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Membrana basal
El primer límite encontrado cuando se mueve desde el espacio extracelular al espacio
intracelular del miocito es la membrana basal. La membrana basal se compone
principalmente de colágeno tipo IV, las glicoproteínas laminina y fibronectina, y
proteoglicanos. 1La membrana basal proporciona una interfaz a la matriz de colágeno fibrilar
del espacio extracelular con fibras de anclaje, que unen la lámina basal al colágeno
subyacente. La función de la membrana basal es proporcionar una barrera inicial que influirá
en el intercambio de macromoléculas entre el espacio extracelular y el miocito. Otra función
importante de la membrana basal es proporcionar una interfaz para la adhesión de los
miocitos y la continuidad con la matriz extracelular. En la figura 1 se muestra una ilustración
de la organización de las estructuras pertinentes del miocito cardíaco.
El sarcolema forma 2 regiones especializadas del miocito, los discos intercalados y el sistema
tubular transverso. Los discos intercalados son una unión celular-célula especializada que
sirve tanto como un fuerte enlace mecánico entre los miocitos como un camino de baja
resistencia que permite una conducción rápida del potencial de acción entre los
miocitos. 3 túbulos transversales, o túbulos T, son invaginaciones del sarcolema en el
miocito, que forman una barrera entre los espacios intracelular y extracelular. Estas
extensiones ponen en aposición estrecha el canal de Ca 2+ detipo L y el sistema de descarga
de Ca 2+ del retículo sarcoplásmico , lo que hace que el sistema tubular en T sea un
componente estructural importante en el acoplamiento excitación-contracción.
Como ocurre con la mayoría de las bicapas lipídicas, la función fundamental del sarcolema
es proporcionar una barrera para la difusión. El sarcolema también contiene proteínas de
membrana, que incluyen receptores, bombas y canales. Esta es una característica
especializada del sarcolema y es esencial para el proceso contráctil del miocito. A
continuación se presenta una visión general de las proteínas sarcolemáticas que son
esenciales para la propagación del potencial de acción de los miocitos y, por lo tanto,
fundamental para el proceso contráctil.
Fig. 2 . Un esquema de un
potencial de acción de miocitos
ventriculares. El potencial de
acción cardiaca regenerativo
consta de 5 fases. La fase 0, la
subida, corresponde a la rápida
despolarización. La fase
ascendente es seguida por la fase
1, una rápida repolarización
temprana, fase 2 o meseta, fase 3 o
repolarización rápida, y la fase 4,
que corresponde al potencial de
membrana en reposo. Este potencial de acción es el resultado de interacciones sarcolemáticas
de proteínas que se han resumido en el texto.
El potencial de membrana de reposo, o fase 4 del potencial de acción, es mantenido
principalmente por el rectificador de K + hacia adentro y es secundariamente influenciado
por la adenosinitrifosfatasa de Na + / K + (ATPasa), el intercambiador de Na + / Ca2 + y el
sarcolema Ca 2+ ATPasa. Durante esta fase, el sarcolemma es permeable sólo a K + ; así es
el potencial de equilibrio de K + que determina principalmente el potencial de membrana de
reposo del miocito. El rectificador K + interno permite la difusión de K + en el miocito. La
relación Na + / K +La ATPasa genera una corriente neta hacia afuera a través de la extrusión
de tres iones Na + para dos iones K + , además de ser el sitio para la unión de
digitálicos. El intercambiador de Na + / Ca2 + y la Ca2 +ATPasa sarcolemática proporcionan
la base para la extrusión de Ca2 + a partir del miocito. El intercambiador de Na + / Ca2 + es
un canal bidireccional, con las cantidades relativas de cualquier ion transportado a través de
la membrana determinado por las concentraciones a cada lado de la membrana. 4 Sin
embargo, el intercambiador de Na + / Ca 2+ es el sistema primario para el flujo de Ca 2+ del
miocito.4-6 A través de la eliminación del Ca 2+citosólico,se puede mantenerel equilibrio
delflujo de salidade Ca 2+y la afluencia, lo que contribuye al mantenimiento del potencial de
reposo.
