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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE ENFERMERÍA

INTEGRANTES:

*GLADYS VERONICA GUAMAN SIMBAÑA

*GREYS VANESSA ILVAY CAGUANA

*NATALY VERONICA CHAMBA ZAVALA

*JESUS EMANUEL QUILLE MOROCHO

MATERIA:

MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

PRIMER SEMESTRE “A”

TEMA: ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL LIQUIDO CEFALORAQUIDEO


(LCR)
Contenido
OBJETIVOS ................................................................................................................................ 3
OBJETIVO GENERAL ............................................................................................................ 3
OBJETIVOS ESPECÍFICOS .................................................................................................... 3
I. INTRODUCCIÓN............................................................................................................... 4
II. CONTENIDO .................................................................................................................. 5
¿QUÉ ES EL LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO (LCR)? ...................................................... 5
CARACTERÍSTICAS GENERALES DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL LÍQUIDO
CEFALORRAQUÍDEO ............................................................................................................ 5
VÍAS DE INFECCIÓN DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL.......................................... 6
EL LCR EN DIFERENTES ENFERMEDADES ..................................................................... 6
TINCIONES .............................................................................................................................. 6
Tinción de Ziehl Neelsen .............................................................................................. 6
Tinta China para Cryptococcus Neoformans................................................................. 7
ANÁLISIS DEL LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO .............................................................. 7
TOMA DE MUESTRAS ...................................................................................................... 7
TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN DE LA MUESTRA ................................................ 8
EXÁMENES DIRECTOS DE LA MUESTRA .................................................................... 9
ESTUDIOS QUÍMICO, ANTIGÉNICO Y MOLECULAR ................................................. 9
ESTUDIO MICROSCÓPICO DEL SEDIMENTO ............................................................ 10
CULTIVO DE AGENTES PRESENTES EN MUESTRAS DE LÍQUIDO
CEFALORRAQUÍDEO .......................................................................................................... 10
CULTIVO DE AGENTES PRESENTES EN MUESTRAS DE LÍQUIDO
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III. CONCLUSIONES ......................................................................................................... 11
IV. BIBLIOGRAFÍA ........................................................................................................... 13
OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Investigar el análisis microbiológico del líquido cefalorraquídeo (LCR).

OBJETIVOS ESPECÍFICOS
1.-Desarrollar información verídica sobre el análisis microbiológico del líquido
cefalorraquídeo (LCR).

2.-Identificar las principales características, enfermedades y tinciones del mismo.

3.-Explicar el proceso del examen microscópico y macroscópico del LCR.


I. INTRODUCCIÓN

El líquido cefalorraquídeo (LCR), es un líquido de transporte e incoloro que se produce


dentro de las cavidades o ventrículos del cerebro por el plexo coroides y el plasma
sanguíneo que se derrama. Además, rodea al cerebro y la médula espinal. La
acumulación excesiva de líquido cerebroespinal resulta en la dilatación anormal de los
espacios en el cerebro llamados ventrículos. Esta dilatación ocasiona una presión
potencialmente perjudicial en los tejidos del cerebro.

Aproximadamente el 70% del líquido cefalorraquídeo se forma en los plexos coroideos


ventriculares a través de un proceso combinado de secreción activa y ultrafiltración a
partir del plasma. Alrededor del 30% de LCR se forma como líquido intersticial,
elaborando dentro los espacios intracelulares del cerebro y de la médula espinal. La
resorción de LCR se produce a través de las vellosidades aracnoides de los senos
dúrales. A lo largo de los linfáticos peri neurales también se producen una pequeña
cantidad de absorción de LCR. (López-Silva, 2014)
II. CONTENIDO
¿QUÉ ES EL LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO (LCR)?
También conocido como fluido cerebroespinal (LCE), se trata de un fluido corporal
estéril e incoloro que se encuentra en el espacio subaracnoideo en el cerebro y la médula
espinal (entre las meninges aracnoides y piamadre).

CARACTERÍSTICAS GENERALES DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL


LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO
 Localización

Circula a lo largo de todo el SNC (entre Piamadre y Aracnoides, por el espacio


subaracnoideo)

 Líquido cefalorraquídeo

Formación y renovación:
Formación: cavidades del cerebro
Renovación: cada 3-4 horas
LCR “viejo”: reabsorbido a través de vellosidades aracnoideas (pasa a sangre)
En sangre: depuración y eliminación de residuos.
(Mimenza, 2006)

 Propiedades y composición normal:

