UNIVERSIDAD DE CUENCA

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA

“CARACTERÍSTICAS DEL MOCO CERVICAL Y CONCENTRACIÓN

DE HORMONAS PERIESTRUALES EN RELACIÓN CON EL TIEMPO
DE OVULACIÓN EN EL GANADO CEBÚ (SAHIWAL)
”

Alumnos: Tania Encalada, Leonardo Garzón, Anabel Guamán

Curso: 8° ciclo
Cátedra: Reproducción Animal.
Profesor: Dr. Luis Eduardo Ayala

Cuenca – Ecuador
2017
CARACTERÍSTICAS DEL MOCO CERVICAL Y CONCENTRACIÓN DE
HORMONAS PERIESTRUALES EN RELACIÓN CON EL TIEMPO DE
OVULACIÓN EN EL GANADO CEBÚ (SAHIWAL)

ABSTRACTO

El presente estudio se realizó para determinar la asociación entre las

características del moco cervical, la progesterona periestrual (P4) y las
concentraciones de la hormona luteinizante (LH) y el tiempo de ovulación en el
ganado Cebú. En el experimento 1 se determinó la relación entre las
características del moco cervical y el tiempo de ovulación. Se recolectó moco
cervical de vacas lecheras Sahiwal ( n = 60) antes de estudiar la inseminación
artificial a partir del cuello del útero y las propiedades reológicas y químicas. El
tiempo de ovulación se determinó mediante ecografía a los 2 h desde el inicio
del estro hasta la ovulación. El moco cervical fue copioso y delgado en 70,2 y
63,2 por ciento de los períodos de estro, respectivamente. El moco cervical del
57,9 por ciento de los estros tenía un patrón de arborización típico. Las medias
± SEM de pH, conductividad eléctrica y valor spinnbarkeit del moco fueron de
7,59 ± 0,06, 15,21 ± 0,15 mS / cm y 11,06 ± 1,06 cm, respectivamente. La
duración de la ovulación fue significativamente mayor (P <0.05) en las vacas
con un valor de 8-16 cm spinnbarkeit del moco cervical que las vacas con valores
más altos o más bajos. En el experimento 2 la relación entre periféricos P 4, Se
determinaron las concentraciones de LH y el tiempo de ovulación. Para este
propósito se recogieron muestras de sangre de 20 vacas Sahiwal (10 estros
naturales y 10 estros inducidos) a intervalos de 2 h desde el inicio del estro
hasta la ovulación. Peripheral P 4 y LH concentraciones se midieron usando kits
de ELISA-bovina específico. La duración del estro a LH-pico y LH-pico a
ovulación fue 2,2 ± 1,62 h y 29,45 ± 1,73 h en celo natural y 3,3 ± 0,67 h y 32,75
± 3,62 h en el celo inducido, respectivamente. El valor pico de la LH no varió
significativamente en sincronía (15,26 ± 2,8 ng / mL) y estro natural (12,67 ±
1,96 ng / mL). La concentración plasmática de P4 en el día de estro fue
significativamente mayor (P <0,05) en los estros sincronizados (1,23 ± 0,23 ng
/ mL) en comparación con los estros naturales (0,65 ± 0,11 ng / mL). El intervalo
entre el estro y la ovulación fue significativamente mayor (P <0,05) cuando
la concentración de P 4 fue> 1 ng / mL en el día de estro (36,17 ± 0,73 h en
estado natural y 37,57 ± 4,32 h en sincronía) en comparación con <1 ng / mL
(31,28 ± 1,74 h en condiciones naturales y 28,83 ± 3,61 h en sincronización). En
conjunto, el valor de spinnbarkeit y el patrón de arborización del moco cervical
tuvieron una fuerte relación con la concentración plasmática de (P4) y el tiempo
de ovulación, indicando que los parámetros podrían usarse como una
herramienta para decidir el momento óptimo de inseminación en el ganado
Sahiwal.

PALABRAS CLAVES
Moco cervical, Ovulación, Progesterona, LH, Ganado cebú

1. INTRODUCCIÓN

En el bovino, la expresión del estro y la ovulación es el resultado de un entorno

hormonal altamente sincronizado durante el período periestrual (Beg et al., 2003;
Galina y Orihuela, 2007). Durante la fase lútea, la alta progesterona circulante
(P4) bloquea la oleada preovulatoria de la hormona luteinizante (LH) así la
ovulación y también la expresión del comportamiento del estro. Cuando la
sangre (P4) concentración comienza a disminuir bajo el efecto luteolitico de
PGF 2α, aumenta la frecuencia del pulso de las hormonas gonadotropinas (FSH
y LH). A medida que el folículo de Graaf madura bajo la influencia de estas
hormonas durante los últimos 3-5 días del ciclo estral, una gran cantidad de
estradiol se sintetiza y se secreta. El estradiol, a una concentración umbral,
provoca la aparición de un estro conductual y desencadena un aumento de la
ovulación de LH (Machado et al., 2008; Roelofs et al., 2010). La concentración
de estradiol en sangre alcanza su concentración más alta concurrente con la
máxima puntuación de comportamiento de celo (Lyimo et al., 2000).

