Resumen

Epileptogenésis y áreas cerebrales relacionadas

 Estudios neurofisiológicos en pacientes con epilepsia del lóbulo temporal intratable

con fármacos, han mostrado que el foco de inicio epiléptico reside dentro de la
estructura del hipocampo, lo anterior ha conducido al estudio de porciones del
hipocampo obtenido de las cirugías resectivas en pacientes epilépticos.

 Los estudios neurofisiológicos evidencian que las células granulares y piramidales

del hipocampo presentan hiperexcitabilidad cuando el sistema de inhibición se ve
comprometido.

 Los pacientes con epilepsia del lóbulo temporal intratable con fármacos mejoran
significativamente después de la extirpación del hipocampo, amígdala y el
neocortex temporal adyacente,lo cual sugiere que el mecanismo de desarrollo
epiléptico subyace en estas regiones del cerebro.

 Estudios en tejidos extraídos de pacientes con epilepsia del lóbulo temporal

intratable con fármacos han evidenciado algunas anormalidades neuropatológicas,
las cuales incluyen: 1) Un patrón de pérdida de células neuronales en el hipocampo,
2) ‘Sprouting’y reorganización de las fibras musgosas en el giro dentado (estructura
del hipocampo), 3) Gliosis1 del hipocampo, 4) Dispersión ectópica de células
granulares.
Nota: Se hace hincapié a que las diferentes anormalidades neuronales aquí
señaladas se desarrollan en el hipocampo.

Todas estas anormalidades neuropatológicas podrían ser consecuencia de

convulsiones repetitivas o ser el efecto causado por una lesión neuronal, la cual, en
última instancia condujo a convulsiones repetitivas. Sin embargo, cada una debe ser
considerada como un mecanismo potencial que contribuye al proceso
patofisiológico de la epileptogénesis. (Ver fig. 7-1)

1
Proliferación de astrocitos en regiones del sistema nervioso central dañadas, que por lo general, deja
como saldo la formación de una cicatriz glial.
 En ratas a las cuales se les han inducido ataques convulsivos mediante la
administración de ácido cainico demostraron daño neuronal prominente y gliosis en
neuronas piramidales del hipocampo y en neuronas polimorfas hiliares del giro
dentado. Después de la pérdida neuronal del hipotálamo, estas regiones
demostraron plasticidad morfológica, con ‘sprouting’ de las fibras musgosas dentro
de la capa molecular interna del giro dentado y de las fibras musgosas distales en la
región CA3 del hipocampo.

 Varios investigadores han mostrado que el desarrollo progresivo de la

reorganización sináptica de las fibras musgosas es paralelo al aumento de la
excitabilidad neuronal en el giro dentado (región dentro del hipocampo), lo cual
preside la aparición de las convulsiones espontáneas. La reorganización de las
fibras musgosas ha sido observado esencialmente en todos los modelos
experimentales agudos y crónicos de epilepsia en el lóbulo temporal mesial, así
como en especímenes patológicos de humanos con epilepsia en lóbulo temporal
mesial.

 Dado que el subiculum es la puerta de salida del hipocampo, su localización crítica

dentro del sistema límbico, la presencia de ‘bursting neurons’ y la
interconectividad lamelar aumentada en modelos epilépticos podrían explicar la
 hipersincronia celular persistente y la hiperexcitabilidad en el sistema límbico
observada en pacientes humanos con epilepsia del lóbulo temporal mesial
intratable.

Sistema Límbico.

Es un sistema formado por varias estructuras cerebrales que gestionan respuestas

fisiológicas ante estímulos emocionales. Está relacionado con la memoria, atención,
instintos sexuales, emociones (por ejemplo placer, miedo, agresividad), personalidad y la
conducta. Está formado por partes del tálamo, hipotálamo, hipocampo, amígdala cerebral,
cuerpo calloso, septo y mesencéfalo.

Bibliografía:

Schachter, Steven C, Holmes L. Gregory, Kastekeijn Trenité G.A. Dorothée. Behavioral

Aspects of Epilepsy Principle & Practice. Demos New York. 2008; 51-67

Schwartzkroin P, Role of the Hippocampus in Epilepsy. Hippocampus. 1994;4:239-242.