Líquido incoloro (aspecto de agua limpia) y estéril


Sometido a presión (una punción hace que fluya libremente)
Contiene un máximo de 4 linfocitos por mm3
No contiene eosinófilos
Contenido en glucosa: 45 – 100 mg/dL (50 – 70% contenido en sangre)
Contenido en proteínas: 15 – 50 mg/dL
VÍAS DE INFECCIÓN DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL
 Diseminación hematógena:
La más frecuente
Entrada al espacio subaracnoideo a través de vasos sanguíneos del cerebro

 Diseminación directa:
Desde infección cercana o contigua al SNC (otitis media, sinusitis, mastoiditis)

Defectos anatómicos en las estructuras del sistema nervioso central:


Consecuencia de cirugía, traumatismos o anomalías congénitas
Ingreso fácil y rápido de microorganismos (incluso de microbiota) en SNC

 Vía intraneural directa:


La menos frecuente (a través de los nervios) (virus: rabia, herpes, varicela)
(Elias, 2007)

EL LCR EN DIFERENTES ENFERMEDADES

1. Meningitis purulenta y crónica


2. Encefalitis viral A
3. Esclerosis múltiple
4. Tumor pineal o hipotalámico
5. Enfermedad de Creutzfeldt-Jakob

(Morales, MedlinePlus, 2009)

TINCIONES
Permiten orientar al médico para realizar un tratamiento empírico precoz-GRAM
directo: 60-80 % sensibilidad Neisseria meningitidis Neumococos

 Tinción de Ziehl Neelsen

La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y


económica, para la identificación de microrganismos patógenos, M. tuberculosis.
 Tinta China para Cryptococcus Neoformans
Poseen una cápsula de naturaleza polisacarídica que le confiere virulencia, protegiendo
al hongo de la fagocitosis, y cuyo tamaño varía dependiendo de la cepa y del medio de
cultivo que se utilice para aislar la levadura. Se puede observar por examen en fresco
con tinta china, tinción negativa que tiñe toda la preparación excepto la cápsula.Alta
especificidad y baja sensibilidad.
(Rodríguez-Segade, 2006)

ANÁLISIS DEL LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO

Es un grupo de pruebas de laboratorio que miden químicos en el líquido que rodea y


protege el cerebro y la médula espinal. Con estos exámenes se pueden buscar proteínas,
azúcar (glucosa) y otras sustancias.

TOMA DE MUESTRAS
Punción lumbar:
 Exclusivamente por especialista
 Paciente recostado (o sentado), con rodillas flexionadas y espalda arqueada
(separar vértebras lumbares)
 Aplicar antiséptico (yodo) sobre zona (impedir contaminación con microbiota de
la piel)
 Introducir aguja entre tercera y cuarta vértebras lumbares
 LCR sale a presión (incrementada en meningitis) y se introduce en jeringa o se
recoge directamente en el tubo. (Morales, 2017)

Recomendado: extraer 5 mL de LCR (1-3 mL puede ser suficiente)


Entre 5 y 10 ml, si se sospecha presencia de Mycobacterium o Cryptococcus (con
menor cantidad difícil identificación)

LCR se reparte en tres tubos:


Tubo 1: recuento celular y tinciones diferenciales
Tubo 2: tinción de Gram y cultivo
Tubo 3: determinación de proteínas y glucosa, pruebas especiales (pruebas serológicas,
detectar antígenos, citología)

TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN DE LA MUESTRA

La muestra de LCR debe ser llevada rápidamente al laboratorio


Si no se procesa inmediatamente:
- Sospecha de infección bacteriana: mantener a temperatura ambiente o incubar a 35ºC
- Sospecha de infección vírica: refrigerar a 4ºC durante 24 horas o congelar a –70ºC
(nunca a temperatura superior) si la demora es mayor
EXÁMENES DIRECTOS DE LA MUESTRA
 Macroscópica
LCR turbio suele indicar infección bacteriana
LCR transparente suele indicar no infección o infección vírica (u otras causas)
LCR enrojecido indica vaso atravesado durante la punción (en casos extremos
hemorragia intracraneal)
 Microscópica

1. LCR normal no contiene células con aspecto claro. Si el aspecto del LCR es
claro, se examina una gota de LCR sin diluir en el microscopio y se cuentan las
células manualmente.
2. Si el número de células es muy bajo (igual o menor a 5) puede o no realizarse el
recuento diferencial.
3. Si el número de células es elevado (superior a 5) se realizará un recuento
diferencial.
4. Se coloca una muestra de las células concentradas en un portaobjetos y se realiza
una tinción especial que permite observar los distintos tipos de células.
5. Si se sospecha la presencia de cáncer, la muestra se citocentrifuga (diseñada para
la concentración de muestras biológicas sobre una superficie visible al
microscopio)

Citología de LCR: se realiza una tinción sobre una muestra citocentrifugada y se


examina al microscopio para evaluar si existen células anómalas. se realiza cuando se
sospecha de un tumor del sistema nervioso central. (Lab tests online-sitios globales, 2018)

