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ANEXO 3

CALCULO DE SERONEUTRALIZACIÓN
EJEMPLO PARA OBTENER LA DILUCIÓN DONDE SE ENCUENTRAN LAS 64 DL 50 TEÓRICAS.

Si el virus trabajo (CVS) tiene un título activo de una DL 50 para el ratón de 10-7.5 sumar
el logaritmo de éste, el correspondiente a 64 (64 DL 50), o sea 1.8, con lo cual quedan
10-5.7 que corresponde a la dilución que debe mezclarse con las diluciones de sueros
(107.1-1.8= -5.7 =10-5.7).

FORMULA DE REED Y MUENCH PARA CALCULAR DOSIS PROTECTORAS (DP).

ACUMULADOS
DILUCIÓN DE VIVOS TOTAL
%
SUERO MUERTOS MUERTOS VIVOS SOBREVIVIENTES

1:5 = 10-0.7 0 8 0 24 24 100

1:25 = 10-1.7 0 8 0 16 16 100

1:125 = 10-2.1 3 5 3 8 11 73
-2.8
1:625 = 10 6 3 9 8 17 47

Log DL50= log dilucidan + - (DP xlog factor de dilución)


______________________________________________________
50% x factor de dilucidan % de positividad inmediatamente mayor al 50% - % positividad
inmediatamente menor al 50%.

Log DL50 = - 2.1 - 73 - 50 x 0.7 =


73 – 47
= - 2.1 - 23 x 0.7 = 0.6
26
= 2.1 – 0.6 = 1.5
= 1 = 1 = 1: 32 (Titulo de suero)
Anti log 1.5 32

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Calcular las DL50 en el control de virus y las dosis letales efectivamente usadas en la
prueba de neutralización

ACUMULADOS
DILUCIÓN DE VIVOS TOTAL
%
VIRUS MUERTOS MUERTOS VIVOS MORTALIDAD

10-5.7 8 0 16 0 16 100
-6.7
10 4 4 8 4 12 67

10-7.7 3 5 4 9 13 31
-8.7
10 1 7 1 16 17 6

FORMULA DE REED Y MUENCH PARA CALCULAR DOSIS DL50.


Log DL50 = log dilución ± (DP x log factor de dilución)
50% x factor de dilucion % de positividad inmediatamente mayor al 50% - % positividad
inmediatamente menor al 50 %

Log DL50 = - 6.7 - 67 - 50 x 1 =


67 – 31

= - 6.7 - 17 =
36
= - 6.7 – 0.47 =

= - 7.17

Título del virus 107.17 DL50/0.03 ml


Dosis letales usadas realmente 7.17 – 5.7 = 1.47
Anti log 1.47 = 29.5
DL50 = 29.5/0.03 ml
Para que la prueba sea válida los rangos deben ser de:
5 a 50 DL50/0.03 ml
Fuente: Kaplan, Koprowski, Meslin, WHO, “Laboratory Techniques in Rabies” 4th Edition, Geneva 1996.

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