(NA+,K+)-ATPASE DA FRAÇÃO MICROSOMAL DO TECIDO BRANQUIAL

DO CARANGUEJO Callinectes danae (Crustacea, Portunidea): AÇÃO DE

METAIS PESADOS NA ATIVIDADE DA ENZIMA

Nayara do Nascimento Rodrigues, Malson Neilson de Lucena, Francisco

de Assis Leone.

Departamento de Química, FFCLRP /USP

rodriguesnayaran@gmail.com
 Conclusões
Objetivos definida como sendo Entre os íons
Este trabalho teve a quantidade de metálicos estudados
como objetivo enzima que hidrolisa neste trabalho, o
caracterizar o efeito 1 nmol de substrato cobre, o manganês e
dos íons metálicos por minuto por o cobalto são
Mn2+, Cu2+, Co2+ e miligrama de elementos
Cd2+ na atividade enzima. As essenciais aos seres
enzimática K +- condições vivos. O íon Mn2+
fosfatase da (Na+, experimentais mostrou ser inibidor
K+)ATPase das padrão foram Hepes e ativador,
brânquias 50 mM, pH 7,5, dependendo de sua
posteriores do siri PNFF 10 mM, MgCl2 concentração no
Callinectes danae. 5 mM e KCl 10 mM, meio. Já os demais
em um volume final íons agiram como
Métodos/Proce de 1 mL. O mesmo (a)inibidores. Os
dimentos procedimento foi estuários (habitat
Os siris C. danae repetido na presença onde se coletaram
adultos machos, 6 de ouabaína e a os siris C. danae)
animais, foram diferença entre o são os locais que
coletados em alto valor obtido na mais sofrem com
mar em Ubatuba-SP. ausência e na acúmulos de
Cada siri foi presença de resíduos oriundos da
anestesiado em gelo ouabaína representa atividade humana,
e a carapaça foi a atividade K +- como os metais
retirada. Em seguida fosfatase. Para pesados. Este
foram extraídos os investigar o efeito estudo mostrou que
pares branquiais 6, 7 dos metais, o o aumento da
e 8 e rapidamente mesmo concentração dos
transferidos para um procedimento foi metais estudados é
volume de 25 mL realizado capaz de causar
tampão de adicionando grandes danos não
homogeneização diferentes só ao siri C. danae,
(tampão imidazol 20 concentrações de como também a
mM, pH 6,8, cada metal em cada outras espécies
contendo sacarose experimento. osmorreguladoras.
250 mM e EDTA 6 Resultados
mM), em banho de
mg )

mg -1)
-1

80

gelo.
-1

60
Atividade (nmol min

60
-1

40

A determinação da
Atividade (nmol min

20

40
atividade K +-
7 6 5 4 3 2
-1
- log [MnCl2] (mol L )

fosfatase da 20

(Na+,K+)-ATPase foi
realizada
(b) 7 6 5 4 3
-1
2
- log [MnCl2] (mol L )
espectrofotometrica
mente a 25ºC e a
mg )
-1

25
hidrólise do p-
-1

20
nitrofenilfosfato
Atividade (nmol min

15
mg )
-1

50

(PNFF) foi medida

-1

40
Atividade (nmol min

10 30

em 410 nm (ɛ410nm, 20

5 10
8 7 6 5 4 3

pH 7,5 = 13160 L
-1
- Log [CuCl2 ] (mol L )

(d)
(c) -1 8 7 6 5 -1 4 3
mol cm-1) através - Log [CuCl2] (mol L )

da concentração de Figura 1: Curvas representando o efeito do Mn

p-nitrofenolato Co2+ em (b), Cu2+ em (c) e Cd
fosfatase da (Na+, K+)-ATPase. Inserção:
formado. Uma (●) PNFFase total
unidade de atividade (○) Atividade PNFFase insensível à ouabaína.
enzimática foi