ENZIMAS ALOSTRICOS

La actividad de las enzimas reguladores se modula de diferentes maneras.

Los enzimas alostricos funcionan a travs de la unin reversible, no
covalente, de unos compuestos reguladores: los moduladores alostricos o
efectores alostricos, que generalmente son metabolitos pequeos o
cofactores. Otros enzimas en cambio estn regulados por modificacin
covalente reversible. Ambas clases de enzimas reguladores tienden a tener
varias subunidades y, en algunos casos, el sitio o sitios reguladores y el
sitio activo se encuentran en subunidades separadas. En los sistemas
metablicos existen al menos otros dos mecanismos que regulan la
actividad de los enzimas. Algunos enzimas son estimulados o inhibidos
cuando se unen a protenas reguladoras separadas. Otros se activan
cuando se eliminan segmentos peptdicos mediante escisin proteoltica la
cual, a diferencia de la regulacin mediada por efectores, es irreversible.
En procesos fisiolgicos tales como la digestin, la coagulacin de la
sangre, la accin hormonal y la visin se encuentran ejemplos importantes
de estos tipos de mecanismos.
El crecimiento y la supervivencia celulares dependen del uso eficaz de los
recursos; esta eficiencia es posible gracias a la accin de los enzimas
reguladores. No hay una regla nica que gobierne la existencia de
diferent3es tipos de regulacin alostricos (no covalente) puede permitir el
control afinado de las rutas metablicas que funcionan de modo
continuado pero a diferentes niveles de actividad cuando cambian las
co0ndiciones celulares. La regulacin por modificacin covalente puede ser
del tipo o nada (el caso ms comn en las roturas proteolticas) o dar lugar
a ligeros cambios en la actividad. En un mismo enzima regulador pueden
darse varios tipos de regulacin.
LAS ENZIMAS ALOSTRICOS EXRIMENTAN CAMBIOS DE
CONFROMACIN EN RESPUESTA A LA UNIN DE
MODUALADORES
Las protenas alostricas son las que presentan otras formas o
conformaciones inducidas por la unin de moduladores. El mismo
concepto de aplica a ciertos enzimas reguladores, en los que cambios de
conformacin inducidos por uno o ms moduladores interconvierten
formas ms activas o menos activas del enzima. Los moduladores de
enzimas alostricos pueden ser inhibidores o estimuladores. El mismo
sustrato es a menudo el modulador; la regulacin en la que el sustrato y el
modulador son idnticos de denomina homotrpica .El efecto es similar al
de la unin del O2 a la hemoglobina: la unin del ligando, o el sustrato en
el caso de los enzimas, origina cambios de conformacin que afectan la
actividad de otros sitios en la protena. En la mayora de casos el cambio
de con formacin convierte una conformacin relativamente inactiva
(estado T) en una conformacin ms activa (estado R). Cuando el
modulador es una molcula diferente del sustrato, se dice que el enzima es
heterotrpico. Obsrvese que los moduladores alostricos no se deben
confundir con los inhibidores acompetitivos y mixtos. Aunque estos
ltimos se unen en un segundo sitio del enzima, no inducen
necesariamente cambios de conformacin entre las formas acticas e
inactivas, y los efectos cinticos son distintos.
Las propiedades de los enzimas alostricos son significativamente
diferentes de las de los enzimas no reguladores sencillos .Algunas de las
diferencias son estructurales .Adems de sitios activos, los enzimas
alostricos tienen generalmente uno o ms sitios reguladores, alostricos,
para la unin del modulador. Del mismo modo que el sitio activo de un
enzima es especfico para su sustrato, cada sitio regulador es especfico
para su modulador. Los enzimas con varios moduladores tienen,
generalmente, diferentes sitios de fijacin especficos para casa uno de
ellos. En los enzimas homotrpicos de sitio activo y el sitio regulador son
el mismo.
En general los enzimas alostricos tambin son mayores y ms complejos
que los enzimas no alostricos. La mayora tienen dos o ms subunidades.
Un ejemplo clsico es la aspartato transcarbamilasa (a menudo abreviada
ATCasa), que cataliza una de las primeras reacciones de la biosntesis de
nucletidos pirimidnicos, la reaccin entre el carbamil fosfato y el
aspartato que forma carbamil aspartato:

