Propagación in vitro de Heliconia bihai (L.) cv.

Lobster Salmón
 

  
In vitro propagation of Heliconia bihai 

  

Marta Leonor Marulanda-Ángel*, Liliana Isaza-Valencia†, y Lina María Londoño-Giraldo‡

 
              
  !  "  #$%"  &' &! ()*+,-./04$$45  *
ubioteve@utp.edu.co; †lilisaza@utp.edu.co; ‡limalon@gmail.com

Rec.: 16.05.11 Acept.: 20.09.11

Resumen
>        ? Heliconia bihai
  >"  )     /4#  ?  )     B
CD0E /#F     G H >I J   
) "+/K-&
+0K-#0K L     
,K "     /K "#4K
 
&B        F B   M 
 0.K 
  ) $/E    >  B
un análisis de varianza (Anova) y un test de Tukey para las variables evaluadas las cuales mostraron
)       )  H     ? 
 P    )     &     
 J      &)       )   
especies de esta planta de interés comercial.

Palabras clave: AIA, BAP, Heliconia bihai&&  ? 

Abstract
A protocol for in vitro propagation of Heliconia bihai  >W     ?W 
   X /4#?W  W    H ))    WHCD0E
/# !H   H G H Y>IZ  WH"+/K-&
+0K-
L  +#0K- HW H    >HW  WH"+,K-WH
  P    WH"+/K-
+#4K-& H
 ).# W H 'W H  WH
0.K!H    H 
acclimatization was 92%. Analysis of variance (ANOVA) and Turkey’s test were realized for each of the
variables evaluated that showed statistical differences in all stages. The in vitro propagation of heliconia
WH?W  & P    )  H  and multiplication stages but allows
higher levels of survival for initial explants and lower contamination, offering an alternative to obtain
important amounts of planting material of different heliconia species of commercial interest.

Key words: AIA, BAP, ?W  & Heliconia bihai, in vitro propagation.

132
 PROPAGACIÓN IN VITRO DE HELICONIA BIHAI (L.) CV. LOBSTER SALMÓN A PARTIR DE MERISTEMOS FLORALES

Introducción plantas usando técnicas de cultivo de tejidos,

 )   -
        
págulos libres de enfermedades entre países,
plantas ornamentales tradicionales ha im-
sino que también sirve como fuente potencial
pulsado un creciente interés por parte de los
de nuevas variedades (Goh et al., 1995).
consumidores extranjeros a comercializar
La oferta comercial de heliconias mi-
especies tropicales (Castro y Graziano, 1997).
cropropagadas es escasa y restringida a
F   X&       
algunas especies. La mayoría de estudios
género Heliconia L. Su excepcional potencial
        Heliconia
  B    
psittacorum utilizando yemas terminales y
X      X 
axilares (Nathan et al., 1992). Sin embargo,
?   ) 
    
 ~ ? 
han encontrado resultados promisorios en la
su calidad y durabilidad después del corte,
   B    H  
      
silvestres y cultivares (Marulanda e Isaza,
    ?   (
2004). Según Castro y Graziano (1997) H.
para ornato en parques y jardines (Santos
bihai abarca una gran cantidad de cultivares
et al., 2006), así como cultivos para producir
  ?           
  € €   X
o paisajismo, posee hábito musoide, con in-
(Jerez, 2007).
?      M   „
   H -
plano. Heliconia bihai  > -
nias es generalmente vegetativa, a través de
?  &  
rizomas, sin embargo, este método favorece
de color naranja y con tres cuartas partes de
         
la margen de color amarillo y verde (Foto 1a).
  +H &  &  M-
FJ    )  -
dos) causantes de importantes enfermedades
llar un protocolo1   
       & €
H. bihai  >& 
)     -
evaluaron diferentes medios de cultivo en el
ductivo (Santos et al., 2006); además es co-
  && B -
„   (  
  
