es
poblacin bacteriana. Posteriormente, tiene lugar una seguido por el aumento de la tasa de respiracin especfica
recuperacin del sistema, llegndose de nuevo a una efi- que se produce, acompaado de la disminucin de la
cacia de depuracin del 80-90 %. concentracin de LAS residual que tiene lugar.
En la Figura 5c aparecen la evolucin de la actividad Respecto a la evolucin de los homlogos e ismeros del
deshidrogenasa junto con la tasa de respiracin especfica. LAS, en la Tabla 3 se dan los porcentajes de biode-
El primer efecto que se produce en la actividad microbiana gradacin de ambos en el ensayo con 100 ppm.
ante la concentracin de 100 ppm de LAS es un aumento Se observa un aumento del porcentaje de biodegradacin
de sta (efecto producido tambin con la concentraciones del tensioactivo al aumentar la duracin del ensayo,
anteriores). Despus de este aumento de la actividad, se (como consecuencia de una mayor adaptacin de la
produce un descenso producido por la muerte y microbiota), excepto el da 3 debido al impacto que causa el
evacuacin que est teniendo lugar de microorganismos. tensioactivo y el da octavo que es cuando se produce un
Este perodo de inhibicin se extiende durante descenso de la actividad microbiana.
aproximadamente 7 das, tras los cuales, el sistema se
recupera volviendo a valores normales. % LAS % C10 % C11 % C12
Relacin entre la concentracin de LAS residual y ac- Das biodegradad biodegradad biodegradad biodegradad
o o o o
tividad de los microorganismos
3 82.1 49.69 81.06 96.75
Para confirmar los resultados obtenidos con las medidas
6 92.1 77.4 93.32 96.34
de actividades de los microorganismos, se ha seguido la
8 83.3 72.14 84.31 84.34
evolucin del consumo de sustrato en el medio por parte de
la microbiota. 13 89.7 74.68 89.74 95.65
15 90.9 81.51 91.21 93.87
La relacin que se ha observado entre el porcentaje de
20 94.5 88.09 94.69 97.12
eliminacin de tensioactivo y la actividad de los micro-
organismos es similar en las tres concentraciones de LAS que 29 99.6 99.32 100 100
han sido ensayadas. A modo de ejemplo en la figura 6 se
representa la evolucin de la tasa de respiracin especfica Tabla 3. Porcentaje de biodegradacin de LAS y sus distintos
(SOUR) con el porcentaje de biodegradacin del sustrato homlogos
(LAS) a la salida del reactor para el ensayo con 100 ppm.
Tambin se observa que los homlogos de mayor longitud
En la Figura 6, se observa cmo al inicio de la expe- de cadena se degradan ms rpidamente que los de cadena
riencia, y ante la entrada a la planta piloto de 100 ppm de ms corta, lo que est de acuerdo con el principio
LAS, la microbiota responde con un aumento de actividad, distancia de Swisher (1963).
(valores iniciales de tasa de respiracin de 325,7 aumentan
hasta 531,7 mgO2*g-1 SVSda-1) este aumento con el En la Figura 7 se muestran algunos de los cromatogra-
mximo de biodegradacin de LAS (el da 6 se produce un mas obtenidos durante los das que dur el ensayo con 100
82 % de biodegradacin de LAS). A continuacin se ppm de LAS. Se observa cmo dentro de cada homlogo,
produce una inhibicin en la microbiota existente en el los ismeros ms externos (2Cx) son los ms fcilmente
reactor, observndose un descenso de la tasa de biodegradados aumentando la facilidad de
respiracin especfica (los valores de SOUR en esta biodegradacin con el aumento de la longitud de la cadena
situacin son de 366.4 mgO2*g-1 SVSda-1) a la vez que se (el homlogo 2C12 se degrada ms fcilmente que el
produce una menor bioadegradacin del sustrato (LAS) homlogo 2C10). Todo ello de acuerdo con el principio
ya que se produce un aumento de la concentracin de anterior.
LAS en el efluente. A medida que desaparece el LAS, van apareciendo los
productos intermediatos de su biodegradacin, conocidos
como cido sulfofenilcarboxlicos (SPC). Aparecen
diferentes picos correspondientes a los cidos carbox-
licos formados.
El primer mximo de actividad, el cual implica un mxi-
mo de degradacin de LAS, conlleva a la aparicin de un
mximo de la concentracin de SPC.
A partir del da trece se produce un aumento de la inten-
sidad del pico nmero 1 a partir de los restantes, los
cuales desaparecen casi por completo despus del da
29, debido a que a continuacin de este momento la
microbiota presente en el reactor se encuentra comple-
Figura 6. Evolucin del porcentaje de biodegradacin y de la tamente adaptada al LAS, y al eliminarse ste muy rpi-
actividad microbiana (SOUR) damente, comienzan a ser degradados los SPC.
CONCLUSIONES
En lo que se refiere a la seleccin del mtodo ms ade-
cuado para el control de actividad microbiana de la uni-
dad de lodos activos son las medidas de la tasa de
respiracin especfica junto con la actividad deshidro-
genasa. Estas medidas siguen fielmente el comporta-
miento de los microorganismos en el reactor, lo cual se
corrobora con el anlisis estadstico realizado (Tabla 4)
desviac.