El canal Na + rápido es responsable de la aceleración rápida de la fase 0 del potencial de
acción. Cuando el potencial de membrana alcanza un voltaje umbral preestablecido,
los canales de Na + se activan rápidamente (<1 ms) y permanecen activados durante una
duración de solamente 2 a 10 ms; por lo tanto el nombre "rápido" Na + canal. La activación
de estos canales permite que Na + fluya a la célula a lo largo de gradientes de concentración
tanto eléctricos como químicos. Esta afluencia de Na + a través del canal Na +rápido pone en
marcha los procesos iónicos responsables de las otras fases del potencial de acción.
La meseta del potencial de acción cardiaca, o fase 2, está determinada principalmente por la
afluencia de Ca 2 + a través de los canales de Ca 2+ de tipo L. 7,8 Además, una corriente
de K +hacia el exterior contrarrestante fluye a través
+ 3
del rectificador K "anómalo" . Ambos canales se activan durante la subida del potencial de
acción y alcanzan la corriente de pico simultáneamente durante la fase de meseta. Los canales
de Ca 2+ de tipo L están íntimamente implicados en el acoplamiento excitación-contracción,
que se discutirá en una sección posterior.
Citoesqueleto de miocitos
El citoesqueleto del miocito forma una importante interfaz estructural con el entorno
extracelular y el aparato contráctil. 20-22Específicamente, un número de proteínas
citoesqueléticas tales como α-actinina, talina y desmina convergen en el sitio donde las
integrinas entran en el compartimiento citosólico. Algunas de estas proteínas citoesqueléticas
pueden ser fosforiladas y, de este modo, cambiar la conformación estructural, que a su vez
puede influir en la geometría y función de los miocitos. Además, las grandes proteínas del
citoesqueleto tales como la titina proporcionan propiedades viscoelásticas al miocito y se han
postulado para evitar el exceso de estiramiento del aparato de miofilamento. 23,24 La Fig. 3
presenta fotomicrografías representativas de un miocito normal después de la tinción
inmunofluorescente de las proteínas citoesqueléticas desmina y titina.
Aparato de contrapeso
La unidad contráctil fundamental dentro del miocito es el sarcómero, que contiene los
componentes del aparato contráctil. El sarcómero está compuesto de filamentos
interdigitantes gruesos y finos y tiene una longitud de reposo de 1,8 a 2,4 μm. 16 Las proteínas
fundamentales del aparato contráctil son miosina, actina, tropomiosina, y el complejo de
troponina. 16 En presencia de aumento de Ca2 + extracelular, se producen interacciones entre
estas proteínas, provocando la hidrólisis de ATP y cambios en la dinámica físico-
química. Estos procesos dan como resultado el desarrollo de tensión dentro del miocito. La
miosina, el filamento grueso, está compuesta por una cola filamentosa y una región globular
de la cabeza. Este cabezal globular contiene el sitio para la unión de actina, así como un sitio
de catalización para la actividad ATPasa. La actina es la principal proteína contráctil que se
encuentra en el filamento fino. Teniendo dos formas, G y F, F-actina es la columna vertebral
del filamento fino con G-actina que funciona como una proteína estabilizadora. Cada
monómero G-actina tiene dos sitios de unión a miosina. La interacción entre la cabeza
globular de la miosina y el monómero G-actina en presencia de ATP da como resultado la
formación de puente cruzado y el acortamiento del sarcómero. La tropomiosina es otra
proteína que se encuentra en el filamento fino. Esta molécula rígida se encuentra a ambos
lados de la actina, añadiendo rigidez al filamento fino. Tropomiosina influye en la formación
de puente cruzado de actina-miosina mediante la interconexión física entre la hendidura
actina-miosina, evitando así que Ca2 + vinculante. 3 El complejo de troponina, también
presente en el filamento fino, está compuesto por tres proteínas: la troponina T, I y C. La
troponina es un componente importante en cuanto a que regula la extensión de la formación
de la cruceta y contribuye a la integridad estructural de el sarcómero. La troponina T une el complejo de
troponina a la tropomiosina y ancla el complejo al filamento fino.
Bajo condiciones normales, la troponina I
fosforilada debilita la afinidad de Ca 2 + por la troponina C. La unión del Ca 2+ a la troponina
C da lugar a un cambio conformacional del complejo, con posterior interacción actina-
miosina, iniciando así la formación de cruce.
