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U N I V E R S I D A D T É C N I C A D E C O T O P A XI

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Y RECURSOS NATURALES


CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA

Informe de Laboratorio de Parasitología y Enfermedades Parasitarias II 1

Fecha de Práctica: 4 de Enero del 2018


Fecha de entrega del Informe: 8 de Enero del 2018
Tema: Identificación de Fasciola Hepática por el Método de Dennis.

Introducción

La parasitología es la rama de la biología que estudia el comportamiento de los seres


de etiología parasitaria y en esta sección se estudian los parásitos que provocan
enfermedades en los animales de interés zootécnico, es una ciencia auxiliar de otras
ciencias de la salud, como la medicina y la veterinaria trata de la sintomatología, el
tratamiento, la epidemiología y la profilaxis de las enfermedades causadas por los
parásitos a las personas o a los animales.
Para evitar daños graves, que pueden causar la muerte de los afectados, es necesario
conocer el ciclo biológico, las vías de infestación y los factores que influyen en la
densidad y distribución de las poblaciones de parásitos.
El rango de infección parasitaria de una enfermedad aguda, frecuentemente se
relaciona con altas tasas de mortalidad, la enfermedad crónica, con varios grados de
morbilidad y sacrificio prematuro, y la infección subclínica con cerdos aparentemente
saludables pero generalmente con rendimiento por debajo de su potencial máximo.
El control de los parásitos requiere el conocimiento de su ciclo evolutivo y así poder
adoptar procedimientos que rompan este ciclo y prevengan la reinfección.
El control de parásitos externos en las explotaciones porcinas permite optimizar la
productividad del ganado. Para conseguirlo es necesario combinar estrategias de
tratamiento, control e incluso erradicación.
En esta ocasión para el diagnóstico de helmintos trematodos y específicamente para
fasciola hepática se utiliza la técnica de Dennis, fundamentada en repetidos lavados y
filtrados de la muestra fecal y la observación posterior de huevos obtenidos por
procesos de sedimentación.
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Objetivos

Objetivo General:
Ejecutar adecuadamente el método de diagnóstico e identificación de parásitos de
bovino antes mencionado con el propósito de caracterizarlo.

Objetivos Específicos:

 Implementar la metodología adecuada para las técnicas de diagnóstico de


parásitos trematodos, en este caso la técnica de Dennis.
 Identificar microscópicamente el huevo del parásito y características
morfológicas del mismo.
 Valorar la magnitud de los problemas parasitarios del área donde se recolecto
la muestra reconociendo las estrategias apropiadas para el control y
prevención.
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Marco teórico
Fasciola Hepática 3

Importancia económica y distribución geográfica


En los vacunos las pérdidas en producción pasan generalmente inadvertidas. El curso
de la enfermedad es lento. Los signos que pueden estar presentes son: reducción en la
ganancia diaria de peso, menor conversión alimenticia y menor producción láctea. Se
han reportado reducciones en la ganancia de peso del 8-28%. Por otro lado, las
pérdidas pueden llegar a cifras importantes si consideramos los decomisos de hígados
afectados.
Agente
El parásito adulto es un verme chato con forma de hoja de laurel, de 2-3 cm de largo
por 1 cm de ancho. Su color es pardo y en su superficie se presenta un dibujo
ramificado.
Es hermafrodita. Se localiza en los conductos biliares del hígado y se alimenta de
sangre. También secreta sustancias tóxicas.
Ciclo de vida
La Fasciola adulta pone de 500 a 20.000 huevos por día en los canalículos biliares,
siendo arrastrados por la bilis y eliminados con la materia fecal. En el exterior,
evolucionan en pocos días, y de cada huevo emerge un miracidio que nada activamente
hasta encontrar a un caracol de aguas dulces (Limnaea viatrix). Una vez en su interior,
evoluciona a Esporocisto, Redia y Cercaria. Este período -desde la penetración en el
caracol hasta la salida de la Cercaria- tarda de 1 a 3 meses. Ya fuera del caracol, la
Cercaria se enquista sobre plantas acuáticas. Evoluciona entonces a un estado -ya
infectivo- denominado Metacercaria. El animal la ingiere con el pasto, y desde el
intestino llega al hígado. En el hígado las fasciolas inmaduras deambulan durante 6-8
semanas, alimentándose del tejido hepático. Transcurridas las 8 semanas, penetran en
el conducto biliar y se alimentan de la sangre de las lesiones que producen.
Patogenia
Hay que remarcar que no todos los estadíos de F. hepatica ocasionan el mismo nivel de
daño. Por diversas experiencias, se comprobó que los estadíos más dañinos son los
parásitos adultos y los inmaduros de más de 8 semanas.
1. La aparición de anemia comienza luego de las 8 semanas post-infestación.
La aparición de anemia coincide con la presencia de formas inmaduras de más de 8
semanas y adultos en los conductos biliares. Estos parásitos -una vez que se encuentran
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en el sistema biliar- comienzan a succionar sangre y a liberar productos tóxicos que


hacen perder más sangre, la que pasa al intestino. Esa pérdida de sangre lleva, con el 4

transcurrir del tiempo, a una anemia.