 Población de receptores GABA en regiones cerebrales epileptogénicas

GABAA y su relación con epilepsia

Estructura

 Basado en su acción farmacológica se concluyó que los receptores GABAA están

involucrados en el control de la excitabilidad del cerebro.
 Receptor miembro de la superfamilia de receptores iónicos dependientes de
ligando
 Dominios: 1 Extracelular con grupo N-terminal; 4 dominios transmembrana; 1
dominio loop intracelular

 Clases de subunidades:
o 6α
o 4β. Pueden reemplazarse por: θ. β1 es capaz de formar homooligoméros en
humanos.
o 3γ (splicing pre-mRNA conduce a la formación de dos subtipos de
subunidad γ: γ2S/ γ2S. Puede reemplazarse por: δ,ε,π
o δ, ε, π, θ
o 3ρ (no se unen a ninguna otra subunidad)

Figura 1 Conformación pentamérica de receptores GABA

 En el sistema nervioso central el subtipo de receptor GABAA con mayor población

es el que presenta la combinación de subunidades: 2α, 2β, γ.
 Sin embargo, una parte significativa de receptores GABAA presenta 2 subunidades α
distintas, 2 subunidades β distintas, por lo que al final, esta fracción de receptores
pueden contener de 4 a 5 subunidades distintas.

Interesantemente, un receptor con 2 subunidades α distintas tiene una actividad

farmacológica distinta a un receptor con 2 subunidades α de la misma clase, este
comportamiento sucede de igual manera para las subunidades β, γ. Por ejemplo: En
células granulares dentadas de hipocampo de ratas, cuando los receptores GABAA
presentan subunidades α de clase 1 y 4 (y una subunidad γ2), en vez de α5, el
receptor es menos sensible a Zn, y además se incrementa la afinidad por las
benzodiacepinas.

 Eficiencia de formación de receptores de acuerdo a la combinación de subunidades:

αβ>αγ o βγ en receptores con dos subunidades diferentes.
Otras combinaciones con clases de subunidades distintas a α,β o γ dan como
resultado receptores GABAA disfuncionales.

 Problemas para probar la existencia in situ de las diferentes combinaciones de GABAA

: 1) Se requieren de un patrón farmacológico distintivo para este tipo de receptores;
2) Se requiere de una huella única de actividad electrofisiológica característica de
cada combinación posible de subunidades conformadoras de un receptor GABAA; 3)
Esperar que la actividad del receptor no cambie durante el estudio debido a la
fosforilación endógena o a su interacción con proteínas de la actividad sináptica.

Abundancia de subunidades de receptor GABAa

 Método para estimación de abundancia relativa de subunidades:

Inmunoprecipitación con Ac’s especifícos a cada subunidad unidos a Isótopo de
tritio (3H)-muscinol.

Nota: (3H)-muscinol se une a las zonas de unión entre subunidades α y β. Por lo que
se asume que todos los receptores a los que el isótopo se une contienen estas
subunidades.

Resultados

 Las subunidades GABAa más abundantes en el cerebro son: α1 (70-90%), β2 (55-

90%), y γ2 (50-70%).
  Estudios sugieren que los fármacos selectivos a subunidades α2,α3,α5 presenten
menores efectos adversos como tolerancia o dependencia

Abundancia subunidades α

Subunidad % Precipitación
α1 (98% acompañado de γ1-3 o δ)
90
α2 35
α3 14
α4 (frecuentemente
co-ensamblada con δ) 6
α4 T 13
α4 H (una parte significativa no se
acompaña de γ1,γ2,γ3 o δ) 20
α5 8
α5 H 31
α6 C/C 58
H=Hipocampo; C/C: Cerebelo; Cóclear, T= Tálamo
Abundancia de subunidades α en receptores GABAA
100
90
80
Inmunohistoquímico

70
% de Precipitación

60
50
40
30
20
10
0
α1 α2 α3 α4 α4 H α4 H α5 α5 H α6 C/C
Clases de subunidades α

Abundancia subunidades β

 Subunidad β2 más abundante y de mayor distribución en el cerebro. Se co-

ensambla preferentemente con las subunidades α1 y γ2

Otras subunidades

 Subunidad γ2 más abundante > γ1,γ3

  La abundancia relativa de las subunidades ε,π,θ o ρ no ha sido determinada.
Ver.anexo 1. Tabla de porcentaje de inmunoprecipatación de sitios de unión de
anticuerpos con subunidades GABAA con isotopo 3H-muscimol.

Distribución cerebral de subunidades de receptor GABAA

Método de identificación: Hibridación “in situ” y estudios inmunohistoquímicos.