Los espermatozoides, al depositarse en el tracto reproductivo femenino, viajan a

través de diferentes ambientes para llegar al sitio de fertilización. Para el servicio
natural, el semen eyaculado se deposita en la vagina y el esperma entra en el
cuello del útero donde el moco cervical filtra los espermatozoides con morfología
y motilidad deficientes (Saurez y Pacey, 2006). Aunque esta barrera se evita en
la inseminación artificial (donde el semen congelado se deposita en el cuerpo
uterino), la caracterización del moco cervical es un determinante crítico para el
momento de la inseminación (López-Gatius et al., 1996). Durante el período
periestrual, el estrógeno más alto influye en el tracto genital, haciéndolo
edematoso, tónico y altamente secretor, especialmente las glándulas cervicales,
dando lugar a flujo de moco pesado característico (Roelofs et al., 2010). Un
aumento en la concentración de agua y electrolitos en el moco cervical, que
cambia la relación glicoproteína: agua que conduce a la alteración de las
propiedades reológicas. El moco cervical se convierte en un aumento, se vuelve
más acuoso, translúcido, menos viscoso y más fácil de atravesar por los
espermatozoides durante la fase folicular en comparación con la fase lútea del
ciclo cuando el moco es escaso, viscoso y desfavorable a la penetración
espermática (Rutllant et al., 2005).

La cuantificación de las concentraciones de (P4) y (LH) durante el periestrus

mejora la precisión de la predicción del tiempo óptimo de inseminación para
asegurar la concepción. Sin embargo, la medición de estas hormonas es
laboriosa, costosa, requiere mucho tiempo y requiere equipo sofisticado y por lo
tanto no es adecuado para condiciones de campo. Las concentraciones
circulantes de hormonas durante el periestrus influyen en la duración del estro,
el tiempo de ovulación, las características del moco cervical y la
concepción. Aunque se ha estudiado la relación entre estos parámetros en
el ganado Bos taurus, se ha realizado muy poco trabajo en bovinos Bos
indicus. Por lo tanto, el presente estudio fue diseñado para evaluar la relación
entre el tiempo de ovulación, periestrual concentración hormonal en sangre (P4 y
LH) y las características del moco cervical en el ganado Sahiwal.

2. MATERIALES Y MÉTODOS

2.1. Experimento 1: Relación entre los síntomas del estro, las características
del moco cervical y el tiempo de ovulación

2.1.1 .Animales experimentales

El presente estudio se realizó en el astillero del Instituto Nacional de

Investigación Lechera (NDRI), Karnal, Haryana. Se utilizaron vacas Sahiwal (n =
60, de 1ª a 5ª parto) para estudiar la asociación entre las características del moco
cervical y el tiempo de ovulación. Las vacas incluidas en el estudio estaban libres
de trastornos anatómicos y reproductivos y también libres de enfermedades. Los
animales experimentales se mantuvieron en un sistema de alojamiento suelto
bajo la práctica de manejo de grupo. Los animales secos y lactantes fueron
alojados por separado en potreros con ladrillos en los bordes del suelo.

2.1.2 .Características del moco cervical

El moco cervical fue recolectado antes de la inseminación artificial por medio de

aspiración cervical media usando vainas azules estériles (IMV Technologies
Francia, Francia) y una pistola de inseminación artificial universal por el método
recto-vaginal. Una funda azul fue colocada en la pistola de inseminación artificial
universal para servir como una jeringa larga. El pistón de la pistola de
inseminación universal actuaba como émbolo y ayudaba a extraer el moco
cervical. Inmediatamente después de la recolección, 5 ml de moco cervical se
llevó al laboratorio en un tubo de ensayo estéril y se probaron los siguientes
parámetros:

I. Cantidad: la cantidad se evaluó en base a la cantidad de secreción de

mucosidad observada que se clasificó como ausente / escasa, moderada y
abundante.
II. Aspecto: el moco obtenido se observó visualmente en cuanto a la
apariencia, que fue clasificado como claro, nublado y sucio (Deo y Roy, 1971).
III. Consistencia: la consistencia del moco se evaluó colocando 2-3 gotas en
un portaobjetos de vidrio sin grasa e inclinando el portaobjetos a 45°. Se
observó el movimiento del moco y se agruparon en tres consistencias
diferentes (Deo y Roy, 1971); grueso, moderado y delgado.
IV. Valor de Spinnbarkeit: dos o tres gotas de moco cervical se colocaron en
una diapositiva sin grasa y otra diapositiva de vidrio sin grasa se colocó sobre
ella. Los portaobjetos se alejaron lentamente uno del otro para estirarse entre
dos portaobjetos y la corredera se movió hasta que se rompió el moco. La
distancia entre las dos placas se midió justo antes de la ruptura de la cadena
de moco con una escala de cm montada en una pared (Panigrahi, 1964). Los
valores de spinnbarkeit se agruparon en 0-8 cm, 8-16 cm, 16-24 cm y> 24 cm.
V. Patrón de arborización: para analizar el patrón de arborización, se
colocaron 2-3 gotas de moco cervical en un portaobjetos de vidrio sin grasa y
se diseminaron uniformemente, se secaron al aire y se examinaron bajo un
objetivo de baja potencia (10x) de microscopio. Los patrones de helecho se
agruparon en categorías típicas, atípicas y nulas.
VI. Conductividad eléctrica: el moco cervical fue lisado por vórtex (Spinix
Corporation, CA, USA) hasta que se convirtió en un líquido de flujo libre. La
conductividad eléctrica (EC) se midió en el moco cervical lisado usando un pH-
conductividad Benchtop (Orion 4 star, Thermo Electron Corporation, USA.). La
conductividad eléctrica se registró en mili-Siemens / cm unidad (mS / cm) y los
valores se clasificaron como <14 mS / cm, 14-16 mS / cm y> 16 mS / cm.
VII. pH: Se midió el pH en las muestras lisadas usando pH-Conductivity
Benchtop (Orion 4 star, Thermo Electron Corporation, USA) y se categorizaron
en grupos <7,0, 7,0-7,5, 7,5-8,0 y> 8,0.

2.1.3 Detección de la duración del estro y del tiempo de ovulación

Las vacas fueron monitoreadas por personal capacitado cada 2 h durante

30 min para la detección del período de celo. Los observadores registraron el
inicio del estro sobre la base de los signos conductuales (agitación, olfateo /
lamido de la vulva, micción frecuente, levantamiento de cola, bramido, montado
pero no de pie, barbilla descansando, montando otras vacas, montando en la
cabeza) y la frecuencia de cada signo en diferentes períodos de tiempo. El punto
medio entre la primera observación de los signos cardinales de celo y el chequeo
previo sin signos de conducta se consideró como el momento de inicio del
estro. Del mismo modo, el final del estro se consideró como el punto medio entre
el primer hallazgo de un animal para ser fuera de estro y el cheque previo en
estro. La duración del estro (en hora) se calculó desde el inicio y la cesación del
estro. El tiempo de ovulación se determinó usando un escáner de ultrasonido de
matriz lineal equipado con una sonda transductora de múltiples frecuencias
(Prosound 2, Aloka Ltd., Japón). Las vacas detectadas en el estro fueron
sometidas a ecografía cada 2 h para determinar el estado del folículo ovárico. El
punto medio entre la primera detección del folículo dominante roto y la última
detección de un folículo intacto se registró como el tiempo de ovulación.
2.1.4 .Tasa de concepción

Las vacas en celo se inseminaron con semen congelado-descongelado y el

diagnóstico de embarazo se realizó 45 días después de la inseminación
utilizando un escáner de ultrasonido de matriz lineal equipado con una sonda
transductora multifrecuencia (Prosound 2, Aloka Ltd., Japón). La tasa de
concepción (CR) se calculó utilizando la siguiente fórmula:

CR= (número de vacas embarazada / número de vacas inseminadas) X 100

2.2 .EXPERIMENTO 2: EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE LA

HORMONA PERIESTRUAL (P4 Y LH) EN TIEMPO DE LA OVULACIÓN

2.2.1. Agrupación de animales

Las vacas Sahiwal (n = 20) a los 45 días posparto que habían experimentado al
menos un estro espontáneo se dividieron en dos grupos. El grupo I se compuso
de 10 vacas que mostraban estro natural mientras que en el grupo II, 10 vacas
que estaban en fase lútea (presencia de CL confirmada por ultrasonografía)
fueron tratadas con 500 μg de Cloprostenol (Clostenol Inj ® con 250 μg de
Cloprostenol / mL, Zydus AHL , India) para la inducción del estro.