6.40 0.33 37.49 37.59 9.22
estndar
Para los niveles de alquil benceno lineal sulfonato sdi- Edwards, G. L.; Sherrad, J.H. (1982) Measurement and
co que suelen encontrarse en los colectores de aguas re- viability of oxigen uptake rate as an activated
siduales urbanas (inferiores a 20 ppm de LAS), no se sludge process control paramete. J. Water
aprecian efectos importantes sobre la microbiota exis- Pollut. Control Fed. 12, 1546-1552.
tente en las unidades de lodos activos de depuradoras que Garca-Lara, J.; Pern, F.J.; Gonzlez, J. and Vives-Rego,
hagan peligrar el buen funcionamiento de las mis- J.; (1991) Assessment of microbial activity by
mas. No obstante, s se produce una ligera alteracin que the INT-dehydrogenase assay during the
puede atribuirse a una simple sucesin de poblaciones. degradation of linear alkylbenzene sulphonate
A concentraciones superiores, 50 y 100 ppm de LAS, se in sea water and in the OECD screening
produce un descenso de todas las variables estudiadas, method. Biomedical Letters 46: 151-157.
ponindose de manifiesto que a estas concentraciones la Granados, J. (1996) Surfactans raw materials. Constant
microbiota existente en el reactor sufre la presencia del evolution and a solid future. 4th World Surfac-
tensioactivo, siendo los microorganismos superio- tants Congress. l , p p 100-123.
res los ms sensibles a la presencia del tensioactivo,
Gray, N. F. (1989) Biology wastewater treatment. Oxford
experimentando la poblacin un disminucin conside-
Science Pubications. Oxford (London)
rable. Como consecuencia se produce una gran elimi-
nacin de biomasa, lo que produce una prdida de Harrigan, W.F. and McCance, M. (1975) Mtodos de
eficacia en la decantacin y una mayor cantidad de sli- laboratorio en microbiologa de alimentos y pro-
dos en suspensin en el efluente siendo los microorga- ductos lcteos. Editorial Academia.
nismos superiores los ms sensibles a la presencia del Kikuchi, M., Tokay, A. and Yoshida, T. (1986)
tensioactivo, y experimentando la poblacin de estos una Determination of trace levels of linear
disminucin considerable. Adems los valores de la alkvlbenzene sulphonate in the marine
DQO del efluente, en las distintas concentraciones de environment by high performance liquid
tensioactivos ensayadas apoyan estas conclusiones. chromatography. Water Research 20, 643-650.
Respecto a las medidas de actividad, el primer efecto que Lpez, J.M., Kopman, B. and Bitton, G. (1985) INT-
se produce es un aumento de la misma, el cual fue ya Dehydrogenase test for activated sludge process
observado por otros autores. Despus del mximo de control. Biotechnology and Bioenginee-
actividad se produce un perodo en el que la flora se ring. 28, 1080-1085.
encuentra inhibida y durante el cual tanto la biomasa
como la actividad microbiana y la DQO disminuyen Madoni, P. (1994) A sludge biotic index (SBI) for the
evaulation of the biolgical performance of
considerablemente. Por ltimo, la microbiota se recu-
pera adaptndose al compuesto y volviendo a niveles activated sludge plants based on the microfauna
normales tanto de actividad como de eficacia depurati- analysis. Water Research 1, 67-75.
va, aunque el periodo en que sta se encuentra inhibida es Mathijs, E. and De Henau, H. (1987) Determination of
mayor en los experimentos de mayor concentracin. LAS. Tenside Surf. Det. 24,193-199.
Mcavoy, J. and Giger, W. (1986) Determination of
BIBLIOGRAFA linear alkylbenzene sulphonate in sewage sludge by
APHA; AWWA; WPCF (1989) Mtodos Normalizados high-resolution gas cromatography/mass
para el anlisis de aguas potables y residuales. spectrometry. Env. Sci. Technol. 20, 376-378.
Editorial Daz de Santos S. A. Edicin en Nakae E, A, Tsuji, K., and Yamanaka, M. (1981)
Espaol.Madrid Determination of alkyl chain distribution of
Awong, J.; Bitton, G. and Koopman, B. (1985) ATP, alkylbenzenesulphonates by liquid
Oxygen Uptake Rate and INT-dehydrogenase ac- chromatography. Anal. Chem. 53(12), 1818-
tivity of actinomycete foams. Water Research 7, 1821.
917-921. Quiroga, J. and Sales, D. (1991) Degradation kinetics of
Berna, J . , Moreno, A., and Ferrer, J. (1992) An surfactants. Tenside Surf. Det. 28, 27-30.
assesment of the ultimate biodegradation of Rappaport, R., Hopping, W. and Echoff, W. (1987)
LAS. C.E.S.I.O. International Surfactants Monitoring LAS in the environment. 8th Annual
Congress. Meeting of the Soc. Env. Tox. and Chem. Pe-
Cavalli, L., Cassani, G. and Maraschin, C. (1996) ascola. Florida.
Linear alkylbenzene sulphonate (LAS). Raimundo, C.C. and Presin, M.R. (1992) The
Structure elucidation of the biodegradation distribution of linear alkylbezenes in coastal and
intermediates. 4th World Surfactants Congress. estuarine sediments of the western north sea.
Barcelona Vol 4, pp 448-462. Marine Pollution Bulletin 24. 138-146.
Dicorcia, A, Marchetti, M, Samperi, R. and Marcomini, Swisher, R. ( 1 9 8 1 ) The problem of the ultimate
A. (1994) Liquid chromatographic biodegradation of LAS: an extension. Tenside
detrrmination of linear alkylbenzene Surf. Det. 19, 298-299.
sulphonates in aqueous environmental samples.
Anal. Chein. 63, pp 1179-1182. Swisher, R (1963) The chemistry of surfactants benzene
rings. J.Am.Oil Chem. Soc. 40, 648-656.