inconformidades entre los cultivadores por
confusiones en el tipo de material adquirido.
"&(   Materiales y métodos
semillas presenta desventajas en compara- F         
     B &   fue recolectado en varias localidades del Valle
ellas, un menor valor comercial y un manejo del Cauca y Risaralda. La especie fue elegi-
M  )        & da con la ayuda de agricultores de la zona,
además las semillas presentan recalcitran- teniendo en cuenta las heliconias de mayor
cia debido a restricciones mecánicas por la  B >       
morfología del fruto (Santos et al.&/##,-F ?       ?     
  &     menor número de brácteas circinales abier-
           ? )    
a gran escala de plantas de heliconia con  )  H %#E 
 (€ &M   4&     
la actualidad cuando ha incrementado la NaClO (1%) durante 20 min y una posterior
importancia de las especies ornamentales y X    ?  
se ha creado la necesidad de establecer un ?J  €  
 €           )   ) )  J  

0 F   (     ? Heliconia bihai  >&H  
    

133
ACTA AGRONÓMICA. 60 (2) 2011, p 132-139

H   „- arena previamente esterilizada en autoclave a
mero de explantes necrosados, fenolizados y 121 °C durante 35 min y el sustrato comercial
supervivencia. Los explantes fueron estable- Forzamix® en proporciones 1:1 y 3:1. Además,
cidos en el medio de cultivo MS (Murashige y     H -
>I&0$,/-  ˆ+/%K-   rriza. Las plantas se cubrieron con plástico
+.#K->  )    - durante las primeras cuatro semanas para
ciones de 6-benzylaminopurina (BAP) y Acido    H

(+
-+ 0-F‰  Con las variables evaluadas en los dife-
J 4Š&     - rentes medios en la fases de establecimiento
   )     (número de explantes necrosados, fenolizados
el medio de cultivo, la limpieza del explante se    -&+„  
hizo en la primera, cuarta y octava semanas brotes por explante) y enraizamiento (apari-
de establecimiento, determinando porcentajes       X -& 
 +H   -&X- HBM   B  €
&   &        ) €J+-  
Para determinar la mejor tasa de multi- Tukey, si se encontraban diferencias esta-
    &   X  -   &  )  B  )W 
     &
)   /##Œ
verdosa y en buen estado fueron transferidos
a un medio MS suplementado con diferentes Resultados y discusión
concentraciones de BAP (0.5, 1, 2, 3.5, 4.5 y
,K-,Š    &  F0.,E  /4#  ?  H. bihai
explantes fueron transferidos a un segundo   >    
 G>"/K &     
  #4 K   
        ) B        )    .4E&
cada mes.   J P  ?     
Para el enraizamiento, las plántulas    &BH %#E
fueron transferidas a medio de cultivo MS en el medio IC (Cuadro 2). Varios trabajos
     .# en cultivo de tejidos en zingiberales, espe-
K      /% K     ˆ >  €     ) ‰   & 
evaluaron tres concentraciones hormonales: realizan utilizando como material de partida

+#%0.K-‹
 rizomas o ápices caulinares (Nathan et al.,
+
-+0K- 1992; Marulanda e Isaza, 2004; Rodrigues,
F      &     2005). Sin embargo, el gran impedimento de
fueron sembradas en bandejas de polipropi-        
leno de 50 alvéolos, utilizando como sustrato         €&

Cuadro 1. Concentraciones de 6-benzylaminopurina (BAP) y Acido Indol Acético (AIA) utilizadas en

)        ? H. bihai  >
Medio Concentración BAP Concentración AIA
(mg/lt) (mg/lt)
IA 2.0 0.5
IB 4.0 0.5
IC 6.0 0.5
IIA 2.0 1.0
IIB 4.0 1.0
IIC 6.0 1.0