Cerebral cortex

α3,δ, β1, β2, β3

α2, γ1, θ, β1, β2, β3

α2, γ1
α2, α3, α4, α5, γ3, δ,
β1, β2, β3
α1, α2, α4 (Giro dentado)
Subunidades distribuidas en todo el cerebro: α1, γ2, β2
α5 (Ammon’s horn), δ, β1, β2,
β3, π, θ.
α1**, α2**, α4*, α5**, β1**,
α1**, α3*, β2**, γ2**, δ, β1o α1*, α2**, α4**, α5*, β1**,
β2*, β3**, γ2**
β2*, β3**, γ2**, δ*

* Baja proporción
** Alta proporción
O Muy baja proporción

Otras subunidades de GABAA presentes en hipocampo:

o π Generalmente se co-ensambla a las subunidades α,β y γ; confiere
propiedades electrofisiológicas y de unión a ligandos únicas

o θ Co-expresesado, y posiblemente, co-ensamblado con la subunidades α, β

yγ
 o ρ , el mRNA de las estas subunidades ha sido encontrado en el hipocampo,
por lo que también podría encontrarse en receptores GABAA de esta región.
Esta subunidad, sin embargo no se co-ensambla con subunidades α,β,
generalmente, forma homooligomeros.

Ver Anexo. 2 (Tabla de distribución regional de subunidades de receptor GABAA en el

cerebro)

α4,γ1, γ3 (sustancia negra), δ, θ,β1, β2,

β3

α3, α4,γ1, γ3, δ, θ, β1, β2,

β3

Cerebelo: α6

α2, α5, γ1, γ3, δ, θ, β1,

β2, β3
 Anexo 1

Subunidades presentes en receptores GABAA - hipocampo

Subunidades de mayor abundancia en receptores GABAA en SNC

Anexo 2
Continuación Tabla 2

Bibliografía:

Sieghart W, Sperk G. Subunit Composition, Distribution and Function of GABAA Receptor

Subtypes. Current Topics in Medicinal Chemistry. 2002; 2:795-846

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Subtypes in Human Temporal Lobe Epilepsy. The Journal of Neurosience. 2000;14:5401-
5419.
 Receptores GABAB

Estructura y función

 Receptor metabotrópico, heteromultímero con tres subunidades: GABAB1, GABAB1(A)

y GABAB2 (Ver. Fig. 2)
 Media respuestas inhibitorias sostenidas y lentas a través de canales de Ca2+/K+
activados por proteínas G

Figura 2. Ilustración de receptor GABAB y sus componentes en el complejo de “señalización”. Los

residuos amino de los dominios GABAB(1A) y GABAB(2) contienen un motivo de “trampa de planta
carnívora venus”, únicamente GABA se une en la subunidad GABA B(1). En la región amino-terminal
de GABAB(1a) se encuentran dos proteínas de control complementarias (CCP) o dominios sushi. La
activación del heterodímero abre los canales de Ca2+ presinápticos y los receptores de potasio K+ a
través de proteínas Gβ/γ.

 La subunidad GABAB(1) es la responsable de unirse a GABA, mientras que la

subunidad GABAB(2) es la responsable del acoplamiento y señalización de las
proteínas G.
 Cada dímero del recetor contiene 7 dominios transmembranales, con secuencias
transmembranales parecidas a los receptores metabotrópicos de glutamato
 El dominio espiral de bobina C-terminal de la subunidad GABAB(1) se une con la
subunidad GABAB(2), por lo que ambas subunidades actúan en conjunto para formar
un receptor funcional. Generalmente, receptores GABAB no forman monómeros u
homodímeros funcionales. Si bien se forman homodímeros de este receptor, éstos
son retenidos en el aparato de Golgi o retículo endoplásmico.
 Las isoformas posibles para la subunidad GABAB(1) en humanos son: GABAB(1a),
GABAB(1b) y GABAB(1c). Sin embargo, de expresarse está isoforma sería soluble in vivo.
La isoforma GABAB(1e) es muy interesante, ya que en cultivos celulares es excretada
en forma soluble, así mismo, en membranas celulares de células transfectadas
pueden heterodimerizar con las subunidades GABAB(2), indicando que la interacción
de las espirales de bobina C-terminal no son fundamentales para unión a ligandos.

Distribución de isoformas GABA(1a):

La distribución de las subunidades GABAB(1a) y GABAB(1b) son relativamente

semejantes en la región del hipocampo (región de mayor interés por su importancia
como punto epileptogénico) como se puede observar en la siguiente tabla.
  La subunidad GABAB(2) no parece presentar isoformas, ya que no se han reportado
sitios apropiados de ‘splicing’ que generen transcriptos alternativos a esta
subunidad del receptor GABAB.