Cuando se observan los resultados de una experiencia con animales infestados versus
animales controles sanos, se verifica que a partir de las 12 semanas posteriores a la
infestación, ocurre una caída brusca de los glóbulos rojos en los animales infestados.
2. La Fasciola Hepática en el conducto biliar causa disminución de las proteínas
plasmáticas.
La llegada de los estadíos inmaduros a los conductos biliares no sólo coincide con la
aparición de la anemia, sino que además causa una disminución de las proteínas
plasmáticas, fundamentalmente albúmina. Cuando el parásito está alojado en el
conducto biliar, al succionar sangre y lesionar, permite la salida o escape de proteínas
plasmáticas que se pierden por el tracto digestivo. El animal intenta compensar estas
pérdidas, pero al estar el hígado - principal sintetizador de proteínas- afectado, se
produce la descompensación.¿Qué relevancia tiene todo esto? Las pérdidas,
compensadas o no, redundan en un gasto energético extra que no será utilizado para
producción.
La disminución de la albúmina fue claramente demostrada en estudios realizados en
Escocia, donde bovinos infestados con 1000 metacercarias, sufrieron una caída brusca
de esta proteína en suero, luego de 8 semanas de infestados.
3. Los estadíos de más de 8 semanas interfieren en las ganancias de peso.
Los estadíos de más de 8 semanas son los que mayores pérdidas ocasionan. Esto se
observó en una experiencia comparativa de la evolución de peso de animales infestados
con controles sanos. Las ganancias de peso se vieron afectadas mayormente en el
grupo de bovinos infestados luego de transcurridas 8 semanas de la infestación.
Síntomas
Los principales son debilidad, decaimiento, falta de apetito, edemas en las zonas en
declive, palidez de las mucosas (ojos, boca, vulva), pérdida de peso o bajas ganancias,
baja fertilidad, diarrea, aborto y ocasionalmente muerte.
Lesiones
El hígado es el órgano que se afecta severamente debido al pasaje, y fundamentalmente
a la permanencia, de las fasciolas de más de 8 semanas y de adultos. La reacción que
se observa es el reemplazo del tejido hepático noble (normal-funcional) por tejido de
cicatrización (no funcional), por lo tanto el cuadro patológico que domina es una
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fibrosis. Esta se incrementa sobre todo en los conductos biliares, los cuales se observan
engrosados, inclusive cerrados y pudiendo estar calcificados, impidiendo el normal 5

flujo de la bilis al intestino.


También hay que destacar que estas lesiones favorecen la proliferación del Clostridium
haemolyticum, determinando la aparición de Hemoglobinuria bacilar, la que ocasiona
la muerte súbita de animales aparentemente sanos. En la necropsia se observa un gran
infarto en el hígado.
Diagnóstico
La Fasciolasis en el bovino es de difícil diagnóstico, ya que generalmente es de curso
lento y por lo tanto los síntomas no son muy evidentes, salvo cuando la enfermedad ha
avanzado y ya las pérdidas productivas son muy grandes.
Un examen complementario muy útil es la detección de huevos en la materia fecal. Otra
posibilidad es la búsqueda del huésped intermediario (el caracol Limnaea viatrix) en
lugares húmedos.
Control
Para realizar un control apropiado es imprescindible conocer la dinámica estacional
de la infestación en áreas endémicas. Es así que en las estaciones cálidas (primavera-
verano) se acelera el ciclo evolutivo, produciéndose un mayor número de
metacercarias en menor tiempo y aumentando la posibilidad de infestación de los
animales.
Para hacer un control más integral se debe apuntar a:
Reducir el número de F. hepatica en los huéspedes definitivos y así disminuir la
contaminación de los caracoles. (Tratamiento antiparasitario)
Reducir las poblaciones de Limnaea viatrix para evitar la diseminación del parásito en
los huéspedes intermediarios (en zona endémica).
Evitar la coincidencia huésped-parásito utilizando medidas de manejo.
Para eliminar las F. hepatica en los bovinos se debe tener en cuenta que las mayores
posibilidades de infestación son en primavera-verano. Por lo tanto los tratamientos
antiparasitarios deben hacerse en primavera y otoño. Existen distintas drogas con
diferentes niveles de eficacia según el estadío, seguridad y vías de aplicación.
Para reducir las poblaciones de caracoles se puede utilizar sulfato de cobre,
aplicándolo al final del verano y realizando otra aplicación al final de la primavera. Y
finalmente, para evitar que los animales tomen contacto con las metacercarias, se
deben conocer los potreros problema, impidiendo que pastoreen zonas anegadas.
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Procedimiento: 6

Técnica de Dennis
1) Pesar 5g de materia fecal
2) Mezclar 25mg de detergente en 475cc de agua
3) Mezclar la muestra en 50cc de la solución con un agitador sin formar espuma
4) Colocar una malla en un vaso o colar la muestra en un vaso de precipitación
5) Dejar en reposo por 10 minutos
6) Eliminar las ¾ partes del sobrenadante del líquido.
7) Aumentar 50 cc de solución a la muestra,
8) Eliminar el sobrenadante y dejar en reposo por un minuto
9) Repetir los pasos (7 y 8) 2 a 3 veces o hasta que la mezcla quede en un tono
regularmente cristalino
10) Eliminar el sobrenadante, dejando 2 a 3 cc del sedimento
11) Verter el contenido con la ayuda de una pipeta en un porta y cubre objetos
12) Mirar al microscopio y contar los huevos de Fasciola hepática o el parasito que
se contempla en el microscopio.
Materiales y Métodos