ESTUDIOS QUÍMICO, ANTIGÉNICO Y MOLECULAR


Muestra mayor de 1 ml: centrifugar (1.500 g, 15 minutos) (concentrar bacterias)

 Transferir sobrenadante a tubo estéril (control periódico de tubos utilizando tubos


estériles con LCR negativo)
- determinar contenido de proteínas y glucosa
- detectar antígenos
Mezclar sobrenadantes negativos y esterilizar (útiles como diluyentes en otras pruebas y
como control de calidad de los tubos)
 Dejar 0,5 ml para resuspender sedimento
- examen directo
-cultivo
-PCR
ESTUDIO MICROSCÓPICO DEL SEDIMENTO
Observación en fresco (contraste de fases): detección de protozoos
Tinción de Gram a todo sedimento de LCR
Después del examen debe informarse la presencia o ausencia de bacterias, células
inflamatorias y eritrocitos.
Morfología en tinción de Gram (más datos clínicos del paciente) permite la
determinación presuntiva de la etiología en la mayoría de casos de meningitis bacteriana
(dentro de los primeros 30 minutos después de recibida la muestra)

Ejemplos:
- Cocos Gram negativos: Neisseria meningitidis
- Cocobacilos Gram negativos: Haemophilus influenzae
- Cocos Gram positivos: Streptococcus pneumoniae
- Levaduras (se tiñen como Gram positivas): Cryptococcus neoformans
(Collado, 2010)
CULTIVO DE AGENTES PRESENTES EN MUESTRAS DE LÍQUIDO
CEFALORRAQUÍDEO

Como rutina para la detección de bacterias se debe incluir:


 Agar chocolate (necesario para recuperar microorganismos exigentes como
Haemophilus influenzae y Neisseria meningitidis)
 Agar sangre (crecen bien los estreptococos).
 Caldo tioglicolato
Las placas deben incubarse a 37ºC con una atmósfera de CO2 al 5 -10% y, por lo
menos, durante 72 horas.
El caldo debe ser incubado al menos 5 días a 37ºC (tapón flojo para permitir
intercambio de gases)
Para la detección de hongos se recomienda:
 Agar glucosa de Sabouraud (sin sangre)
 Agar infusión de cerebro y corazón con 5% de sangre de oveja (BHIB agar)
Las placas para hongos deben ser incubadas a 30ºC durante 4 semanas (si es posible,
incubar dos juegos de placas, a 30ºC y 35ºC)
Los virus pueden ser cultivados en cultivos celulares

Se pueden utilizar medios específicos para la recuperación de algunas bacterias


*Agar de Thayer-Martin modificado (Neisseria meni meningitidis)
*Agar sangre con estría estafilocócica (Haemophilus influenzae)
*Agar de Lowestein-Jensen (Mycobacterium tuberculosis)
*Agar de MacConkey o agar EMB (Escherichia coli)

III. CONCLUSIONES
 La presencia del líquido cefalorraquídeo es muy importante ya que su principal
característica es de actuar como amortiguador y protege de traumatismos al
sistema nervioso central.
 Se determinó que el líquido cefalorraquídeo está implicado en enfermedades
degenerativas del sistema nervioso, por lo cual es necesario realizar un análisis
microbiológico para medir químicos en el mismo que rodea y protege el cerebro.
 Mediante los exámenes macro-microscópico podemos identificar infecciones
que afectan, alteran al LCR.
IV. BIBLIOGRAFÍA
Collado, S. M. (23 de Enero de 2010). psicoactiva. Obtenido de
https://www.psicoactiva.com/blog/liquido-cefalorraquideo-lcr-caracteristicas-funcion/

Elias, J. (10 de Marzo de 2007). SCRIBD. Obtenido de


https://es.scribd.com/document/40512867/Analisis-Liquido-CefaloRaquideo

López-Silva, S. (24 de Diciembre de 2014). ResearchGate. Obtenido de


https://www.researchgate.net/publication/273204860_Analisis_del_Liquido_Cefalorraq
uideo_y_otros_Liquidos_Organicos_Manual_para_su_estudio_e_interpretacion

Mimenza, O. C. (24 de Octubre de 2006). Psicologia y Mente. Obtenido de


https://psicologiaymente.net/neurociencias/liquido-cefalorraquideo

Morales, J. (21 de Diciembre de 2009). MedlinePlus. Obtenido de


https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003369.htm

Morales, J. (12 de Diciembre de 2017). MedlinePlus. Obtenido de


https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003369.htm

Rodríguez-Segade. (30 de Abril de 2006). Psicologia y Mente. Obtenido de


https://psicologiaymente.net/neurociencias/liquido-cefalorraquideo

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