GENETICĂ CURS 2

 REPLICAREA ADN
 ADN MITOCONDRIAL
 ACIZI RIBONUCLEICI

1. REPLICAREA ADN
 Proces prin care se sintetizează ADN
 Fiecare catena a unei molecule de ADN se va comporta ca o
matriță unei unei noi moelcule
 Secvența este determinată de complementaritatea bazelor
 Are loc în procesul S al ciclului
 Pentru ca replicarea să se desfășoare într-o perioadă de timp
rezonabilă sunt necesare mai multe puncte de start ale replicării
numite REPLICONI
 Schematic, dubla spirală a ADN-ului se separă în cele 2 catene
componente, rezultând o structură în formă de Y numită FURCĂ
DE REPLICARE

ETAPELE REPLICĂRII

I. INIȚIERE – implică recunoașterea regiunii de pe o moleculă

de ADN unde va începe procesul de replicare
II. ELONGARE – cuprinde evenimentele ce se desfăsoară la o
bifurcație de replicare, unde catenele parewntale sunt
copiate în catene fiice(noi)
III. TERMINARE – încheierea procesului atunci când moelcula
parentală a fost complet replicată

MECANISMELE REPLICĂRII

 Inițierea
o Sub acțiunea unor enzime numite topoizomeraze, ADN-ul
este despiralizat
 o Ulterior, catenele sunt separate de enzime numite helicaze,
iar proteinele SSB (stromal binding protein) stabilizeaz[
catenele și împiedică respilarizarea lor
o Desfacerea ADN-ului are loc la nivelul repliconilor, la aceste
nivele apărând furcile sau bifurcațiile de replicare în formă
de Y
 Replicarea
o ADN-ul devine monocatenar, iar ambele catene se replică
simultan servind ca matrițe pentru catenele noi formate
O Pentru inițierea replicării, este nevoie de ARN PRIMAZĂ care
va așeza primul nucleotid iar apoi enzimele necesare
replicării numite ADN POLIMERAZE (DELTA, ALFA) vor
elonga catenele.
O ADN Polimerazele prezintă doua caracteristici:
 Toate sintetizează ADN doar în direcția 5’ -> 3’
 „Nu știu” să înceapă sinteza unei catene, ci doar să o
alungească, adăugând un nucleotid la extremitatea
3’OH
O Polimerizarea celor 2 catene antiparalele se face diferit
datorită direcției 5’ -> 3’
 Pentru catena matriță 5’ -> 3’ sinteza catenei
noi(avansate – leading strand) se realizează continuu.
ARN primaza este necesară doar la început iar apoi
ADN polimeraza va adăuga nucleotid cu nucleotid la
capătul 3’OH
 Pentru catena matriță 5’ -> 3’ sinteza catenei noi(
întârziată – lagging strand) se face discontinuu cu
ajutorul ADN polimerazei delta începând din punctul
cel mai îndepărtat al furcii de replicare prin sinteza
unor fragmente de 100-1000 nucelotide numite
FRAGMENTE OKAZAKI care apoi sunt legate cu
ajutorul ADN ligazei
O Într-o fază mai avansată a replicării, primerii sunt
îndcepărtați, iar golurile vor fi umplute de ADN polimeraza
alfa
 O Replicarea este bidirecțională, având loc în ambele sensuri,
terminându-se cand ADN polimeraza ajunge la celălalt capăt
O Replicarea este semiconservativă, moelculele de ADN fiice
fiind formate dintr-o catenă veche și una nouă
2. ADN MITOCONDRIAL
DEF. Mitocondriile sunt organite celulare a căror funcție este producerea
de energie. Majoritatea ADN-ului (98a%) este în nucleu, mitocondriile
prezentând și ele ADN propriu numit ADN mitocontrial (ADNmt)
CARACTERISTICI
 Genomul are ADN circular, bicatenar, format din 16.569 pb
 Are 2 catene
o Catena H (grea)
o Catena L (ușoară)
 Într-o regiune mai mică (bucla CR/D) în care se afla situsul
deinițiere al transcripției, ADN-ul are 3 catene:
o Catena H
o Catena L
o Secvența ADN 7S
 Genomul mitocondrial este compact și conține 37 de gene: 28 pe
catena H + 9 pe catena L
o 13 codifică enzime implicate în fosforilare oxidativă
o 22 codifică ARNt
o 2 gene codifica ARNr
 Genele nu conțin introni (non informațional)
 Nu este asociat cu proteine, nu conține ADN repetitiv
 Numărul copiilor de ADN variază de la o mitocondrie la alta (între 2
și 20)
 Codul genetic motocondrial are o semnificație diferită
 Se transmite exclusiv pe cale maternă
 Rata mutațiilor este de 10-15 ori mai mare ca în ADN nucleolar și
de obicei se produce fenomenul de heteroplasmie, într-o
mitocondrie existând atat ADN normal cât și cu mutație
 Mutațiile produc boli degenerative severe cu un debut tardiv și
evoluție progresivă precum:
o Miopatia mitocondrială
 o Sindromul Kearns-Sayre
o Neuropatia optică ereditară Leber