3BA 3.0 0
6BA 6.0 0
9BA 9.0 0

134
 PROPAGACIÓN IN VITRO DE HELICONIA BIHAI (L.) CV. LOBSTER SALMÓN A PARTIR DE MERISTEMOS FLORALES

Cuadro 2.F           ?  H. bihai cv. Lobster
>

Medio Fenolización Supervivencia Crecimiento y Brotes de

(%) cambio de color yemas

IA Alta 60 NO NO
IB Baja 40 >  SI

IC Baja 16 SI NO
IIA Baja 50 SI SI
IIB Baja 33 >  NO

IIC Baja 70 SI NO
3BA Alta 10 >  NO
6BA Alta 0 >  NO
9BA Muy Alta 0 NO NO

lo que limita el desarrollo del explante (Ate- entre la sexta y la octava semanas (Foto 1b).
hortúa et al., 1999; Días y Rodrigues, 2001). F"   
  -
F      ? &     H„ dos inferiores de supervivencia y vigor de los
(1994) encontraron porcentajes de contami- explantes, así mismo, concentraciones muy
  0#E04E H. wagneriana, altas de BAP provocaron en los explantes
H. platystachys, H. bihai, H. burleana y H. M) B   +/-
rostrata& M  Š#E    H„+0$$Œ-B%K 
de H. marginata y H. latispatha desinfectando BAP tanto en la fase de establecimiento de los
las yemas con NaClO (2%) durante 15 min. explantes de H. latispatha y H. wagneriana
F   &   )       &  &
   ?  H. bihai cv. Lobster en este estudio se observa que el uso de BAP
>   CD+0E-        P  . K 
/#&P       - X P „   € 
  P 04E J  ?         J     -
de supervivencia superior a 80%. crosis de la especie estudiada, probablemente
F          ?     X   X 
            H    
masiva en H. bihai  >)   F  X‘P
una mayor tasa de supervivencia, si se com- en la fase de establecimiento ha sido descrito
   B   B   M  igualmente por Sosa-Rodríguez (2004) en H.
caulinares como material de partida. Naka- standleyi. Marulanda e Isaza (2004) encon-
no (2008) obtuvo un porcentaje máximo de traron reverdecimiento de los rizomas entre la
supervivencia, con ápices caulinares de 21% segunda y tercera semana de establecimiento
en H. bihai cv. Peach Pink y de 40% en H.    (   X -
ortotricha mana. Nathan et al. (1992) describen reverde-
F)      H. bihai cimiento de rizomas de H. psittacorum entre
  >& " los 7 y 14 días de establecimiento, mientras

       que en este estudio los explantes en medio
 J  )(  IIA presentaron un aumento de tamaño y
     ? +/- ) - reverdecimiento entre la sexta y séptima se-
rencias (P < 0.05) se obtuvieron en el medio     +0- 

&        €  (  
de los explantes y brotes de yemas nuevas semana (Foto 1d).

135
ACTA AGRONÓMICA. 60 (2) 2011, p 132-139

a b c d

Foto. 1. F    H. bihai   a.
?  b.“ ?         c.
FX           d.   €          
en medio IIA.

F)  &   inhibe su crecimiento y posterior desarrollo,

subcultivado en medio que contiene BAP en- una respuesta similar a la encontrada por los
 #4Œ4K
   
 mismos autores con H. rostrata.
 
& 
 
+/-     
   H. bihai
" &   ,K  
  >      
 

 "
)  
+"’##4- ?
 P  &&H
-
  
&
 - nas en un medio de cultivo que contenga 6
 
 
  K   "  
 
  
que 0.5 cm (Foto 2a y Cuadro 3). Nathan et al.   "+/K
(1992) encontraron que la mejor tasa de mul- -
+#4K-& €   


 seis semanas después crecimiento de los brotes (Foto 2b y Cuadro
de la transferencia de los brotes a un medio de .-F


XLP
P  //4K " también fueron evaluadas por Talukdar et al.
Debido a la naturaleza del explante (2002) quienes encontraron una mayor tasa
utilizado, en el presente trabajo la tasa de    X
 H. psitta-
    
 
 corum transferidos a un medio suplementado
P  
  

 H

 
(
 
+#/4K-"+/#K-"

 
  ,K "  &

BL +/##Œ- P 
Nathan et al.+0$$/-€P    Œ4K "

"  Œ4$K  
por un tiempo prolongado, induce brotes de
&
 -
H. psittacorum más pequeños y compactos, e
una respuesta favorable en el crecimiento y
 
 /K "#/4K 

a b

Foto 2. G  X    H. bihai  >a."   
B,K "b.>   B"/K
#4K

136
 PROPAGACIÓN IN VITRO DE HELICONIA BIHAI (L.) CV. LOBSTER SALMÓN A PARTIR DE MERISTEMOS FLORALES

Cuadro 3. !   H. bihai  > )      