Relación de GABABR con epilepsia

 Perturbaciones en el Sistema GABAB durante el desarrollo puede cambiar el balance

de excitación/inhibición, lo que conduce en diversas condiciones neurológicas como
convulsiones atípicas ausentes.
 GABA B agonistas: Exacerbación de convulsiones
 GABA B antagonistas: Supresión de convulsiones, pueden además, revertir
convulsiones y la discapacidad cognitiva.
 La sobreexpresión de receptores GABAB inducen a la aparición de convulsiones
atípicas ausentes
 El efecto de spillover en GABA activa receptores postsinápticos GABAB para
controlar la actividad neuronal del hipocampo (región epileptógena)
 GABA producto del efecto ‘spillover’ de terminales inhibidoras, activa los receptores
postsinápticos GABAB para controlar la actividad rítmica del hipocampo.

Distribución de receptores GABAB en el cerebro

 Subunidades R1a y R1b se expresan abundantemente en el cortex cerebral, la

capa celular piramidal de las regiones CA3-CA1 del hipocampo, la capa granular
del giro dentado.
o La subunidad R1a se expresa predominantemente en neuronas
glutamatérgicas de terminales presináptica, donde contribuye a la
inhibición de la liberación de glutamato.
o La subunidad R1b influencia preferentemente la inhibición postsináptica.

 mRNA de Subunidad R2 altamente expresada en celular de Purkinje del

cerebelo, en el cortex cerebral, talámo y células piramidales del hipocampo.

 Aunque los receptores GABAB se localizan principalmente en poblaciones de

células neuronales, también puede encontrarse en astrocitos, implicados en el
 reforzamiento de los circuitos de inhibición y excitación mediante la liberación de
glutamato o el consumo de GABA producto del fenómeno de spillover.

GABAB y su relación con canales de Ca2+ y K+ en la respuesta inhibitoria.

 Los canales de Ca2+ del tipo P/Q y N son inhibidos por la unión con las
subunidades βγ de las proteínas G acopladas a los receptores activados
GABAB
 Función presináptica de receptores GABAB : Como auto o heteroreceptores,
inhiben respectivamente la liberación de GABA o glutamato.
 Función postsináptica de receptores GABAB: La liberación del complejo βγ de
la proteína G, interactúa con los canales de potasio IRK, lo que conduce a un
aumento de la conductancia, y por tanto, al eflujo de iones K+. Hay evidencia
que en este proceso subyace la generación de las corrientes postsinápticas
inhibitorias lentas, así como de la hiperpolarización postsináptica de larga
duración. (Ver Fig. 3)
Fig. 3 Localización y roles fisiológicos de los receptores GABAB. Los receptores GABAB se
localizan en las membranas presinápticas, postsinápticas y extrasinápticas. Los receptores
presinápticos GABAB previenen la liberación de neurotransmisores mediante la regulación
negativa de la actividad de los canales de Ca2+ o por la inhibición directa de la maquinaria
de liberación de neurotransmisores. Los autoreceptores GABAB inhiben la liberación de
GABA, mientras que los heteroceptores GABAB inhiben la liberación de glutamato y varios
otros neurotransmisores. Algunos heteroreceptores son activados por GABA circundante,
otros por el efecto spillover de GABA de las terminales inhibitorias. Los receptores
postsinápticos inducen IPSCs (Inhibitory Postsinaptical Current) por la activación de canales
de K+ del tipo Kir3, lo cual hiperpolariza la membrana, inactivando las corrientes
excitatorias.

Los receptores GABAB en espinas y ejes dendríticos (dendritic shafts) son activados por el
efecto spillover de GABA de terminales adyacentes durante las oscilaciones de poblaciones
neuronales o durante la actividad epileptiforme, lo cual puede servir para contrarrestar la
hiperexcitabilidad neuronal.

Los receptores GABAB dendríticos inhiben los potenciales de acción de la propagación

reversa mediante la activación de canales de K+, lo cual puede influenciar en los procesos
de plasticidad sináptica.

Durante la transmisión neuronal de alta frecuencia, GABA deprime su propia liberación

mediante los autorreceptores GABAB , lo cual permite la activación suficiente de receptores
NMDA para la inducción de LTP (Long Term Potentiation) o potenciación a largo plazo. De
hecho, la activación de receptores NMDA y de CaMKII en espinas dendríticas aumenta los
IPSC mediados por receptores GABAB y canales de K+.

Receptores GABAB y su relación en la modulación del aprendizaje y memoria: Recordar que

el levetiracetam es un fármaco procognitivo, efecto que podría deberse a su unión con
receptores GABAB, debido a que:

 Se ha comprobado que los agonistas a GABAB perjudican el aprendizaje y la

memoria, mientras que los antagonistas a GABAB mejoran dichos procesos
cognitivos.

Bibliografía:

 Hua A Han, Miguel A Cortez, Carter Snead. GABAB Receptor and Absence Epilepsy.
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