Cromatografa

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INTRODUCCIN
La cromatografa es una tcnica fsica que se emplea en los laboratorios clnicos
para separar y cuanticar una gran variedad de sustancias. En este captulo se
presentan los conceptos bsicos de la cromatografa y los principales mecanis-
mos de separacin. Asimismo, se da cuenta de los diferentes tipos de cromato-
grafa y su aplicacin en los laboratorios clnicos.

PRINCIPIOS GENERALES
La cromatografa es un proceso fsico en el que los componentes de una mezcla
se separan por la distribucin diferente entre una fase mvil y una fase esta-
cionaria. Durante el proceso cromatogrco de separacin, la fase mvil trans-
porta el espcimen a lo largo de la capa o columna que contiene la fase estacio-
naria. A medida que la fase mvil uye por la estacionaria, los solutos se
distribuyen entre ambas fases. Los que son ms anes a la fase mvil viajan
ms rpido que los que no lo son.

CLASIFICACIN DE LAS SEPARACIONES

CROMATOGRFICAS
Las separaciones cromatogrcas pueden clasicarse de tres formas: de acuer-
do con el estado fsico de las fases mvil y estacionaria, segn el mtodo de
contacto entre estas fases y segn los mecanismos fsicos de separacin. En
funcin del estado fsico de las fases mvil y estacionaria, la cromatografa
puede ser de gas-lquido (fase mvil gaseosa y fase estacionaria lquida) y de
lquido-lquido (ambas fases lquidas). Segn el mtodo de contacto entre
las fases, la cromatografa se divide en: cromatografa en columna, en la que la
fase estacionaria se coloca en una columna delgada por la que se mueve la fase
mvil bajo la inuencia de la gravedad o la presin; y cromatografa en placa,
en la que la fase estacionaria recubre una placa plana de vidrio, metal o plstico
que se coloca en contacto con la fase mvil. De acuerdo con el mecanismo de
separacin la cromatografa puede clasicarse en: de adsorcin, de reparto,
de cambio de in, de exclusin y de anidad. A menudo, en algunos mtodos
cromatogrcos de separacin coexisten dos o ms tipos de mecanismos. En
los laboratorios clnicos se emplean fundamentalmente los mecanismos de
intercambio inico y de reparto.

CROMATOGRAFA EN COLUMNA: TEORA GENERAL

PRINCIPIOS GENERALES

De los dos mtodos de contacto de las fases estacionaria y mvil, el ms impor-

tante es el que se realiza en columna. Un cromatograma es el dibujo de la seal
del detector en funcin del tiempo o del volumen de fase mvil que eluye. El 197
2010. Elsevier Espaa, S.L. Reservados todos los derechos