Mitocondrias
El mantenimiento de almacenes altos de ATP es un requisito del miocito. Así, el miocito es
rico en organelos esenciales para este proceso: las mitocondrias. Las mitocondrias ocupan el
40% del volumen de las células miocitarias, 3 haciendo hincapié en las inmensas demandas
energéticas del miocito. La fosfocreatina es una reserva de alta energía y también juega un
papel instrumental en la transferencia de fosfato al citosol. 3Debido a que las concentraciones
de fosfocreatina y creatina citosólicas son más altas que las del difosfato de adenosina, esto
sirve como un sistema de transporte rápido de fosfato de alta energía entre la mitocondria y
el citosol. El fosfato de alta energía de ATP se transfiere a la fosfocreatina, que difunde a
través del citosol para ser reconvertida a ATP para el uso de energía celular, por ejemplo, en
el acoplamiento excitación-contracción. 3 También se sabe que las mitocondrias tienen la
capacidad de unirse y tomar grandes cantidades de Ca 2+ citosólico , así como desempeñar
un papel en el amortiguamiento del Ca 2+ citosólico , protegiendo así el miocito de los efectos
de la sobrecarga de Ca 2+ . 3,37
Acoplamiento excitación-contracción
El acoplamiento excitación-contracción se refiere al mecanismo por el cual un potencial de
acción conduce a la contracción del miocito. El ion fundamental para inducir el complejo de
acoplamiento excitación-contracción es Ca2 + . El complejo de acoplamiento excitación-
contracción se consigue mediante el aumento de los niveles de Ca 2+ citosólicos desde
concentraciones nanomolares (100 nmol / L) hasta micromolares (10 μmol / L). 16 La Fig. 4
presenta componentes importantes del proceso de acoplamiento excitación-contracción.
Relajación activa
La relajación activa depende de la función de SERCA-2. Por cada 1 mol de ATP hidrolizado,
2 mol de Ca 2+ se transportan de nuevo al retículo sarcoplásmico. La función de SERCA-2 y
el estado regulador de phospholamban influyen significativamente en el proceso de
relajación activa dentro del miocito. Otros sistemas, aunque más lentos, para la eliminación
de Ca2 + del compartimento citosólico incluyen el intercambiador Na + / Ca2 + , la
Ca2 + ATPasa sarcolemática y proteínas de unión al Ca2 + citosólicas adicionales
que incluyen calmodulina y calsequestrina. El complejo formado por la unión de
calmodulina al Ca2 + intracelular puede activar el Ca2 +sarcolemáticoATPasa para extruir el
Ca 2+ citosólico . 41,42 Lacalsequestrina se une e internaliza Ca 2+ en las vesículas cardiacas
internas donde se encuentra. 27,41 Es importante enfatizar que la relajación activa es un
proceso altamente dependiente de la energía, y los cambios en esta fase de acoplamiento
excitación-contracción se manifiestan como cambios en el rendimiento diastólico de los
miocitos.
La contractilidad de los miocitos
El resultado final de un potencial de acción transducido con éxito y la iniciación de
la liberación de Ca 2+ en el compartimento citosólico del miocito es una contracción. Durante
la última década, los refinamientos en métodos de aislamiento, técnicas de cultivo 43 y
sistemas de adquisición de computadoras han hecho posible medir la función contráctil en el
nivel de miocito único. 44,45El miocito aislado proporciona una medida para examinar los
efectos moduladores de los sistemas de receptores sarcolemáticos con respecto al
comportamiento contráctil en ausencia de factores de confusión, tales como las condiciones
de carga y la actividad neurohormonal. Por ejemplo, se han examinado más recientemente
los efectos directos de la estimulación del receptor β-adrenérgico, así como la modulación de
factores aguas abajo en la vía de transducción del receptor β-adrenérgico. 46 En concreto, a
la izquierda ventriculares muestra de biopsia de miocardio tomadas en el momento de la
cirugía cardíaca puede usarse para aislar miocitos y medir el rendimiento contráctil. Se ha
demostrado que se pueden obtener miocitos ventriculares izquierdos humanos aislados
quiescentes viables a partir de esta aplicación y tienen la capacidad de responder a la
estimulación eléctrica de una manera apropiada
(Figura 5).