2.2.2. Observación del comportamiento del celo

Las vacas en los dos grupos fueron observadas por personal entrenado para el
inicio de la conducta en etapa de estro y estral (mencionada en la Sección
2.1.3 ). El estro fue confirmado por examen ginecológico (tumefacción de la
vulva, enrojecimiento de la mucosa vulvar y tonicidad uterina). El inicio y la
frecuencia de los signos cardinales se observaron y se registraron en la tabla de
registro de síntomas de celo previamente probada diseñada para este propósito
(Layek et al., 2011; Mangal, 2009). Los criterios para decidir el inicio y cesación
del estro se detallan en la Sección 2.1.3.

2.2.3. Puntuación de signos de estro

 La puntuación de comportamiento estral se realizó de acuerdo con (Dash
(1980) para el ganado Cebú. En este sistema, diferentes signos de
comportamiento observados durante el estro se les asignó una puntuación
dependiendo de su frecuencia o intensidad de expresión (Tabla 1). Todas las
frecuencias o intensidades de cada signo de comportamiento se convirtieron en
una puntuación de 1, 2 o 3. Se añadieron las puntuaciones obtenidas para cada
uno de los signos de comportamiento para cada animal para obtener una
puntuación total. La puntuación total para cada vaca observada se clasificó en
tres clases como débil (1-11), moderada (12-22) e intensa (23-33) (Layek et al.,
2011).

Tabla 1. Escalas para la puntuación de los síntomas del estro en el ganado cebú
(Dash, 1980).

Síntomas de estro Frecuencia de expresión durante un período de celo

Débil (puntuación- Medio (puntuación- Fuerte (puntuación-

1) 2) 3)

Calor permanente <9 9-14 > 14

Montaje en otros <9 9-14 > 14

Descansando la
<5 5-7 7
barbilla

Oler / lamer <6 6-8 >8

Levantamiento de la
<3 3-4 4
cola

Micción <3 3-4 4

Inquietud Templado Moderar Pronunciado

Agresión Templado Moderar Pronunciado

Gritando Muy rara vez Ocasional A menudo

Descarga de
Ausente Leve Copioso
mucosidad
Síntomas de estro Frecuencia de expresión durante un período de celo

Débil (puntuación- Medio (puntuación- Fuerte (puntuación-

1) 2) 3)

Tumefacción de la
Débiles Moderar Intenso
vulva

2.2.4. Muestra de sangre

En el estro natural (Grupo I), se inició la recolección de sangre a partir de la

evaluación visual del estro y en el grupo de celo sincronizado (2do grupo) se
inició la recolección de sangre a las 60 h después de la inyección de
Cloprostenol (Mattoni y Ouedraogo, 2000). Las muestras de sangre se
recogieron a través de la punción venosa yugular usando 9 tubos de recogida de
sangre ml con EDTA como anticoagulante (Vacuette ®, Greiner Bio-One GmbH,
Austria) a los 2 intervalos h hasta que la ovulación y, posteriormente, a cada 24 h
durante 4 días en ambos grupos. Inmediatamente después de la recogida, las
muestras de sangre se centrifugaron a 4ºC (1500 g durante 20 min), se separó
el plasma y se almacenaron en crioviales a -20ºC hasta el ensayo hormonal.

2.2.5. Análisis hormonal

La hormona luteinizante y (P4) se cuantificaron utilizando el kit de bovino (LH)

ELISA y el kit bovino de la hormona (P4) ELISA (Endocrine Technologies Inc.,
Newark, CA), respectivamente según el protocolo proporcionado por el
fabricante. La curva estándar y la concentración de LH y P 4 hormona se
calcularon usando GraphPad PRISM ® software 3.0 (software GraphPad,
EE.UU.). La concentración mínima detectable de LH bovina utilizando el kit fue
de 0,1 ng / ml. La variación intra-ensayo fue del 4,3% y la variación entre los
ensayos fue del 10,3%. La concentración mínima detectable de bovino
P4 utilizando el kit fue de 0,5 ng / mL. La variación intra-ensayo fue del 5,3% y la
variación entre los ensayos fue del 18,6%. no apareado t se realizó con
el software SigmaPlot 11 ® (Systat software Inc., EE.UU.) para comparar entre
animales naturales y sincronizados para el intervalo de pico de estro-LH,
duración del estro, duración de la ovulación de la LH, duración de la ovulación
del estro, concentración máxima de LH y diferente P4 concentración.