La ATCasa tiene 12 cadenas polipeptdicas organizadas en 6 subunidades

catalticas (organizadas en forma de 2 complejos trimricos) y 6
reguladores (organizadas en forma de 3 complejos dimricos). La figura 6-
33 muestra la estructura cuaternaria de este enzima deducida a partir de
anlisis de rayos X .Tal como se detalla ms adelante, el enzima muestra
un comportamiento alostrico, ya que las subunidades catalticas
funcionan como cooperativo. Las subunidades reguladoras tienen sitios de
unin para el ATP y el CTP , que actan como reguladores positivo y
negativo , respectivamente .CTP es uno de los productos finales de la ruta
por lo que la regulacin negativa por el CTP sirve para limitar la accin
de la ATAasa en condiciones en las que el de ATP indican que el
metabolismo celular es robusto , la clula crece , por lo que pueden
necesitarse ms nucletidos de pirimidina para que se produzca la
transcripcin del RNA y la replicacin del DNA .
LAS PROPIEDADES CINTICAS DE LOS ENZIMAS
ALOSTRICOS DIVERGEN DEL COMPORTAMIENTO DE
MICHAELIS MENTEN
Los enzimas alostricos muestran una relacin entre Vo y (S) alcanza
valores suficientemente elevados, la mayora de enzimas alostricos dan
lugar a un curva de saturacin sigmoidea cuando representa Vo frente a
(S), en lugar de la curva hiperblica tpica de los enzimas no reguladores
.En la curva de saturacin sigmoidea podemos encontrar un valor de
(S) a la que Vo es mitad de la mxima, pero no nos podemos referir al
mismo con la designacin Km ya que el enzima no sigue la relacin
hiperblica de Michaelis -Menten. En su lugar se utilizan a menudo los
smbolos (S) 0,5 o K0, 5 para representar la concentracin mxima de la
reaccin catalizada por una enzima alostrico.
El comportamiento cintico sigmoideo es por lo general el reflejo de
interacciones cooperativas entre subunidades proteicas .Dicho de otro
modo , los cambios en la estructura de una subunidad se traducen en
cambios estructurales de las subunidades adyacentes , efecto que es
facilitado por interacciones no covalentes en la interfase entre subunidades
.Los principios estn especialmente bien ilustrados por un no enzima : la
fijacin de o2 a la hemoglobina .El comportamiento cintico sigmoideo se
explican mediante los modelos concent5rado y secuencial de interaccin
de subunidades
La ATCasa ilustran de manera efectiva tanto el comportamiento cintico
alostrico homotrpico como el heterotrpico .La unin de los sustratos,
aspartato carbamil fosfato, al enzima producen de manera gradual una
transicin desde el estado t relativamente inactivo al estado r ms activo
.este hecho explica el incremento sigmoideo en lugar de hiperblico de Vo
al aumentar (S). Una caracterstica de la cintica sigmoidea es que
pequeos cambios en la concentracin de un modulador se puede asociar
con grandes cambios en la actividad .un incremento relativamente
pequeo en (S) en la parte de mayor pendiente de la curva provoca un
incremento comparativamente grandes en Vo.
La regulacin alostrica heterotrpica de la ATCasa es producto de sus
interacciones con ATP y CTP. En el caso de los enzimas alostricos
heterotrpicos, un activador puede hacer que la curva de saturacin con el
sustrato sea ms prxima a la hiperblica, con un descenso de K0, 5 pero sin
cambios en Max lo que se traduce en un incremento de velocidad de
reaccin a una concentracin de sustrato fija. En el caso de la ATCasa ,
esto se produce por la interaccin con ATP lo que hace que el enzima
muestre una curva de Vo frente a (S) caracterstica del lado R activo a
concentraciones de ATP suficientemente elevadas (Vo es superior a
cualquier valor de (S) ) . Un modulador negativo (un inhibidor) puede
producir una curva de saturacin de sustrato ms sigmoidea, con un
incremento en K0, 5. Otros enzimas alostricos heterotrpicos responden a
la presencia de una activador con un incremento de Vmax pero con poco
cambio en K0, 5. Los enzimas alostricos heterotrpicos muestran, por
tanto, diferentes clases de respuesta en sus curvas de actividad frente a
sustrato debido a que algunos tienen moduladores inhibidores, otro tienen
moduladores activadores y otros (como la ATCasa) los tienen de ambas
clases.