      )  
Concentración Tasa de Altura promedio de los
hormonal (mg/lt) multiplicación brotes (cm)
BAP 0.5 1 3.8
BAP 1.5 1 3.8
BAP 2.5 1 3.4
BAP 3.5 1 3.0
BAP 4.5 1 3.1
BAP 6 2 0.9
BAP 2.0 + AIA 0.5 3 3.2


)       X         HJ    
H  Π 4         en condiciones de invernadero que aquellas
máxima de 2.5 yemas. sembradas directamente en sustrato sin raí-
)      ces. Por el contrario, Rodrigues et al. (2005)
de las plántulas de H. bihai cv. Lobster Sal- sugieren omitir la fase de enraizamiento in
) M 
B          M-
 0.K+.-     tulas de H. bihai cv. Lobster Claw I debido a
encontraron Cockburn (1996) en trabajos in que las raíces previamente existentes no son
vitro con H. psittacorum Var. Golden Torch funcionales en este ambiente.
B
+0K-" W La fase de vivero es una de las más críti-
(2003) utilizando medio MS suplementado    

+#%4K-&      F        -
al. (2010) observaron la mayor tasa de en- vivencia de 92% y un crecimiento, promedio,
raizamiento de H. bihai cv. Lobster Claw Two  0 ) HJ 
cuando no aplicaron hormonas al medio. nuevas cada 10 - 13 días (Fotos 3b y 3c) y un
  M      -       4, 
raizamiento in vitro mostraron un mayor   +.-

a b

c d

Foto 3. Fases de enraizamiento y vivero de H. bihai    a.   M  H 
/     b. Plántulas de heliconia en bandejas de polipropileno. c. Plántulas de heliconia
a raíz desnuda. d."M  H   4     

137
ACTA AGRONÓMICA. 60 (2) 2011, p 132-139

Conclusiones Trinidad and Tobago, Agriculture and Life Scien-

ces Division. 158 p.
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 "+/K- vitro de Heliconia bihai (Heliconiaceae). Rev. Bras.

+0K-+ 

-F    Hortic. Ornam. 7:165 - 168.

produjo la mayor tasa de crecimiento, cambio Goh, C. J.; Nathan, M. J.; y Kumar, P. P. 1995. Di-
    X rect organogenesis and induction of morphogenic
semanas luego del establecimiento. callus through thin section culture of Heliconia
Después de seis semanas en un medio psittacorum. Holanda. Sci. Hortic. 62:113 - 120.
 "+,K-Π  
)  /##Œ
) &    /##Π
-
   "+/K ) & &    C   &
-
+#4K- B   Argentina.
 .     Isaza-Valencia, L. 2004. Desarrollo de un protocolo
       H  
) 
explante.
€š       
F B  M  
!  "  &   -
B
+0.K-    
bientales, Laboratorio de Biotecnología Vegetal.
cultivo y sustrato arena - Forzamix® en pro- š  B&F/##%F  H   
.*0&  Tropicales 28(1):29 – 35.
exitosa de las plántulas en la fase de vivero. G&G 
B&/##ŒF   
F      ?  X-     H    €    
plante requiere de un estímulo continuo y masiva. Sci. Tech. 10:(26).
prolongado de hormonas para lograr la misma Murashige, T. y Skoog, F. 1962. A revised medium for
respuesta morfogénica que se obtiene a través rapid growth and bioassays with tabacco tissue
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H ›& Bœ)  €-
Agradecimientos ção molecular de bactérias contaminantes. Dis-
œ+G " " Lœ
Las autoras expresan sus agradecimien- em Ciências. Área de Concentração: Biologia na
tos al Ministerio de Agricultura y Desarrollo      -     F 
Rural de la República de Colombia, a la Go- Nuclear na Agricultura da Universidade de São
    '        Paulo. 81p.
!  "  €  Nathan, M. J.; Goh, C. J.; y Kumar, P. P. 1992. In
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138
 PROPAGACIÓN IN VITRO DE HELICONIA BIHAI (L.) CV. LOBSTER SALMÓN A PARTIR DE MERISTEMOS FLORALES

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