2.3. ANÁLISIS ESTADÍSTICO

Se calcularon estadísticas descriptivas para la duración del estro, el estro a la

duración de la ovulación y estro al final de la duración de la ovulación, con todas
las medidas representadas en el formato de la media ± SEM. Se realizó una
prueba de Chi cuadrado para determinar la diferencia entre las vacas primíparas
y multíparas para las características del moco cervical. La comparación de la
duración del estro y el estro con la duración de la ovulación entre los diferentes
grupos característicos del moco cervical se realizó mediante ANOVA de una
vía. Intervalo estro-LH pico, LH duración de pico de la ovulación, la duración del
estro-ovulación, la concentración pico de LH y P4 concentración durante
periestrus entre grupo estro natural, y sincronizada se compararon mediante
ANOVA de una vía. Estro a la duración de la ovulación en plasma diferente P4 la
concentración durante el periestrus en celo natural y sincronizado se comparó
por ANOVA bidireccional con la interacción utilizando el modelo lineal
general. Se consideró interacción entre diferentes concentraciones de P4 (es
decir, <1 ng / mL y> 1 ng / mL) y el tipo de estro (es decir natural y
sincronizado). Para los medios de ANOVA de una vía se separaron sobre la base
de la media real, mientras que en los medios de ANOVA de dos vías se
separaron sobre la base de la media de mínimos cuadrados y todas las
comparaciones múltiples de pares se realizó usando la prueba de Tukey como
ensayo post hoc. Cuando el valor de P <0,05, se consideró que las medias eran
significativamente diferentes. Todos los análisis se realizaron con SigmaPlot
11 ® software (Systat software Inc., EE.UU.).

3. RESULTADOS

3.1. Experimento 1
3.1.1. Características del moco cervical

La cantidad de secreción de moco cervical fue copiosa en 70,2% de períodos de

estro y escasa en 4,9% con los períodos de estro restantes caracterizados por
una descarga moderada. Aunque la diferencia no fue suficiente para ser
significativa, las vacas multíparas tuvieron una mayor proporción de descargas
copiosas (75,6%) que las primíparas (56,2%). La duración media del estro en las
vacas Sahiwal fue de 14,53 ± 0,80 h (rango 6-31 h). Las vacas que tuvieron una
descarga escasa invariablemente tuvieron una duración (no significativa) más
corta del estro (11,9 ± 1,21 h) que las vacas que presentaron una
descarga copiosa (14,56 ± 1,04 h) y moderada (15,46 ± 1,54 h). El moco
cervical de la mayoría de las vacas (63,2%) era de apariencia clara. La duración
del estro fue mayor, aunque la diferencia no fue significativa, en vacas con
mucosidad clara (15,28 ± 1,05 h) que las vacas con flujo turbio (13,21 ±
1,20 h). La descarga de mucosidad fue delgada en el 63,2% de las vacas y el
resto fue moderado (19,3%) a espeso (17,5%). La duración del estro no fue
significativamente mayor en las vacas con flujo moco (14.55 ± 1.09 h) que en el
grueso (13.5 ± 1.51 h).La mayoría de las vacas presentaron descarga de moco
con un patrón de arborización típico (57,9%), mientras que el resto tuvo un patrón
atípico (26,3%) o nulo (15,8%). El moco cervical de las vacas multíparas (60,9%)
presentó un patrón de arborización típico no significativamente mayor que el
grupo de vacas primíparas (50%).El pH promedio del moco cervical fue de 7,59
± 0,06 (6,3-8,41). Para una alta proporción de moco cervical de las vacas
primíparas (31,2%), el pH fue superior a 8, en comparación con las vacas
multíparas (9,8%). La conductividad eléctrica media del moco cervical fue de
15,21 ± 0,15 mS / cm (rango 12,34-16,91 mS / cm). El moco cervical de la
mayoría de las vacas tenía una conductividad eléctrica superior a 14 mS / cm.
El valor promedio de spinnbarkeit del moco cervical fue de 11,06 ± 1,06 cm
(rango 1-40 cm). El valor spinnbarkeit del moco cervical de la mayoría de las
vacas estaba en el rango de 0-8 cm (53.4%) y 8-16 cm (25.9%) y la mayoría de
las vacas primíparas tenían 0-8 cm de spinnbarkeit (76.5%). En el 13,8% de las
vacas el valor de spinnbarkeit estaba en el rango de 16-24 cm y en el 6,9% de
vacas el valor era> 24 cm. La duración del estro y el estro a la duración de la
ovulación fueron significativamente mayores (P <0,05) en vacas que tenían 8-
16 cm de spinnbarkeit del moco cervical (17,33 ± 2,28 h y 36,97 ±2,77 h
respectivamente) que 0-8 cm (13,93 ± 0,93 h y 30,97 ± 1,42 h respectivamente),
16-24 cm (12,5 ± 0,81 y 27,25 ± 1,37 h respectivamente) y> 24 cm (12,62 ±
1,07 h y 30,25 ± 1,44 h respectivamente).

