INTRODUCCION:

Los microorganismos son seres vivos que solo pueden visualizarse con el
microscopio; se encuentran en todos lados: en el suelo, agua, superficies corporales,
alimentos e incluso en el aire. La mayoría son unicelulares sin embargo también
existen microorganismos multicelulares como algunas algas u hongos, cabe
mencionar que también los virus forman parte de los microorganismos en el campo de
estudio de la microbiología, aunque no son considerados seres vivos.

Muchos microorganismos no son perjudiciales y juegan un papel muy importante en

la biosfera, dicho papel va desde fijar el nitrógeno para poder ser absorbido por las
plantas hasta descomponer materia orgánica y transformarla para su reabsorción en
la naturaleza; algunos microorganismos son patógenos, por esta y muchas razones
más, su estudio es de gran importancia. La supervivencia y crecimiento continuo de
microorganismos depende de un suministro adecuado de nutrientes y un ambiente
favorable para su crecimiento. Un medio de cultivo es una solución que contiene los
nutrientes necesarios para permitir el crecimiento de microorganismos, en condiciones
favorables de pH y temperatura. Existen 3 tipos de medios de cultivo según sus
cualidades físicas: líquidos, semisólidos y sólidos. Un medio liquido carece de un
agente solidificante y se denomina caldo de cultivo; si a un caldo se le adiciona un
agente solidificante como agar, se forma un medio semisólido o sólido. Para esta
práctica sólo se utilizaron medios sólidos de agar, por lo que no nos adentraremos en
los medios de cultivo líquidos o semilíquidos.

OBJETIVO
Analizar las siembras realizadas en las diferentes placas Petri
MATERIALES
• cocina eléctrica
• Erlenmeyer de 250 ml
• Espátula
•papel craf y metálico
• Agar
•placas Petri
• Agua destilada
• Algodón
MARCO TEORICO
SIEMBRA
Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porción de muestra (inóculo) en un
medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano, para su desarrollo y
multiplicación.
Las reglas fundamentales para efectuar la siembra exigen:
Que se efectúen asépticamente
Que los medios de cultivo y el instrumental a utilizar estén esterilizados
Que se realicen solo los manipuleos indispensables
Que se trabaje fuera de toda corriente de aire. De ser posible utilizando un mechero o
bien Flujo laminar. Existen diferentes tipos de siembra de acuerdo al medio utilizado y
los requerimientos del microorganismo a estudiar.
MEDIOS SOLIDOS:
 Siembra por inmersión
 Siembra en doble capa
 Siembra en superficie
 Siembra en estría
Existen distintas técnicas para la siembra en estrías, el objeto es obtener colonias
aisladas
• TÉCNICA A
Consiste en cargar el ansa con la muestra y hacer estrías paralelas en la cuarta parte
de la superficie de la placa, se quema el ansa, se enfría, se gira la placa a 90° y se
vuelve a estriar tocando 3 o 4 veces el área sembrada inicialmente y cubriendo otro
cuarto de la placa. Por último, sin quemar el ansa, se estría el resto de la superficie sin
sembrar.

• TÉCNICA B
Con el ansa cargada se hacen 3 o 4 estrías; se quema el ansa, se hacen 3 o 4 estrías
perpendiculares a las anteriores, se quema el ansa y se repite el procedimiento hasta
agotar la superficie de la placa.
PREPARACIÓN DEL MEDIO DE CULTIVO
Se siguen las instrucciones del rótulo del medio de acuerdo a la cantidad a preparar. Se
transfiere el medio a un erlenmeyer y se agrega la cantidad de agua destilada
establecida. Con ayuda de un vigilante se disuelven los grumos que puedan formarse y
se lleva la suspensión a baño maría hasta que el medio se torne transparente, se cubre
el erlenmeyer con un tapón de algodón.
Se cubre la torunda con material impermeable y se esteriliza en autoclave a 121ºC
durante 15 minutos. Si se utiliza de inmediato, dejar enfriar a temperatura alrededor de
45ºC. En caso de que el medio solidifique, fundirlo nuevamente a baño maría antes de
su uso.

DISCUSIÓN DE RESULTADOS
El crecimiento bacteriano realizando la siembra por estría no fue claramente observable,
presentando una forma de desarrollo en colonias separadas.
“Cabe suponer que cada colonia aislada es la descendencia de una sola célula y, por
tanto, un cultivo puro” (Pelczar, 1977)
La forma de desarrollo es una de las características que contribuyen la morfología de
las células bacterianas.
“Entre las principales características de las bacterias figuran su tamaño, su forma, su
estructura y tipo de agrupación. Estas características constituyen la morfología de la
célula bacteriana y la definen en un grupo taxonómico. (Pelczar, 1977)
 Los resultados obtenidos muestran que para todas las placas presentaba la formación
de desarrollo en colonias separadas, consistencia membranosa, ausencia de
cromogénesis y en cuanto a la cantidad se pudo percibir crecimiento escaso, abundante
y moderado. Este ultimo dependiendo de la forma en la cual fue realizada la siembra.
CONCLUSIONES
 El desarrollo de microorganismos anaerobios facultativos en un medio líquido se
manifiesta a través de la turbidez.
 El crecimiento bacteriano realizado en la siembra en placas por estría no fue
claramente observable.
 El crecimiento microbiano obtenido en la siembra por punción manifiesta la
existencia de microorganismos aerobios.
 En la siembra por punción y estría se desarrolló un tipo de crecimiento filiforme.
 El desarrollo de colonias formadas a partir de las diluciones seriadas presenta
características que difieren en forma, borde, elevación, superficie y estructura
interna, lo cual es notablemente influenciado por las concentraciones de carga
microbiana del medio en el cual dichas colonias se desarrollan.
RECOMENDACIONES
1. Usar guantes y tapa boca para evitar contaminaciones.
2. Esterilizar el área antes de iniciar el trabajo.
3. No colocar materiales sobre el mesón de trabajo.
4. Trabajar con el área estéril.
5. Hablar lo indispensable.
6. No ingerir alimentos dentro del laboratorio.
7. Al salir del laboratorio lavarse las manos con una solución antibacterial.
8. Debe asumirse que todas las superficies expuestas tales como la de las manos,
las mesas, instrumentos y aun los exteriores de los utensilios recién esterilizados
están contaminados.
9. En el momento de realizar la siembra la aguja y asa de platino deben esterilizarse
por calentamiento hasta rojo vivo.
BIBLIOGRAFÍA
BARRETO, Miriam. 1994. Manual Práctico de Microbiología General. Canoabo
CARPENTER, Philip. 1969. Microbiología. 2da Edición. Editorial Interamericana, S.H.
México.
PELCZAR. 1990. Microbiología. 2da Edición. Editorial. Mc Graw-Hill. México.
WALTER, W.G. 1980. Introducción a la Microbiología. Editorial Continental. México.
GRASSINI, Luis. 1967. Microbiología Agraria. UCV-Facultad de Agronomía. Caracas-
Venezuela.
BLAIR, J. 1970. Manual Clínico de Microbiología. Bethesda. AMER-Soc-Microbiológica.