3. ACIZII RIBONUCLEICI
 Sunt macromolecule prin care informația genetică estte exprimată
și vehiculată în organismul uman
 Structura lor moleculară este asemănătoare cu a ADN-ului cu
diferența că flucidul din compoziție este reprezentat de riboză în
loc de dezoxiriboză, iar timina este înlocuită cu uracilul
 Se găsește sub formă monocatenară, însă poate forma și dublu
helix în anumite condiții
 Din totalitatea moleculelor de ARN găsite într-o celulă activă din
punct de vedere metabolic:
o ARNm -> 3-5%
o ARNr -> 90%
o ARNt -> 4%

Principalele tipuri de ARN

1. ARN mesager (ARNm) – copiază inițial tot (inclusiv introni și exoni);

în final, copiază doar exoni
2. ARN de transfer (ARNt) – are formă de trifoi; prezintă anticodon
3. ARN ribozomal (ARNr) – prezintă 2 subunități (mare, mică), care se
deplasează pe ARN mesager și se sintetizează proteina
4. Alte tipuri de ARN

ARN MESAGER

a) Rezultă din ARNm precursor (pre ARNm) printr-un proces de maturare

care presupune înlăturarea intronilor și protejarea extremităților
b) Este o copie a secvenței codante a unei gene și servește ca matriță
pentru sinteza unei proteine
c) Este exportat din nucleu în citoplasmă unde se leagă de ribozomi și
translatat în proteină cu ajutorul ARNt
d) O secvență de 3 nucleotide reprezintă un codon care este apoi tradus
printr-un aminoacid în proteină
 e) Mărimea nucleului ARNm este direct proporțională cu dimensiunea
peptidului pe care îl codifică, de exemplu o secvență codantă de 1000 pb
va determina formarea unei proteine cu 333 aminoacizi
f) Unele ARNm sunt comune tuturor celulelor specificând proteine house-
keeping, iar altele sunt specifice altor celule, de exemplu hemoglobina
regăsită doar în hematii
g) Într-o celulă există câteva sute de molecule de ARNm diferite

ARN TRANSPORT

a) Se găsește în citoplasma celulelor

b) Este o moleculă mică de ARN (70-93 nucleotide) care transferă la situsul
ribozomal în timpul translației un aminoacid specific lanțului peptidic în
formare
c) Într-o celulă care sintetizează activ proteine se regăsesc simlutan cel
puțin 50 de tipuri de ARNt
d) Există cel puțin un ARNt pentru fiecare dintre cele 20 de tipuri de AA
regăsiți în proteine
e) Are o structură particulară, prezentând un sit pentru atașarea AA în trei
bucle, dintre care una prezintă o regiune de trei nucleotide numită
anticodon pentru recunoașterea codonului din ARNm de care se leagă
prin legături de hidrogen
f) Secvenșa anticodonului ARNt este esențială pentru formarea lanțului de
AA ai proteinei

ARN RIBOZOMAL

a) Este sintetizat în nucleu

b) În citoplasmă se combină cu proteine fiind elementul majoritar din
structura ribozomului având rol CATALIZATOR cât și STRUCTURAL în
sinteza proteinelor prin procesul de translație
c) Ribozomii umani conțin 4 tipuri de ARNr (5S, 5.8S, 18S, 28S) care intră în
componența celor 2 subunități (mare, mică)
d) Ribozomii leagă ARNm și realizează sinteza proteinelor
e) Mai mulți ribozomi pot fi atașați simultan la o moleculă de ARNm
f) ARNr este regăsit în cantitate mare în citoplasmă, reprezentând 90% din
totalitatea ADN-ului
OBSERVAȚIE

 Subunitate mică -> 18S + 33 proteine

 Subunitate mare -> 5S, 5.8S, 28S + 49 proteine

ALTE TIPURI DE ARN

I. ARN MIC NUCLEAR (ARNsm)

 Grup heterogen de ARN care are 60-360 nucleotide
 Intră în constituția splaisozomului participând la convertirea pre-
ARNm în ARNm prin secționarea și îndepărtarea intronilor
 Participă la procesarea altor clase de ARN
 Reglează factorii de transcripție
II. ARN MIC NUCLEOLAR (ARNsno)
 Grup heterogen de ARN care are 60-360 nucleotide
 Participă la biogeneza ARNr și ARNt
 Participă la reglarea matisării alternative a unor gene
III. MICRO ARN (ARNmi)
 O moleculă de ARN cu 21-22 nucleotide
 Blochează translația sau produce degradarea ARNm prin fenomenul
de „interferență ARN”
IV. ARN INTERFERENT MIC (ARNsi)
 Moleculă ARN cu 20-25 nucleotide
 Este utilizat posttranscripțional
V. ARN NECODANT LUNG
 Moleculă ARN cu peste 200 nucleotide
 Implicat în reglarea expresiei genelor prin modificarea cromatinei,
biologia telomerelor, amprentare, inactivarea cromozomului X