3.1.2. Características del moco cervical y tasa de concepción

No hubo concepción en vacas inseminadas cuando la cantidad de moco cervical

era escasa ( Tabla 2 ). La tasa de concepción fue mayor en las vacas con
mucosidad clara (32,4%) en comparación con aquellas con flujo nublado (25%),
aunque la diferencia no fue significativa. Se obtuvo alta tasa de concepción
cuando el moco cervical fue de consistencia moderada (45,4%) sin concepción
en las vacas con mucosidad espesa, aunque el número de vacas fue bajo en el
presente estudio.

La tasa de concepción fue de 38,2% en vacas inseminadas cuando el moco

cervical tenía patrón de arborización típico. Ninguna de las vacas concebidas
cuando se realizó la inseminación cuando su moco cervical no tenía patrón. Se
observaron altas tasas de concepción cuando el moco cervical tenía valores de
spinnbarkeit entre 8-16 cm (37,5%), conductividad> 16 mS / cm (35,29%) y pH>
8 (44,44%).
Tabla 2. Tasa de concepción en diferentes categorías de moco cervical durante
el periestro.

De 60 vacas Sahiwal, se recogió el moco cervical antes de la inseminación artificial mediante aspiración
desde el cuello del útero utilizando vainas azules estériles y una pistola universal de inseminación artificial
a través del método recto-vaginal. Inmediatamente después de la recogida del moco cervical se probó la
cantidad, apariencia, consistencia, patrón de arborización, spinnbarkeit valor, la conductividad y el pH.

3.2. Experimento 2

3.2.1. Características del estro y estro al intervalo de la ovulación

La duración del estro en el grupo estro natural fue de 16,6 ± 2,22 h y el inicio del
estro a la ovulación fue de 32,75 ± 1,41 h, mientras que los valores
correspondientes en estro sincronizado fueron 16,2 ± 2,21 h y 34,95 ± 3,37 h,
respectivamente. La puntuación total durante el período de estro fue mayor (no
significativa) en el grupo de celo natural (18,7 ± 1,93) que en el grupo de celo
sincronizado (16,1 ± 1,28).
3.2.2. Patrón de secreción de LH en relación con el tiempo de ovulación

La concentración máxima de LH en el grupo de celo natural fue 12,67 ± 1,96 ng

/ mL y 15,26 ± 2,80 ng / mL en el celo sincronizado ( Tabla 3 y Fig. 1 A y B). El
inicio del estro a la duración máxima de la LH fue 2,2 ± 1,62 h y 3,3 ± 0,67 h en
estro natural y sincronizado, respectivamente. En las vacas sincronizadas, la
duración entre PGF 2 α tratamiento y la aparición del estro fue de 63,6 ± 1,25 h
(rango de 56-70 h), mientras que el pico de LH se produjo 65,8 ± 1,64 h (rango
de 60-75 h) después de la administración de PGF2α.

Tabla 3. Patrón de secreción de hormona luteinizante (LH) y progesterona (P4)

en estro natural y sincronizado en vacas Sahiwal (los valores entre paréntesis
indican el rango).

Dentro de una fila, los medios con letras de superíndice diferentes difieren (P <0,05).

Las concentraciones de LH y progesterona en el plasma sanguíneo en el momento del estro se midieron

en vacas Sahiwal. El estrus se observó por observación visual cada 2 h durante 30 min y la ovulación fue
confirmada por ultrasonido. Se calculó la duración entre el inicio del estro y el pico de LH, el pico de LH y la
ovulación, el inicio del estro y la ovulación.

En estro natural, la duración media desde el pico de LH hasta la ovulación fue

de 29,45 ± 1,73 h y el estro a la ovulación fue de 32,75 ± 1,41 h, mientras que
en el grupo sincronizado las duraciones fueron 32,75 ± 3,62 h y 34,95 ± 3,37 h
respectivamente ( Tabla 3 ). En el grupo de celo natural las vacas ovularon
dentro de un rango estrecho de tiempo (26.5-38.0 h después del inicio del
estro). En el grupo sincronizado, 7 de cada 10 vacas fueron ovuladas dentro de
28-32 h después del inicio del estro. Entre los restantes, uno ovuló antes (24,5 h
después del inicio del estro) y dos ovuló tarde (56 h después del inicio del estro)
en relación con el pico de LH ( Figura 1 B).