« Mandil.
« Mascarilla.
« Guantes de Exploración.
« Cofia
« Paleta
« Gasas
« Colador
« Pipeta
« Vaso de Precipitación
« Cubre Objetos
« Porta Objetos
« 25 mg de Detergente
« 475ml de agua
« 5g de muestra (heces)Pulp
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« Microscopio
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« Balanza

Método: Dennis
Para el diagnóstico de helminto, tremátodos y específicamente para Fasciola hepática
se utiliza la técnica de Dennis, fundamentada en repetidos lavados y filtrados de la
muestra fecal y la observación posterior de huevos obtenidos por procesos de
sedimentación.

Resultados

A la vista del microscopio en la placa número 8 se encontraron huevos de:

- Fasciola: 0
- Haemonchus: 1

Haemonchus
Haemonchus es un género de nematodos estrongílidos de la familia Trichostrongylidae
parásitos del ganado; habitan en el abomaso y son hematófagos.
Son de color rojizo, poseen una cavidad bucal con lanceta dorsal, un esófago
claviforme y la cutícula lisa con papilas cervicales. Los machos llegan a medir de 19 a
22 mm y tienen una bolsa copuladora muy desarrollada; las hembras miden 25 a 34
mm y poseen un pliege vulvar prominente y la cola en punta.
Taxonomía
Reino: Animalia
Filo: Nematoda
Clase: Secernentea
Orden: Strongylida
Superfamilia: Trichostrongyloidea
Familia: Trichostrongylidae
Género: Haemonchus
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omo muchos nematodos, el género Haemonchus también tiene un ciclo vital directo.
Los huevos se excretan por las heces. El desarrollo del huevo a larva infecciosa dura 8
entre 4 y 6 días.
Las jóvenes larvas eclosionan del huevo, se alimentan de bacterias y se desarrollan a
larvas L2. Tras la muda de L2 a L3, no se desprende la piel vieja (exuvia) sino que
permanece cubriendo a la larva que no puede alimentarse pero continúa el desarrollo
hasta que la ingiere el hospedador final. Las larvas L3 infecciosas son capaces de
nadar hacia arriba en la película de agua que cubre las hierbas. El hospedador final
ingiere las larvas infecciosas al pastar o beber aguas contaminadas.
El periodo de prepatencia dura unos 20 días, pero puede haber síntomas clínicos antes,
pues tanto las larvas como los adultos chupan sangre.
Los huevos de Haemonchus son bastante sensibles a las condiciones medioambientales
y apenas si logran hibernar en climas fríos. En regiones áridas las larvas L4
interrumpen su desarrollo dentro de la mucosa del cuajar durante la temporada seca y
lo retoman poco antes del inicio de las nuevas lluvias.

Análisis

En la muestra individual de la placa 8 se analizó detenidamente varios campos de la


muestra en el microscopio con movimientos de arriba hacia debajo de forma horizontal,
se contempló Haemonchus lo cual nos dice que el ganado esta espontáneamente con
parasitosis leve

Análisis de gravedad: +
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Conclusiones 9

 El índice de parásitos que frecuentemente observamos en el ganado bovino


depende del habitad y el estado ambiental que facilita el desarrollo del parasito,
ya sea en épocas de sequias o de lluvias, haciendo el examen microscópico un
análisis que ayuda a controlar el índice de enfermedades en la producción de
animales.
 Identificamos microscópicamente el huevo del parásito y características
morfológicas, fisiológicas tanto externas como internas esto nos ayuda a
controlar las enfermedades parasitarias analizando su etapa biológica, y su
proceso de eliminación, previniendo la contaminación del mismo.

Recomendaciones

 Utilizar diferentes métodos para realizar un coproparasitario, entre más


métodos realicemos, mas conocimiento y dominaremos la descripción de los
parásitos.
 Tener mayor higiene a la hora de realizar la muestra y llevar todos los
materiales adecuados.
 Tener un aprendizaje teórico antes de la práctica, para así identificar
brevemente los parásitos.
 Realizar con más frecuencia las prácticas para adquirir más destrezas y
conocimientos sobre los parásitos
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Bibliografía

CARGILL, C.; DAVIES, P.R. Parásitos imternos. En: Enfermedades del bovino. Tomo
II, Sec. 4. Ed. InterMédica, Buenos Aires, 2000, pp. 587-598.

GRACIA, M.J.; LATORRE, E.; ÁLVAREZ, C. Otros endoparásitos del ganado., 2000;
Vol 57: 73-92.

GÓMEZ-BAUTISTA, M., FERRE, I., ORTEGA-MORA, L.M. Control de las parasitosis


bovinas. [en línea]. 2007. Ref. de 1 de abril de 2008.