Fig. 1. La concentración de LH plasmática periférica durante el estro natural (A) y sincronizado (B) en vacas
Sahiwal (muestras de plasma sanguíneo se obtuvieron a partir de vacas Sahiwal en estro sincronizado (n =
10) o en estro natural (n = 10) y se midieron las concentraciones de LH utilizando kits de ELISA. El estro se
vigiló, por observación visual cada 2 h durante 30 min y la ovulación fue confirmada por ultrasonido).

3.2.3. Patrón de secreción de progesterona en relación con el tiempo de

ovulación

El día del estro, la concentración plasmática de P4 fue significativamente mayor

(P <0,05) en celo sincronizado (1,23 ± 0,23 ng / mL) que el celo natural (0,65 ±
0,11 ng / mL) ( Tabla 3y Fig. 2A y B). El estro a la duración de la ovulación fue
significativamente mayor (P <0.05) cuando la concentración de P4 fue> 1 ng /
mL en el día de estro (36.17 ± 0.73 h en natural y 37.57 ± 4.32 h en sincronía)
que cuando fue <1 ng / mL (31,28 ± 1,74 h en estado natural y 28,83 ± 3,61 h en
sincronización, (Tabla 4 ). Las vacas con patrón típico de helecho de moco
cervical tuvieron (no significativo) P4 (0,66 ± 0,13 ng / mL) en comparación con
los patrones atípicos y nulos (1,04 ± 0,71 ng / mL y 1,25 ± 0,78 ng / mL,
respectivamente) ( Figura 3 ).
Fig. 2. La concentración de progesterona plasmática periférica durante el estro natural (A) y sincronizado
(B) en vacas Sahiwal (muestras de plasma sanguíneo se obtuvieron a partir de vacas Sahiwal en estro
sincronizado (n = 10) o estro natural (n = 10) y se midieron concentraciones de progesterona utilizando kits
de ELISA. Estro se observó por observación visual cada 2 h durante 30 min y la ovulación fue confirmada

por ultrasonido).

Tabla 4. Estro a la duración de la ovulación en diferentes concentraciones

plasmáticas de progesterona durante el periestrus entre el grupo de celo natural
y sincronizado en vacas Sahiwal (los valores entre paréntesis indican el rango).

Dentro de una columna, los medios con diferentes letras superíndices difieren (P <0,05).

Se obtuvieron muestras de plasma sanguíneo a partir de vacas Sahiwal ya sea en estro sincronizado (n =
10) o en estro natural (n = 10) y las concentraciones de progesterona se midieron usando kits de ELISA. El
estro se observó por observación visual cada 2 h durante 30 min y la ovulación fue confirmada por
ultrasonido.

Fig. 3. Patrón de arborización típica (A) y atípica (B) en las vacas sahiwal durante el estro (de 60 vacas
Sahiwal, el moco cervical fue recogido antes de la inseminación artificial por aspiración desde el cuello del
útero utilizando vainas azules estériles y una pistola universal de inseminación artificial a través de
Inmediatamente después de la recolección 2-3 gotas de moco cervical se extendieron en diapositivas sin
grasa, se secaron al aire y se examinaron bajo un objetivo de baja potencia para el patrón de
arborización). (Para la interpretación de las referencias al color en esta leyenda figura, el lector se refiere a
la versión web de este artículo.)

4. DISCUSIÓN

Características del moco cervical en el momento del servicio / inseminación

artificial influencia la concepción en las vacas. Los cambios en las
concentraciones periestruales de hormonas influyen en las características del
moco cervical. El presente estudio reporta la relación entre las características del
moco cervical, la concentración periestrual de hormonas y el tiempo de ovulación
en vacas cebú.

La aparición del moco cervical indica el estado de salud sexual del animal (Gill
et al., 1974, Tsiligianni et al., 2001). En general, el moco cervical es transparente
y transparente (como la porción de albúmina del huevo de gallina); cualquier
desviación de esto podría indicar trastornos en el tracto genital (Deo y Roy,
1971). Se observaron mayores tasas de concepción en vacas inseminadas
cuando el moco cervical era claro, lo que podría deberse a un mejor estado
reproductivo ya un estadio adecuado de inseminación. El moco cervical durante
el período del estro cambia a un líquido fino y transparente que muestra
propiedades no newtonianas. La tasa de concepción fue mayor en las vacas
cuando el moco cervical tuvo un comportamiento no newtoniano en el momento
de la inseminación (Murugavel y López-Gatius, 2009). Nuestra observación
sobre la consistencia del moco cervical está de acuerdo con (Rangnekar et
al. (2002) . El patrón de arborización del moco cervical aumenta claramente con
el estrógeno y disminuye con P 4 reducido (Tsiligianni et al., 2001), por lo que
puede ser un buen predictor del inicio del estro, las diferentes etapas del estro y
el tiempo de ovulación en las vacas y búfalos (Alena et al. al., 2008). El presente
estudio mostró bajos perfiles de progesterona en vacas que tenían patrón de
helecho típico de moco cervical que está de acuerdo con los reportados
por Kumaresan et al. (2001, 2009). La tasa de concepción también fue
influenciada por el patrón de arborización ya que el patrón de arborización típico
se asocia con el equilibrio adecuado en la concentración hormonal, lo que facilita
la concepción. El presente estudio también mostró alta tasa de concepción en
vacas con patrón de arborización típico y no se registró la concepción en vacas
sin un patrón de arborización. Bajo la influencia del estrógeno hay un aumento
en las mucoproteínas, el cloruro de sodio y el contenido de agua del moco
cervical que altera el pH del moco cervical durante el periestrus. El pH alcalino
del moco cervical es favorable para la motilidad del esperma, sin embargo se ha
informado que con el aumento del pH, la viabilidad y la penetración del esperma
es afectada negativamente (Pattabiraman et al., 1967).

Durante el estro, la concentración de electrolitos tiende a ser mayor bajo la

influencia del estrógeno y, por lo tanto, contribuye a una mayor conductividad
eléctrica. Esta alta concentración de electrolitos en el moco se requiere para
activar los espermatozoides y la motilidad uterina y el estado físico del moco
facilita el contacto del óvulo y los espermatozoides. La EC media de moco
cervical (15,21 ± 0,15 mS / cm, rango 12,34-16,91) observada en el presente
estudio está de acuerdo con Bishnoi et al. (1983) y Sopelink (1971) . Se observó
una correlación positiva entre la conductividad eléctrica de las secreciones
cervicales y la tasa de concepción en vacas (Bishnoi et al., 1983) y nuestros
resultados apoyan sus hallazgos. Durante el estro, el moco cervical tiene la
capacidad de ser atraído hacia los hilos, lo cual es atribuible a la presencia de
moléculas grandes en el moco y probablemente depende de la ramificación de
cadenas moleculares y otras fuertes fuerzas intermoleculares (Elstein, 1974). El
valor spinnbarkeit del moco cervical alcanza un valor máximo inmediatamente
antes o durante la fase ovulatoria en las vacas debido al aumento en la
concentración de estrógenos. Una disminución posterior en esta propiedad sigue
al aumento de la concentración de progesterona en la fase lútea (definida como
el efecto de la progesterona). Una amplia variación en los valores de spinnbarkeit
del moco cervical se ha informado en diferentes razas (Pattabiraman et al., 1967,
Rangnekar et al., 2002, Tsiligianni et al., 2001). Spinnbarkeit valor puede
predecir el momento óptimo de la inseminación para obtener una mayor
concepción, pero el procedimiento de medición tiene que ser estandarizado para
reducir la variación en los resultados. La mayor duración del estro al pico de LH
en vacas sincronizadas puede atribuirse a la luteólisis incompleta que no permite
la reducción de P4 y por lo tanto retrasar el estro a la duración máxima de la LH
(Bage et al., 2002, Gustafsson et al., 1986). Los animales con estro prolongado
a intervalo de ovulación o LH pico a ovulación intervalo podría haber tenido LH
pico de pico en comparación con los ovulados en un tiempo normal. El
P4 concentración observada en el presente estudio es similar a los hallazgos
de Kumaresan et al. (2001) y Rekwot et al. (2000) que informaron <1 ng / mL
durante el período periestrual. La razón de mayor P 4 en vacas sincronizadas
puede ser atribuible a la luteólisis incompleta, que a su vez se ve afectada por la
amplitud y la frecuencia de PGF2α secreción (De Rensis y López-Gatius, 2007;
Orihuela, 2000). Se ha demostrado que las concentraciones de progesterona
durante el estro influyen en el inicio y amplitud del pico de LH y, por tanto, en la
ovulación. Esto se confirma en el presente estudio como vacas con
alta concentración de P4 (> 1 ng / ml) tuvo mayor estro a tiempo de la ovulación
en comparación con aquellos con normal de P4 concentración (<1 ng / ml).

5. CONCLUSIÓN

Valor y arborización patrón spinnbarkeit de moco cervical tiene una fuerte

relación con el plasma P4 concentración y el tiempo de la ovulación lo que indica
que los parámetros se pueden utilizar como una herramienta para decidir el
momento adecuado de la inseminación en Sahiwal ganado.